일반기술

비침입성 진단 테스트로서 갈락토실-자일로스의 구강 관리를 통한 생체 내 장 락타제 측정

이 방법은 장 락타제의 기질인 갈락토실-자일로스((4-O-beta-D-galactopyranosyl-D-xylose)의 구강관리 후 소변, 또는 혈액에서의 색체계 측정법에 기반하고 있다. 이 비침입성 테스트는 간단한 운용, 최소 그리고 일상적인 장치, 그리고 대상에 의한 활동적인 참여가 실제적으로 없다는 장점을 가지고 있다. 이 이당류 합성은 쉽게 이용 가능한 기질에서부터 나온, 단지 하나의 효소적 반응 단계와 관계있다.한 회사가 락타제 효소의 결핍에 대한 비침입성 진단 테스트로써, 인간에게 적용할 수 있는 생체 내 장 락타제의 측정을 위한 새로운 방법을 개발했다. 락타제의 결핍은 어른들에게는, 인류의 1/3에 영향을 주는 가장 빈번한 유전적 이상인 알락타시아를 유발한다. 신생아에 있어서, 이 결핍은 유당을 이용하는 능력을 상실하게 하여, 감소된 에너지 섭취와 장내 가수분해 되지 않은 이당류 누적으로 인한 심각한 이상을 유발한다. 따라서 무유당 우유를 섭취하도록 하는 조기 진단을 요구하게 된다. 이 효소활동의 측정은 대개, 소아과 적인 특정 관심사이며, 병리학적 과정에서 장내점막의 기능적 완전함의 평가가 필요하다. 이 방법론은 갈락토실-자일로스(4-O-O-D-galactopyranosyl-D-xylose)의 이용에 기반을 두고 있다.이 화합체는, 유당의 생리학적 기질인, 유당의 구조적 상사기관으로써 작용한다. 따라서 그것은 장점막 효소에 의해 가수분해되며, 반응 생성물들은 혈액과 단순한 색체계 테스트로 측정될 수 있는, 소변에서 나타나는 그것들 중 하나인 자일로스로 흡수된다. 혈액 자일로스의 내용물은 또한 이 유체의 몇방울을 사용하여 대신 측정될 수도 있다. 소변이나 혈액에서의 자일로스 내용물은 장 락타제 활동 수준과 연관되어 있다. (r=0.95). 이는 이어지는 이 방법을 사용한 이유 후 새앙쥐에서의 이 효소의 생리학적 감소와 사후 장 점막에서의 효소활동의 직접적 측정에 의해 확립되었다. 이 실험은 우리 지식에 의하면, 같은 동물에서 감지된, 장 락타제의 감소에 대한 생체에서의 첫번째 측정이다. 갈락토실-자일로스의 조제는 효소의 합성에 의해 수행되며, 우리가 이전에 보고한, 갈락토스 유도체, 자일로스, 활성화된 탄소와 95%이상 순수한, 최종 산물의 결정체 반응 혼합물의 색층 분석에 의해 이끌어 내어진 상업적 O-galactosidase를 사용한, 화학 공정보다, 비교적 간단하다. 이 방법은 동물들에서 최적화 되었으며, 임상 실험(stage 1)을 할 준비가 되어있다. 인간에 대한 관리된 이당류의 Dosis는 어른들에게 대략 1-2g, 유아들에게는 비례적으로 낮게 측정되며 이 데이터는 임상실험에 의존한다.혁신적인 사항:이 방법은, 가수분해 되지 않은 이당류의 결장 발효로부터 발생된 수소 혹은 CO2의 생성 같은, 그 결핍에서 초래된 물질대사 결과의 측정에 기반한 것이 아니라, 효소 활동의 직접적 측정에 기반한다. 효소활동의 측정은 색체계 테스트에 의해 수행된다. 높은 민감도: 자일로스 최소 감지 한계는 0.1 mg이다.따라서 관리된 이당류의 dosis는 상당히 감소될 수 있으며, 효소 결핍은 95%만큼의 광범위에서 확실히 측정될 수 있다. 인체 체액에서의 유사한 농축으로 글루코제에 대한 자일로스 판별의 특이성은 98%보다 높다. 대상에 의한 활동적인 참여가 실제적으로 요구되지 않는다. 이당류에 대한 효소의 합성.주요장점:기타 비침입성 기술은, 대개 장 락타제 결핍과 유당 소화불량의 진단에 사용되며, 13C-유당 또는 13C-락툴로스의 섭취 후의 H2 와 13CO2 호흡 테스트, 혈액 글루코제와 갈락토제 또는 소변의 갈락토제의 측정에 기반을 두고 있다. 이 기술은 다음을 요구한다.:1) 높은 dosis의 관리된 이당류(체중 1Kg 당 2g)는, 환자에게 메스꺼움, 구토, 복통 또는 설사와 같은 상당한 장애를 발생시킬 수 있으며, 특히 유아에게 심각할 수 있다. 2) 모든 건강센터에서 장비가 사용 가능하지는 않다.3) 대상의 활동적인 참여이 기술과 반대로, 갈락토실-자일로스 방법은 다음과 같은 이점을 제공한다.- 생체에서의 효소 측정이 단지 색채계 테스트에 기반하고 있으므로, 단순하고 싼 기술, 모든 임상 생화학 실험실에서 일상적으로 사용 가능하다.- 구강 관리 이당류의 dosis는, 기타 비침해 테스트가 요구하는 것 보다, 상당히 낮아질 수 있다. 따라서 저-락타제 환자에서 장애의 생성을 최소화할 수 있다.- 자일로스 측정이 직접 락타제 활동에 의존하고 있으므로, 어른과 아이에서의 결과의 확실성이 있다.. 반면에 호흡 테스트에 있어서는, 특히 아이들에게서, 내생적인 가스 생성 용적에서의 개인적 다양성 때문에 가음성과 가양성 둘다 빈번하다. - 대상의 활동적인 참여가 필요하지 않으며, 이는 유아들에게 특별히 중요한 점이다.- 동위원소의적으로 식별된 화합물 투약이 포함되어 있지 않다.- 요구된 이당류의 합성의 단순함