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일반기술 생명과학 > 미생물자원

해충제어용 활성미생물 탐색기술개발(II)

전국의 자연계로부터 지속적으로 BT 균주를 분리하여 총 3000여 균주를 확보하였으며 이들 중 2,000여 균주에 대하여 crystal morphology , 독소 단백질의 SDS - PAGE , bioassay , biochemical 특성조사 등을 완료하였고, DNA dot blot hybridization 및 PCR 을 통하여 가장 효과적으로 신규성이 있는 균주를 선별하는 방법을 확립하였다. 이런 방법으로 분리균주 BF190으로 부터 새로운 2개의 독소유전자를 발견하였으며 두종류 모두 cloning 하여 염기서열을 결정하였는데 둘다 기존의 다른 독소 유전자와 상동성을 가지지 않았다. 또한 분리주 BP465에서도 cryV-type 의 독소유전자를 발견하여 염기서열을 결정한 결과 새로운 독소유전자임이 밝혀졌다. 딱정벌레류에 독성을 보이는 Bt subsp. tenebrioruis(BTT)형태의 균주를 국내 최초로 분리하였으며 독소 단백질을 SDS -PAGE 로 분석한 결과 기존의 BTT 균주보다 더 많은 양의 독소단백질을 합성하는 균주를 발견할 수 있었다. 이러한 독소단백질 과다생산 균주는 기존의 BTT 균주보다 좀더 우수한 살충성을 보일 것으로 기대되며 기존의 BTT 제제와 경쟁력이 있을 것으로 기대된다. 한편 파밤나방에 대해서 가장 강한 활성을 보이는 cryIC유전자를 Bt subsp. entomocidus HD198 균주에서 cloning 한 후 이 유전자를 이용 재조합 plasmid 를 만들어서 BT 4D11 균주에서 발현시키는데 성공하였다. 이 재조합 균주는 파밤나방이 집중적으로 발생하는 시기에 작물의 보호에 유용하게 사용될 수 있을 것으로 전망된다.

보유기관
한국생산기술연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

미세조류 형질 전환법에 의한 유용 물질의 생산

자연계에 존재하는 미세 조류를 유용 유전자로 형질전환 시키고 이들을 대량 배양하여 미세조류로부터 유용한 물질을 경제적인 비용으로 대량 생산하는 기술을 개발하는 것이다. 본 발명에서는 미세조류의 원형질체를 생성하여 외래 유전자를 대량 발현시키고 이를 이용한 제품을 만드는 것이다. 본 발명은 어류의 성장호르몬 유전자를 이용하여 미세조류를 형질전환 시킨 후 대량 배양하여 어류의 성장을 촉진하는 기능성 사료를 개발하는데 있었으며 이 기술을 이용하여 성장 호르몬 유전자를 다른 유용 유전자로 대체하여 원하는 기능성 단백질을 대량 생산하는 진핵세포 발현 시스템을 개발할 수 있다. 예를 들면 어류의 성장 호르몬 유전자를 interferon과 같은 면역관련 유전자로 대체할 경우 어류의 면역기능을 증가시키는 특수 사료를 제조할 수 있을 것이다. 현재 본 연구진에 의하여 어류로부터 여러 유용 유전자가 분리되어 있기 때문에 여러 가지의 특수 기능을 가진 유용 단백질의 대량 생산이 가능할 것이다. 이러한 적용 범위는 어류에 국한된 것이 아니어서 유전자가 확보될 경우 의학적, 산업적으로 가치있는 단백질을 형질전환된 미세조류로부터 생산할 수 있을 것이며 따라서 본 발명의 적용 범위와 효과는 무한하다고 볼 수 있다.미세조류는 단세포로 된 진핵 생물로 동물이나 식물이 만드는 단백질과 가장 가까운 기능과 활성을 지닌 단백질을 만들 수 있다. 또한 미세조류는 간단한 시설과 저렴한 비용으로 대량 생산할 수 있으며 이들로부터 발현된 단백질을 분리 정제하는 방법도 간단하여 이들 물질의 생산비를 크게 감소시킬 수 있어 경제성이 탁월하다.

