일반기술

식물체의 다형성 검출용 마커의 제조방법

*원리 및 구성본 기술은(a) 식물에서 추출된 게놈 DNA를 제한효소로 절단하고, 절단된 DNA의 양 말단에 어댑터(adaptor)를 라이게이션(ligation)시키는 단계;(b) (a) 단계에서 어댑터와 라이게이션된 DNA를 주형으로 하고 (a) 단계의 절단된 DNA의 한 쪽 말단의 어댑터 염기서열의 일부 또는 전부를 포함하는 프라이머를 사용하여 한 방향(one way) PCR을 수행하는 단계;(c) (b) 단계에서 얻은 DNA 단편 중에서 초위성체(microsatellite)를 포함하는 DNA 단편을 선발하는 단계;(d) (c) 단계에서 선발된 DNA 단편을 주형으로 하고, (a) 단계의 절단된 DNA의 양 말단의 어댑터 염기서열의 일부 또는 전부를 포함하는 프라이머쌍을 사용하여 PCR을 수행하는 단계; (e) (d) 단계에서 얻은 PCR 산물의 염기서열을 분석하는 단계를 포함하는 식물체의 다형성 검출용 마커의 제조 방법이다.*기술적 배경육종에 이용되고 있는 대부분의 주요 작물 및 소재배 작물에서 해마다 많은 양의 유전자원이 수집되고 있다. 그러나, 이에 반해 유전자원에 대한 평가는 충분히 이루어지지 않고 있는 실정이다. 수집된 유전자원의 종간 및 아종간 품종의 신속한 판별은 정확한 유전자원의 관리 및 보호를 위하여 매우 중요하다. 또한 품종의 판별과 함께 유전자원의 유형 형질 탐색과 분류, 그리고 유연관계의 규명은 유전자원의 보존이나 신품종의 창출 및 작물의 개량에 있어서 매우 중요하다.*중요성 및 독창성제한효소로 절단된 식물 게놈 DNA를 어댑터와 결합시킨 후, 어댑터 염기서열의 일부 또는 전부를 포함하는 하나의 프라이머를 이용한 한 방향 PCR로 증폭시키는 단계를 갖는다는 점에서 그 중요성과 독창성이 있다고 할 수 있다.*적용제품 및 경쟁제품식물의 다형성을 검출하는 마커 분야에 적용될 것이며, 다양한 마커 및 바이오 칩 분야에서 이용이 가능할 것으로 판단된다.*특징 및 장점식물의 다형성 검출 마커로 각광을 받고 있는 초위성체 및 SSR 마커를 제조하는 매우 효과적인 방법으로 어댑터와 결합된 게놈 DNA를 어댑터 염기서열의 일부 또는 전부를 포함하는 하나의 프라이머를 이용한 한 방향 PCR로 증폭시키는 단계를 가진 잇점이 있다.