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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

게놈 부정합 주사: 소형 가족 단위를 이용한 효율적인 유전 사상을 위한 방법

유전 매핑은 2개의 관련 일반 절차의 조합에 의해 마련되었다. 첫 번째 절차에서 매핑은 2개의 개체들이 베이스 부정합의 비싼 하이브리드 자유 형태로 조합할 수 있는 것으로부터 유도된 DNA 조작으로부터 유전 영역의 식별에 의해 마련되었다. DNA는 2개의 개체로부터 DNA 사이에 형성된 완전 정합 하이브리드 DNA 분자들을 허용하는 방법에 의해 융기되며 2개의 꼬임은 동일한 개별 DNA로부터 하이브리드 혹은 불완전쌍 DNA 하이브리드로부터 분리된다. 그런 후 완전 하이브리드 DNA는 라벨이 붙여지며 라벨이 붙여진 DNA는 2개의 개별 사이에서 동일 혈통의 궤적 식별을 위한 탐침으로 사용된다. 두 번째 절차에서는 새김눈들이 개개의 배수 염색체 게놈에서 이종 접합의 영역으로부터 비동일 대립 사이의 DNA 하이브리드 속으로 특수하게 형성되었음을 소개하였다.유전 매핑은 2개의 관련 일반 절차의 조합에 의해 마련

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특허법인충정
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2001-03-01
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

In vivo에서 RNA 중재적 유전자 발현

살아 있는 마우스의 간에서 ∼30% 세포의 RNA 트랜스펙션을 위한 간단한 방법으로 리포좀, 양이온성 지질 혹은 기타 복잡한 공식이나 특별한 기구를 필요로 하지 않는다, 전자 현미경의 In situ hybridization 관측에 의하면 트랜스펙션된 RNA는 엔도좀 혹은 핵에서 포획되지 않으며 세포질에서 유리된다, 이 방법은 C형 간염 바이러스(HCV) 게놈 RNA를 트랜스펙션시키고 HCV IRES와 3 HCV UTR 조절하에서의 루시페라아제 발현에 이용된다, 이 방법은 마우스에서 단백질 반감기를 측정하고 치료 단백질 사람 인자 IX의 일시적 발현에 이용된다효율적이며 간단하며 재현성이 있다, 특별한 기구가 필요 없으며 상업적으로 이용 가능한 재료를 사용, 전사 조절 염기 서열 혹은 인트론성 염기 서열에 대한 정보가 필요 없이 cDNA로부터 단백질 발현 가능, DNA 주형(예를 들면, HCV 게놈 RNA 같은 캡이 없고 폴리아데닐 결합 되지 않은 RNA)에서 Pol II 전사에 의해 생성되기 불가능한 RNA로부터 단백질 번역 가능, 혈청 존재하에서 작동하는 방법, 펄스 표지화 실험에 이상적

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특허법인충정
등록일
2001-03-01
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

효모 RNA 중합 효소 II의 결정학상 골격 모델

열 개 서브유니트로 구성된 효모 RNA 중합 효소 II의 골격 모델을 X 선 결정으로 추론하였다, 열 개의 모든 서브유니트는 상동하는 사람 단백질과 높은 동일성을 보여 주며 열 중 아홉 개의 서브유니트는 보존적이거나 혹은 모든 세 진핵 생물 RNA 중합 효소와 공통적이다, 이 모델의 주목할 특성은 활성 부위에 DNA 하부를 잡는다고 여겨지는 서브유니트 Rpb1, Rpb5, 그리고 Rpb9으로 형성된 좁은 입구를 포함한다는 것이다, Rpb1, Rpb2 그리고 Rpb6로 형성된 활성 부위 근처 DNA상 집게 형태는 RNA에 의해 닫힘 위치내에 봉쇄될 수 있으며 이는 높은 전사 안정성을 설명해 준다, 활성 부위밑 단백질 복합체내 공극은 DNA상 효소의 후퇴 이동 과정에서 중합화를 위한 기질의 유입과 전사체의 방출을 이루게 한다원자 단위에서의 상세성, 진화적 보존에 의한 넓은 응용성, 전사 조절을 위해 RNA 중합 효소 II와 상호 작용하는 무수한 유전자 조절 단백질의 동시 결정 구조 해명에 이용

