산업기술 통합검색
- 단백질 추출 및 분리정제법 활용- In vitro 검색법을 이용한 항 알레르기 치료제 개발에 활용 · 폐조직에서 비만세포 분리법 · 세포의 매개체 유리 검색법 · 세포의 신호변환에 관여하는 여러 효소계 및 제 2전령물질인 PLA2, PLC, PLD, DAG, MT 및 단일세포내 calcium level측정- 천연물에서 chromatography를 이용한 당단백 분리 및 정제- 항 알레르기 효과 검색을 이용한 알레르기 치료제 개발- 단백질 분리기술의 확립은 다양한 단백분리에 활용- 알레르기 질환의 예방 및 치료제가 거의 없으므로 알레르기 질환 치료제 개발에 확립된 효과검색법을 적용한다면 효과적인 치료제 개발에 기여- 알레르기 비염 동물모델(in vivo)에서 항 알레르기 비염 효과를 나타내므로 앞으로 많은 연구를 통하여 독성이 없는 천연 항 알레르기 치료제 개발이 가능할 것으로 기대
- 대장균 O157:H7에 의한 감염증은 전세계적으로 문제가 되고있는 심각한 질병임- 우리나라에서 식품중 대장균 O157:H7의 검사는 필수적으로 요구되고 있음- 수입산 육류의 검역시 본 항목의 검사가 요구됨- 병원에서의 의심환자에 대하여 본 검사를 수행하고 있음- 대장균 O157:H7의 식품중 분리는 까다롭고 많은 시간을 요구하기 때문에 본 단클론항체를 이용한 진단킷트는 다량의 시료를 짧은 시간에 검색할 수 있는 장점을 가짐- 외국에서 수입되어 사용되는 진단 킷트는 가격이 시료당 만원이상으로 매우 비싼 단점이 있음- 기존의 보고된 단클론 항체에 비하여 민감성 및 특이성이 뛰어남- 외국제품과 비교하여 동일한 수준의 검출능력을 가지며, 가격은 훨씬 저렴함- 개발한 대장균 O157:H7 검출용 단클론항체는 현재 전 세계적으로 문제가 되고있는 대장균 O157를 식품중에서 검출할 수 있는 진단킷트에 이용됨. 즉 면역학적인 방법을 이용한 대장균 O157의 검출용 지단킷트에 이용되며, 본 단클론항체는 시험결과 민감성 및 특이성이 매우 우수하므로 진단킷트의 상품화시 매우 유용하리라 판단됨
- 식육중 병원성대장균 O157:H7 신속검출- 대장균 O157:H7의 병원성 유무 확인- 신속 및 민감성 높은 검출기법으로 활용- 식중독원인 규명에 활용- 특이성이 매우 높은 검출법(대장균 O157:H7를 정확히 검출)- 민감성이 매우 높음(10개미만균을 검출가능)- 병원인자(베로톡신 2종, 장벽부착병원인자) 동시 검출가능- 세계적으로 대장균 O157 에 의한 식중독 발생이 최근 문제시되고 있으며, 국내에서도 발생되고 있어 쇠고기 등의 식품중 대장균 O157 검사 뿐만아니라 식중독의 원인규명에도 활용될 수 있으므로 산업체에 이용가능성이 높고, 그 수요가 매우 클것으로 예상됨
돼지에서 설사증을 일으키는 병원성 대장균이 산생하는 독소인 이열성, 내열성독소의 유전자를 동시검출하는 멀티플렉스 PCR 기법의 개발돼지에서 설사를 일으키는 병원성 대장균은 설사의 직접적인 원이이되는 장내독소인 이열성, 내역성 혹은 두가지 모두의 독소를 산생한다. 그러므로 대장균증의 진단을 위해서는 분리한 대장균에서 이러한 독소의 확인이 필요하다. 이러한 독소는 조직배양, 동물시험들의 번잡한 과정이 요구됨. 본 PCR 기법은 분리한 대장균중 독소의 존재를 한번의 PCR 반응으로 확인하므로서 신속하게 대장균증을 진단 할 수 있음- 동물의 질병을 진단하는 병성감정기관, 일반대학, 각도의 연구소에서 이용이 가능
