일반기술

형질전환 벼세포의 동결보존 방법

기술개요)본 발명은 형질전환 벼세포의 동결보존 방법 및 상기 동결보존된 벼세포의 회수방법에 관한 것으로, 종래의 동결보존 방법보다 최적화된 동결보존 및 회수 조건을 제시한다. 더욱 상세하게는 0.5 M 수크로오스를 포함한 예비배양배지에서 형질전환된 벼세포를 5일간 예비배양한 후 최적의 농도 비율로 혼합된 동결보호제를 첨가하여 동결하고, 액체질소에서 동결보관한 단시간 또는 장시간 경과후 해동하여 동결보존후 형질전환 벼세포에서의 재조합 단백질 발현양이 동결보존전과 큰 차이가 없으며, 성체 벼로 성장하는데 이상이 없음을 확인함으로써 형질전환 벼세포의 효과적으로 재현성높은 동결보존방법 및 회수방법을 제공한다. 특징 및 대표청구항)1) 삼투압 증진제로 0.4 ~ 0.6 M의 수크로오스가 첨가된 예비배양배지에 형질전환된 벼세포를 예비배양하는 단계;2) 단계 1)의 예비배양된 벼세포에 DMSO(Dimethyl sulfoxide), 수크로오스 및 글라이세롤(glycerol)을 유효성분으로 포함하는 동결보호제 혼합액을 첨가하는 단계;3) 단계 2)의 동결보호제 혼합액이 첨가된 벼세포를 동결시키는 단계;4) 단계 3)의 동결된 벼세포를 동결보존하는 단계를 포함하는 형질전환된 벼세포의 동결보존방법.