일반기술

설파구아니딘 내성 및 L-시스테인 요구성 균주에 의한 L-글루타민의 제조방법

본 기술은 L-로이신, L-시스테인 요구성을 갖고 동시에 설파구아니딘 내성을 가지며 알라닌에 의해 생육이 촉진되는 미생물을 이용한 발효법에 의한 L-글루타민 제조방법에 관한 것이다.L-글루타민은 아미노산의 일종으로써 영양제 및 소화기 궤양 치료제, 알콜중독 치료제, 뇌기능 개선제 등의 약용은 물론 최근에는 화장품의 기초원료로서 각광을 받고있는 물질이다.지금까지 발효법에 의한 L-글루타민 제조방법은 상당수 공지되어 있는데, 본 기술의 목적은 종래보다 L-글루타민의 생산능력이 뛰어난 미생물을 선별하는 것이다.본 기술에서는 생육에 로이신을 요구하고 L-알라닌에 의해 생육이 촉진되는 코리네박테리움 MWM-791012를 친주로 변이 처리하여 설파구아니딘 내성 및 L-시스테인 요구성이 부가된 코리네박테리움 MWM-891020 가 친주에 비해 L-글루타민 생성능이 우수한 것을 밝혀내었다.본 기술에 있어서 새로운 균주의 분리방법은 코리네박테리움 MWM-79l012를 통상의 변이처리, 즉 자외선 조사나 화학변이 유기제인 NTG(N-메틸-N-메틸-N-니트로소구아니딘), DES(디에틸설페이트)를 처리하고 최소 한천 평판배지에서 1차 변이주(MWM-890821)인 설파구아니딘 내성균주를 분리하였다. 이와 같은 방법으로 선별 분리한 본 기술의 1차 변이주인 설파구아니딘 내성주 MWM-890821은 친주인 MWM-791012에 비해 강한 설파구아니딘 내성을 보였다.선별된 1차 변이주를 친주로 다시 자외선 조사나 NTG 등의 화학변이 유기제를 처리하고 통상의 아미노산 요구성 균주의 분리방법에 따라 2차 변이주인 L-시스테인요구성 균주, 코리네박테리움 MWM-891020을 분리하였다. 2차 변이주인 MWM.-891020의 균화적 성질은 변이처리전 친주인 MWM-791012와 비교해본 결과 설파구아니딘 내성 및 L-시스테인 요구성만이 명확한 차이를 나타냄을 알 수 있다.또한 2차 변이주인 MWM-891020과 친주인 MWM-791012의 L-시스테인첨가농도별 생육도 및 L-글루타민 생성량을 비교분석 해본 결과는 L-시스테인이 첨가된 경우 신균주는 친주에 비해 생육은 약간 저조하였으나 L-글루타민의 축적량이 크게 향상 된 것으로 나타났다