일반기술

스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 생산하는 미생물 및 이의 제조방법

미생물을 배양하여 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 동시에 제조하는 방법이다. 배양후의 배양액으로부터 두 효소의 회수공정을 간단히 하고 제조원가를 낮추기 위해 발효 배양액내에 생성되는 스트렙토키나제 및 스트렙토도르나제의 역가비율이 특정비율로 조절되는 조건을 확립하는 것으로, 미생물을 발효조에서 배양할 때 배양조건, 특히 교환기의 팁스피드(tip speed)를 적절히 조절함으로서 배양액 중에 생성된 상기 두 화합물의 역가 비율이 회수공정이 용이한 4:1의 비율의 범위에 들도록 함으로써 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 동시에 제조하는 방법이다.본 기술에 따르면, 발효 완료 후에 별도로 스트렙토키나제의 역가와 스트렙토도르나제의 역가를 약 4:1의 범위로 조절하기 위한 설비나 그에 따른 작업 없이 목적하는 최종 산물을 얻을 수 있다 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제 생산능을 갖는 미생물을 배양하여 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제를 동시에 생산하는 방법에 있어서, 배양시에 팁스피드를 적절히 조절함으로써 배양액중에 생성되는 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제의 역가 비율을 3.8-4.2:1로 조절하는 기술로서, 스트렙토키나제는 용혈성 스트렙토코커스 균주에 의하여 생산되는 균체외 단백질의 일종으로 분자량이 46-50kDa 정도인 폴리펩타이드이며 혈액성분인 플라스미노겐을 플라스민으로 활성화시키는 혈전용해 인자로 작용한다. 또, 스트렙토도르나제는 스트렙토키나제와 함께 생성되는 균체외 단백질의 일종으로 핵단백 용해 인자로 작용하며, 이들 두 효소는 적절한 비율로 혼합되어 복합소염 효소제제로 널리 이용되고 있다. 시중에 시판되고 있는 복합소염 효소제제들의 최종 완제품내의 스트렙토키나제와 스트렙토도르나제의 함량비는 일반적으로 4:1이다. 그러나 미생물을 배양하여 상기의 화합물을 제조할 때 발효액으로부터 효소를 분리 정제하는 과정에서 두 효소의 역가비율을 4:1로 맞추기 위해서는 잉여의 스트렙토키나제를 분리해내어 제거해야 하는데 이에 따라 회수설비의 증가 및 제조원가가 상승하게 된다이에 본 기술에서는 배양조건중 교반속도가 빨라지면 배양되는 미생물의 생육형태에 영향을 주어 생육을 높게 하고 이에 따라 스트렙토키나제 역가는 유지되는 반면 스트렙토도르나제 역가가 향상됨을 밝혀내어 기술에 적용하였다.