산업기술 통합검색
본 재조합 Streptavidin-단백질 A 키메라 단백질 (Recombinant streptavidin-protein A chimeric protein)은 항체와 생물학적 물질간의 결합을 가능케 하는 새로운 단백질이다. 본 키메라 단백질은 대장균 (Escherichia coli)에서 효율적으로 발현되며, 간단한 과정을 거쳐 정제된다. 정제된 키메라 단백질 소단위는 바이오틴 (biotin) 한 분자와 두 분자의 면역 글로불린 항체 모두와 결합될 수 있다. 따라서, 본 재조합 단백질을 항체에 특이적으로 결합시키거나 항체 표지화에 이용할 수 있으며, 반대로 항체가 결합하게 될 물질을 표지화 시킬 수도 있으며, 이러한 일련의 방법을 통해 다양한 생물학적 실험에 이용할 수 있다.고감도 검출 가능. 시그널 증폭
본 기술은 침윤성 암에서만 활성을 나타내는 효소인 Matrix metalloprotease-2 (MMP2)를 검출하는 항체들에 관한 것이다.MMP2 효소는 기저막에 존재하는 악성 콜라겐에 의한 종양세포의 증식 확산을 촉진하는 역할을 하며, 활성화된 MMP2는 양성종양에서는 발견되지 않는다. 따라서, 활성화된 MMP2효소의 검출은 종양세포의 초기 진단에 응용될 수 있다.본 항체들은 활성화된 재조합 인간 MMP2에 대해서만 특이적으로 정확하게 결합하도록 고안되었으며, ELISA와 western blotting, 조직면역세포화학 실험을 통해 확인할 수 있다. 또한 개발된 항체들 중 몇몇은 인간 이외의 다른 종과도 교차반응 할 수 있다. 상기와 같은 특성들은 암전이 신호기작 연구에서의 MMP2의 기능연구에 도움이 된다.MMP2의 기능을 억제하는 치료제 개발에 응용 가능.개발된 명몇 항체들은 기존의 항체들로는 검출할 수 없었던 설치류와 같은 종과도 교차반응 가능.콜라겐, 라미닌, 프로테오글리칸과 같은 세포외기질에서의 MMP2의 기능연구에 이용.활성화된 MMP2의 구분가능.MMP2 분자의 다양한 항원결정부위(epitope)를 인지하기 떄문에 ELISA실험에 효율적으로 이용할 수 있음.
혈전증 성인병의 원인이 되고 있는 혈액내의 혈전을 제거하는 물질이 그램음성 세균인 에어로모나스 히드로필라(Aeromonas hydrophila)KCTC 0174BP로부터 얻을 수 있었다. 본 물질은 배양중 세포외로 분비하는 단백질로서 뱅양액으로부터 물질을 회수할 수 있는 단백질로서 분자량 38kD으로 N-말단 아미노산 분석결과 신물질로 밝혀졌다. 또한, 혈전을 특이적으로 분해하는 반면 일반 단백질인 스킴밀크, 콜라겐 그리고 혈액 단백질은 분해하지 않는 특징이 있으므로 혈액순환개선제로 제공될 뿐만 아니라 순환계 성인병 예방과 치료에 효과가 있다.세균을 배양하여 혈액순환개선에 유효한 물질을 생산, 이 물질은 부작용이 없으며 경구투여용으로 개발 가능함. 저렴한 가격으로 공급가능한 특질이 있음.
세균인 바실러스 서브킬리스(Bacillus subtilis) BK-17(KTTC 0205 BP)를 배양하여 혈액순환 개선 작용에 효과가 있는 물질을 생산하였다.본 물질은 세포외로 분비하는 단백질로서 N-말단 아미노산 서열이 AQSVPYGZSQIKAP로 밝혀져 신물질로 규명되었다. 이 물질의 분자량은 31kD으로 혈전에만 작용하는 특이성을 보였다. 본 물질은 혈전증 성인병의 원인이 되고 있는 혈액내의 혈전을 분해하여 혈액순환을 원활히하여 성인병을 치료, 예방하는 데에 효과가 있다.본 물질은 혈액내에 생성되는 혈전을 분해하여 혈액순환을 원활히 함과 동시에 혈액의 단백성분과 피부성분인 콜라겐은 분해하지 않는 특이성이 강함.