- Insulin에 의한 전사 증가는 AT2R 프로모터 부위 upstream -850nt 부터 -950nt 부위의 cis-element에 의하여 매개되었으며 여기에 결합하는 trans-element에는 c-fos가 관여함을 밝힘- ACE polymorphsim에 따른 활성도는 DD>DI>II 순이었음- 혈청이 존재하지 않는 배양조건에서 산화질소는 혈관평활근세포의 세포고사를 유도함. '생존인자'인 혈청이 존재하는 경우, 산화질소는 세포고사를 유발하지 못함- 동맥경화 위험도 진단- 신약개발
개발한 난황항체는 돼지 대장균 설사증의 원인체인 병원성 대장균의 병원성 인자인 세가지 섬모항원과 이영성 장독소를 이용하여 시험백신을 제조한후에 이 백신을 산란계에 접종하여 고도로 면역을 시킨후 이후 산란계가 생산하는 달걀을 이용하여 달걀중 난황내에 포함된 특이항체를 추축하여 이를 대장균 설사증의 예방 및 치료목적으로의 이용대장균 설사증은 발생율이 높으며, 그 피해또한 크다. 이러한 설사증의 예방을 위해서는 병원성대장균의 병원성 인자의 섬모항원과 이열성독소를 분만전 모돈에게 접종하여 태어난 새끼돼지에게 초유를 통하여 항체를 전달하는 방법이 일반적이다. 하지만 여러가지 요인으로 새끼돼지의 설사가 발생하며, 발생한 새끼돼지의 치료를 위해서는 항생제 처치가 일반적이다. 하지만 항생제의 오남용으로 인한 내성균 출현의 문제드 문제점이 많다. 그래서 본 발명품은 달걀에서 난황항체를 제조하여 이를 대장균 설사증의 예방 및 치료목적으로 이용하려는 것이다.- 대장균 설사증은 발생율이 높고 피해 또한 큼. 개발한 난황항제는 생산이 간편하며, 산란계에 수회의 접종으로 지속적으로 고역가의 달걀을 얻을 수 있는 장점을 가짐. 또한 실험결과 예방 및 치료효과가 거의 90%이상임을 보여서 항생제를 대체하여 안전하게 사용할 수 있으며, 달걀 1개로 약 20두의 돼지에게 투여할 용량을 생산할 수 있어서 산업화의 전망이 매우 밝음
자돈 설사병의 대표적인 원인체인 병원성 대장균과 돼지 유행성 설사 바이러스의 단독 또는 복합 감염증을 동시에 신속하고 효울적으로 치료 및 예방할 수 있는 수동면역 요법 제제복합면역제제는 병원성 대장균의 3종섬모항원과 돼지 유행성 설사 바이러스를 포함한 시험백신을 산란계에 접종한 훙 면역화 된 닭의 달걀의 난황으로부터 특이항체를 추출하여 제제화 함- 본 발명에 따른 면역제제에 의하면 면역효율이 낮은 장관면역계의 예방능과 치료제가 없는 바이러스성 설사병의 치료도 가능하여 양돈산업의 생산성 향상과 돈육의 수출증대등에 획기적으로 기영할 수 있을것으로 기대됨
- 국내분리 돼지전염성위장염바이러스(TGEV) 스파이크 유전자 염기서열 분석- 바큘로바이러스 발현계를 이용한 TGEV 스파이크 단백질 발현- 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 이용한 TGEV에 대한 항체검사법 확립- 국내분리 TGEV 스파이크 유전자 염기서열분석 자료 제공- 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 이용한 진단법 확립- 재조합 TGEV 스파이크 단백질의 TGEV예방약 개발에 제공- 3시간 이내의 TGEV에 대한 중화항체 검사KIT 개발 가능