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한국생산기술연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

버섯류의 발효에 의한 미백식품의 개발

식품을 통하여 기미나 노인성 검버섯을 치유할 수 있는 목적기초연구를 수행하였다. 이들 증상을 일으키는 물질인melanin의 생합성에는 인체내에서 tyrosinase라는 한가지 효소만이 관여하므로 이 효소의 저해제를 탐색하였다.식품미생물로부터 저해제 생산능이 높은 fungus를 선정하였으며 저해제 생산을 위한 배지는 표고버섯과 glucose 두 가지만으로도 충분하였다. 식용식물체 129종 및 식품 성분 15종의 tyrosinase 활성 저해능을 탐색한 결과 홍고추, 무, 표고버섯, 4-hexylresorcinol, L-cystein, glutathione, kojic acid 등이 80% 이상의 높은 저해능을 보였다.생체 내에서 저해제의 효과가 발휘되는지를 알아보기 위하여 저해제를 cysteine 등이 함유된 식품첨가물 처리구, 표고버섯을 Aspeptomyces bikiniensis와 검은툭눈붕어를 이용하여 효능을 평가한 결과 식품 첨가물 처리구와 버섯 발효액 처리구 붕어는 검은색이 퇴색하여 대조구보다 명도와 yellowness가 유의성이 있게 높은 것으로 나타나 melanin 생성 억제 효과가 뚜렷하였다. 이 결과를 바탕으로 tyrosinase 저해제가 함유된 음료 1종을 개발하였다.

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한국생산기술연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

섬유가공용 효소 생산을 위한 Bacillus 균주의 분자육종과 공업적 응용외

섬유가공용 내열성 -amylase 고생산성 B. licheniformis 변이주를 개발하여 발효조건을 검토한 결과 현재 생산량이 산업적 수준의 20%에 해당하며, 이로부터 내열성 -amylase 유전자를 크로닝하고 염기배열 분석 및 염색체상의 변이지점을 확인함. 내열성 -amylase 고생산성 변이주와 효소유전자 발현 기작 분석을 위한 -amylase 결손변이 주 B. subtilis를 개발 완료하고 구조유전자 발현용 promoters를 탐색하여 tandem promoter로 개발중임. 핵산계 대사물질의 고생산성 변이주를 다수 확보하고 변이주의 발효조건을 검토하였으며 핵산계 대사물질 생합성에 관여하는 핵심 효소 유전자 (guaA, guaB, purF)를 크로닝하여 분석하였음. Aspergillus의 alkaline protease 유전자 절편 크로닝을 완료하고 염기서열을 결정중임. 발효용 종균으로부터 Aspergillus oryzae, A. sojae 분리하고 숙주균으로 사용가능한 영양요구성 OTC변이주 개발하였으며 promoters와 terminator를 도입하여 염색체 삽입발현벡터를 제조함. 글루타치온 생합성에 관련된 glutamylcyst -eine synthetase 변이 유전자 제조와 특성 분석함. 재조합 대장균의 배양조건을 검토하여 plasmid 안정성 향상을 위한 연구를 진행중이며 고정화 혼합균주를 개발중임. 인간 유래의 lactoferrin 구조유전자를 3 단편으로 나누어 확보하였고 -galactosidase 유전자를 크로닝함. 인간의 분변으로 부터 두 종류 장내세균을 분리하고 lactate 내성변이주로 개발하고 장내분리균과 변이주 발효에 미치는 탄소원과 발효산물의 영향을 규명함 .

