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우리는 효모의 중합성 RNA를 이용하여 새로운 면역촉진제에 대한 생산 기술을 개발했다. 이미 알려진 바와 같이, 이 RNA 제품은 비 특이성 면역반응을 유발하는 자극제이다. 이 촉진제를 투여하면, 장관의 대식세포와 혈액내 호중성구의 탐식작용이 증가한다. 그리고 비장의 항체형성 세포의 수치가 2배에서 3배까지 증가한다. 또한 방사선에 노출된 동물의 생존률을 증가시키며, 비장내의 내인성 군락의 수치가 증가한다. 그리고 조혈작용을 촉진 시키고, 면역조절물질의 조절능력을 증대시킨다.이 제품의 가장 중요한 특징중의 하나는 백신의 면역유발성을 향상시킨다는 것이다. guinea pig에 BCG와 이 제품을 함께 투여하면 결핵에 대한 저항성이 크게 향상된다. 비슷한 실험 결과가 소에서도 나타났다.대규모의 임상전 실험에 의하면, 이 면역촉진제는 독성이 없으며, 다양한 동물에서 관용성을 나타낸다. 또한 돌연변이나 알러지를 유발하지도 않고, 자극성의 효과도 없다. 오늘날까지 이 촉진제와 유사한 제품은 개발되지 않았다.
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전통적인 방법으로는 매독의 조기 진단을 할 수 없었다. 중합효소 연쇄반응(PCR)의 등장으로 매독의 조기 진단이 가능하게 되었다. 우리는 또 다른 조기 진단 방법을 1997년에서 1998년 사이에 개발했는데, 이는 매독균의 항원에 결합하는 림프구(ABL-Antigen Binding Lymphocyte)를 동정하는 방법으로 매독을 조기 진단하는 것이다. 매독환자에 대한 실험과 연구의 결과, 매독에 감염된지 4-7일 후에 항원결합 림프구(ABL)가 혈액내에 나타난다는 것이 밝혀지게 되었다. 매독을 조기 진단할 수 있는 이 두가지의 방법에 대한 비교연구가 실험실과 실제 임상 과정에서 이루어져야 할 것이다.새로운 면역시약의 생산을 위한 공동연구와 기구의 구성
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임질을 효과적으로 치료하기 위해서는 정확한 조기 진단이 이루어져야 한다. 항원이 인체 내에 침입했을 때 면역 체계에 나타나는 특수한 반응은, 이 항원에 대한 수용체를 가지고 있는 림프구가 혈액내에 증가하는 것이다. 임질과 이질, 그리고 매독과 같은 감염성 질환을조기 진단하기 위해서는, 질환을 발생시키는 세균의 항원에 결합하는 림프구의 동정이 필요하다. 임질의 조기 진단에 있어서, 항원결합 림프구를 동정할 수 있는 기법에 대한 연구가 이루어져야 한다.임질균 항원에 대한 수용체를 가지고 있는 림프구의 자동화된 동정 기법의 개발, 이러한 동정과정에 필요한 면역시약의 생산
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결핵균에 대한 백신과 진단 약품을 개발하는 과정에는 멸균과정이 필요한데, 이 멸균과정을 생물학적으로 관리하는 방법이 필요하다. 우리는 지금 새로운 계열의 세균인, Bacillus stearothermophilus BKM B-1230 이라는 세균의 장점을 이용하여 관리방법을 개선하고자 한다. 현재 이용되고 있는 B.stearothermophilus BKM B-718과 비교해 볼 때, 이 세균의 스포어는 더 뛰어난 내열성을 가지고 있다. 따라서 이 새로운 세균을 멸균과정에 사용하면, 과정은 좀 더 엄밀해질 것이다. 이 세균은, 살아있는 항 결핵성 백신과 진단제제들이 다른 종류의 미생물과 항원에 오염되는 것을 막아줄 것이다.멸균과정의 생물학적 관리능력을 증가시키는 방법의 개발
