일반기술

사람 T세포주에서 세포내 칼슘 이온을 증가시키는 펩티드

인간 면역세포에서 포스포리파제 C(PLC)의 활성과 관련하여 세포내 칼슘이온을 증가시키는 테트라머 펩티드로서, 테트라머 펩티드 라이브러리를 합성, 정제한 다음, 면역세포인 CEM 세포내 칼슘이온의 증가를 조사하기 위하여, mid-log phase로 분열하는 면역세포를 얻은 후 칼슘이온과 결합하는 염색물질 Fura-2/AM을 첨가하여 배양하고, 칼슘이온이 첨가되지 않고 EGTA 등이 첨가된 용액에 재현탁하여 흡광도를 측정하고 다시 펩티드 라이브러리를 각각 처리하여 그 흡광도 차이를 조사하여, 그 결과를 Grynkiewicz의 방법에 따라 세포내로 유리된 칼슘이온의 농도로 환산하여 확인함으로써 세포내 칼슘이온을 증가시키는 테트라머 펩티드를 선별한다. 본 펩티드는 사람 T세포주에 특이적으로 작용하는 면역증강제 또는 본 펩티드에 특이적인 수용체를 탐색할 수 있는 프로브로 사용될 수 있으며 이는 T 세포의 생리활성 및 면역조절 연구의 수단 등으로 사용된다생체 면역시스템에서 가장 핵심적인 역할을 하는 T 세포 등의 면역세포들의 활성화 초기 과정에서 PLC의 활성화와 세포내 칼슘이온의 유리 등이 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 왔다. 이 과정에는 세포막의 수용체 단백질과 다른 세포의 단백질 또는 펩티드 사이의 결합을 촉진하거나 이와 유사 결합을 이루어 면역 기능을 활성화시킬 수 있는 펩티드들이 작용하는데, 본 펩티드는 면역세포의 초기 활성화 과정에서 세포막의 수용체 단백질과 다른 단백질의 결합을 촉진하는 활성 펩티드로서, 면역세포에서 PLC를 활성화시켜 세포내 칼슘이온의 분비를 촉진한다. 한편 섬유아세포, 신경세포 그리고 다른 면역세포인 B 임파구 세포 등에서 펩티드에 의한 세포내 칼슘 이온증가 효과를 조사한 결과 사람의 T 세포가 아닌 다른 면역세포들에서는 세포 활성화 효과가 없는 것으로 나타나, 사람 T 세포인 CEM 세포를 특이적으로 활성화시키는 것을 알 수 있었다.신규 펩티드는 면역증강제 또는 본 펩티드에 특이적인 수용체를 탐색할 수 있는 프로브로서 사용이 가능하다