일반기술

스트랩토키나제와 스트렙토도르나제를 생산하는 미생물 및 이를 이용한 스트렙토키나제 및스트렙토도르나제의 제조방법

스트렙토키나제 및 스트렙토도르나제를 고역가로 생산하는 신규 미생물 및 이 미생물을 배양하여 상기 화합물을 제조하는 방법에 관한 것으로서, 값싼 배지, 특히 아르기닌 이용성이 증가하고 카제인 분해능이 우수하여 아르기닌과 미분해 카제인을 함유하는 배지에서 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 동시에 생산할 수 있는 스트렙토코커스 속의 새로운 변이주를 제공하는 것을 목적으로한다. 본 기술에서는 미생물 기탁기관인 유전자은행(KCTC)으로부터의 스트렙토코커스속(sp. KCTC 3098) 균주를 모주로 하여 자외선(UV)과 유기변이제인 NTG를 이용하여 돌연변이 처리함으로써 아르기닌 이용성이 증가된 변이주를 선별하였으며 이를 이용하여 계속 변이처리한 후, 카제인 분해능이 우수하면서 스트렙토키나제 및 스트렙토도르나제의 역가가 매우 향상된 변이주를 선별하였다본 기술의 균주를 배양하여 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 생산하는 방법에서는 균주를 아르기닌 및 미분해 카제인을 함유하는 저렴한 배지에서 배양하는 것이 가능하고 고역가의 효소를 생산하기 때문에 종래의 분해 카제인을 함유하는 배지를 이용한 방법에 비해 경제성이 우수하여 산업적인 규모의 실시가 가능하다스트렙토키나제는 용혈성 스트렙토코커스에 의하여 생산되는 균체의 단백질의 일종으로 분자량이 46-50 kDa 정도인 폴리펩타이드이며 혈액성분인 플라스미노겐을 플라스민으로 활성화시키는 혈전 용해인자로 작용한다. 또한 스트렙토도르나제는 스트렙토키나제와 함께 생성되는 균체의 단백질의 일종으로 핵단백 용해인자로 작용하며 이들 두 효소는 적절한 비율로 혼합되어 복합소염 효소제로 널리 이용되고 있다.스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 제조하는 종래의 대부분의 방법들은, 스트렙토키나제의 생성역가가 너무 낮아 산업화가 어려운 단점이 있었으며, 또한 시스테인 이용성이 증가된 미생물 변이주를 이용하여 스트렙토키나제 역가를 크게 증가시킨 방법도 있으나, 배지성분 중 효소처리하지 않은 카제인을 사용하였을 경우 효소 처리한 카제인을 사용하였을 경우에 비해 생성된 스트렙토키나제의 역가가 낮아진다고 하고 있어서, 효소 처리한 카제인의 가격이 효소 처리하지 않은 카제인의 가격보다 2-3배 정도 비싼 점을 감안할 때 이 방법 역시 생산원가가 높아지는 단점이 있었다.본 기술의 균주 스트렙토코커스 sp. MSK-1209는 스트렙토코커스 sp. KCTC 3098을 모주로 하여 변이처리를 통해 선별되었으며 아르기닌 이용성이 증가하고 카제인 분해능이 우수하기 때문에 아르기닌 및 미분해 카제인을 함유하는 배지에서 고역가의 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 동시에 생산하는 장점을 갖는다