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LT라는 기관에서는, 러시아의 많은 종양연구센터와 함께, 광섬유를 통하여 사람의 조직을 검사할 수 있는 장치를 개발하고 있다. 이 장치를 이용하면 유방에 생기는 종양에 대한 진단과 예후의 측정을 할 수 있다. 현재의 진단장치들은 진단효율에 있어서 많은 차이를 보이고 있다. 그러나, 몇가지의 단점들을 가지고 있다. 예를 들면, 진단을 위해 조직을 떼어내야 하는 점, 그리고 방사선의 좋지않은 영향등이다.우리의 진단장치는 다른 유사한 장치들보다 몇가지의 장점을 가지고 있다. 첫째, 진단 효율이 75%에서 95%정도가 될 정도로 아주 높다. 둘째로, 조직의 형태학적 패턴에 따라 진단을 할 수 있으며 또한 치료한 후의 예후를 측정할 수 있다는 것이다. 셋째, 환자가 화학적 영향에 대해 받는 민감성을 명백히 할 수 있다는 것이다. 마지막으로, 진단 속도가 빠르다는 것이다. 검사방법은, 섬유성의 바늘을 통해 조직안으로 레이저를 탐침하는 것을 통해 이루어진다. 이 장치는 약 50명의 유방암 환자들에게 시험되었다.유방 이외의 다른 조직에 생긴 종양의 진단, 혈액 분석, 전반적인 항상성(homeostasis) 진단
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1994년 이후에, 크세논을 마취제로 사용할 수 있는지의 가능성에 대한 연구가 전 세계를 통해 수행되었었다. 이 연구는 다음과 같은 문제의 개선을 위해 구체화되었다. 즉 마취제로 가장 많이 사용되는 nitrous oxide를 포함한 대부분의 약물이, 수술하는 동안이나 수술뒤의 기간을 통하여 많은 부작용을 나타냈기 때문이었다. 지난 수십년 동안에 크세논에 대한 연구가 많은 기관을 통해서 이루어졌다. 이 연구의 결과 크세논의 마취제로서의 장점이 속속 발견되었다. 우선, 크세논은 nitrous oxide보다 마취효과가 더 강하면서도, 낮은 활성도를 보이기 때문에 환자에게 더 안전하다는 것이다. 또한 혈액에서 잘 녹지 않기 때문에 쉽게 제거되는 특성이 있다. 또한 마취시에 가스를 공급하지 않기 때문에, 환자의 회복이 신속하다. 또한 크세논이 환자에게 미치는 아무런 부작용도 발견되지 않았다. 크세논의 이러한 뛰어난 장점들에도 불구하고 크세논은 마취제로 잘 실용화가 되지 않았다. 그 이유는 크세논의 높은 가격 때문이다.마취장치를 보유한 모든 의료기관이 크세논에 대한 잠재적인 소비자이다. 수술과정 중에 사용되는 마취제의 해로운 부작용과 사용뒤의 나쁜 효과는 감소되어야 한다. 특히 어린이나 병약한 환자의 경우에 더 그러하다. WHO에 의하면 산업화된 지역의 인구 20명중 한 사람이 수술을 경험한다고 한다. 즉, 이 약 20억의 인구중 1000만명 정도가 크세논의 잠재적인 수요자이다.
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저고압변화에 의한 산소유입 방법은 일반적인 의학적 치료 방법이다. 그러나 특수한 압력 변화실의 부족으로 인해 이 방법은 충분하게 검토되지 않았다. 이 압력실은 심혈관계의 질환에 걸린 환자의 상태를 관찰하는데 필요한 것이다.이 치료방법의 핵심은 다음과 같다. 즉, 환자를 처음에는 저압의 상태에 둔 뒤, 다음에 고압의 상태에 노출시켜 산소를 공급해 주는 것이다. 이로 인해 대부분의 질환의 원인인 저산소증을 치료할 수 있는 것이다.이 방법은 Lazurit Central Design Bureau에서 처음으로 소개한 것이다.본 연구를 통해, 심혈관계 질환에 걸린 환자의 다양한 증상을 해결할 수 있는, 저고압 변화에 의한 산소유입 방법을 개발할 수 있을 것이다. 그 결과, 새로운 의학적 치료 기법의 기술을 발전시킬 수 있을 것이다.
