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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

중간엽기질세포를 이용한 생착증진 방법

본 발명은 (i) 개체에 생착시키기 공여줄기세포의 시료와 (ii) 중간엽기질세포의 시료를 포함하는 조성물에 관한 것이다.(i)의 시료는 골수줄기세포, 말초혈액줄기세포, 제대혈액줄기세포 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 또한, (i)의 줄기세포의 시료는 다수의 동종이계 시료의 혼합물일 수 있다. 또한, (i)의 줄기세포는 서로 주조직적합항원이 다를 수 있다. 이러한 조성물에서 중간엽기질세포는 (i)의 줄기세포들과 주조직적합항원이 다를 수 있다.특히, 중간엽기질세포는 개체에서 단일이식편우세를 감소시키는 데 효과적인 양으로 존재할 수 있다.또 다른 측면에서, 본 발명은 중간엽기질세포의 저장(stock) 조성물에 관한 것이다. 이들 세포는 냉동보관될 수 있다.또 다른 측면에서, 본 발명은 (i) 공여줄기세포의 다수 시료 및 (ii) 단일이식편우세를 감소시키는데 효과적인 양의 중간엽기질세포를 줄기세포의 단일이식편우세를 감소시킬 필요가 있는 개체에게 투여하는 것을 포함하여, 줄기세포의 단일이식 편우세를 감소시티는 방법에 관한 것이다. 이 방법에서, (i)의 공여줄기세포는 서로 동종이계일 수 있다. 또한, (i)의 공여줄기세포는 서로 이종이계일 수 있다. 또한, 이 방법에서 중간엽기질세포는 공여줄기세포와 동시이식될 수 있다. 전술한 방법에서 중간엽기질세포는 공여줄기세포가 투여되기 이전에 투여될 수 있으며 또는 공여줄기세포투여 이후에 투여될 수 있다. 본 방법에서 우세도는 공여줄기세포간 0.5에서 3의 비율까지 감소될 수 있다. 본 방법에서 개체는 인간을 포함한 포유동물이 될 수 있다.다양한 줄기세포원에서 기원한 줄기세포와 중간엽기질세포를 동시이식한 후 생착을 증진시키기 위한 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은다수 단위의 공여줄기세포와 중간엽기질세포를 동시이식하여 이식편대이식편 거부반응을 감소시키기 위한 방법에관한 것이다. 또한, 본 발명은 동시이식으로 생착을 증진시키는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 중간엽기질세포와 함께 공여줄기세포(단일 또는 다수 단위)를 동시이식함으로써 이식편대숙주반응질환을 치료, 감소 또는 억제하는 방법에 관한 것이다.

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가톨릭대학교
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2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

인공 고관절용 비구 컵

본 발명에 따르면, 세라믹 또는 금속 구체를 내표면에 수용할 수 있도록 형성된 오목한 내표면, 볼록한 반구 형상의 외표면 및, 상기 내표면과 외표면 사이에 원형으로 형성된 저면 가장자리; 상기 내표면으로부터 상기 외표면을 관통하도록 소정의 위치에 형성된 제 1 내지 제 4 의 나사 삽입공; 상기 반구형상의 외표면 정상부에 위치하며 상기 내표면으로부터 상기 외표면을 관통하여 형성된 공구 삽입공; 및, 상기 저면 가장자리에 180 도 간격을 두고 배치된 홈;을구비하는 인공 고관절용 비구 컵이 제공된다.본 발명은 인공 고관절용 비구 컵(acetarular cup)에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 골반의 비구에 고정되는 비구컵에 관한 것이다.고관절은 인체의 대퇴골과 골반의 관골 사이를 연결하는 관절로서, 사람이 앉거나 서는데 있어서 가장 중요한 작용을 하는 관절이다. 고관절은 결핵과 같은 병적 원인 및, 외상등에 의해서 손상될 수 있는데, 이를 치유하기 위해서 외과수술을 통해서 고관절 인공 삽입 기구가 적용될 수 있다. 통상적으로 인공 고관절용 기기는 스템(stem)과 비구 컵(acetabular cup)으로 이루어진다. 스템과 비구 컵은 예를 들면 인체에 무해한 티타늄 합금등으로 제작된다. 인공 고관절용 스템은 대퇴골내에 삽입되어 고정되고, 상기 비구 컵은 골반의 비구에 고정된다. 스템의 단부에는 세라믹 또는 금속 재료로 형성된 구체가 고정되며, 상기 컵안에는 상기 구체가 수용되어 회전할 수 있는 대응 형상의 구체가 끼워지게 된다. 상기 대응 구체는 상기 스템의 단부에 고정된 구체가 그 안에서 회전함으로써 관절 운동이 가능하도록 내표면이 오목한 반구의 형상을 가지며, 마찬가지로 세라믹 재료 또는 고분자 폴리에틸렌으로서 제작된다.인체의 골반은 장골, 치골 및, 좌골로 이루어지는데, 비구컵은 골반의 비구부를 제거하고 그에 고정된다. 비구컵을 비구에 고정시키기 위해서는 나사등을 사용하게 된다. 나사는 비구컵에 형성된 구멍을 통해서 삽입되어 비구에 고정된다.종래 기술에 따르면, 비구컵에는 다수의 나사 삽입 구멍이 형성되어 있다. 비구컵에 다수의 나사 삽입 구멍이 형성된 것은 시술시에 나사 삽입 위치를 용이하게 선정하기 위한 것이기는 하지만, 실제에 있어서 비구에 나사를 고정시킬 수있 는 위치는 제한적이다. 즉, 인체의 골반 구조상 혈관이나 기타의 조직을 손상시키지 아니하고 나사를 고정시킬 수있는 장소는 극히 제한되어 있는 것이다. 따라서, 다수의 나사 삽입 구멍은 불필요할뿐 아니라, 오히려 부정적인 영향을 미친다. 즉, 고관절 인공 삽입 기구의 시술 이후에 표면에 골 조직의 성장을 방해함으로써 환자의 회복을 저해하는 것이다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