송이버섯의 균사체를 배지에서 배양하여 혈전용해 효소를 축적시키고, 배양액으로부터 효소를 분리 회수하여 발효법에 의한 혈전용해 효소를 제조.인체에 유익하고 대량생산이 용이한 혈전용해효소로, 혈액 내에 생성되는 혈전을 분해하여 혈액순환을 원활히 하는 효과가 있다.
본 기술은 항암물질 카텝신 B 저해제를 생산하는 균주 스트렙토마이세스 sp. KH-1(Streptomyces sp. KH-1)와 이들이 생산하는 카텝신 B 저해제의 동정에 관한 것이다. 본 기술은 토양에서 단백질 분해효소 저해제를 생산하는 균주를 분리하여 배양한 후 배양액을 여과하는 단계, 배양여과액을 카텝신 B 용액 및 기질용액과 혼합하여 반응시킨 후 흡광도를 측정하여 상기 배양여과액의 카텝신 B 저해활성을 측정하는 단계, 국제 스트렙토마이세스 프로젝트(International streptomyces Project; ISP)에 의해 제안된 배지를 사용하여 상기 토양에서 분리한 균주의 화학분류학적 및 형태학적 특성을 조사한 후 이 균주를 스트렙토마이세스 sp.KH-1로 명명하는 단계, TAXON 프로그램을 사용하여 본 기술의 신규 균주 스트렙토마이세스 sp. KH-1를 동정하는 단계, 본 기술의 신규 균주 스트렙토마이세스 sp. KH-1가 생산하는 카텝신 B 저해제의 동정을 위해 13C-NMR 스펙트럼분석, 원소분석, UV 스펙트럼분석 및 IR스펙트럼분석을 실시하는 단계로 구성된다.- 본 기술의 신규한 스트렙토마이세스 sp.KH-1 균주의 배양 여과액은 카텝신 B의 단백질 분해활성을 뚜렷하게 저해하는 뛰어난 효과가 있음- 본 기술은 폴리하이드록시아민(polyhydroxylamine)으로 구성된 신규한 카텝신 B 저해제를 제공하는 뛰어난 효과가 있음- 생물의약산업상 매우 유용함
본 발명은 세크로핀(cecropin A, CA)과 마가이닌(magainin 2, MA)을 접합한 CA-MA 펩타이드의 아미노산 중 하나 또는 그 이상을 치환하여 + 전극과 소수성 영역이 증가된 펩타이드 및 그를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 서열번호 1로 기재되는 CA-MA 접합 펩타이드의 아미노산 중 하나 또는 그 이상을 + 전하를 띄는 아미노산과 소수성을 나타내는 아미노산으로 치환시켜 제조한 합성 펩타이드 및 그를 포함하는 항균, 항진균 및 항암용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 합성 펩타이드는 세포독성이 없고 탁월한 항균, 항진균 및 항암 활성을 나타내므로 인체에 안전한 항생제 및 항암제로 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은 세크로핀(cecropin A, CA)과 마가이닌(magainin 2, MA)을 접합한 CA-MA 펩타이드의 아미노산 중 하나 또는 그 이상을 치환하여 + 전극과 소수성 영역이 증가된 펩타이드 및 그를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 서열번호 1로 기재되는 CA-MA 접합 펩타이드의 아미노산 중 하나 또는 그 이상을 + 전하를 띄는 아미노산과 소수성을 나타내는 아미노산으로 치환시켜 제조한 합성 펩타이드 및 그를 포함하는 항균, 항진균 및 항암용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 합성 펩타이드는 세포독성이 없고 탁월한 항균, 항진균 및 항암 활성을 나타내므로 인체에 안전한 항생제 및 항암제로 유용하게 사용될 수 있다.
