일반기술

경구용 백신으로 사용할 수 있는 알긴산염 마이크로스피어 및 그 제조방법

항원 단백질 확산-조절 계면 겔화 기법(diffusion-controlled interfacial gellation technique)에 의해 생분해성 알긴산염 마이크로스피어에 포함시킴으로써 얻어지는 5㎛이하의 직경을 갖는 알긴산염 마이크로스피어의 제조방법 및 상기 알긴산염 마이크로스피어로 구성되는 경구용 백신에 관한 기술이다. 기존의 방법은 작은 크기의 알긴산염 마이크로스피어를 유제화된 기제와 회전 팬으로 제조하였다. 그러나 칼슘 이온을 포함하는 수용액 내에 알긴산염을 적가하여 생성되는 겔은 평균 직경이 크고, 입자 크기의 분포도 넓었다. 이로 인해 페이어 패치내로 항원을 전달하기 위해서는 바람직한 크기의 범위를 갖는 마이크로스피어를 생산하는 새로운 제조방법이 요구되어 왔다. 이에 본 기술은 항원 단백질을 확산-조절 계면 겔화 기법으로 생분해성 알긴산염 마이크로스피어에 포함시킴으로써 얻어지는 5㎛이하의 직경을 갖는 알긴산염 마이크로스피어를 제조하고 알긴산염 마이크로스피어로 구성되는 경구용 백신을 제공한다 알긴산염은 1,4-β-D만누론산과 α-L-글루론산의 공중합체로, 실온 상태 및 수용액 상에서 용이하게 제조할 수 있어 항원을 마이크로캡슐화하는데 매우 유용하며, 독성이 없고 생체적합성이 뛰어나다. 또한 추가적으로 콜레라 독소, 콜레라 독소 B 단위체, 대장균 장독소, 뮤라밀디펩타이드, 또는 포볼 에스터와 같은 보조제를 포함할 수 있어 마이크로스피어의 내상 또는 외상에 혼합 시 강한 점막성 면역반응을 유발하여 본 발명의 경구용 백신의 면역원성을 높일 수 있다. 특히 본 기술은 유중 수형 에멀젼 방법(water-in-oil emulsion technique)에 의해 더 작고 균일한 입자를 제조하는 방법을 제공한다. 본 기술로 인해 마이크로스피어는 알긴산염을 고분자 기질로 하여 위의 산성 환경 및 장관 내의 단백질 분해효소에 대한 저항성이 있어서 단백질 항원의 수송체로 사용할 수 있으며, 5㎛ 이하의 직경을 가지므로 포합된 항원을 페이어패치에 의한 경로 및 임파관에 의한 부수경로를 통하여 전신적 또는 국소적 면역기관까지 효과적으로 전달할 수 있으며, 알긴산염에 포함되지 않은 PsaA에 비해 더 높은 항체를 생성할 뿐만 아니라 점막 면역 보강제인 콜레라 독소 또는 콜레라 독소 B 단위체와 함께 투여시 혈청 및 점막 항체의 수준을 향상시킬 수 있다.