일반기술

고체 표면에 부착된 당을 간단히 정량하는 방법

고체반응과 표면에 분포하는 당 분자의 간편한 정량법에 관한 기술이다. 기존의 고체상에 부착된 당을 정량하기 위해서는 강산이나 강알칼리 등으로 리포터물질과 당분자간의 결합을 분해하여 분해된 리포터물질을 정량한다. 그러나 이 방법은 반응조건이 가혹하여 분해조건에서 당분자의 변화를 초래하거나 당과 리포터부위의 정확한 절단을 기대하기 어렵고, 또한 부착된 당분자의 양이 매우 적은 경우에는 정량이 어려웠던 문제점이 있었다. 본 기술은 리포터물질이 결합된 당을 고체상에 부착시키고, 효소로 리포터분자와 당간의 글리코시드 결합을 분해하고, 분해된 리포터분자를 정량함으로써 고체상에 부착된 당을 간단하고 정확하게 정량하는 방법을 제공한다 극단적 화학적인 조건을 피하고 좀더 생리적인 온화한 조건에서 리포터물질의 분해 방법을 제시한다. 즉, 자연에 존재하는 여러 종류의 당 분해효소를 이용하면 쉽게 활성화된 당 결합을 분해하여 리포터물질을 분해할 수 있다. 특히, 이와 같은 당 분해 효소들은 비교적 그 효소활성의 특이성이 적어서, 고체 상태에 여러 가지 형태로 연결된 당도 충분히 그들이 기질로 쓰일 수 있어서 쉽게 고상화되어 있는 모든 당에서 리포터물질을 방출할 수 있을 것으로 기대된다. 이와 같은 효소반응에 의해서 분해된 리포터 분자는 전처리 과정을 거치지 않고 바로 정량화 할 수 있는 장점이 있다. 본 기술의 정량법은 당과 리포터 물질의 분리에 효소를 사용함으로써 반응조건이 온화하며, 강산 및 강염기로 하는 방법과는 달리 별도의 전처리 절차를 필요로 하지 않는다. 또한 당을 고체상에 부착하는 방법으로서 당의 히드록시기를 이용할 수도 있어 온화한 조건, 당의 손실방지, 전처리절차를 줄일 수 있는 장점이 있다. 따라서 특정 당에 특이적으로 접합할 수 있는 도구를 제조할 수 있고 이를 이용하여 세포간의 신호를 차단할 수 있고, 나아가 이와 같은 신호 차단의 이상에서 오는 질병에 대한 새로운 치료제 개발이 용이하게 이루어질 수 있다