일반기술

세포배양에 의한 유용 바이러스 생산기술 개발

수두 바이러스는 동물세포 대량배양에서 많이 사용되는 microcarrier culture에서는 바이러스의 수율이 낮다. 이러한 문제점을 해결하기 위한 방안으로서 본 연구에서는 충전탑 세포배양기를 개발하였다. 적절한 충전탑 세포배양기를 사용한 결과 숙주세포의 성장 및 수두 바이러스의 증식이 원활함을 확인하였으며 숙주세포의 shear sensitivity를 고려한 Air lift Packed-bed Reactor(APR)를 개발하였다. 본 연구에서 개발된 바이오리액터에서의 고농도세포배양을 통하여 T-flask와 비교할 때 2배 이상의 고농도 세포배양이 가능함을 알 수 있었다. 이같은 결과는 바이오리액터를 사용할 때의 산소농도 및 pH 제어의 유리함 때문인 것으로 생각된다. 한편 바이러스 증식에서도 APR을 사용할 경우 T-flask보다 높은 바이러스 수율을 얻을 수 있었으며, 이러한 바이오리액터는 특히 scale-up에 있어서 Roller bottle, Cell factory등의 기존 생산 시스템보다 우수한 것으로 판단된다. 바이러스의 분리를 위해서 다양한 세포 파괴 방법을 시도한 바 그 중에서 sonication방법이 가장 우수하였으며 sonication으로 수두 바이러스를 분리할 때 scale-up 지표로서 sonication power/volume (P/V)이 효과적으로 사용될 수 있슴을 확인하였다. 바이러스의 증식 모델을 통한 수두 바이러스 생산조건 최적화를 위하여 Finite element 방법으로 바이러스 감염을 simulation한 결과 실험치에 근접하는 모델을 얻을 수 있었으며 이러한 바이러스 증식 모델은 생산조건이 최적화에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 생각된다.