일반기술

면역 활성 증강용 동충하초 액체배양물로부터 얻어지는 균체내 다당체와 균체외 다당체 및 그 생산 최적 배양조건

□ 기술개요해당 기술은 동충하초(Cordyceps militaris) 균사체 액체배양물로부터 얻어지는 면역활성 증강용 균체내 다당체 (endo-polymer)와 균체외 다당체(exo-polymer) 및 그 생산 최적 조건 및 이를 유효성분으로 포함하는 면역 증강용 조성물에 관한 것으로 동충하초의 균사체 및 균체외 다당체 생산의 최적 pH, 온도, 교반속도 및 접종량은 각각 6.0, 25℃, 150 rpm, 4%였으며, 최적 탄소원과 질소원은 슈크로즈 20g/L(sucrose)와 효모 추출물 (yeast extract) 4g/L이였다. 또한 이때 생산된 균체내 다당체와 균체외 다당체는 항 보체 활성과 대식세포 리소좀 효소활성을 증가시키는 효과가 있으므로 이를 유효성분으로 하는 면역 활성 증강용 조성물로서 약학적 조성물 또는 건강기능성 조성물로서 유용하게 이용될 수 있는 뛰어난 기술이다.□ 기술내용동충하초 (Cordyceps militaris)를 감자/덱스트로스 아가 배지 (pH 6)에 접종하고 25℃에서 3일간 배양하는 단계와; 상기 배양균을 포테이토/덱스트로우스 브로스 배지 (pH 6) 100mL에 접종하고 25℃의 회전 진탕배양기(150rpm)에서 종균 배양하는 단계와;상기 배양 2일 후, 상기 배양물을 무균 상태에서 분쇄하고나서 상기 분쇄물을 미리 조제한 버섯완전 배양배지 (슈크로우스 20 g/L, MgSO4 · 7H2O 0.5 g/L, K2HPO4 1 g/L, KH2PO4 0.46 g/L, 효모 추출물 4 g/L 멸균하기 전에 pH는 6로 조정함)에 2%(v/v)로 접종하는 단계와;상기 배양 배지에 상기 분쇄물을 포함하여 25℃, 150 rpm 조건의 회전 진탕배양기에서 6일 동안 액체배양하는 단계와;상기 균사체 액체배양물을 10,000 xg로 20분간 원심분리하여 균사체와 상등액으로 분리하여 얻은 균사체를 세척한 후 3번 열수 추출하여 상등액을 에탄올을 침전시켜 원심분리하고 그 침전물을 다시 4℃에서 24시간 후 원심분리하여 얻은 상등액을 물로 희석 후 3일간 투석한 다음 동결건조하여 균체내 다당체를 얻는 단계와;상기 원심분리하여 얻은 상등액을 에탄올로 침전시켜 원심분리하고 그 침전물을 4℃에서 24시간 후 다시 원심분리하여 얻은 상등을 물로 희석 후 3일간 투석한 다음 동결건조하여 균체외 다당체를 얻는 단계;로 이루어진 것을 특징으로하는 동충하초 균사체 액체배양물로부터 수득되는 균체내 다당체와 균체외 다당체의 생산방법.