일반기술

ｗｂｌＡ 유전자를 이용한 항생물질 고생산 균주 제조방법

기술개요)o본 발명은 스트렙토마이세스속 미생물 항생물질 생합성 경로의 공통 억제자(global repressor)로 기능하는 유전자를 규명하고 상기 유전자를 이용한 항생물질 고생 균주 제조방법 및 항생물질 생산을 증가시키는 물질의 스크리닝 방법을 제공하며, 보다 구체적으로 본 발명자들은 독소루비신을 생산하는 스트렙토마이세스 퍼시셔스(S. peucetius)의 야생형 균주 및 산업 균주 사이의 유전자 발현 양상 차이를 스트렙토마이세스 코엘리칼라(S. coelicolor) 전체 게놈 마이크로어레이 칩을 이용하여 분석하고 특이적인 발현 차이를 보이는 유전자를 선별하고 선별된 유전자들을 상기 항생물질 생산균주 상에서 과발현시킨 다음, 상기 유전자들이 항생물질의 생산에 미치는 영향을 조사하여 스트렙토마이세스속 미생물의 항생물질 생합성 경로에서 공통 억제자로 작용하는 유전자가 wblA 유전자임을 규명하였다. 본 발명이 개시한 상기 wblA 유전자는 스트렙토마이세스속 미생물 중 항생물질 생산 미생물에서 항생물질 생합성 경로의 공통 억제자로 기능하므로, 상기 유전자는 항생물질 고생산 균주를 제조하거나 스트렙토마이세스속에서 생산되는 산업적으로 유용한 항생물질의 생산을 증가 또는 촉진시키는 화합물을 스크리닝하는데 유용하게 이용될 수 있다. \특징 및 대표청구항)1) 스트렙토마이세스속 항생물질 고생산 균주 및 이의 야생형 균주로부터 각각 전체 RNA를 수득하는 단계;2) 단계 1)의 수득된 전체 RNA를 이용하여 스트렙토마이세스속 항생물질 고생산 균주와 이의 야생형 균주간의 유전자 발현 정도를 비교하는 단계;3) 단계 2)의 비교된 유전자 발현 결과에서 발현의 차이를 보이는 유전자를 선별하는 단계;4) 단계 3)의 선별된 유전자를 스트렙토마이세스속 항생물질 생산균주에 도입하여 과발현시키는 단계;5) 단계 4)의 선별된 유전자 도입되어 과별현된 균주에서 생산되는 항생물질의 양을 측정하는 단계;6) 단계 5)의 측정된 항생물질 생산량을 선별된 유전자 도입전 스트렙토마이세스속 항생물질 생산 균주에서의 생산량과 비교하여 항생물질 생산경로 관련 유전자를 선별하는 단계;7) 스트렙토마이세스속 항생물질 생산균주에 상기 선별된 유전자를 조작하여 돌연변이 균주를 제작하는 단계; 및8) 단계 7)의 돌연변이 균주에서 항생물질 고생산 균주를 선별하는 단계를 포함하는 항생물질 고생산 스트렙토마이세스속 균주 제조방법.