일반기술

범용 연계 체계 (ULS;Universal Linkage System) 의 적용

ULS에 의해 표기된 DNA, RNA, PCR 제품들은 생체내 광학/형광 현미경 관찰에 이용될 수 있으며, 조합하거나 일정 비율로 혼합할 때에도 사용될 수 있다.단백질의 경우 백금화합물은 메티오닌의 Thiokol-ether 기나 시스테인 잔기의 non-sulphur 결합부에 부착한다. ULS에 의한 단백질의 표기는 다음의 위한 강력한 도구를 제공한다.- 표적물질 표지- 표지의 광범위성- 농도 범위, 감수성 한계ULS (Universal Linkage System)범용 연계 체계의 적용1) (F)ISH핵산의 경우 백금은 퓨린의 N7위치에 결합한다. ULS에 의해 표기된 DNA, RNA, PCR 제품들은 생체내 광학/형광 현미경 관찰에 이용될 수 있으며, 조합하거나 일정 비율로 혼합할 때에도 사용될 수 있다. 표식자에 표기를 하는데에는 제한이 없다 길거나 짧은 잔기에 모두 가능하다. 예를 들면 성상체, 중심체, 극체 표식자나 플라스미드, 코스미드 벡터, 또한 인공 식물 염색체 등에도 모두 가능하다. 이러한 기능은 유전자 증폭이나 삭제 연구에 이용될 수 있으며, 특정 DNA, RNA 서열의 위치 파악에도 이용될 수 있다. 진핵 생물에서의 병을 일으킬 수 있는 유전자를 찾아내는 데에도 blotting 기법과 마찬가지로 사용될 수 있다.2) Protein labelingULS는 또한 유용한 단백질 표지 도구이다. 단백질의 경우 백금화합물은 메티오닌의 Thiokol-ether 기나 시스테인 잔기의 non-sulphur 결합부에 부착한다. 또한 히스티딘, 라이신, 트립토판 잔기의 질소 포함 곁사슬도 백금 화합물과 결합할 수 있다. 합텐이나 플루오로크롬 변화 단백질들(면역글로블린 등)은 면역화학기법으로 연구되어왔으며, 여러 가지 실험 기법(ELISA, 유동 세포질 계측, 세포 전처리)에서도 같은 항원 결합 능력을 유지하는 것으로 밝혀졌다. ULS에 의한 단백질 표지는 다음에 강력한 도구를 제공한다.- 표적물질 표지 : 처리되지 않은 단백질 용해액에서의 알려지지 않은 단백질이나 펩타이드의 표지- 표지의 광범위성 : 다양한 염의 농도, 산도, 불순도 등의 다양한 환경에서의 표지가 가능하다.- 농도 범위, 감수성 한계 : 밀리리터당 피코그램 단위의 정량 분석이 가능하다혁신적인 사항:유전자 증폭이나 삭제 연구에 이용될 수 있으며, 특정 DNA, RNA 서열의 위치 파악에도 이용될 수 있다. 진핵 생물에서의 병을 일으킬 수 있는 유전자를 찾아내는 데에도 blotting 기법과 마찬가지로 사용될 수 있다. 합텐이나 플루오로크롬 변화 단백질들(면역글로블린 등)은 면역화학기법으로 연구되어왔으며, 여러 가지 실험 기법(ELISA, 유동 세포질 계측, 세포 전처리)에서도 같은 항원 결합 능력을 유지하는 것으로 밝혀졌다.주요 장점:방사선 표지에서의 이득:간편한 표지, 간편한 결과 확인, 가격대 성능비 우수, 간단한 실험 장비, ULS에 표지된 목표물의 신호는 증폭이 가능하다효소를 이용한 표지에서의 이득- 효소를 직접 이용하는 것보다는 감도가 높다- 훨씬 생산적이다- 단순한 화학 기법이다- 실험관 한 개에서 실험이 가능하다- 범위 조절이 가능하다- 피펫 조작이 줄어든다화학적 표지에서의 이득- 감도가 높다- 취급이 편리하다- 공유 결합에 반대되는 단백질 변성 작용 등에 이용