일반기술

ㅇ 균주개발 ㅇ 대량생산기술 ㅇ 살충력 검증

ㅇ 기존 화학합성 농약의 심각한 폐해로 새로운 개념의 농약 개발이 시급한 실정임. ㅇ 무공해 농약중 미생물 살충제의 생산기술개발에 관한 연구를 수행함. ㅇ 플라즈미드의 안정성을 향상시키기 위하여 항생제 투여 없이 100% 안정한 재조합 대장균 균주를 개발 중에 있음. ㅇ Btt toxin 의 생산을 위한 재조합 대장균의 숙주세포로 XL1-Blue가 가장 좋았음. ㅇ 안정화를 위한 hok/sok system은 대장균에서 plasmid를 110 generation 동안 100% 안정하게 하였음. ㅇ 본 연구에서 사용된 재조합 살충단백질은 온도 유도에 의해 생산됨. ㅇ Btt toxin gene의 발현은 induction시작한지 한 시간 이내에 시작됨. ㅇ 복합질소원으로 yeast extract를 첨가했을 때 0.5g/L의 생산성을 보였음. ㅇ 배양온도에 따른 최적 배양시간은 30℃에서 7시간, 42℃에서 5-8시간 정도였음. ㅇ 최적 pH는 6.5 였고, 아미노산의 적정 농도는 threonine, leucine, tryptophan의 경우 각각 0.1, 0.1, 0.01g/L 였음. ㅇ 미생물 살충제 피막화를 위한 연구로서 전분입자를 평면에 접착시키고 이를 건조하였을 때 접착력이 증가됨을 관찰함. ㅇ 건조된 전분입자의 접착력은 수중에서 시간이 지남에 따라 감소함. ㅇ Biotest결과 본 재조합 대장균에 의해 생산된 살충단백질이 원래 Btt 균주에 의해 생산된 살충단백질과 같은 수준의 살충력을 지님이 밝혀졌음. ㅇ 총 단백질 농도가 0.02g/L으로 낮을 때에도 4일 후 100% 치사율을 기록함.