일반기술

말토테트라오즈 생산 아밀라제의 제조방법

본 기술은 퇴비로부터 분리한 말토테트라오즈 생산 아밀라제 효소를 생산하는 새로운 균주인 스트렙토마이세스속 KFCC-10846을 분리하고 전분류를 주원료로 하는 배지에서 호기적으로 배양하여 말토테트라오즈생산 아밀라제를 제조하는 방법에 관한 것이다.본 기술의 목적은 상기 종래의 균주외에 말토테라오즈를 주생산물로 생산하며 공업화에 적합한 아밀라제 생성 균주를 분리하여 공업화에 적용시키기 위한 것이다.본 기술에서 밝혀진 새로운 미생물 스트렙토마이세스속 KSM35 (KFCC-10846)이 생산하는 말토테트라오즈 생산성 아밀라제는 액화시킨 전분에 일정한 조건에서 작용하여 말토테트라오즈를 주생산물로 생산하며 그 외 말토트리오즈 및 말토즈를 생산하며, 탄소원으로 다른 G4-아밀라제 생산 미생물이 용성전분을 주로 이용하는 것에 비해 용성전분뿐만 아니라 가격이 저렴하고 구입이 용이한 양성전분 및 산화전분을 이용할 수 있으며 이들을 주탄소원으로 이용할 때 효소역가가 크게 증가하는 특성이 있어 공업화에 매우 유용한 방법이다말토테트라오즈 생산 아밀라제(G4-아밀라제)는 말토올리고당의 주성분인 말토테트라오즈를 생산하는데, 말토올리고당은 식품 첨가물로써 주로 사용되어 식품의 점도와 보습성을 증가시키며 빙점강하 혹은 삼투압같은 물리적 성질의 조절뿐만 아니라 감미의 조절이나 갈변의 방지 등에 효과가 있으며 정제된 상태로는 혈청 아밀라제의 분석용 기질로도 이용되고 있다.본 기술의 목적에 따라 분리한 미생물은 G4-아밀라제를 생산하는 것으로는 특이하게 방선균의 일종인 스트렙토마이세스속의 균주로 경기도 북부지역의 퇴비에서 분리 동정하였다. 분리한 균주들에서 선별한 KSM-35를 배양하여 광학현미경으로 관찰한 결과 균사를 형성하여 포자의 사슬이 길게 나타났으며, 부분적으로 나선형사슬이 뚜렷하고 한 포자사슬은 대체로 12-15개의 포자로 이루어져 있는 것으로 확인되었다. 또한, 이 미생물이 지나는 전균체 성분의 디아미노피멜릭산의 종류를 알아보기 위하여 균체를 산가수분해하여 TLC로 분석한 결과 LL-DAP(Rf : 0.3)와 글리신(Rf : 0.47)이 검출되었으며, 그밖에도 알라닌(Rf : 0.67), 글루타민산(Rf : 0.58)등이 검출되었다. 특별한 당의 검출은 나타나지 않았다.이러한 결과들은 이 균주가 레체발리에와 레체발리에에 의한 분류법에 따라 스트렙토마이세스속으로 분류됨을 나타낸다. 나아가 형태학적, 배양학적, 생리학적 특성을 비교 검토한 결과 종은 알부스(albus)의 근연종으로 동정되었으나 추가적인 연구가 요구된다