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한국생산기술연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

브라케스트리아 트리스포라 배양으로 부터 베타-카로텐의 생산방법

.곰팡이의 일종인 브라케스리아 트리스포라배양시 PH를 알카리조건으로 하고, 소르비탄 지방산염 계열의 계면활성제를 첨가함으로서, 제조된 베타-카로틴을 조성물을 영양보강제, 식품착색제, 항산화제, 사료첨가제, 화장품소재, 면역기능 부활작용, 항종양제로 사용

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한국생명공학연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

형질전환된 대장균 SS373(KCTC 8818P)과 이를 이용한 숙신산의 생산방법

본 발명은 형질전환된 대장균(Escherichia coli) ＳＳ373과 이를 이용한 숙신산의 생산방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 유전공학기술을 이용하여 대사경로를 조작함으로써 초산 및 젖산 생성경로를 유전적으로 결손시킨 신균주 대장균 SS373과 이 균주를 호기적조건에서 1차 생장시킨 후, 숙신산 생산단계에서는 2차적으로 배양조건을 혐기적 조건으로 전환시켜 배양함으로써, 보다 효율적으로 그리고 보다 높은 수율로 숙신산을 생산하는 발효방법에 관한 것이다.

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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세포막결합 그루코네이트 탈수소효소 및 그 유전자와 형질전환된 재조합 대장균을 이용한 2-케토-D-글루코네이트로의 생산

본 발명은 어위니아 시프리페디(Erwinia Cypripedii)로 부터 글루코네이트를 2-케토-디-글루코네이트로 전환하는 세포막결합 글루코네이트 탈수소효소(gluconate dehydrogenase), 글루코네이트탈수소 유전자 및 염기서열과 이 유전자를 함유하는 형질전환된 재조합 대장균을 이용하여 글루코네이트의 2-케토-디-글루코네이트로의 전환하는 방법을 제공한다.

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

아스로박터 유레아휘션스로부터 분리된 레반 프룩토트랜스퍼라제 및 이를 이용하여 레반으로부터 디프룩토스 디언하이드라이드 4를 생산하는 방법

아스로박터 유레아휘션스의 레반 프룩토트랜스퍼라제 유전자의 클로닝 및 이를 대장균에서 대량생산하여 레반으로 부터 디프룩토스 디언하이드라이드 4를 생산하는 방법

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

효모로 부터 단백질을 분리시키기 위한 시그날 서열

.효모세포에서 발현된 목적단백질을 세포외 배지로 완전히 분비시키는 클루이베로마이세스 마르사은스로 부터 유래된 이누리나제 분비 시그날 서열, 코딩 뉴클레오티드, 발현벡터, 재조합효모세포, 단백질 생산방법

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2000-04-07
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아르기닌을 이용한 인체 부갑상선 호르몬의 효율적인 생산방법

.효모로 부터 인체 부갑상선 호르몬(Human parathyroid gland hormone:hPTH)을 효율적으로 생산하는 방법으로, 인체 부갑상선 호르몬을 발현할 수 있도록 형질전환된 효모세포주를 아르기닌이 첨가된 배지에서 배양하면서, 고수율로 획득하는 방법

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

YAP3 유전자 결손된 효모균주 및 그를 이용한 재조합 인체 부갑상선호르몬의 생산

본 발명은 효모로부터 인체 부갑상선 호르몬(human parathyroid hormone: hPTH)을 효율적으로 생산하는 방법에 관한 것으로 단백질 분해 효소인 효모 아스파틱 프로테아제 3 (Yeast Aspartic Protease 3: YAP3) 결손 균주를 제작하여 인체 부갑상선 호르몬의 분해를 최소화하므로써 완전한 형태의 인체 부갑상선 호르몬을 생산하는 방법을 제공한다.

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한국생명공학연구원
등록일
2000-04-07
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

유해 미생물 억제 활성을 갖는 신규 내산성 락토바실러스 속 미생물 및 이를 함유하는 가축용 생균활성제

.국내 암퇘지 분변으로부터 혐기적으로 분리된 락토바실러스 레우테리는 내산성, 내담증성을 가지면서, 항생제에 대하여 내성을 나타내고, 병원성 세균과 같은 유해 미생물의 생장을 억제하는 신규의 유산균으로 가축용 생균활성제로 이용, 균주, 생균활성촉진제, 생균활성제

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한국생명공학연구원
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2000-04-07
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