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많은 수의 enveloped viruse(influenza A, B등)로부터 아단위(subunit) 백신을 생산할 수 있는 기술이 개발되었다. 전통적으로, 생백신과 비활성화 백신은 살아있는 바이러스 또는 죽은 바이러스로부터 만들어진다. 이렇게 만든 백신은 높은 면역유발성을 갖기는 하지만, 많은 수의 항원이나 감염성 인자를 갖고 있다. 따라서 이를 투여하면 심각한 부작용을 유발할 수 있다.이같은 단점을 해결하기 위해 다른 방법으로 백신을 만들게 되었다. 바로 정제된 당단백으로부터 만든 아단위 백신이다. 이 백신은 안전하고 부작용이 없다. 그러나 면역유발성이 낮다는 단점이 있다. 이 백신의 면역유발성을 높이기 위하여 보조제를 사용했다. 그러나 보조제를 사용하면 면역유발성은 높아지지만 반응유발성이 높아진다는 또 다른 단점을 갖게 되었다.우리는 아단위 백신의 높은 면역유발성을 유지하면서도, 반응유발성을 낮추는 방법을 연구하게 되었다. 바로 식물성 글라이코시드(예를 들면, Glycoside Quil A)를 이용하여 정제된 바이러스 항원의 다중 결합 복합체를 이용하여 백신을 만드는 방법이다.높은 면역유발성을 갖는 influenza virus와 parainfluenza virus의 개발, 이는 효율이 높고 안전하며 낮은 반응유발성을 가져야 한다.
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비활성화된 일본산 뇌염 바이러스에 대한 백신 생산 기술이 개발되었다. 이 백신은 병아리의 태아 세포에서 배양한 것이다. 안정된 JEV의 변종(K3)이 특수한 바이러스 군락으로부터 클론화 되었다. 모체가 되는 이 바이러스 군락은, 쥐의 뇌 세포에서 만성적으로 길러졌던 JEV의 Nakayama 계열이다. K3는 병아리의 뇌 세포에서 높은 생산성을 나타내었다. 즉, 항원기의 HA-activity에 있어서 기존의 JEV 계열과 다른 차이점을 나타내었다.K3 클론은 모체가 된 Nakayama 계열보다 높은 항원성을 가지며, JEV의 다른 계열과 항원성에 있어서 연관이 있다. 또한 생물학적인 특성에 있어서 JEV의 다른 계열과 뚜렷한 차이점을 나타낸다. 이러한 특징으로 인해 K3는 JEV에 대항하는 항체의 생산에 있어서 밝은 전망을 제시한다.K3 JEV와 병아리 태아 세포를 통해 만든 JE백신의 개발(전통적인 백신보다 방어성이 강한 것)
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면역체계의 기능은, 사이토카인과 같은 체액성 인자의 도움을 받아서, 세포간 상호작용에 의해 수행된다. T-림프구는 이러한 중개물질을 생산하는 주요한 역할을 담당한다. 사이토카인에 대한 대부분의 연구는 말초기관(림프절의 세포, 비장, 그리고 혈액)에 존재하는 림프구에 집중 되었었다. 본 연구는 생물학적 활성 물질을 생산하는 원천으로서 이중음성 흉선세포에 초점을 두고 있다. 흉선은 면역계의 T-system의 통제 기관이다. 이중음성 흉선세포는 흉선세포의 특별한 subgroup이다. 이 세포의 생리면역적인 역할은 아직 알려지지 않았다. 이중음성 흉선세포에서 분비되는 사이토카인의 생산에 대해서 알려진 지식은 거의 없다.본 연구의 목적은 흉선세포에서 분비되는 사이토카인과 같은 새로운 체액성 인자의 구조와 기능을 알고자 하는데 있다. 이 연구의 결과, 직접적으로 면역계를 조절하거나 기관의 조혈 작용을 유발하는 약물을 개발할 수 있을 것이다. 그리하여 방사선에 노출된 사람이나 종양이나 유전성 질환을 가진 사람의 치료에 도움을 줄 것이다.본 연구를 통해서 분리되고 정제된 조절물질은 다양한 면역결핍성 질환(방사선 노출, 종양, 유전성 질환)을 치료할 수 있는 약물개발에 이용될 수 있을 것이다.