인공 고관절용 시멘트형 스템

본 발명에 따르면, 전방면 및, 후방면에 각각 외측에 근접하여 전방 돌출부 및, 후방 돌출부가 형성된 근위부; 상기 근위부로부터 수직 하방으로 연장된 원위부; 상기 근위부로부터 소정의 각도로 경사를 이루어 상방으로 연장된 경부;및, 상기 경부의 단부에 형성된 절두 원추부;를 구비하는 인공 고관절용 시멘트형 스템이 제공된다.본 발명은 인공 고관절용 시멘트형 스템에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 고관절의 대퇴골내에 시멘트(cement)와함께 삽입되는 스템에 관한 것이다.고관절은 인체의 대퇴골과 골반의 비구 사이를 연결하는 관절로서, 사람이 앉거나 서는데 있어서 가장 중요한 작용을 하는 관절이다. 고관절은 결핵과 같은 병적 원인 및, 질병등에 의해서 손상될 수 있는데, 이를 치유하기 위해서 외과수술을 통해서 인공 고관절 기기가 적용될 수 있다. 통상적으로 인공 고관절 기기는 스템과 컵으로 이루어진다. 스템과 컵은 예를 들면 인체에 무해한 티타늄등 합금등으로 제작된다. 인공 고관절 기기의 스템은 대퇴골내에 삽입되어 고정되고, 상기 컵은 골반의 비구에 고정된다. 스템의 단부에는 세라믹 재료 또는 금속 재료로 형성된 구체가 고정되며, 상기 컵안에는 상기 구체가 수용되어 회전할 수 있는 대응 반구체가 끼워져 있으며 상기 대응 반구체는 세라믹 재료 또는 고분자 폴리에틸렌으로 제작된다.본 발명은 위와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 시멘트와 함께 적용될 수 있는 개선된 인공 고관절용 시멘트형 스템을 제공하는 것이다.상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따르면, 전방면 및, 후방면에 각각 외측에 근접하여 전방 돌출부 및, 후방 돌출부가 형성된 근위부; 상기 근위부로부터 수직 하방으로 연장된 원위부; 상기 근위부로부터 소정의 각도로 경사를 이루어 상방으로 연장된 경부; 및, 상기 경부의 단부에 형성된 절두 원추부;를 구비하는 고관절 인공 삽입 기구용 스템이 제공된다.본 발명의 일 특징에 따르며, 상기 전방 돌출부 및, 후방 돌출부 각각은 상 기 근위부로부터 상기 원위부로 접근할수록 돌출 높이가 낮아진다.본 발명의 다른 특징에 따르면, 상기 원위부는 이중으로 테이퍼져서 형성된다.본 발명의 다른 특징에 따르면, 상기 근위부 및, 원위부의 단면은 전체적으로 직사각형으로 형성되고, 상기 직사각형의 모서리는 라운드 처리된다.본 발명의 다른 특징에 따르면, 상기 근위부의 내측면은 87 내지 93 mm 의 곡률 반경을 가지는 곡면부로써 형성된다

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가톨릭대학교
등록일
2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 세포치료 기술

EC SOD 및 세포 침투성 EC SOD와 이들의 용도

본 발명은 EC SOD 및 세포침투성 EC SOD와 이들의 용도에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 EC SOD 및 세포침투능이 개선된 EC SOD 융합 단백질과 이들을 피부질환의 예방 또는 치료에 사용하는 용도에 관한 것이다.본 발명에 따른 EC SDO는 피부조직 전반에 걸쳐 분포하면서 피부세포내 활성 산소종을 제거하며 표피세포의 과증식, MMP(matrix metalloproteinase)의 발현 및 비만세포의 탈과립을 억제하는 효과가 있으므로 피부질환을 예방하거나 치료하는데 유용하게 사용될 수 있다. 또한, EC SOD에 단백질 전달 도메인을 융합시켜 제조한 세포침투성 EC SOD 융합 단백질은 세포침투능이 우수하여 피부질환의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.EC SOD의 활성에 대해 연구하던 중 EC SOD가 생체 피부특히, 피부의 표피층에 비해 진피층에 더 많이 존재하면서 피부세포내 활성 산소종을 제거하고 표피세포의 과증식, MMP(matrix metalloproteinase) 발현 및 비만세포의 탈과립을 억제한다는 새로운 사실을 발견함으로써 상기 EC SOD를 피부질환의 예방 및 치료에 사용할 수 있음을 확인하였으며, EC SOD에 단백질 전달 도메인을 융합시켜 세포침투능이 부여된 세포침투성 EC SOD 융합 단백질을 제조함으로써 본 발명을 완성하였다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