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특허법인충정
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2001-03-01
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일반기술 생명과학 > 효소공학 (H73)

효소 해리를 가진 올리고 뉴클레오티드 합성을 위한 보편적인 지지체

생화학에서 올리고 뉴클레오티드 합성은 매우 중요한 과정이다, 중합 효소 연쇄 반응(PCR)의 높은 작업 처리량은 PCR 프라이머를 제공하기 위해 높은 작업량의 올리고 합성을 필요로 한다, 현재 phosphoramadite 화학은 유래된 유리 지지체 매트릭스로부터의 3-5 방향성의 합성을 가능하게 한다, 이 매트릭스는 또한 3 말단의 정확한 염기를 위해 네 염기 선택성에서 합성된 각 올리고에 사용되어져야만 한다, 이 발명은 사용될 한 보편적인 지지체를 가능하게 한다, 더욱이, 지지체 매트릭스로부터의 올리고 해리는 화학적이라기 보다 효소적으로 이루어질 수 있다, 또한, 더 이상의 화학적 세정 단계가 필요 없이 상위 생화학적 과정(예, PCR)에 적당한 완충 용액에서 올리고를 회수할 수 있게 해 준다정확한 지지체 매트릭스를 각 합성 반응으로 운반하는 번거로운 작업을 제거해 에러 줄임, 화학적 절단 단계와 후속적인 세정이 필요 없는 효소를 이용해 생화학적으로 적당한 완충 용액내로 올리고가 해리되게 함, 올리고 뉴클레오티드 합성 비용 절감

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특허법인충정
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2001-03-01
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일반기술 생명과학 > 효소공학 (H73)

PCR을 위한 연쇄된 올리고 뉴클레오티드 프라이머 합성

단일 올리고 뉴클레오티드 프라이머를 이용해 중합 효소 연쇄 반응(PCR)이 실행되게 한다, 이 프라이머는 기존 기술을 이용해 쉽게 합성될 수 있으며 PCR 실행을 위해 약간 변형된 PCR 법에도 첨가될 수 있다, 이 기술의 장점은 프라이머를 추적해 쌍들을 혼합할 필요가 없다는 것이다, 특히 정확한 DNA 증폭을 위해 추적 혼합할 필요가 있는 수만개의 프라이머가 사용되는 높은 작업 처리량 PCR에서 유용하다, 이 기술의 장기간 사용을 위해선 PCR과 직접적으로 호환되는 형태로 올리고 뉴클레오티드 합성을 실행시켜야 한다, 이런 방식으로 수많은 프라이머는 혼합이나 추적의 필요 없이 한 단계에서 PCR 산물로 전환된다PCR 반응의 복잡성을 대폭 감소, PCR 운용에서 오염과 프라이머의 잘못된 추적을 제거, PCR의 매우 높은 작업 처리량 형식 유발

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특허법인충정
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2001-03-01
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

게놈 DNA상의 직접적인 다중 유전자 타이핑

이 기술은 게놈 DNA 표본내 여러 표식체가 다중 양상으로 분석될 수 있게 한다, 다중 PCR에 의해 생겨날 수 있는 배경에 덜 영향을 받는 양상을 가진 특이적 표식체의 PCR 증폭법이다, 작용의 한 예는 SNP 유전형의 다중 동정이다, 복잡한 게놈 DNA(분석당 ∼10,000 SNP정도까지)의 다중 SNP 유전자 타이핑을 가능하게 한다, DNA 배열, 질량 분광계, 그리고 젤 전기 영동을 포함하는 수많은 감지 근거에 적용될 수 있다, SNP 유전자 타이핑 비용 잘감을 위해서 자동화 양상으로 단일 튜브에서 게놈내 수천 SNP가 분석된다단일 튜브 분석에서 ∼10,000 SNP 대립 형질의 결정 가능, 유전자 타이핑 비용의 대폭 절감, 소형 게놈 DNA 표본에서 여러 유전자형이 선별되게 함