돼지 유행성 설사 바이러스의 분리는 유행성 설사로 폐사한 6일령 자돈의 소장 및 장 내용물을 이용함. 즉, 장 조직 및 장 내용물을 인산염 완충액 식염수로서 10배로 의석한 다음, 25rpm으로 10분간 원심침전시킨 상등액을 채취하여 단계별로 희석후, 증식된 베로세포에 접종, 접종후 4-5일간 세포를 관찰하면서 세포 변성 효과를 나타낸 희석단계의 세포를 선정하여 3회 동결용해시킴. 그 상층액을 이용하여 베로세포에 동일 방법으로 재접종함. 그리고 접종 군에 대해 동일한 세포 변성 효과를 나타낸 세포군을 클로닝함. 한편, 베로 세포를 세포배양병에서 회전 배양시킨 뒤 세척한 다음, 바이러스를 접종함. 병원성을 감소를 위해 연속계대임신모돈에 분만전에 2회 접종함으러써 모돈의 면역을 형성시켜 분만후 모체이행항체를 자돈에 공급함으로써 자돈의 돼지유행성설사 감염증을 사전에 예방할 수 있음- 돼지 유행서 설사병 바이러스 국내분리주의 세포내에서 연속계대하여 약독화시킨 바이러스주를 이용하여 돼지 유행성 설사병의 진단제 및 예방약을 제조
80년대 후반에서 90년대 초에 이르러 몇몇 연구자들에 의해 조류 중 쉽게 접할 수 있으며 고도로 항체를 생성할 수 있는 산란계가 낳은 달걀을 이용한 난황항체에 대한 연구가 질병의 진단목적뿐만 아니라 치료 및 예방을 목적으로 이용하고자 산란계에 돼지 유행성설사병 바이러스를 접종하여 생산된 달걀의 난황으로부터 추출된 항체를 제제화하여 돼지에 경구투여하는 경우 돼지의 위점막, 소장에의 PEDV의 부착 및 감염이 억제되는 것을 발견하고 이를 이용한 돼지 유행성설사병의 예방약 및 간이진단 킷트를 생산하는 기술을 확립함본 면역제제는 역가의 균질화를 통하여 경구투여방식으로 적용할 수 있으며 발생농장의 피해를 감소시킴으로서 질병발생의 초기에 피해를 최소화할 수 있음
본 기술은 기존의 코로나바이러스 정제방식이 2-3일이 소요되는데에 비하여 소요시간이 4-5시간으로 매우 신속하며 고농도의 항원을 간단하게 분리, 농축할 수 있으므로 면역제의 생산이나 진단시약 및 진단킷트 생산의 표준화에 고정적으로 적용할 수 있음. 특히 기존의 정제에 요구되는 초원심분리기와 같은 고가장비를 사용하지 않으므로 경제성, 생산성 향상 및 소요 노동력의 단순화로 인한 원가절감효과 및 경쟁력의 확보가능주요 돼지 전염성 질병의 원인체로 돼지 코로나바이러스군인 유행성 설사병 바이러스, 전염성 위장염 바이러스 및 호흡기 코로나바이러스를 신속하고, 간편하게 고역가로 정제하는 방법- 면역제제 작성- ELISA법, Dip-stick법, dot blot법 등에 적용되어 바이러스의 진단에 이용- 고효능의 예방약 생산 및 야외에서 손쉽게 적용할 수 있는 진단키트의 생산