티클로피딘을 활성성분으로 함유하는 각막 혈관신생억제조성물과 그 제조방법

본 발명은 티클로피딘(Ticlopidine)을 활성성분으로 함유하는 각막 혈관신생 억제조성물과 그 제조방법에 관한 것이다.하이드론을 에틸알콜에 용해하여 제조한 하이드론 24 % 의 에틸알콜 용해액에 티클로피딘을 1 ~ 5 mM 의 농도로 녹여서, 본 발명의 티클로피딘을 활성성분으로 함유하는 각막 혈관신생 억제조성물을 제조한다.본 발명의 각막 혈관신생 억제조성물은, 각막의 외상이나 화상을 치료하거나, 각막 이식시 부작용 억제 및 각막 궤양의 치료, 콘텍트렌즈 착용에 따른 부작용의 치료 등에 사용된다.본 발명은 각막의 혈관신생을 억제하는 새로운 물질로 티클로피딘을 찾아내고, 그것을 약제로 제조하여 티클로피딘을 활성성분으로 함유하는 각막 혈관신생 억제조성물과 그 제조방법을 제공하는데 있다.티클로피딘(Ticlopidine)을 활성성분으로 함유하는 각막 혈관신생 억제조성물과 그 제조방법에 관한 것이다.본 발명자는 티클로피딘이 각막의 혈관신생을 억제하는 효과가 높은 것을 찾아내고, 여러 차례의 실험을 거쳐 본 발명을 완성하게 되었다.하이드론을 에틸알콜에 용해하여 제조한 하이드론 24 % 의 에틸알콜 용해액 에 티클로피딘을 1 ~ 5 mM 의 농도로 녹여서, 본 발명의 티클로피딘을 활성성분으로 함유하는 각막 혈관신생 억제 조성물을 제조한다.본 발명의 티클로피딘을 활성성분으로 함유하는 각막 혈관신생 억제조성물의 제조과정을 도 1을 참조하여 설명한다.하이드론을 에틸알콜에 24 % 로 용해한 하이드론의 에틸알콜 용해액을 제조한다.하이드론의 에틸알콜 용해액에 티클로피딘을 1 ~ 5 mM 의 농도로 녹여서, 본 발명의 티클로피딘을 활성성분으로 하는 각막 혈관신생 억제조성물을 제조한다.이하 실험예 및 실시예를 들어 본 발명을 상세히 설명하나, 이들이 본 발명의 내용을 한정하는 것은 아니다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

디지털 방사선 영상의 처리방법

본 발명은 의학분야에 적용되는 다양한 종류의 디지털 방사선 영상을 해부학 적 특성에 따라 인체부위별로 최적화 시킴으로써 임상적 가치가 높은 양질의 영상 으로 제공할 수 있게 하는 디지털 방사선 영상의 처리방법에 관한 것이다.한편, 본 발명은 디지털 방사선 영상을 통하여 보다 쉽고 빠르게 영상의 비정상적인 특징 들을 식별할 수 있도록 함으로써 진단적 효율성을 증대시키는 디지털 방사선 영상 의 처리방법에 관한 것이다.이를 위한 본 발명은, 디지털 방사선 영상기기의 a-Si 디텍터(Amorphous Silicon detector)에 의해 검출된 디지털방사선 영상의 처리방법에 있어서, 상기 디텍터에 의해 검출된 입력영상(INPUT(x,y))을 명암값이 개선된 영상으로 하기 위해 로그함수를 이용하여 로그스트레칭(log stretching)한 로그스트레칭 영상(f(x,y))을 아래 공식에 의해 획득하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 창출된 것으로서, 의학분야에 적용되는 다양한 종류의 디지털 방사선 영상을 해부학적 특성에 따라 인체부위별로 최적화된 임상적 가치가 높은 양질의 영상으로 제공할 수 있게 하는 디지털 방사선 영상의 처리방법을 제공하는데 그 목적이 있다.본 발명의 다른 목적은 디지털 방사선 영상을 통해서 보다 쉽고 빠르게 영상의 비정상적인 특징들을 식별할 수 있도록 함으로써 진단적 효율성을 증대시키는 디지털 방사선 영상의 처리방법을 제공하는데 있다.상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따른 디지털 방사선 영상의 처리방법은, 디지털 방사선 영상기기의 a-Si 디텍터(Amorphous Silicon detector)에 의해 검출된 디지털 방사선 영상의 처리방법에 있어서, 상기 디텍터에 의해 검출된 입력영상(INPUT(x,y))을 명암값이 개선된 영상으로 하기 위해 로그함수를 이용하여 로그스트레칭(log stretching)한 로그스트레칭 영상(f(x,y))을 아래 공식에 의해 획득하는 단계를 포함하는 점에 그 특징이 있다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

