일반기술

아그로박테리움에 의한 형질전환 고추의 제조방법 및 그에 의해 생산된 고추

1) 고추자엽의 형질변환, 2) 슈트의 유도, 3) 슈트의 신장, 4) 뿌리의 유도하는 일련의 과정으로 구성된다. 고추를 형질전화하기 위해서는 아그로박테리움투마파시엔(AgrobacteriumtumefaciensLBA4404)을 매개체로 고추 자엽조직에 감염시켜 유전자를 형질전환 시키고, MS(Murashige & Skoog)기본배지에 3% 수크로스(Sucrose), 0.4% 젤라이트(Gelrite), 호르몬제로 제아틴(Zeatin)과 인돌 아세트산(Indole Acetic Acid, IAA), 항생제로는 카나마이신(Kanamycin)과 카베니실린(Carbenicillin)을 첨가한 슈트유도배지에 형질전환된 고추자엽을 배양하여 형질전환된 조직에서만 슈트(shoot)가 유도되도록 한다. 유도된 슈트(shoot)를 절단하여 MS 기본배지에 3% 수크로스, 0.4% 젤라이트, 호르몬제로 제아틴과 NAA, 항생제로는 카나마이신과 카베니실린을 첨가한 슈트신장배지에서 계대배양하여 정상적인 어린 식물로 분화시킨다. 이 과정에 의해 분화된 어린 형질전환체를 MS 기본배지에 3% 수크로스, 0.4% 젤라이트, 호르몬제로 인돌부틸산, 항생제로는 카나마이신과 카베니실린을 첨가한 뿌리유도배지에서 뿌리를 발생시키고 질석(vermiculite)용기에서 순화시켜 재분화된 형질전환 고추를 획득한다.고추는 사람들이 즐겨 먹는 음식 또는 음식에 사용되는 재료로서 우리나라에서는 상당히 대중화되어 있는 실정이므로 고추에 있어 유용한 형질을 가진 유전자를 도입할 수 있다면 재배농가 뿐만 아니라 국민 식생활 개선에도 크게 이바지 할 수 있다. 그러나 종래에는 형질전환 고추의 제조에 있어서, 슈트 (shoot)에서 뿌리(root)로의 유도과정에서의 재현율이 무척 낮고 효율면에서도 지극히 낮은 단점이 있다.따라서 본 발명은 작물에 유용한 유전자를 도입 할 수 있는 아그로박테리움 투마파시엔 (Agrobactrium tumefaciens LBA4404)을 이용하여 고추를 형질전환 할 수 있는 기술을 제공한다. 또한 본 발명은 일반적으로 모든 고추 품종에 적용될 수 있어 새로운 기능의 유전자를 짧은 시간내에 전환하여 고추 신 품종을 개발할 수 있기 때문에 국내 종묘산업의 발전과 농가의 소득 증대 및 국내 농업의 보호할 수 있다.