Bacillus thuringiensis의 결정성 단백질이 사람이나 가축의 병원체인 토리코모나즈에 대해서 강한 파괴활성(항토리코모나스 활성)을 보유하고 있는 것이 밝혀졌다. 항토리코모나스 활성을 나타내는 균주는 기존의 살충활성, 암세포 파괴활성, 용혈활성을 갖는 균주와는 다른 균주이다. 원생생물인 토리코모나스에 대해서 활성이 발견된 B. thuringiensis을 주목하고 있다. 최근 항생물질 내성의 토리코모나스가 심각한 문제를 일으키고 있지만 본 단백질을 이용한 결과 항생물질애서 토리코모나스에도 유효한 효과를 일으키는 것으로 나타났다.토리코모나스는 사람, 소, 조류(카나리아 등의 애완동물, 닭)의 토리코모나스증의 병원미생물질이다. 사람의 경우 후생성(일본의 관청)에 의해 5대 감염병으로 정해져 있다. 현재에도 감시가 계속되고 있지만. 소의 경우에는 생식기에 기생하여 유산이나 임신장애를 일으키기도 한다. 조류의 경우에도 소화기관을 감염시켜 급속한 체중감소로 폐사하게 만든다. 본 기술을 적용한 단백질은 기존의 항생물질과는 전혀 다른 작용기구를 갖고 있기 때문에 기존의 항생물질에 대한 내성을 가진 토리코모나스균에 대해서도 큰 효과를 볼 수 있는 것으로 나타났다.
인간을 포함한 여러 유기체들의 유전자들은 식별되었으나 많은 유전자 생성물들은 그렇지 않다. Proteomics 분야는 여러 샘플에 존재하는 단백질의 본질과 양을 결정하는 기술들을 이용함으로 목표에 달성한다. 기존 기술들 모두 mass 분광계 사용에 의존한데 비해, 본 연구팀은 단백질 샘플의 분류를 위한 기술을 개발했다. 비싼 시약 사용과 다른 기술에 의해 부과되는 제한을 없앴으며, 유연하고, 복잡한 혼합물에 있는 단백질/펩티드의 포괄적인 분석에 사용 가능하다. 분석을 위해서 특정 펩티드 또는 펩티드 계층에 대한 유사성-포착을 할 수 있다.- 다른 기술들에서 요구되는 비싼 시약 사용을 제거한다. - MALDI-MS 그리고 electrospray MS 와 양립 된다. - 아미노산을 기본으로 하는 유사성-포착 기술을 이용하는 방법과 양립 된다. 분석되어 질 수 있도록 펩티드 pool을 충분히 넓힌다. - MALDI 이온 분야가 증가됨에 따라 기존 방법보다 민감도가 증가한다. - 저렴하고 신속하다. - 관대한 조건 아래 단순한 one-step 분류 반응을 나타낸다.
본 발명은 B형 간염 바이러스의 유전자 중 주된 간암 유발 인자로 알려진 HBx 유전자가 발현되는 간세포의 완전한 세포사멸을 세포배 양상에서 유도시키는 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 활성 산소유도제 및 NF-k B 억제제를 처리하여 HBx 단백질을 발현하는 간세포의 완전한 세포사멸을 유도시키는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 세포사멸 유도 방법을 이용하여 HBx 단백질을 발현하는 간세포의 세포사멸을 억제하는 물질 및 유전자를 탐색하는 시스템에 관한 것이다.기존의 간염바이러스 관련 세포사멸 유도방법은 TNF- 처리 또는 serum starvation이 보고되어 있지만 완전한 세포사멸이 아닌 일부세포의 사멸만을 유도하였으며 이러한 결과도 다른 연구팀에 위해 반복 재현되지 않고 있다. 본 기술은 새로운 약제를 사용하여 간세포의 완전한 사멸을 유도하였다. 또한 B형 간염바이러스 관련 인체 간세포의 100% 세포사멸을 유도하는 방법을 세계 최초로 개발하여 간암치료제 및 간암발생 관련 유전자 검색에 사용할 수 있음.
