일반기술

발효법에 의한 L-페닐알라닌의 제조방법

에쉐리시아 콜리의 돌연변이주중 L-페닐알라닌 생산균주를 배양 배지에서 배양하여 배지내에 고농도의 L-페닐알라닌을 생산 및 축적시키고 배지로부터 L-페닐알라닌을 회수하는 발효법에 의한 L-페닐알라닌의 공업적인 제조방법에 관한 것으로서, L-페닐알라닌은 미생물의 생합성 경로가 복잡하고 방향족환을 갖는 구조식의 영향 등으로 생산수율은 일반적으로 대단히 낮으며, 생육이 불량하여 발효지연 등의 문제점이 있는데, 이를 극복한 에쉐리시아 콜리MWWJ 304가 개발된 바 있다. 그러나 이 균주는 37℃에서 L-타이로신을 첨가하지 않으면 생육이 극히 저조하여 배양액 내에 L-페닐알라닌이 거의 생산, 축적되지 않고, L-타이로신을 과량으로 첨가하면 생육은 크게 향상되나 L-페닐알라닌의 생산성이 극히 저조한 단점이 있었다. 이에 본 기술은 이러한 MWWJ 304를 모주로 하여, L-타이로신을 고농도로 함유한 배지에서 L-페닐알라닌 생산성이 우수한 변이주 에쉐리시아 콜리를 선별하는 방법을 개발하였으며, MWWJ 304의 단점들을 보완할 수 있다. 변이처리된 균주는 L-타이로신을 고농도로 함유한 배지에서도 L-페닐알라닌을 생산하는 변이균주 주변에 검정균주의 생육환이 나타나게 된다. 이러한 변이균주중 검정균의 생육환을 빠르고 크게 생성시키는 균주를 선별하여 그중 L-페닐알라닌 생산성이 가장 우수한 균주를 최종적으로 선별하였다. 선별된 에쉐리시아 콜리 MWTR 42는 모주인 MWWJ 304와 비교하였을 때 다음과 같이 생리학적 성질에 있어서 상이하게 나타났다.1. 고농도의 L-타이로신 함유 배지에서도 L-페닐알라닌 생산성이 우수하다.2. 온도 변화에 따라 생육을 위해 L-타이로신의 보충을 요구하는 온도 감수성 타이로신 우수성이 약화되었다.3. L-페닐알라닌 아날로그와 L-타이로신 아날로그를 함께 포함한 배지에서도 생육이 우수하다