일반기술

유전자 프로브를 이용한 돼지의 유행성 설사병과 전염성 위장염의 진단방법

돼지 전염성 위장염 바이러스(TGEV)에 감염된 것으로 추측되는 돼지의 분변으로부터 바이러스의 RNA를 추출하고 그 RNA를 주형으로 하여 역전사효소를 이용하여 cDNA를 제작하며, 그 cDNA, 프라이머 T1 5-AGAAC AAGCT GTTCT TGCCG-3, 프라이머 T2 5-GTTTA GTTCG TTACC TCGTC-3를 이용하여 중합효소 연쇄반응을 행하고 그 PCR의 산물을 전기영동하여 582bp 의 DNA가 형성되었는지의 여부를 판단하여 돼지 전염병 위장염 바이러스를 검출할 수 있으며 또한 돼지 유행성 설사병 바이러스에 감염된 것으로 추측되는 돼지의 분변으로부터 바이러스의 RNA를 추출하고 그 RNA를 주형으로 하여 역전사효소를 이용하여 cDNA를 제작하며, 그 cDNA, 프라이머 P1 5-GAGAA TTCCC AAGGG CGAAA-3, 프라이머 P2 5-GGCAC GCTCT TCCAT ATAGG-3를 이용하여 중합효소 연쇄반응을 행하고 그 PCR의 산물을 전기영동하여 582bp 의 DNA가 형성되었는지의 여부를 판단하여 돼지 전염병 위장염 바이러스를 검출할 수 있다제공된 프라이머들을 이용하여 제작된 각 프로브들은 서로 교차반응을 나타내지 않으므로 돼지의 분변으로부터 돼지 유행 설사병 바이러스(PEDV)와 전염성 위장염 바이러스(TGEV) 의 각 항원의 존재를 특이적으로 확인하고, 돼지의 설사병을 정확히 감별 할 수 있다.