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특허법인충정
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2001-03-01
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일반기술 생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학

막에 결합된 G 단백질 알파 서브유니트

스탠포드의 Haward Hughes 의학 연구소의 Brian Kobilka 박사와 이태원 박사는 G 단백질 신호 전달의 효과를 증진시키는 수단을 발견했다, 그들은 영구적으로 G 단백질 알파 서브유니트(Gsa)를 세포막에 결합시켰다, 융합 단백질을 경유해 결합된 G 단백질 서브유니트(tetGsa)는 앞서 이루어지는 활성화후에 막으로부터 해리되지 않는다, 따라서, 중재되는 신호를 더 효과적으로 증폭시킨다G 단백질 신호 전달 계를 증폭시킬 유일한 계

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특허법인충정
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2001-03-01
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

세포/조직/기관 특이적 mRNA 태그화

Stuart Kim과 Peter Roy 박사는 세포, 조직, 기관 특이적 mRNA의 더 효율적인 분리법을 고안하였다, 현재로선 뉴런같은 세포에서 mRNA를 분리하는데는 어려움이 따른다, 연구 대상에서 침략적으로 관심 분야 세포/조직/기관이 제거되므로 세포, 조직 그리고 기관 특이적 mRNA의 분리와 정제는 수고가 많이 들거나 불가능하다, 이런 비효율적이고 느린 mRNA 분리법의 해결책으로 세포, 조직, 기관 특이적 mRNA 추출의 새로운 방법이 개발되었다, 알려진 항원 결정기로 태그 표지 시키고 오직 의도되는 세포/조직/기관에서 생성되는 mRNA 결합 단백질을 생성하는 유전자를 삽입한다, 조직 혹은 유기체의 용해후 단백질 항원 결정기에 특이적인 항체와의 동시 면역 침강법으로 세포, 조직, 기관 특이적 mRNA를 회수한다, 이 방법의 효과는 C.elegans에서 입증되었으며 뮤린과 사람 모델에서도 효과가 제시된다동물의 구제:수많은 모델 동물의 살상과 관심 있는 세포 정제의 필요성이 없다, 모든 세포 타입에서 분리 가능:세포 타입의 정제가 어려웠던 세포, 조직, 기관 특이적 mRNA의 효과적 분리가 가능

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특허법인충정
등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

유전자 칩 분석으로 동정한 혈관 생성 유전자

Thomas Quertermous와 Jay Wohlgemuth 박사는 혈관 생성과 다혈관 발생에 관련된 유전자의 cDNA 라이브러리를 생성하였다, 이 라이브러리는 미세 배열 분석에 이용될 수 있다, 사람 배꼽 정맥 내피 세포(HUVEC)는 콜라겐과 라미닌을 포함하는 젤상에서 조직 배양된다, 다혈관 내피 생장 인자(VEGF)로 촉진시켰을 때 HUVEC는 신장, 이주, 부착 그리고 in vivo에서 모세관 망상과 유사한 관 네트워크를 초래하는 류멘 형성을 겪는다, 관 혈성 과정중인 세포로부터 RNA를 분리해 cDNA를 합성한다, 휴지상 그리고 융합성의 HUVEC로부터 분리한 cDNA는 공제/억제 PCR 클로닝에 의한 cDNA의 공제(subtraction) 라이브러리 생성에 이용된다, 이 과정은 내피 관 형성에서 촉진 그리고 억제 조절되는 유전자 염기 서열의 라이브러리를 생성한다, 위에 명시한 라이브러리에서 유래된 2200개 이상 cDNA와 수많은 positive, negative 대조구가 PCR로 증폭되고 미세 배열상에 점적된다, RNA 표본으로 추적한 배열 유전자 분석은 실제로 촉진 조절되는 유전자의 동정과 조절양의 상대적 정량을 제시한다, cDNA 분석은 스탠포드에서 이루어지지 않으나 실험 목표는 내피 세포 특이적인 조절형 유전자의 결정과 어느 유전자가 여러 생리학적 그리고 병리 생리학적 조건에서 촉진 조절되는가를 알아내는데 있다, 유전 정보의 할당과 더 상세한 기능성 게놈 연구는 구상된 단백질 아미노산 서열과의 hybridization 결과 상관성과 실리코(silico) 발현 양상에서 이루어진다, 라이브러리 라이센스는 글리세롤 보존액상으로 부여되며 미세 배열은 포함되지 않는다자료 없음