돼지파보바이러스의 vp2 단백질은 유전자 재조합 백신으로 기존의 백신 생산방법과 다르게 첨단 유전자 조작기술에 의하여 중요 방어 물질만을 고도로 생산함으로써 기존의 백신생산비의 20%수준으로 안전성 및 면역원성이 우수한 백신임양돈업이 대규모함에 따라 돼지이 유사산 등 번식장애에 의한 피해가 증가하고 있는 실정임. 돼지파보바이러스는 번식장애를 일으키는 중요한 원인체임. 이를 예방하기 위해 유전공학 기법을 이용한 돼지파보백신을 개발함- 기존 1두분당 생산단가가 1000원인데 비하여 개발된 유전자 재조합백신은 200원으로 경제적이라 할수 있으며, 1두분당 5ml의 기존백신보다 적은량인 2ml를 접종하기 때문에 용이하다. 따라서 기존의 시장점유율을 90-100%까지 차지할 것으로 사료됨
돼지 신장세포를 우태아 혈청이 첨가된 알파-MEM 배지에 접종하여 세포배양 플라스크에서 배양시킨 후, 세포가 모노레이어를 형성하였을 때, PBS액으로 3회 세척함. 돼지 호흡기 코로나바이러스를 접종한 세포는 1시간 흡착시켜 세포에 바이러스를 감염시킨 후, 다시 접종액을 PBS액으로 1회 세척함. 이렇게 세척된 세포에 알파-MEM 배지에 우태아 혈청을 첨가하여 배양한후, 바이러스를 접종한 배양액을 10분간 원심분리한 다음, 상등액을 취하여 1대 계대 바이러스로 함. 다음 , 이 바이러스를 이용하여 초대 돼지 신장세포에 이 같은 방법으로 연속 계대시킴- 자돈에 예방약주의 사전접종을 통하여 자돈의 병원성 호흡기코로나 바이러스에 의한 감염 피해를 예방 할 수 있음
마(산약)의 생장점배양에 의한 우량 종묘 생산과 기내 영여자 직접 생산과 부정아 유도에 의한 대량 증식 기술을 개발하여 영양 번식 약용작물의 대량 생산에 이용될 수 있음- 우량종묘 생산을 위한 생장점 배양기술- 기내 영여자 직접 생산과 부정아 유도에 의한 대량증식- 시설내 양액시비에 의한 재배생산- 영양번식형 약용작물의 우량영양제 생산과 건전종묘의 기내대량 증식 및 시설내 재배 생산의 기반 기술로 활용하여 생약재의 안정적 공급과 농가소득 증대에 기여할 것임.
- 국내 각종 시료로부터 미생물의 순수분리 및 동정- 수치분류, 분자생물학적 분류, 화학적 분류 등으로 국내 분리 미생물의 계통분류 체계의 확립- 국내외 표준 균주의 수집- 교육 및 연구용 미생물 및 유전자 자원의 확보- 수집된 미생물 균주의 보존 체계의 정립과 공급체계의 확립- 미생물 균주를 정확하게 동정하는 서비스를 제공- 21세기의 생물산업시대를 대비한 미생물 종 다양성 및 유전자 자원의 확보 및 보존- 체계적이고 정확하게 동정된 균주로 교육과 연구 목적에 합당한 특성을 가진 균주가 제공되므로 효율적인 교육과 연구 수행 가능- 동남아 각국의 미생물 학자와 유대가 강화됨으로서 균주의 수집과 교환, 정보 교환 및 협력할 수 있는 거점이 확보됨
돼지에서 설사를 일으키는 병원성 대장균의 병원성인자인 4가지 섬모항원 K88, K99, 987p, F41의 유전자 동시 검출용 PCR기법의 개발대장균 설사증의 진단을 위해서는 분리한 대장균의 병원성 인자의 확인이 필수적이다. 병원성 인자중 병원성 대장균이 가지는 섬모항원은 장관벽에 부착하는 역활을 한다. 이러한 섬모항원의 확인은 분리한 대장균과 항혈청을 이용한 응집반응을 실시하여 그 존재유무를 판단한다. 하지만, 섬모항원의 발현은 여러가지 배양조건에 따라서 달라지며, 항혈청의 교차반응 또한 문제가 된다. 그러므로 이러한 단점을 극복하기 위하여 분리한 대장균을 대상으로 섬모항에 대한 유전자를 한번의 PCR반응으로 동시에 검출함으로서 신속하게 대장균 설사증을 진단 할 수 있음- 본 PCR기법은 일선 가축의 병성감정기관에서 이용이 가능하며, 이밖에 동물의 질병을 다루는 대학과 일선 기관에서의 이용이 가능하다. 특히 돼지의 설사주증중 대장균에 의한 설사의 빈도가 거의 50%이상을 차지하고 있어서 진단에의 이용은 매우 유용하리라 판단됨
