일반기술

녹차로부터항암성분의추출및정제공정

본 발명은 최근 십이지장암, 결장암, 피부암, 위암, 폐암, 유방암, 간암, 대장암 등에 대한 항암제로서 관심을 모으고 있는 카테킨 화합물(Catechin compound) 중 에피갈로카테킨 갈레이트(Epigallocatectun Gallate)를 전남 보성산 녹차로부터 얻기 위한 추출 및 분리·정제 공정에 관한 것이다. 녹차로부터 물을 사용하여 추출하는 공정, 클로로포름과 에틸아세테이트를 사용하여 층 분리에 의해 분배하는 공정, 준-제조용 액체 크로마토그래피를 사용하여 에피갈로카테킨갈레이트를 정제하는 공정 및 역상 액체 크로마토그래피를 이용하여 에피갈로카테킨 갈레이트를 분리하는 공정으로 구성되어 있다. 추출 공정에서는 순수한 물 150㎖에 녹차잎 5g을 넣고 50∼60℃의 온도로 유지되고 있는 교반기에서 300rpm으로 4시간 동안 교반하여 추출하였다. 이후에 추출물/클로로포름(l/l, 부피비)의 비율로 혼합하여 층 분리를 하였다. 클로로포름층에서 물층을 분리하여 물층/에틸아세테이트(l/l, 부피비)의 비율로 혼합하여 층 분리를 하였다. 층분리가 이루어진 물층과 에틸아세테이트층에서 각기 불순물 및 에피갈로카테킨 갈레이트가 분배되었다. 준-제조용 액체 크로마토그래피에서 에피갈로카테킨 갈레이트가 포함된 추출물을 크기가 15㎛인 Lichrospher 100RP-18 충전물2.38g이 채워진 칼럼(250×4.60mm)에 물, 아세토나이트릴, 아세트산을 이동상으로 사용하여 에피갈로카테킨 갈레이트를 정제하였다. 이러한 방법으로 얻어진 시료를 역상 액체 크로마토그래피에서 물, 아세토나이트릴, 아세트산을 이동상으로 사용하고, 이동상의 유속을 1.0㎖/min, UV 검지기를 280nm로 고정하고 시료 10㎕를 μ-Bondapak(3.9×300mm, 10㎛) 역상 칼럼에 주입하여 순수한 에피갈로카테킨 갈레이트를 얻었다.