저밀도 지질 단백질에 대해 항산화 활성을 갖는 리그난계 화합물, 그의 제조방법 및 그를 함유하는 약학적 조성물에 관한 것으로서, 리그난계 화합물, 삼백초로부터 이 화합물을 분리하여 얻는 방법 및 이 화합물을 유효성분으로 함유하는 저밀도 지질 단백질에 대한 항산화제 및 저밀도 지질 단백질의 산화와 관련된 동맥경화를 포함하는 순환계 질환의 예방제 및 치료제용 약학적 조성물에 관한 것이다.1. 식물에서 추출한 신물질2. 항산화제의 작용확인3. 동물실험에서 지방성분의 체내합성속도를 줄여줌.
본 발명은 사람 파필로마바이러스 18형 외피단백질을 구성하는, L1과 L2 유전자 동시 발현할 수 있는 플라스미드를 제조하여, 곤충세포에서 상기의 단백질을 본래의 바이러스 형태와 유사한 크기와 모양으로 생산할 수 있는 시스템을 수립하였으며, 또한 상기 플라스미드를 이용하여 발현시킨 바이러스 입자를 이용하여 제조한 마우스 유래의 항체는, 바이러스 입자를 중화시킬 수 있는 능력이 있는 것으로 관측되어, HPV 18형에 대한 예방백신 후보물질로서 이용될 수 있음.뉴캣슬병은 기침에 의해 전파되어 2 내지 3일 내에 계사 전체로 확산 되며, 거의 100%에 육박하는 폐사율을 보이기 때문에 경제적으로 피해가 심한 급성 전염병으로 다른 질병에 비해 더욱 신속한 진단 방법이 요망되어 왔다. 따라서, 본 발명은 뉴캣슬병 바이러스의 F 단백질 유전자 절편에 대응하는 프라이머를 가지고 역전사효소-중합효소 연쇄반응을 실시하는 것을 특징으로 하는, 뉴캣슬병의 진단 방법을 제공한다.
본 발명은 사람 파필로마바이러스 18형의 외피단백질인 L1과 L2 유전자를 곤충세포에서 동시에 발현시킬 수 있는 재조합 발현 플라스미드, 이 재조합 플라스미드를 함유하는 재조합 바큘로바이러스에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 재조합 바큘로바이러스를 이용하여 Sf-21 곤충세포를 형질감염시키고 이를 배양한 다음, 분리과정을 수행함을 특징으로하여 제조된 사람 파필로마바이러스 18형 유사 입자 및 이 입자에 특이적으로 반응하는 마우스 폴리클론항체에 관한 것이다.본 발명은 사람 파필로마바이러스 18형 외피단백질을 구성하는, L1과 L2 유전자 동시 발현할 수 있는 플라스미드를 제조하여, 곤충세포에서 상기의 단백질을 본래의 바이러스 형태와 유사한 크기와 모양으로 생산할 수 있는 시스템을 수립하였으며, 또한 상기 플라스미드를 이용하여 발현시킨 바이러스 입자를 이용하여 제조한 마우스 유래의 항체는, 바이러스 입자를 중화시킬 수 있는 능력이 있는 것으로 관측되어, HPV 18형에 대한 예방백신 후보물질로서 이용될 수 있음.
본 발명은 B형 간염 바이러스를 구성하는 4가지 단백질 중에 조절 단백질로서, HBV에 의한 간염이 간암으로 이행되는 기작에 직접적으로 관여하는 것으로 추정되는 X 단백질의 항원 에피토프로 작용하는 새로운 합성 펩타이드에 관한 것으로서, 본 발명의 합성 펩타이드는 세포독성T임파구 등을 유도하여 세포 면역기능을 조절할 수 있어 간염이 간경화 및 간암 등으로 이행하는 것을 억제하거나 간암을 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은 국내 B형 간염바이러스 중 가장 감염율이 높은 adr 아형의 전사활성인자 X에서 이 바이러스에 감염된 세포를 괴사시킬 수 있는 CTL을 유도할 수 있는 에피토피를 선별하고 CTL활성이 우수한 펩타이드를 선정하며, 인체 간세포의 감염인자 중 하나인 HBV바이러스의 X단백질에 대한 면역세포 활성화에의한 바이러스 감염 및 암의 면역치료제 개발의 기반을 확립하였다.