HIV psi에 대한 결합력이 증가된 NC 돌연변이체및 이를 함유하는 약학적 조성물

HIV psi에 대한 결합력이 증가된 NC 돌연변이체 및 이를 함유하는 약학적 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 서열번호 1로 기재되는 아미노산 서열을 가지는 폴리펩티드에 있어서, 24번째 및 41번째 아미노산이 각각 발린(valine)과 글리신(glycine)으로 치환되거나 37번째부터 55번째까지의 아미노산이 결실된 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 이를 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 폴리펩티드는 HIV의 뉴클레오캡시드(nucleocapsid, NC)의 경쟁적 저해제로 작용하여 야생형 NC와 psi의 결합을 억제함으로써 HIV의 조립을 저해한다. 따라서, 본 발명에 따른 폴리펩티드는 HIV에 의한 감염증을 치료 또는 예방하는 항-HIV 제제로 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은 HIV Psi에 대한 결합력이 증가된 NC 단백질 돌연변이체 및 이를 함유하는 약학적 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 서열번호 1로 기재되는 아미노산 서열을 가지는 폴리펩티드에 있어서, 24번째 및 41번째 아미노산이 각각 발린(valine)과 글리신(glycine)으로 치환되거나 37번째부터 55번째까지의 아미노산이 결실된 것을 특징으로 하는 폴리펩티드 및 이를 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다.HIV의 바이러스 조립을 저해하는 항-HIV 제제를 개발하기 위하여 연구를 거듭하던 중, HIV의 바이러스 조립에 필요한 포장 염기서열(packaging sequence)에 대한 결합력이 HIV 야생형 NC에 비해 현저히 높은 변이형 NC폴리펩티드를 제조함으로써 본 발명을 완성하였다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 세포치료 기술

스탓3 (STAT3) 분자 활성화에 의한 줄기세포의 생체내이식생착효율 증가

본 발명은 의학에서 줄기세포에 의한 세포이식과 전자 치료에 관련된 발명이다.악성종양 및 난치병 치료를 위해 사용되는 골수이식 또는 각종 장기재생을 위해 줄기세포 이식치료를 하는바, 줄기세포의 팽창 및 이식된 세포의 생체내 생착을 유전자 치료 또는 약물학적 치료에 의해 선택적으로 증가 또는 감소시키기 위한 방안이다.미분화 상태에 있는 줄기세포는 세포외 배양을 통해서 확장되기 힘들뿐 아니라 실제 이식되는 줄기세포의 양은 고가의 배양장치와 싸이토카인을 동원하여도 기존의 방법으로는 거의 증가하지 않아서, 줄기세포 이식후 생착의 속도를 가속화 하고 생착의 양을 증가시킬 수 있는 방안이 절실히 필요한 상태이다. 본 발명은 스탓3 (STAT3) 분자의 활성도가 생체내 이식된 줄기세포의 증식 및 억제를 조절하는 직접적 조절인자임을 밝힘과 동시에 이 분자 (STAT3)의 활성도를 높이는 유전자 조작 또는 약물조작을 통해 이들 줄기세포의 생체내 자가재생산의 증가와 이식후의 생착률 증가를 통한 이식효율증가 및 장기 재구성율을 증가시킬 수 있다는 것이 본 발명의 핵심이다 이들 발명을 통하여 줄기세포의 기능저하, 세포사 등에 의한 각종 혈액질환의 치료와 줄기세포의 골수이식효율 증가 로 인한 종양 및 백혈병에 혁신적인 치료법이 될것이며 간, 췌장등의 장기를 재생하는 효율을 증대시킴으로써 난치병 정복에 중요한 발명이 될것이다.본 발명은 인간이나 동물의 골수등에서 비롯된 원발성 조직중 미분화상태에 있으면서 이식생착능력이 있는 줄기세포에서 이들의 이식생착능력이 이들 세포내의 STAT3 의 활성도에 의해 직접적으로 조절된다는 것을 발명하였다. 따라서 이러한 생체내 이식생착능력의 항진을 위하여 STAT3-C를 비롯하여 여러 방법으로 STAT3 분자의 기능을 활성화 시킴으로써 조혈모 세포 (hematopoietic stem cell) 를 비롯한 줄기세포의 생체내에서의 자가재생산 및 이식생착 능력을 증가시키고자 한다. 또한 이러한 목적으로 STAT3-C 등의 유전자를 삽입하여 전체 이식생착되는 양을 증가시킴과 동시에 여러 세포가 함께 섞여 있을 때 이들 유전자 조작된 세포만을 선택적으로 확장시킴으로써 원하는 치료효과를 극대화 하고자 한다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 생물학