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Opisthorchis Felineus, Opisthorchis viverrini, clonorchis sinensis에 의해 전파되는 간 디스토마는 아시아 지역에서 빈발하는 풍토병이다. 그러나 아시아 이외의 지역에서도 이 질환의 발생은 빈번해지고 있다. 이 기생충은 담도(膽道)에 상주하면서 scarring과 epithelia metaplasia(상피세포 이형성)를 유발한다. 또한 심각한 병적상태를 유발하여 담관암종으로 이어지기도 한다. 러시아, 특히 동부지역에서 Opisthorchis Felineus에 의한 간 디스토마는 만연되어 있다.현재 Opisthorchis Felineus 에 의해 생산되는 항체의 동정에는 두 가지의 EIA 시험 시스템이 이용된다. 그러나 이러한 EIA의 사용은 단점이 있다. 이 시스템의 민감도가 너무 낮기 때문에 만성적인 형태의 간 디스토마 항체는 동정하지 못한다는 것이다.본 연구의 목적은 변형된 ELISA를 이용하여 Opisthorchis Felineus에 대한 항체를 동정하고자 하는데 있다.
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지난 수십년 동안에 포도상 구균에 의한 질환은 크게 증가되었다. 대체포 포도상 구균에 의한 질환은 치명적이지는 않다. 그럼에도 불구하고, 질환에 걸린 사람은 상당한 고통을 겪는다. 음식물을 통한 포도상 구균 감염은 대표적인 세균 중독증이다. 음식물을 통한 중독에 있어서 포도상 구균에 의한 중독증이 가장 많다. 지난 30년 동안에 포도상구균에 의한 질환은 증가되었다. 이는 포도상 구균이 항생제에 내성을 갖게 되었기 때문이다. 또한 포도상 구균의 매개체의 수가 증가되었기 때문이다.포도상구균에 의한 질환의 진단에는 미생물학적인 방법이 이용된다. 그런데, 이 방법은 시간이 많이 걸리기 때문에 효과적인 예방과 치료를 하지 못한다. 따라서 효과적이고 빠른 진단방법이 필요하게 되었다.우리는 수시간 내에 음식물 내에 존재하는 포도상구균 유래의 장독소를 탐지할 수 있는 면역효소학적 테스트 시스템을 개발했다.우리의 테스트 시스템을 이용하면, 음식물 속에 포함된 포도상구균의 장독소를 빠르고 정확히 동정할 수 있을 것이다.
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신경바이러스가 중추 신경계까지 가는 경로는 다음과 같은 세가지로 이루어진다: (1) 혈액을 통한 유입 (2) 말초 신경을 통한 유입 (3) 후각 경로를 통한 유입이 그것이다. 그런데. togavirus, herpesvirus등 여러 바이러스들이 후각 경로를 따라 중추신경계로 유입된다는 가능성에 대한 실험이 이루어졌다.우리는, 바이러스가 후각 경로를 따라 중추신경계로 유입되는 중에 비강 점막에 있는 특수한 항체에 의해서 유입이 차단된다고 가정한다. 재조합 TK (이는 우두 바이러스의 변종이며, 특수한 유전자를 유입시켜 TBE 바이러스 처럼 만든 것이다)와 비활성화된 TBE 바이러스 백신의 방어능력에 대한 비교 실험이 시행되었다. 또한 이 둘을 비강내로, 그리고 피하로 투여하여 비교하였다. 이 실험은 "Vector"에서 수행된 것이다. 데이터를 얻은 결과, 재조합 TK를 비강내로 투여했을 때 가장 강한 방어능력을 나타냈다.TBE에 대항하는 비강내 면역화를 위한 재조합 백신의 개발과 이용
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- 2000-04-24
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인플루엔자에 감염된 사람은 건강에 큰 타격을 받게 된다. 심한 호흡기성 질환등의 예견되지 않은 돌발적 상황에 처하게 되어 큰 손실을 입게 된다. 본 프로젝트의 목표는, 이와 같은 질환을 야기시키는 인플루엔자 바이러스의 진화적 변화에 대한 문제를 이해하고자 하는데 있다. 중국은 인플루엔자 바이러스의 변종(變種)이 많이 양산되는 지역이다. 중국으로부터 양산된 인플루엔자 바이러스는 중앙 아시아 지역과 이전의 USSR지역으로 퍼져 나간다. 따라서 중국은 이 바이러스의 근원지이다. 카자흐스탄은 중국과 접해 있기 때문에, 카자흐스탄에서 이 바이러스는 특별한 의미를 갖는다.본 연구의 목적은 A형과 B형 인플루엔자 바이러스의 항원적 변화성의 방향과 정도를 밝히고자 하는데 있다인플루엔자 바이러스의 원종(原種)을 이용하여 인플루엔자에 의한 풍토병의 병인과정을 이해할 수 있다. 이에는 분자 생물학적 방법이 동원된다. 새로운 융합성 시약(amidol, methol)과 안정화 시약(bile, Thirton X-100)을 이용하여 orthovirus와 paravirus, 그리고 arbovirus에 의한 감염을 진단할 수 있는 동결건조 적혈구 테스트 시스템을 개발할 수 있다.