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특허법인충정
등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

핵산 분자의 재형성, 재결합, 결합 그리고 hybridization 법

스탠포드 Ron Davis 박사 연구실에서 독특한 시약 혼합물을 이용해 핵산 분자의 재형성, 재결합, 결합 그리고 hybridization의 새로운 방법을 개발하였다, 이 방법은 반응 속도 가속화와 개선된 특이성을 겸하고 있다150mMNaCl을 포함하는 표준 완충 용액에 비교해 더 높은 속도와 개선된 특이성을 지닌다

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특허법인충정
등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학

분자와 세포 분석을 위한 형광 접합체

자연에서 피코빌리 단백질은 매우 효율적인 빛 포획 단백질 형광체이다, 매우 유용한 형광 성질을 보여 주는 강한 색소이다, 450nm와 650nm 사이에서 최대로 빛을 흡수하고 560nm와 66nm에서 최대로 빛을 방출한다, 단일 클론 항체에 결합한 피코빌리 단백질은 면역학과 진단학에 사용된다, 세포나 조직상의 특이적 수용체 부위에 항체가 결합하면 세포나 조직은 빛 조사로 표지된 형광에 의해 감지된다, 두 개나 세 개의 색 표지화가 가능하다, DNA probe의 형광 표지와 분자 그리고 세포의 형광 면역 분석에도 응용 가능하다세포나 조직상의 특이적 수용체 부위에 항체가 결합하면 세포나 조직은 빛 조사로 표지된 형광에 의해 감지된다, 두 개나 세 개의 색 표지화가 가능하다, DNA probe의 형광 표지와 분자 그리고 세포의 형광 면역 분석에도 응용 가능하다

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특허법인충정
등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

단일 클론 항-유전자형 제조법

사람 B 세포 종양의 세포 표면 Ig에 대한 단일 클론 항-유전자형 항체와 항체의 접합체 표지화, 항체를 포함하는 면역 치료 구성분 그리고 항체 제조 과정, 환자 종양의 세포 표면 IgM에 대한 단일 클론 항체 항-유전자형 항체가 처리된 환자의 혹성 임프종은 완전한 경감을 나타냈다사람 B 세포 종양의 세포 표면 Ig에 대한 단일 클론 항-유전자형 항체와 항체의 접합체 표지화, 항체를 포함하는 면역 치료 구성분 그리고 항체 제조 과정, 환자 종양의 세포 표면 IgM에 대한 단일 클론 항체 항-유전자형 항체가 처리된 환자의 혹성 임프종은 완전한 경감을 나타냈다

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한국산업기술진흥원
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2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

단일 클론 항-유전자형 제조법

사람 B 세포 종양의 세포 표면 Ig에 대한 단일 클론 항-유전자형 항체와 항체의 접합체 표지화, 항체를 포함하는 면역 치료 구성분 그리고 항체 제조 과정, 환자 종양의 세포 표면 IgM에 대한 단일 클론 항체 항-유전자형 항체가 처리된 환자의 혹성 임프종은 완전한 경감을 나타냈다사람 B 세포 종양의 세포 표면 Ig에 대한 단일 클론 항-유전자형 항체와 항체의 접합체 표지화, 항체를 포함하는 면역 치료 구성분 그리고 항체 제조 과정, 환자 종양의 세포 표면 IgM에 대한 단일 클론 항체 항-유전자형 항체가 처리된 환자의 혹성 임프종은 완전한 경감을 나타냈다

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등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