비만억제 및 치료를 위한 약제약적 조성물

본 발명은 정제된 홍삼 총 사포닌(ginseng total saponin, GTS) 과 아세틸콜린 효능제인 니코틴을 유효성분으로하는 비만억제 및 치료를 위한 약제학적 조성물에 대한 것이다. 본 발명은 비만 억제효과를 규명하기 위하여, 정상 식이군쥐와 고지방 식이군에서 유도된 비만 쥐에서 약제를 투여하여 에너지 균형 및 섭식행동에 대한 효과를 비교해 보고자 체중변화, 식이 섭취량, 식이 효율, 보행성 활동량(locomotor activity)을 측정하여 본 발명의 영향을 평가하고, 나아가 약물 처치에 대한 뇌의 변화를 면역조직화학기법(immunohistochemistry)을 이용하여 시상하부에서의 대표적인 섭식을 자극물질인 NPY와 섭식을 감소시키는 물질인 CCK의 활성을 살펴보았다. 연구 결과, 정상 및 고지방 식이에서 유도된 비만 쥐에서 본 조성물은 체중증가 억제 및 에너지 균형에 대한 효과가 있으며, 정상 대조군에 비하여 시상하부에서의 NPY 발현의 감소 및 CCK 발현의 증가를 보이는 섭식행동에 대한 억제효과를 나타냈기에 본 발명의 총 사포닌과 니코틴 복합조성물은 비만억제 및 치료제로 사용될 수 있다.본 발명은 정상식이와 고지방으로 유도된 비만동물모델에서 GTS와 니코틴의 복합적 투여가 현저한 체중감량, 체지방감소, 보행성 활동량의 증가와 NPY의 발현 증가 및 CCK 발현 감소를 나타내어, 비만억제및 비만 치료에 유용한 약제학적 조성물을 제공함을 목적으로 한다.발명은 상기의 목적을 달성하기 위하여, 고지방 식이로 유도된 비만동물모델에서 홍삼에서 추출한 물질인 GTS와 니코틴을 이용한 비만 치료를 위한 약제학적 조성물을 제공한다.또한, 본 발명은 에너지 균형과 NPY의 발현을 감소 및 CCK의 발현을 증가시 키는 것을 특징으로 하는 GTS와 니코틴을 이용한 비만 치료를 위한 약제학적 조성물을 제공한다.또한, 본 발명에 사용된 홍삼 시료는 한국담배인삼공사에서 6년근 원료수삼을 증감가온시켜 제조한 홍삼을 42∼80m esh로 균일하게 분쇄한 의료용 분말(수분함량 7.22%)을 구입하여 시료로 사용하였다. 본 발명은 홍삼을 상온에서 70% 에탄올로 추출하고 농축하여 이 농축액에 동량의 물을 가한 후 pH를 중성으로 조절한 다음 벤젠으로 3회 추출하였다. 그 수층을 Ando 등의 수포화 n-부탄올 추출방법으로 조사포닌을 얻었으며, 이 조사포닌 클로로포름을 가하여 가용성부분을 제거한 후, 활성탄으로 탈색시켜 조제된 정제 총 사포닌을 이용한 비만 치료를 위한 약제학적 조성물을 제공한다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 단백질 구조분석 기술

대변내 종양 표지 단백물질 추출방법

본 발명은 대변을 이용하여 위장관계 종양을 초기에 진단하기 위해 각종 종양표지 단백물질을 추출하는 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 환자 또는 검사 대상자의 대변을 채취하는 단계와; 상기 채취된 대변 10∼100㎎을 1∼10cc의 완충액(인산완충액, 글라이신, 식염수 등)에 넣고 혼합하는 단계와; 상기 완충액에 혼합된 변추출액을 영하 15도 내지 영하 196도에서 냉동하는 단계와; 상기 냉동된 추출액을 상온 내지 37도 수조에서 해동시켜 상피세포가 깨지도록 하는 해동단계와; 상기 냉동하는 단계와 해동하는 단계를 2∼3회 반복하는 단계와; 상기 추출액을 필터를 통과시켜 여과하는 단계와; 상기 여과된 액체를 원심분리하여 부유물질들을 가라 앉혀 제거하고 상층액을 분리하는 단계와; 상기 분리된 상층액을 검사하는 단계로 종양여부를 검진할 수 있도록 하는 방법으로서, 본 발명은 대변을 일정 기준량 채취하여 대변내의 세포내에 포함된 종양표지 단백양이 일정 기준량 이상 검출될 경우 정밀 진단하도록 하여 위장관계 종양 환자가 수술 불가능한 종양 및 전이가 발생되기 전에, 초기단계에서 치료를 함으로서 불치병이라 하더라도 완치의 가능성을 높일 수 있도록 한 대변내 종양 표지 단백물질 추출방법을 제공할 수 있도록 한 것이다.본 발명은 이와 같은 문제점을 감안하여 발명한 것으로서, 신체의 위장 관계를 거쳐 발생되는 대변을 채취하여 이에 포함된 상피세포 내의 종양표지 단백 양을 측정하여 일정 환자가 수술 불가능한 종양 및 전이가 발생되기 전에, 초기단계에서 위장관계 암을 검출 또는 진단할 수 있도록 함을 목적으로 한 것이다.따라서 본 발명은 종양검사시 대변채취 단계, 완충액에 혼합하는 단계, 냉동하는 단계, 상온 또는 37℃의 수조에서 해동하는 단계, 상기 냉동과 해동을 2∼3회 반복하는 단계, 필터로 여과하는 단계, 필터로 걸러진 액을 원심분리하는 단계, 상층 액을 검사체로 하여 검사는 단계, 검사 후 결과를 판독하는 순서로 이루지는 검사방법을 특징으로 한다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 유전자 발현·조절 기술

