일반기술

포유동물의 염색체 이상의 진단 및 KARIOTYPIC EVOLUTION 분석을 위한 PAINTING PROBES

□ 기술개요중기 염색체와 ТОРО-DOP-PCR의 현미 해부에 의해 전체 및 부분 염색체 페인팅 프로브 생성을 위한 새로운 기술은 디자인되었다. 분석은 표준 인간 염색체를 가진 DNA 프로브의 시츄 하이브리다이저(FISH)에서 연속형광성을 띠는 이상한 인간염색체를 가진 DNA 프로브 염색체에의 발생에 의해 실행될 수 있다. 이 기술은, 최소한으로, prometaphase 염색체로 반응하는 분해 레벨에서 염색체의 브레이크 포인트의 확인을 가능하게 한다. 게다가 이 기술은 백혈병의 특정한 유형에 독특한 이상한 염색체의 특질의 확인을 위해 급속한 DNA 프로브 (전체적인 염색체 페인트 및 부분적인 염색체 페인트)의 생산을 일으킨다. 현 방법은 여분 유전표시 염색체의 삭제 분석, 및 신생물성 세포전이에 있는 염색체 재배열의 연구과 같은 유전적 염색체 이상의 확인에서 매우 효과적으로 증명했다. 현 접근은 포유동물의 핵형 발전의 비교 분석에 있어 다양한 종의 염색체에 있는 일치하는 지역 확인을 하는 새로운 기회를 연다. □ 페인팅 프로브 발생의 원리 1. 유사분열 세포 현탁액의 생산. 2. 분열 중기 염색체 준비. 3. 분열 중기 염색체의 현미해부. 4. 절개된 염색체 파편에서 DNA 고립. 5. DOP-PCR의 DNA 유전자 확장 6. 확장된 DNA의 라벨링 □ 페인팅 프로브의 유형 1.정상 염색체의 (WCP) 전 염색체 페인트. 2.비정상 염색체의 전 염색체 페인트. 3.부분적인 염색체 페인트 a.염색체 암 페인트 b.개별 염색체 지구에 특성 페인트 c.염색체 또는 염색체 지역 다색 밴딩을 위한 부분 염색체 페인트의 오버랩핑 세트. 녹색 페인팅은 염색체 5, 빨간 페인팅은 염색체 20를 나타낸다. DAPI (파란 신호)에 의하여 염색체의 일반적인 페인팅. 정상적인 염색체 5와 20는 아라비아 숫자에 의해 나타난다. 재 정비된 염색체는 다음과 같이 표시된다: der (5) t (5; 20는) 염색체 5의 centromeric 지역를 포함하는 유도 염색체이다; der (20) t (5; 20는) 염색체 20의 centromeric 지역를 포함하는 유도 염색체이다. 건강한 기증자의 분열 중기 염색체를 가진 특정한 표시 염색체의 페인팅 프로브 형광성 위치 교잡의 결과. (화살에 의해 나타나는) 염색체의 5개쌍의 지역에 있는 녹색 페인팅은 변형된 세포의 표시 염색체에 있는 염색체 지역를 보여준다. □ 기술적 평가 및 경제적 이점 ● 다른 염색체 지역의 구조상 유사성 때문에 실수를 없애는 유일한 DNA 배열의 시각화 근거를 두는 염색체 지역의 확인 ● 비정상 염색체에서 작은 지구 (5 МВ)의 확인과 정확한 묘사. ● 다색 밴딩을 이용한 삭제 그리고 역환과 같은 intrachromosomal 재배열의 탐지 그리고 확인 □ 응용분야의학 ● 유전된 선천 염색체 이상의 분석 ● 종양학에 있는 염색체 재배열의 분석 ● 핵형 발전의 분석