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- 2000-04-24
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본 프로젝트의 목적은 Orthomyxoviridae 계열에 속하는 RNA 바이러스를 연구하고자 하는데 있다. 이 계열의 바이러스들은 게놈의 변이성이 크다. 그리고 강한 전염성을 띄고 있다. 이 계열의 바이러스를 동물이나 사람에게서 분리하여 그들을 분자 전염병학적으로 연구할 것이다. 또한 우리는 분자 전염병학적인 방법으로 Orthomyxoviridae 계열에 속하는 변종의 바이러스에 대해서도 연구할 것이다. 이 변종들이 어느 속(屬)에 속하는지는 알려지지 않았다. 우리의 연구 결과 다음과 같은 일들이 가능해 질 것이다. 첫째, 바이러스 군락 사이에서 유전적 물질이 이동하는 경향을 관찰할 수 있을 것이다. 둘째, 바이러스 유전자의 변이성을 분석할 수 있을 것이다. 마지막으로, 자연적으로 재조합된 바이러스(이들은 항원성과 생물학적 특성이 변화된 것이다)의 등장여부를 밝힐 수 있을 것이다.연구의 결과 우리는 인플루엔자 바이러스의 다양한 변종들을 진단할 수 있는 고성능의 테스트 시스템을 개발할 수 있을 것이다. 그리고 변이된 바이러스에 대한 예방약품을 생산할 수 있게 될 것이다.
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러시아의 다양한 지역에 사는 건강한 사람으로부터 분리한 혈청내의 C형 간염 바이러스(HCV)마커의 빈도가 결정되었다. 러시아 사람들중 2.4%에서 2.7%가 HCV에 반응하는 항체를 가지고 있었다. 반면에, 몽골리안 사람들은 10.7%까지 육박했다. 유전자형을 밝히는 작업은 HCV RNA를 이용한 PCR방법에 의해 수행되었다. 이 작업에 사용된 샘플은 HCV에 양성을 나타내는 86개였다. 이 샘플은 다양한 임상적 형태를 띄는 C형 간염 환자로부터 제공된 것이었다. HCV의 유전자 핵심 지역에 있는 type-specific primers가 이용되었다. 이러한 연구의 결과 밝혀진 HCV의 유전자형의 종류와 빈도는 다음과 같다. 1a가 5.3%, 1b가 76.7%, 2a가 9.3%, 3a가 8.19%, 1b+3이 1.6%를 차지하는 것으로 나타났다. 이 외에도 약 5.3%의 유전자 변이형이 발견되었다. 1b 유전자 형이 일반적으로 우성을 나타내었다. 1b 유전자 형은 러시아의 Far-East 지역에서는 80 - 83%까지 육박했다.연구의 결과 우리는 장관외 간염 바이러스의 다양한 변종들을 진단할 수 있는 고성능의 테스트 시스템을 개발할 수 있을 것이다. 그리고 변이된 바이러스에 대한 예방약품을 생산할 수 있게 될 것이다.
