일반기술

신규 세포융합 균주 및 이를 이용한 데메칠 테트라싸이클린의 제조

전분 및 이의 가수분해물등의 탄소원과 옥수수 침출액(corn steep liquor) 및 면실분(cottonseed meal)등의 유기태 질소원을 주원료로 한 영양배지에 스트렙토마이세스 오레오파시엔스(Streptomyces aureofaciens)의 새로운 세포 융합균주를 배양하여 배양액 중에 데메칠클로르테트라싸이클린[demeth-ylchlorteracycline(DMCT)의 축적을 최소로 하면서 목적산물인 데메칠테트라싸이클린(DMT)의 회수를 쉽게 할 뿐 아니라 미노싸이클린으로의 화학적 전환을 용이하게 한 데메칠테트라싸이클린의 제조방법에 관한 것으로, 오트밀 한천배지에서 회갈색의 포자를 형성하고 배양액중에 데메칠클로르테트라싸이크린(DMCT)은 소량 축적하지만 목적산물인 데메칠테트라싸이클린(DMT)을 상대적으로 많이 생산하는 스트렙토마이세스 오레오파시언스(Streptomyces aureofaciens) 세포융합변이주 CKD-3562 KCTC 8526P를 선발하고 이를 탄소원, 에너지원 및 질소원을 함유한 배지에서 배양하여 데메칠테트라싸이클린(DMT) 및 데메칠클로르테트라싸이클린(DMCT)을 생성, 축적시킨후, 데메칠테트라싸이클린을 분별채취함을 특징으로 한다.본 기술에 따른 고역가 세포융합변이주 스트렙토마이세스 오레오파시언스 CKD 3562(KCTC 8526P)는 공지의 친균주인스트렙토마이세스 오레오파시언스 ATCC 12551과 비교하여 다음과 같은 형태적 특성을 갖는다. 두 균주의 기균사(aerial mycelium) 말단은 방선균 특유의 나선형을 하고 있으나 세포융합주는 기균사의 길이가 다소 짧은 편이며 포자 형성능이 미약했던 친균주에 비하여 포자 형성능이 월등히 향상되었다. 특히, 세포융합주는 오트밀 한천배지에서 회갈색의 포자를 형성한다. 또한, 본 기술에 따라 선발된 세포융합주는 배양도중 알카리나 산의 첨가 없이도 생리적으로 목적산물의 생산최적 pH가 자동적으로 조절되어 발효 공정상의 불편한 점을 해소함과 동시에 pH조절시 야기될 수있는 사고를 근원적으로 방지할 수 있으며, 원료중 성분이 불균일한 옥수수 침출물(cornsteep liquor)의 농도에 따른 발효성적의 편차가 적고, 포자를 잘 형성하여 균주의 보존, 균주의 개발등에 유리한 점을 갖는 등의 장점을 갖는다.