일반기술

팽창층 겔 흡착-이온교환 크로마토그래피법을 이용한 박테리오신의 분정제 방법

본 발명은 팽창층 겔 흡착-이온교환 크로마토그래피법(expanded bed adsorption-ion exchange chromatography)을 이용한 락토코크스 락티스 발효 배양액 가운데 존재하는 항균단백질인 박테리오신의 정제방법에 관한 것으로 더 상세하게는 박테리오신이 존재하는 발효배양액을 원심분리 또는 단백질 침전 등의 어떠한 전처리 없이 바로 컬럼에 흘려줌으로서 목적하는 박테리오신을 선택적으로 분리 정제하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 팽창층 겔 흡착-이온교환 크로마토그래피법을 이용한 박테리오신의 분리 정제 방법은, 락토스를 함유한 배지에서 락토코크스 락티스 균주를 전치 배양한 후 배양기에서 교반 시키면서 통기 없이 배양하는 배양액 조성단계; 상기 단계에서 배양된 배양액중의 박테리오신을 분류하기 위하여 팽창층 이온교환겔이 채워진 컬럼에 유로를 아래에서 위 방향으로 배양액을 전처리 없이 투입하는 단계; 배양액을 모두 이온교환겔에 투입한 후 겔세척 용매인 물로 이온교환겔에 결합하지 않고 남아있는 다른 입자들을 제거하는 단계; 세척이 끝난 겔을 침강시키고 컬럼의 어뎁터를 겔의 윗표면 까지 내리고 유로의 방향을 컬럼의 위에서 아래로 잡아 일반 충진 컬럼처럼 사용하는 단계; 이온교환 겔에 결합한 박테리오신을 유리시키기 위해 염화나트륨을 일정한 유속으로 하여 등용매를 이용하여 분리하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 한다. 이에 따라 실험 방법이 간단해지고, 공정의 단순화를 통한 박테리오신의 분리 정제 효율을 향상시킬 수 있다.