일반기술

발효에 의한 L-쓰레오닌이 제조방법(아스파라긴산 하이드록사메니트 내성변이주)

본 기술은 미생물의 발효에 의한 L-쓰레오닌의 제조방법에 관한 것으로서, L-시스테인을 요구하고 동시에 S-2-아미노에틸-L-시스테인과 아스파라긴 산의 대사길항물질인 DL-아스파라긴산 하이드록사메이트에 대한 내성을 가지는 변이주를 분리하고 슈크로스 등의 당류를 탄소원으로 이용, 호기적으로 배양하여 L-쓰레오닌을 제조하는 방법에 관한 것이다.본 기술의 목적은 발효에 의한 L-쓰레오닌의 제조에 있어서, 종래의 방법보다 높은 수율로 L-쓰레오닌을 생산할 수 있는 방법을 모색하기 위한 것이다.본 기술에서 이용한 균주는 L-쓰레오닌 생산에 이용되고 있는 L-시스테인 요구주이며, 그 분리 방법은 S-2-아미노에틸-L-시스테인에 내성을 가지는 세라티아속 SW9410을 친주로 하여 통상의 변이처리 방법에 의해 얻은 변이주중 L-시스테인에 대한 요구성과 S-2-아미노에틸-L-시스테인와 DL-아스파라긴산 하이드록사메이트에 대한 내성을 동시에 가지는 변이주 SW9511을 유도하였다.본 기술에 의해 분리된 균주를 이용하여 동일 조건에서 배양할 때, 친주에 비하여 다량의 L-쓰레오닌을 배양액내에 축적된다는 것을 알 수 있었다L-쓰레오닌은 필수아미노산의 일종으로서 쌀의 제 2 제한 아미노산이다. 지금까지 알려진 바로는 아미노산 수액제제, 종합아미노산제제의 의약용도와 식품의 영양 강화제나 건강음료 등의 식품용도를 사용되고 있다. 최근에는 L-라이신과 함께 사료첨가제로도 수요가 급증하고 있는 아미노산이다. 본 기술에서는 DL-아스파라긴산 하이드록사메이트와 S-2-아미노에틸-L-시스테인에 내성을 가진 동시에 L-시스테인 요구성을 가진 변이주중 특성이 명확한 신균주 SW9511을 분리하였으며, 이 새로운 균주는 배양액 내에 많은 L-쓰레오닌을 축적시키는 것을 특징으로 한다.본 기술에서는 신균주가 친주에 비하여 현저하게 L-쓰레오닌을 배양액내에 축적시키는 원인에 대하여는 확실하게 밝혀지지 않았으나, 본 기술에서 DL-아스파라긴산 하이드록사메이트에 대한 내성주를 유도하여 피드백 조절이 제거된 돌연변이주를 유도한 결과 L-쓰레오닌의 축적량이 증가되었다고 판단된다