본 발명은 외래 단백질을 세포 내에서 융합 단백질 형태로 발현시키는데 유용한 맥아당 결합 단백질에 특이적으로 결합하는 단일클론항체, 이를 분비하는 생쥐 하이브리도마 세포주 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 단일클론항체는 세포 내에서 생산된 재조합 단백질을 대량으로 분리 정제하거나 단백질의 발현을 검색하는데 널리 사용될 수 있다.본 발명에서는 최초로 NBP에 대한 단일클론항체와 이를 생성하는 마우스 세포주를 제조하였다. 이 항체는 종전에 써오던 토끼에서 유래한 폴리클론 항체를 대체할 수 있으며, 단일클론으로부터 유래한 특성을 이용하여 보다 항원 특이적인 검출방법을 가능하게 한다. 나아가서, 폴리클론 항체로는 수행하지 못했거나 어려웠던 면역침전법 등과 같은 실험기술의 응용을 가능하게 한다.
본 발명은 아스퍼질러스 니가 (Aspergillus nigaer)의 배양액으로부터 최초로 분리된 항진균성 단백질에 관한 것으로, 인체에 무해하고 대량 배양이 가능한 아스퍼질러스 니가로부터 분리되어 서열 1의 아미노산 서열을 가지는 본 발명의 항진균성 단백질은 다양한 병원성 진균에 대하여 항진균 활성을 나타냄으로써 진균성 질환의 예방 및 치료제로 유용하게 사용될 수 있다.본 발명의 항진균성 단백질은 인체에 무해하다고 알려진 아스퍼질러스 니가가 생산하는 새로운 단백질로서, 서열1의 아미노산 서열을 가지는 본 발명의 항진균성 단백질은 아스퍼질러스 플라버스, 아스퍼질러스 퓨미가트스, 프사리움 옥시스포럼, 프사리움 솔라니, 사카로마이세스 세레비시아, 캔디다 알비칸스 및 트리코스포론 베이젤리에 대해 항진균 활성을 나타냄으로써, 아스퍼 질러스 퓨미카트스 및 아스퍼질러스 플라버스에 의해 유발되는 아스퍼질로시스증, 캔디다 알비칸스에 의해 유발되는 켄디다증, 트리코스포론 베이젤리에 의해 유발되는 사모증에 대한 예방 및 치료제로서 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명은 E2-25K/Hip-2 단백질을 코팅하는 mRNA의 발현을 저해하는 안티-센스 뉴클레오타이드; 이러한 안티-센스 뉴클레오타이드를 포함하는 E2-25K/Hip-2의 발현을 저해하여 알츠하이머를 예방 또는 치료하기 위한 약제학적 조성물, E2-25K/Hip-2의 기능상실 돌연변이 유전자를 포함하는 E2-25K/Hip-2의 발현을 저해하여 알츠하이머를 예방 또는 치료하기 위한 약제학적 조성물 및 이러한 약제학적 조성물을 사용하여 알츠하이머를 예방 또는 치료 방법; E2-25K/Hip-2 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 및 이러한 항체를 사용하여 E2-25K/Hip-2 단백질에 의해 유발되는 질병을 진단하는 방법; 및 E2-25K/Hip-2 발현을 저해하는 화합물을 확인하는 방법에 관한 것이다알쯔하이머의 예방을 위하여 새로운 유발인자 E-25K/Hip2를 발굴, 규명하였음. 따라서 알쯔하이머병의 예방 또는 치료를 하기위한 방법, 진단방법, 저해하는 화합물 확인하는 방법에 관한 것이 특징임.