진핵 생물 유전자의 증폭

987년 4월 7일 발행된 U.S. 특허 일련 번호 4,656,134는 진핵 생물 기주 세포내 흥미 있는 대상 단백질의 증진된 생성 법이다. 대상 단백질 유전자는 기주 세포 생존에 필요한 유전자인 dihydrofolate 환원 효소(DHFR)에 가깝게 삽입된다, 선별 조건에서 DHFR은 연속적 반복(탠덤) 단위로서 다중 복제되어 증폭된다, 흥미 있는 대상 단백질의 연관 유전자는 생존 유전자에 근접함으로써 증폭된다, 유전자 복제 수의 증가는 증가된 mRNA 전사체 수의 증가와 대상 단백질의 증가된 생성을 초래한다, 형질 전환된 기주 세포는 대상 단백질의 더 높은 생성을 위한 유전자 증폭을 유도하는 배지에서 생장된다진핵 생물 기주 세포내 흥미 있는 대상 단백질의 증진된 생성 법

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등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

사람 근육 세포의 분리, 생장 그리고 분화

포유류 기주 특히 사람 기주로의 도입과 근육 조직 병 치료 혹은 유전적 능력의 전달체로서 유전 결함을 보정 그리고 치료에 이용되는 용해성 단백질 생성을 위해 낮은 혈청 혹은 혈처 유리 배지에서 근아세포가 생성되었다, 조직으로 유입된 근아세포는 주입 부위에서 먼 부위로도 이동할 수 있어 효과 지역을 넓힌다조직으로 유입된 근아세포는 주입 부위에서 먼 부위로도 이동할 수 있어 효과 지역을 넓힌다

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등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학

AlhnRNP 단백질을 이용한 빠른 핵산 부착

핵산 hybridization probe의 빠른 부착을 도모한 방법이다, 10^4-배 이상으로 상보성 DNA 가닥의 재연결 속도를 증가시킨다, 일반적으로 68℃의 1M NaCl에서 행하는 반응보다 2,000 배 빠른 재연결 속도를 갖는 AlhnRNP 단백질을 사용한 스탠포드 연구자의 초기 개발과 유사하다, 반응 속도는 상보성 가닥이 용액내에서 서로 마주치는 속도에 근접하거나 같으며 재연결은 이중 가닥 DNA의 예측된 해리 온도 이상에서 가능하다, 또한 비상보성 염기 서열의 10^6-배가 과도하게 존재할 때 빨라지며 이형성 DNA와는 상대적으로 독립적이다.일반적으로 68℃의 1M NaCl에서 행하는 반응보다 2,000 배 빠른 재연결 속도를 갖는 AlhnRNP 단백질을 사용한 스탠포드 연구자의 초기 개발과 유사하다, 반응 속도는 상보성 가닥이 용액내에서 서로 마주치는 속도에 근접하거나 같으며 재연결은 이중 가닥 DNA의 예측된 해리 온도 이상에서 가능하다,

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특허법인충정
등록일
2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

시클로필린 유사 단백질을 인코딩하는 cDNA/이 cDNA에서 유래한 단백질/상응하는 게놈 클론 그리고 시클로필린 결합 막 단백질 DNA 염기 서열

시클로스포린 A(CsA)의 작용 양상 동정을 위해서 결합 단백질을 코딩하는 유전자 분리가 이용된다, 시클로스포린 C(cyp C)인 시클로필린은 CsA 치료에 대부분 영향을 받는 조직내에 존재한다시클로스포린 C(cyp C)인 시클로필린은 CsA 치료에 대부분 영향을 받는 조직내에 존재한다

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특허법인충정
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2001-03-02
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

Prader Willi 결실에서 첫 발현된 유전자로 동정한 SNRPN 유전자 동정

Prader Willi 증후군은 저혈압증, 미숙한 생식 기관, 정신 지체 그리고 조절성 없는 식욕으로 인한 비만을 보여 주는 유전적 다중 계 이상이다, SNRPN 유전자 probe는 비만에 대한 유전적 전치를 진단하는 도구가 된다Prader Willi 증후군은 저혈압증, 미숙한 생식 기관, 정신 지체 그리고 조절성 없는 식욕으로 인한 비만을 보여 주는 유전적 다중 계 이상이다,

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2001-03-03
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