일반기술

스타필로코커스 오레우스가 생산하는 스타필로키나제 및 그의 유전자

스타필로코커스속 균주가 생산하는 혈전용해능을 가지는 새로운 스타필로키나제로서, 스타필로코커스속 균주로부터 혈전용해능이 우수한 오레우스 균주를 선별하고, 이로부터 스타필로키나제를 확인하여 그의 유전자를 분리하고 그 염기 서열 및 아미노산 서열을 결정함으로써 기존의 혈전용해제의 단점을 극복한 새로운 혈전용해성 단백질을 제공한다. 스타필로코커스속 균주를 피브린 플레이트 분석방법 등으로 조사하여 스타필로코커스 오레우스 ATCC 29213 균주가 혈전을 용해하는 기능이 우수함을 확인한 다음, 배양 상등액으로부터 새로운 혈전용해 활성을 가지는 15 kDa의 스타필로키나제를 얻은 후, 그 아미노산서열과 유전자 및 DNA 염기서열을 분석하였다.플라즈미노겐 활성인자를 정맥주사하여 혈전용해계를 활성화하는 치료법이 지난 30여년간 보편적으로 사용되어 왔는데, 혈전에 대한 특이성이 없으므로 치료기간 동안에 전신출혈 등의 부작용이 보고되었다. 최근 자연계의 여러 생물에서 존재하는 혈전용해성 물질을 광범위한 탐색 기술을 활용하여 새로운 혈전용해제로 개발하려는 많은 시도가 이루어져, 이미 은행잎 추출성분과 지렁이로부터 분리된 6가지의 혈전용해제들이 개발되어 상품화되었다.한편, 미생물에서 분리된 스타필로키나제는 인간 플라즈미노겐의 강력한 활성제로 알려져 있는 단백질로서, 혈전용해능이 우수하여 새로운 혈전용해제로 기대되고 있다.본 기술에서는 스타필로코커스 오레우스 균주에서 혈전용해 활성을 가진 물질을 분비함을 확인하고, 이로부터 스타필로키나제 유전자를 분리하고 아미노산 서열을 분석하여 다른 스타필로키나제와 비교한 결과, 기존에 알려진 3개의 스타필로키나제 변형체들은 아미노산 번호 11번, 34번, 36번, 43번 위치에서 아미노산이 치환되었는데, 본 스타필로카나제는 지금까지 알려지지 않은 33번 위치에서 아미노산이 치환된 것으로 나타났으며, 또한 아미노산 번호 36번 위치의 아미노산은 기존의 변형체가 글리신이나 라이신으로 치환되는데 반하여 음 전하를 가지는 글루탐산으로 치환되어 전체 단백질의 구조에 영향을 주는 전하 변화가 있는 새로운 스타필로키나제임을 알 수 있다. 본 스타필로키나제는 혈전용해 활성이 우수하여 급성 심근경색, 뇌경색 등을 치료하는 혈전용해제로 이용될 수 있다