본 발명은 산소의존형 유도성 프로모터에 의한 단백질의 제조방법에 관한 것으로, nar 프로모터의 발현은 배양초기에 1% 질산염(NaNO3) 존재하에서 대장균을 키우는 것이 최적이었으며, 몰리브데늄염의 농도에는 별 영향이 없었다. 최대의 유도율은 하룻밤 배양액을 발효기에 접종하기 전에 플라스크에서 2.5시간(OD600=1.3 될 때까지) 배양한 경우에 얻어졌다. 단위 세포당 뿐만 아니라, 단위 배지부피당 최대의 베타 유당분해효소는 대장균을 OD600=1.7까지 호기적인 조건(용존산소를 80% 이상)으로 키우다가 용존산소를 1-2%로 낮추어 유도시 킨 경우에 얻어졌다. 이상에서 얻은 최적의 조건에서 회분실험한 결과, 유도 6시간 후에 세포농도는 OD600- 3.2가 되었고, 베타 유당분해효소의 비활성도는 36,000밀러 단위였으며, 유도율은 300이었다. 이것을 SDS- PAGE한 결과 발현된 베타 유당분해효소는 전체 세포단백질의 약 35%에 해당하였다. 본 발명은 산소의존형 유도성 프로모터에 의한단백질의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명자들은 본 연구에 앞서 염색체상에 정상적인 nar 오페론을 가지고 있는 대장균내에 클로닝되어 있는 nar 프로모터가 들어있는 계(Mv1190/pXR8971)에 대한 특성을 조사한 바 있다(Biotechnology Letters, Accepted, 1995). 이 Mv1190/pXR8971계에서는 대장균내 염색체상의 nar 오페론으로부터 발현된 질산염 환원효소가 질산염을 아질산염으로 변환시키면서 발생시키는 산소에 의해 클로닝된 nar 프로모터로부터의 발현은 억제되었다. 따라서, 본 실험에서는 이 영향을 없애기 위해 염색체상에 비정상적인 nar 오페론을 가지는 대장균에 들어 있는 계에 대해 특성연구를 하였다. 이 비정상적인 nar 오페론은 질산염 환원효소를 이루는 한 소단위가 돌연변이되어 만들어진 것이다(J.Bacteriol., 151, 788-799, 1982).
- 단백질 추출 및 분리정제법 활용- In vitro 검색법을 이용한 항 알레르기 치료제 개발에 활용 · 폐조직에서 비만세포 분리법 · 세포의 매개체 유리 검색법 · 세포의 신호변환에 관여하는 여러 효소계 및 제 2전령물질인 PLA2, PLC, PLD, DAG, MT 및 단일세포내 calcium level측정- 천연물에서 chromatography를 이용한 당단백 분리 및 정제- 항 알레르기 효과 검색을 이용한 알레르기 치료제 개발- 단백질 분리기술의 확립은 다양한 단백분리에 활용- 알레르기 질환의 예방 및 치료제가 거의 없으므로 알레르기 질환 치료제 개발에 확립된 효과검색법을 적용한다면 효과적인 치료제 개발에 기여- 알레르기 비염 동물모델(in vivo)에서 항 알레르기 비염 효과를 나타내므로 앞으로 많은 연구를 통하여 독성이 없는 천연 항 알레르기 치료제 개발이 가능할 것으로 기대
돼지파보바이러스의 vp2 단백질은 유전자 재조합 백신으로 기존의 백신 생산방법과 다르게 첨단 유전자 조작기술에 의하여 중요 방어 물질만을 고도로 생산함으로써 기존의 백신생산비의 20%수준으로 안전성 및 면역원성이 우수한 백신임양돈업이 대규모함에 따라 돼지이 유사산 등 번식장애에 의한 피해가 증가하고 있는 실정임. 돼지파보바이러스는 번식장애를 일으키는 중요한 원인체임. 이를 예방하기 위해 유전공학 기법을 이용한 돼지파보백신을 개발함- 기존 1두분당 생산단가가 1000원인데 비하여 개발된 유전자 재조합백신은 200원으로 경제적이라 할수 있으며, 1두분당 5ml의 기존백신보다 적은량인 2ml를 접종하기 때문에 용이하다. 따라서 기존의 시장점유율을 90-100%까지 차지할 것으로 사료됨