인간 원암 유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질

본 발명은 신규 원암 유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질에 관한 것으로, 본 발명의 원암 유전자는 기존의 보고된 원암 유전자와는 전혀 상동성을 나타내지 않는 신규 유전자로서 유방암, 난소암, 백혈병, 림프종, 자궁암, 폐암, 대장암, 피부암 등을 비롯한 암의 진단, 형질전환 동물의 제조 및 안티-센스 (anti-sense) 유전자 치료 등에 효과적으로이용될 수 있다.인간을 포함한 고등동물들은 약 100,000 개의 유전자들을 갖고 있으나 이들 중 약 15 %만이 각각의 개체에서 발현된다. 따라서, 어떠한 유전자가 선택되어 발현되느냐에 따라서 생명의 모든 현상, 즉 발생, 분화, 항상성(homeostasis), 자극에 대한 반응, 세포분열 주기조절, 노화, 및 아폽토시스 (apoptosis; programmed cell death)등이 결정된다.종양발생과 같은 병리학적 현상은 유전자 변이과정으로 유발되어 결국에는 유전자 발현의 변화를 유도하게 된다.따라서, 상이한 세포들 사이에서 나타나는 유전자 발현의 비교는 여러 생물학적 현상을 이해하는데 기본적이고 효과적인 접근방법이라고 할 수 있다.본 발명의 다른 목적은 상기 원암 유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암 유전자에 의해 코드되는 단백질 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암 유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암 유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA에 상보적인 염기서열을 지닌 안티센스 유전자를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 안티센스 유전자를 사용하여 암을 치료 또는 예방하는 것이다.본 발명의 한 태양에 따라, 서열번호: 1의 뉴클레오티드 서열을 갖는 신규 원암 유전자 또는 그의 단편이 제공된다.본 발명의 다른 태양에 따라, 상기 원암 유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물이 제공된다.

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가톨릭대학교
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2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 유전자 발현·조절 기술

PML-RARa 정량키트

PCR 반응혼합물, PML-RARa 융합유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, ABL 유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, PML-RARa 표준 플라스미드 DNA, ABL 표준 플라스미드 DNA, PML-RARa 음성대조군 및 ABL 음성대조군을 포함하는 PML-RARa 정량키트 및 전기 키트를 이용하여 PML-RARa 융합유전자를 정량하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 PML-RARa 정량키트를 사용할 경우, 급성 전골수성 백혈병의 원인이 되는 PML-RARa 융합유전자의 재조합 정도를 보다 간편하고, 정확하게 정량할 수 있으므로, 급성 전골수성 백혈병의 정확한 진단에 널리 활용될 수 있을 것이다.본 발명자들은 보다 간편하고, 정확하게 PML-RARa 융합유전자의 재조합정도를 정량할 수 있는 정량키트를 개발하고자 예의 연구노력한 결과, PML-RARa 융합유전자 특이적인 프라이머 및 프로브와 대조군인 ABL 유전자 특이적인 프라이머 및 프로브를 포함하는 PML-RARa 정량키트를 사용할 경우, 보다 간편하고, 정확하게 PML-RARa 융합유전자의 재조합 정도를 정량할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.결국, 본 발명의 주된 목적은 간편하면서도 정확도 및 재현성이 향상된 PML-RARa 정량키트를 제공하는 것이다.본 발명의 다른 목적은 전기 키트를 이용하여, PML-RARa 융합유전자를 정량하는 방법을 제공하는 것이다.

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가톨릭대학교
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2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

BCR-ABL 정량키트

PCR 반응혼합물, BCR-ABL 융합유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, ABL 유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, BCR-ABL 표준 플라스미드 DNA, ABL 표준 플라스미드 DNA, BCR-ABL 음성대조군 및 ABL 음성대조군을 포함하는 BCR-ABL 정량키트 및 전기 키트를 이용하여 BCR-ABL 융합유전자를 정량하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 BCR-ABL 정량키트를 사용할 경우, 만성 골수성 백혈병의 원인이 되는 BCR-ABL 융합유전자의 재조합 정도를 보다 간편하고, 정확하게 정량할 수 있으므로, 만성 골수성 백혈병의 조기 진단 및 환자의 예후 모니터링에 널리 사용될 수 있을 것이다.BCR-ABL 정량키트에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명은 PCR 반응혼합물, BCR-ABL 융합유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, ABL 유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, BCR-ABL 표준 플라스미드 DNA, ABL 표준 플라스미드 DNA, BCR-ABL 음성대조군 및 ABL 음성대조군을 포함하는 BCR-ABL 정량키트 및 전기 키트를 이용하여 BCR-ABL 융합유전자를 정량하는 방법에 관한 것이다.상술한 단점을 극복하기 위한 방법으로, 최근에는 미량의 시료로부터 표적 RNA의 정량까지 가능한 실시간 RT-PCR 방법을 활용한 BCR-ABL 진단키트들이 개발되어 시판되고 있다. 그러나, 상기 진단키트들은 표준 유전자로 RNA를 제공함으로써 안정성 및 재현성의 문제점을 내포하고 있거나, 표준화에 사용되는 참조 유전자정량용 프라이머 및 프로브가 포함되어 있지 않거나, 또는, 참조 유전자 정량용 프라이머 및 프로브가 포함되어 있다 하더라도, 백혈병 정량과 무관한 GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) 유전자나 베타액틴 유전자에 관한 정량용 프라이머 및 프로브를 포함하고 있어, 정확한 BCR-ABL 정량을 수행하기가 어렵다는 단점이 있다.따라서, 보다 간편하고, 정확하게 BCR-ABL 융합유전자의 재조합정도를 정량할 수 있는 정량키트를 개발하여야 할 필요성이 끊임없이 대두되었다.

