일반기술

난초 식물 모자이크 바이러스의 염기 서열, 발현 벡터 및 형질 전환체

○ 기술발명의 목적: 난초(Cymbidium) 모자이크 바이러스(CyMV)의 염기 서열을 결정하고 이를 토대로 제작한, 바이러스 저항성 식물체개발을 위한 발현벡터 및 그 형질 전환체 ○ 기술 요약 및 특징: 1. CyMV RNA로부터 cDNA를 합성하고 이들 중 가장 길이가 긴 clone인 pCyMV1(1.6kb)을 선발하고 이를 Probe로 Nothern blot을 수행함으로써 이들 cDNA가 CyMV로부터 합성되었음을 제공2. 식물 발현용 벡터는 pCyMV1로부터 외피 단백질 유전자를 분리한 후 PGEM-7Z(+) 벡터의 SmaI site에 삽입시켜 pCyCPS와 pCyCPA를 얻고 이중 pCyCPS를 XbaI으로 절단하여 식물 발현용 벡타인 pMBPI의 XbaI site에 삽입한 후 E. coli JM109에 형질전환하여 pMBPCPS/J(정방향)와 pMBPCPA/J(역방향)을 얻어 이 두 벡터를 각각 다시 Agarobacterium tumefaciens LBA4404에 형질전환시켜 최종적으로 CyMV저항성 형질 전환 식물 개발을 위한 Vector pMBPCPS/L과 pMBPCPA/L을 제조