청국장은 된장보다 단백질, 지질, Vit. B-B2 등과 같은 영양이 풍부하고 생리활성효과가 뛰어난 전통식품에도 불구하고 특유의 불쾌취로 인해 섭취가 기피되고 있는 설정임. 복발효 방법으로 청국장을 제조한다면 불쾌취가 감소하고 풍미가 향상된 청국장을 제조 할 수 있어 청국장 제품의 고급화를 도모할 수 있고 청국장의 수용를 증가시켜 청국장 산업의 활성화에 기여할 수 있음청국장 발효시 젖산균과 국균을 이용한 복발효 방법 도입- 불쾌취를 제거하여 풍미가 향상된 청국장 제조
- 최근 애완동물의 급증 및 대규모사육농가의 증가로 인하여 개 부루셀라병의 발생 및 확산 우려- 개 부루셀라병의 예방약이 개발되어 있지 않아 개 부루셀라병 예방을 위해서는 신속하고 정확한 진단기법 확립- 부루셀라 케니스 변이균주를 이용한 신속평판응집 반응법 확립- 개 부루셀라병의 신속 정확하는 서비스 제공- 부루셀라 케니스 변이균주 선발- 부루셀라 케니스 변이균주를 이용한 신속평판응집반응 진단액 생산- 진단킷트의 효율성 조사
비타민 D3는 1번과 25번 탄소에 수산화가 된 형태가 체내에서 뼈의 생성이나 조직구조유지에 요구되는 활성형비타민으로 이들의 분석기술은 이의 결핍이나 조절이상에 의해 야기되는 질병을 진단하거나 골다공증의 치료에 사용하는 의약품의 생산을 위한 미생물의 탐색과 개발에 활용할 수 있는 기술- 비타민 D3와 수산화된 활성형 비타민 D3의 분리정제법과 이의 구조동정 기술- 활성형 비타민 D3 생산 미생물의 탐색을 위한 산물의 분석기술- 활성형 비타민 D3의 생산미생물의 탐색법- 비타민 D3에 결핍이나 과다에 의해 야기되는 질병의 진단- 골다공증 치료제로서 활성형 비타민 D3 제제의 분석에 활용- 골다공증 치료제로서 활성형 비타민 D3의 생산을 미생물이나 효소전환에 의해 생산할 수 있는 미생물의 탐색과 개발에 활용가능
Hypoxia marker와 항체를 이용하여 발생중인 마우스 배자와 태아에서 hypoxia의 존재를 규명한 결과, 발생중인 neural tube, heart, 기관 형성의 초기 단계인 mesenchyme에서 hypoxia가 검출됨. 또한 혈관신생인자인 VEGF와 hypoxia 유도인자인 HIF-1α 역시 발현이 hypoxia region에 집중되고 co-localization 됨. 혈관내피세포의 표식인자인 PECAM으로 염색한 결과 hypoxia가 존재하는 부위로 혈관내피세포가 이동되는 것으로 보임. 발생단계에서는 hypoxia를 매개로 혈관내피세포의 이동과 혈관신생인자의 발현을 통해 혈관신생이 되는것으로 판단됨. 결과는 in-vitro에서 embryonic stem cell을 이용하여 재확인함혈관신생 및 혈관분화의 핵심요소로서의 산소분압의 중요성을 규명하여 혈관신생-산소분압의 밀접한 상관관계를 통한 혈관 신생의 분자적 조절기전을 밝힘- 세포가 산소분압을 어떻게 인지하여 혈관신생을 저절하는지의 규명에 대한 연구성과 제공- 암. 당뇨병성 망막증 등과 같은 다양한 혈관신생관련 질환의 예방과 치료에 기여