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2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

인간 암 억제 유전자, 이에 의해 코딩되는 단백질, 이를포함하는 발현 벡터 및 이 벡터로 형질전환된 세포

본 발명은 서열번호: 1의 염기서열을 갖는 인간 암 억제 유전자, 이에 의해 코딩되는 단백질, 이를 포함하는 발현 벡터 및 이 벡터로 형질전환된 미생물에 관한 것으로, 본 발명의 유전자는 인간 암의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은 인간 암 억제 유전자, 이에 의해 코딩되는 단백질, 이를 포함하는 발현 벡터 및 이 벡터로 형질전환된 세포에 관한 것이다.암 억제 유전자(tumor suppressor gene) 산물은 정상 세포로부터 암 세포로의 형질전환을 억제하며, 이 기능이 상실되면 세포는 악성 형질전환에 이르게 된다(Klein, G., FASEB J. , 7 , 821-825(1993)). 암세포가 암을 형성하기 위해서는 암 억제 유전자의 정상 카피수 기능이 상실되어야 한다. p53 암 억제 유전자의 코딩 서열내 변형이 인간 암에서 가장 일반적인 유전적 변화로 밝혀졌다(Bishop, J.M., Cell , 64 , 235-248(1991); 및 Weinberg, R.A., Science ,254 , 1138-1146 (1991)).그러나 자궁경부암에서 보고된 p53 변이는 2 % 내지 11 %의 범위에 불과하여(Crook, T. et al., Lancet , 339 , 1070-1073(1992); 및 Busby-Earle, R.M.C. et al., Br. j. Cancer , 69 , 732-737(1994)), 자궁경부암 조직의 일부만 이 이러한 p53 변이를 보이는 것으로 생각된다.이에 본 발명자는, 정상 자궁경부 조직과 자궁경부암 사이에 차별적으로 발 현되는 유전자를 보다 효율적으로 나타내는 mRNA 감별 전개법(mRNA differential display(DD) method)을 사용하여, 정상 자궁경부 조직에서 새로운 암 억제 유전자를 분리하고자 예의 연구하였다.본 발명의 목적은 신규한 인간 암 억제 유전자를 제공하는 데 있다.본 발명의 다른 목적은 상기 유전자에 의해 코딩되는 암 억제 단백질을 제공하는 데 있다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 유전자를 포함하는 발현 벡터를 제공하는 데 있다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 벡터로 형질전환된 세포를 제공하는 데 있다.상기 목적에 따라, 본 발명에서는 서열번호: 1의 염기서열을 갖는 인간 암 억제 유전자(HCCS-4로 명명함)를 제공한다.상기 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 서열번호: 2의 아미노산 서열을 갖는 인간 암 억제 단백질을 제공한다.상기 또 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 상기 유전자를 포함하는 발현 벡터를 제공한다.상기 또 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 상기 벡터로 형질전환된 세포를 제공한다.

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2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 유전자 치료 기술

