일반기술

우로가스트론의 정제방법

본 기술은 위산분비억제 및 항궤양 효과를 갖는 고분자량의 우로가스트론 및 표피세포증식 효과를 갖는 저분자량의 우로가스트론을 뇨로부터 분리정제하는 방법에 관한 것이다.본 기술에 따른 고분자량의 우로가스트론 정제방법은 흡착,에탄올-분별침전,추출, 한외여과 및 아세톤 침적 단계를 순차적으로 수행함으로써, 복잡한 다단계의 컬럼크로마토그래피 공정을 전혀 사용하지 않고 고활성의 고분자량-우로가스트론을 간단히 정제할 수 있다.본 기술에 따른 저분자량의 우로가스트론 정제방법은 에탄올 분별침전후, 추출 및 한외여과단계, 1단계의 컬럼크로마토그래피, 아세톤 침적, 항-EGF 컬럼크로마토그래피를 거치므로써 컬럼크로마토그래피공정을 최소화하여 저분자량-우로가스트론을 고수율로 간편하게 정제할 수 있다우로가스트론은 분자량 36,000이상 및 6,000등의 다양한 종류로 존재한다. 이중 분자량36,000이상의 고분자량은 탄수화물분획을 함유한 당단백질로서 우수한 위산분비 억제효과와 항궤양작용이 있는 것으로 알려져 왔으며 위,십이지장궤양 치료제로 사용되고 있다. 고분자량을 분리정제하는 종래의 방법으로는 흡착제에 흡착시킨 우로가스트론 분획을 암모늄아세테이트 완충액에 용해시킨 후, DEAE-셀룰로오스 컬럼크로마토그래피,카르복시메틸 - 셀룰로오스 컬럼크로마토그래피를 순차적으로 행한 후 세파클릴 S-200컬럼 크로마토그래피 및 역상분배크로마토그래피를 순차적으로 사용하는 등 다단계의 컬럼크로마토그래피공정을 거쳐 제조되기 때문에 과정이 복잡할 뿐 아니라, 이러한 공정을 거쳐 정제한 후에도 활성이 매우 낮다는 문제점이 있다. 본 기술은 흡착( 벤조산),에탄올-분별침전 후, 추출, 한외여과한 다음, 아세톤에 침적시켜 간단히 고분자량의 우로가스트론을 정제 할 수 있다.저분자량의 우로가스트론은 β-, γ-우로가스트론으로 분류되기도 하며 β-우로가스트론은 사람의 표피증식인자(Epidermal Growth Factor)와 동일한 것으로서 상처 및 화상의 치료, 안과수술후 처리, 당뇨성 궤양치료, 피부이식, 무혈청 배지등에 사용될 수 있다. 종래 기술은 다단계의 컬럼크로마토그래피 공정을 수행하며 정제수율이 매우 낮다. 본 기술은 컬럼크로마토그래피 공정을 최소화하여 높은 수율로 저분자량의 우로가스트론을 정제할 수 있다