일반기술

C형 간염 바이러스의 프로테아제의 활성을 측정할 수 있는 C형 간염 대체 바이러스, 그 재조합 유전자 및 그 용도

피코르나바이러스를 코딩하는 바이러스 유전자와 피코르나바이러스의 전사 해독프레임내에 위치하는 C형 간염바이러스(HCV) 프로테아제 NS3를 코딩하는 프로테아제 유전자와 HCV 프로테아제 NS3의 타겟 부위를 코딩하는 타겟 유전자를 포함하는 C형 간염 대체 바이러스를 코딩하는 재조합 유전자와 이 재조합 유전자에 의하여 발현되는 대체 바이러스의 증식을 억제하는 물질을 검출하는 공정을 포함하는 항C형 간염 바이러스제의 스크리닝 방법 및 이 대체 바이러스를 항C형 간염 바이러스제의 존재하에 증식시키고 증식 능력을 측정하는 공정을 포함하는 항C형 간염 바이러스제의 활성 측정방법이다. 따라서 종래 항C형 간염 바이러스제 개발에 있어서의 문제점을 해결하기 위하여, 조직 배양시스템에서 증식이 잘 일어나며 항C형 간염 바이러스제의 효능을 효과적으로 검정할 수 있는 HCV의 대체바이러스를 제공한다.비A형 간염, 비B형 간염의 주요한 병인자는 HCV로 알려져 있으며 이 바이러스는 간염, 간경변 및 간암 등의 간질환을 일으킨다고 보고되고 있다. HCV에 대한 항바이러스제를 개발하기 위해서는 항바이러스 효과를 나타내는 물질을 찾아내거나, 항바이러스제의 효능을 검정할 수 있는 시스템이 필요한데, HCV를 직접 사용하여 항C형 간염 바이러스제를 스크리닝하거나 항바이러스 효능을 검정하는 것은 매우 어렵기 때문에, 항바이러스제의 효능을 테스트하기 위해서는 HCV의 특징적인 면을 나타내는 대체 바이러스의 개발이 시급하다.본 기술에서는 HCV와 소아마비 바이러스의 특성에 기초하여 HCV 프로테아제의 활성이 있을 때에만 살 수 있는 유전자 재조합 소아마비 바이러스를 생산하였다. 재조합 바이러스에 있어서 증식 및 다른 세포의 감염에 필요한 단백질들은 소아마비 바이러스의 유전자에 의하여 만들어지며 여기에 HCV의 프로테아제와 그 프로테아제가 자르는 부위를 소아마비 바이러스의 유전자 앞에 첨가하여, HCV 프로테아제의 활성이 있을 때에만 이 재조합 바이러스가 증식할 수 있게 구성하였다. 재조합 바이러스를 이용하면 프로테아제 저해제를 기초로 하는 항C형 간염 바이러스제의 개발을 쉽고 정확하게 수행할 수 있다. 본 재조합 바이러스는 항C형 간염 바이러스제의 개발과 효과적인 효능검정에 유용하게 이용될 수 있다