일반기술

신규한 오메가 코노톡신

본 발명은 종래의 ω-코노톡신의 문제점, 즉 N-타입 칼슘 채널에 대해 낮은 특이성(specificity) 및 가역성(reversibility)에 따른 부작용을 해결하는 신규 ω-코노톡신에 관한 연구내용으로 대한민국에 서식하는 청자고둥(Conus Flavidus)으로부터 상기기술한 두 가지 측면의 문제점을 해결하면서 N-타입 칼슘 채널에 대한 차단제(blocker)로서의 활성이 높은 신규한 ω-코노톡신을 분리하고 그 생물학적 기능을 검증하였다.○ 통증관련 이온채널에 대한 전기생리활성 측정결과* ω-코노펩타이드 FVIA는 N-type 캘슘채널에 대한 선택성과 특이성이 뛰어나 현재 시판되고 있는 유사체인 Ziconotide와 비교하여 캘슘채널에 대한 가역성이 우수함○ ω-코노펩타이드 FVIA의 대량합성법 개발* ω-코노펩타이드 FVIA 및 MVIIA를 합성수지 5mmole 규모로 대량 합성함* 5L 단위의 공기산화법을 이용하여 cysteine의 이황화결합 형성* 이온교환수지컬럼과 RP-HPLC를 이용한 최종정제○ ω-코노펩타이드 FVIA의 구조분석결과 및 가역성 결정인자 규명* 핵자기공명을 측정하여 용액상 3차구조를 계산하였고 구조분석을 통해 루프II 부분이 가역성에 영향을 주는 결정인자임을 예측함 *루프II 부분을 이용한 치환체를 합성하여 N-type 캘슘채널에 대한 유효도와 가역성을 측정하였고 루프II가 가역성 결정인자임을 확인○ ω-코노펩타이드 FVIA의 항통증 생리활성 실험결과* ω-코노펩타이드 FVIA에 대한 생리활성 실험을 위하여 Glutamate induced pain test, Substance P induced pain test, 1% Acetic acid induced pain test, TNF-α induced pain test를 수행하였으며 그 결과 ω-코노펩타이드 FVIA의 항통증생리활성이 있음을 확인* ω-코노펩타이드 FVIA에 대한 항통증 활성을 측정하기 위하여 MVIIA 대조군과 비교하여 포르말린 시험을 수행하였으며 그 결과 ω-코노펩타이드 FVIA의 항통증생리활성이 있음을 확인하였고 유효농도로 FVIA와 MVIIA는 염증성통증 모델에서 활성이 거의 동일함을 확인. 1st phase ED50(ng): FVIA(12.72), MVIIA(12.96), 2nd phase ED50(ng): FVIA(5.82), MVIIA(6.59)* 각각 꼬리신경(S1)과 다리신경(L5,6)을 손상시켜 신경병증성 통증을 유도한 후 ω-코노펩타이드 FVIA를 투여하였을 때 유의하게 기계적 이질통을 억제함- 혈압 강하 등의 심혈관계 부작용 개선을 MVIIA와 비교하였을 때 두 펩타이드 정맥투여 후 혈압이 강하하였으나 FVIA가 더 빠른 속도로 개선되었음.○ 국내 해양자원확보 : 한국산 청자고둥으로부터 분리된 신경독소 성분을 특허화하여 신규 의약품의 가능성이 있는 국내 해양자원을 확보○ 펩타이드 의약품 : ω-코노펩타이드 FVIA의 대량생산을 통하여 Cysteine이 풍부한 펩타이드의 대량생산법을 구축○ 신규 신경병증성 통증억제제 개발 : 기존에 시판되고 있는 신경병증성 통증억제제보다 약효를 유지하되 독성이 개선된 통증억제제를 개발 ○ 신규 염증성 통증억제제 개발 : 기존에 시판되고 있는 염증성 통증억제제보다 약효를 유지하되 독성이 개선된 통증억제제를 개발○ 항통증계 신약개발 기반구축 : ω-코노펩타이드 FVIA를 기초로 하여 합성이 수월하고 투여법 및 약효가 우수한 화합물을 설계