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오늘날 많은 수의 혈청학적인 방법으로 Rubella Virus에 의한 감염을 진단할 수 있다. 그러나 임신후 22주가 지나기 전에 탐지된, Rubella Virus에 의해 생긴 immunoglobulin M은 신뢰할 수 없다. 즉, Rubella Virus에 의한 감염은 조기진단이 어렵다는 것이다. 이러한 문제를 해결하기 위하여, 우리는 Rubella Virus의 비구조적 단백질중 가장 면역우성을 띠는 에피토프를 개발했다. 이러한 면역우성 에피토프 중에서 Rubella Virus의 비구조적 단백질중 항원적으로 활성을 띤 지역이 선별되었다. 이 지역은 가장 진단률이 높은 곳이다. 선별된 지역은 세균의 벡터에서 표현되어 단일 클론성 항체를 만들어낼 것이다. 이 단일 클론성 항체를 검사에 이용하면, Rubella Virus에 감염되었을 경우, 이 항체가 Rubella Virus와 결합하게 되어 감염을 조기진단 할 수 있게 되는 것이다.임신 여성이 Rubella Virus에 감염되었을 경우, 이를 조기진단 할 수 있는 방법의 개발
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HHV-6와 HHV-7은 새롭게 발견된 림프 친화성의 바이러스이다. 이 바이러스들은 Herpesviridae계열에 속한다. HHV-6는 바이러스성 질환의 보조인자로서 종양 유발성 특징를 갖으며, 다발성 경화증을 유발하기도 한다. HHV-7은 chronic fatigue syndrome의 잠재적인 원인이 된다. 본 연구의 목적은, HHV-6와 HHV-7의 분리와 그의 특징규명에 있다. 연구 대상이 되는 사람들은 건강한 성인과 어린이, 그리고 다양한 질환을 가진 환자까지 다양하다.우리는 또한 신경계의 이상이 있는 환자와 암환자로부터 혈액과 타액을 채취하여 검사할 것이다. 항체 탐지를 위해서 IFA와 ELISA가 사용될 것이며, HHV-6와 HHV-7에 대한 항원의 동정을 위해서 다양한 방법을 사용할 것이다. 또한 바이러스에 의한 감염은 PCR에 의해서 탐지될 수도 있을 것이다. 그리고 우리는 HHV-6와 HHV-7의 게놈들을 분자 생물적인 방법을 통해서 비교 연구할 것이다.
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HIV를 포함한, 광범위한 바이러스 감염시에, 이중 나선 RNA 단백질 카이네이즈(PKR)가 세포 반응을 매개하는 것으로 알려졌다. PKR은 이중 나선 RNA구조를 띄고 있기 때문에 활성화된다. HIV의 mRNA를 구성하는 TAR가 PKR을 활성화 시키는 것으로 알려졌다. 반면에 HIV의 TAT단백질은 PKR의 활성화를 차단하는 것으로 알려졌다. 우리는 PKR의 dsRNA 결합 지역에 해당하는 단백질과 PKR의 TAT 결합지역에 해당하는 단백질을 인위적으로 합성하려고 한다. 그리고 이들 합성 단백질들이 PKR-TAR RNA복합체와 PKR-TAT 복합체를 파괴하는 능력을 측정하려고 한다. 우리가 연구한 자료에 따르면, 쥐의 세포에 있는 PKR의 54-74번째까지 해당하는 합성 단백질이 TAR RNA에 의한 PKR의 활성화를 저해했다. 이 합성 단백질은 TAR RNA와 결합함으로써 PKR-TAR RNA 복합체를 파괴한다는 사실이 Gel-shift 분석에 의해 입증되었다.
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수년간의 연구 결과, 현재 우리는 300종이 넘는 미생물들을 광범위하게 수집했다. 이들은 자연에서 분리된 것이다. 또한 이들은 사람과 동물에 매우 위험한 질병을 매개하는 흡혈 디프테리아의 유충에 독성을 나타낸다. 우리가 수집한 이 종들은 외국산들보다 몇배의 강한 독성을 갖고 있다. 이러한 사실은 수년간의 실험결과 입증되었다. 우리가 수집한 미생물종들은 흡혈 디프테리아에만 독성을 나타낸다. 그러나, 사람이나 동물들에게는 해를 끼치지 않고 또한 자연에도 악영향을 끼치지 않는다. 만약 경제적인 지원이 있다면, 기존의 것들보다 수배나 효과가 좋은 생물학적 약품을 제조할 수 있을 것이다.
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