일반기술

미생물 발효에 의한 L-페닐알라닌의 제조방법

본 기술은 에쉬리시아 콜리(Escherichia coli)의 돌연변이주중 L-페닐알라닌 생산균주를 탄소원, 질소원, 기타 유용한 유기 및 무기 영양원을 함유하는 배양배지에서 호기적인 배양을 하여 배지내에 고농도의 L-페닐알라닌을 생산, 축적시키는 발효법에 의해 L-페닐알라닌의 공업적 제조방법에 관한 것이다.본 기술은 종래 제조방법의 단점을 극복하고 저가의 생산원가로 대량생산을 위해서 보다 고수율의 생산능력을 갖춘 돌연변이체의 개발을 목적으로 하고 있다.본 기술에서의 균주 에쉬리시아 콜리 MWWJ304주는 MWEC101-6주를 모주로 하여 연속적인 변이처리를 행함으로써 고농도의 페닐알라닌 및 타이로신 아날로그 물질에 대한 내성 강화주이며 온도 감수성 타이로신 누수(leaky)주를 개발하고 이들 중 L-페닐알라닌 생산성이 우수한 균주를 선별하여서 얻을 수 있었으며, 이 새로운 균주를 이용하면, 저렴하게 L-페닐알라닌을 생산할 수 있게 된다L-페닐알라닌은 필수아미노산의 일종으로 의약품 원료, 혹은 저칼로리 감미료인 아스파탐의 합성원료로 사용되며, 일부식품의 첨가제로 사용되는 물질이다. L-페닐알라닌은 미생물의 생합성 경로가 복잡하고 방향족환을 갖는 구조식의 영향 등으로 생산수율은 일반적으로 대단히 낮으며, 생육이 불량하여 발효지연 등의 문제점이 있어왔다.본 기술에서 최종적으로 선별된 에쉬리시아 콜리 MWWJ304가 모주인 MWEC101-6주와 다른 생리학적 성질은, 온도변화에 따라 생육을 위해 L-타이로신의 보충을 요구하는 온도감수성 타이로신 누수주인 점, 자일로스, 리보스 등 5탄당 이용능이 저하된 균주인 점, L-페닐알라닌, L-타이로신 아날로그 물질들에 대한 완전내성을 가지고 있는 점으로 요약된다