일반기술

식물 세포질내 형질전환을 위한 DNA 단편 및 그를 함유하는 벡터

본 기술의 ARS 단편은 유채의 엽록체로부터 통상의 엽록체 DNA 분리방법에 따라 분리한다. 본 기술에 따라 제공되는 ARS 단편은 효모의 형질전환율을 증강시킴과 동시에 ARS 단편을 보유하며 기타 유용성 구조 유전자를 보유하는 벡터에 의해 형질전환시킨 식물 세포에 있어서, 그 유용 유전자의 발현을 안정화시키고 발현율을 증가시키는 역할을 한다. ARS를 보유하는 벡터는 통상의 방법에 따라, 적절한 선발 인자, 프로모터 서열 등과 함께 ARS를 결합시켜 제조할 수 있다. 본 기술에서는 대장균의 플라스미드로서 대장균의 복제 오리진, 선발 인자로서 암피실린 내성 유전자를 갖는 pUC19에 식물 세포에서의 선발 인자로서 하이드로마이신 유전자, 식물 미소기관에서의 발현을 위한 프로모터로서 PrbcLp(Rubisco 유전자의 큰 서브유니트) 및 PatpB(ATPase의 β-서브유니트)를 재조합시켜 세균 및 식물의 형질발현에 사용될 수 있는 벡터 pECTRHG 제작한다.본 기술은 식물체 형질 전환시 세포질내 형질전환을 위하여 사용할 수 있는 벡터를 제작하는데 사용할 수 있는 유전자 단편 및 이를 보유하는 식물의 세포질내 형질전환용 벡터에 관한 것이다.식물체내에 유용한 유전자를 도입시키기 위해서는 벡터(vector)가 사용되는데 이 벡터에 삽입된 유용 유전자들을 여러가지 형질전환 방법에 의해 식물 세포내로 들어가서 핵내로 삽입되어 재분화시켜 형질전환 식물체가 완성된다. 그러나 지금까지의 식물의 형질전환은 핵내 염색체에 대한 형질전환에 머무르고 있는 실정이다.따라서 본 기술의 목적은 ARS 단편과 엽록체의 프로머터 서열을 갖는 셔틀 벡터 pECTRHG를 제공하는 것이다.본 기술에 따른 ARS 단편은, 효모의 형질전환율을 증강시킴과 동시에 ARS 단편을 보유하며 기타 유용성 구조 유전자를 보유하는 벡터에 의해 형질전환시킨 식물 세포에 있어서, 그 유용 유전자의 발현을 안정화시키고 발현율을 증가시키는 역할을 한다.