HIV-1의 누클레오캡시드 단백질과 결합할 수 있는 단백질

본 발명은 인간에게 후천성 면역 결핍증을 유발시키는 HIV-1의 뉴클레오캡시드(nucleocapsid, NC) 단백질과 결합하여, HIV-1의 활성을 억제할 수 있는 단백질 또는 펩티드에 관한 것이다. 본 발명의 NC 단백질과 결합하는 펩티드는 HIV-1의 증식에 중요한 역할을 하는 NC 단백질의 기능을 억제하여 HIV-1의 증식을 저해할 수 있으므로, HIV-1의 검출, NC 단백질에 대한 저해제의 개발, NC 단백질에 대한 저해제를 천연/비천연의 화합물 라이브러리로부터 스크리닝하는 데에 널리 활용될 수 있을 것이다.본 발명자들은 NC 단백질과 결합하여 HIV-1의 활성을 저해시킬 수 있는 단백질 또는 펩티드를 개발하고자 예의 연구노력한 결과, 파지 디스플레이 시스템(phage display system)을 이용하여, 검출된 펩티드가 NC 단백질에 특이적으로 결합할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.결국, 본 발명의 주된 목적은 NC 단백질과 결합하여 HIV-1의 활성을 저해시킬 수 있는 단백질 또는 펩티드를 제공하는 것이다.본 발명자들은 HIV-1의 NC단백질과 결합할 수 있는 단백질 또는 펩티드를 개발하기 위하여, 파지 디스플레이 시스템(phage display system)을 이용하였다. 파지 디스플레이 시스템은 단일사슬 필라멘트형 박테리오파지(M13)(single strand filamentous bacteriophage, M13)의 코트 단백질인 gⅢ 단백질에 무작위적인 펩티드를 발현시키고, 특정 목적 단백질과 결합시킴으로써, 특정 목적 단백질과 결합하는 단백질 또는 펩티드를 검출하는 방법이다.상기 파지 디스플레이 시스템은 목적 단백질을 플레이트에 코팅하는 단계; 파지 디스플레이-펩티드 라이브러리를 결합시키는 단계; 및, 결합된 파지를 추출하고, 증폭시키는 단계를 포함한다. 이러한 일련의 작업을 패닝(panning) 이라고도 하며, 상기 패닝을 약 3회 동안 반복 수행할 경우, 목적 단백질에 높은 친화도로 결합하는 파지를 수득할 수 있다.

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2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 유전자 재조합 기술

AML1-ETO 정량키트

PCR 반응혼합물, AML1-ETO 융합유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, ABL 유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, AML1-ETO 표준 플라스미드 DNA, ABL 표준 플라스미드 DNA, AML1-ETO 음성대조군 및 ABL 음성대조군을 포함하는 AML1-ETO 정량키트 및 전기 키트를 이용하여 AML1-ETO 융합유전자를 정량하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 AML1-ETO 정량키트를 사용할 경우, 급성 골수성 백혈병의 원인이 되는 AML1-ETO 융합유전자의 재조합 정도를 보다 간편하고, 정확하게 정량할 수 있으므로, 급성 골수성 백혈병의 정확한 진단에 널리 활용될 수 있을 것이다.AML1-ETO 정량키트에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명은 PCR 반응혼합물, AML1-ETO 융합유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, ABL 유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, AML1-ETO 표준 플라스미드 DNA, ABL 표준 플라스미드 DNA, AML1-ETO 음성대조군 및 ABL 음성대조군을 포함하는 AML1-ETO 정량키트 및 전기 키트를 이용하여 AML1-ETO 융합유전자를 정량하는 방법에 관한 것이다.급성 골수성 백혈병(acute myelogenous leukemia, AML)은 다양한 발병원인이 밝혀지고 있으나, 가장 일반적인 원인은 염색체의 전좌(translocation)에 의하여 발생하는 것으로 알려져 있는데, 특히 8번 염색체와 21번 염색체의 전좌가 주된발병원인으로 알려져 있는데, 전기 21번 염색체의 AML1유전자가 8번 염색체의 ETO유전자 부위에 전좌되어 융합된 유전자 재배열을 AML1-ETO 재배열(AML1-ETO rearrangement)이라고 한다. 전기 AML1-ETO 재배열은 세포학적으로 발견이 어려우나, 환자의 치료방향 결정과 예후 판단에 중요하므로, 분자생물학적 결과가 중요한 의미를 가진다.

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2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 유전자 공학

피토스핑고신 유도체를 함유하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 및 치료용 약학 조성물

본 발명은 피토스핑고신 유도체를 유효성분으로 함유하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 및 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.본 발명은 피토스핑고신 유도체에, 추가로 비타민 D3 또는 칼시포트리올을 유효성분으로 함유하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 및 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.본 발명은 피토스핑고신 유도체에, 추가로 UVB를 조사한 세포의 배지를 유효성분으로 함유하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 및 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.본 발명은 피토스핑고신 유도체를 유효성분으로 함유하는 약학 조성물을 투여하고, 환부에 UVB를 조사하는 것으로 이루어진 건선치료 방법을 제공한다.본 발명의 조성물은 생체내 아폽토시스 유도에 의해 예방 또는 치료가 가능한 각종 피부질환, 각종 종양, 각종 암 등의 예방 또는 치료에 유용하다.본 발명에서는 피토스핑고신 유도체를 유효성분으로 하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하고자 한다.본 발명은 피토스핑고신(phytosphingosine, PS), 피토스핑고신-HCl(PS-HCl), C6-피토스핑고신(N-hexanoylphytosphingosine; C6-PS), CLA-피토스핑고신(conjugated linoleic acid-phytosphngosine; CLA-PS), 테트라아세틸 피토스핑고신 (TAPS) 및 N-아세틸 피토스핑고신(NAPS)으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.본 발명은 피토스핑고신, 피토스핑고신-HCl, C6-피토스핑고신, CLA-피토스핑고신, 테트라아세틸 피토스핑고신 및 N-아세틸 피토스핑고신으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 유효성분에, 추가로 비타민 D3 또는 칼시포트리올을 유효성분으로 함유하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.본 발명은 피토스핑고신, 피토스핑고신-HCl, C6-피토스핑고신, CLA-피토스핑고신, 테트라아세틸 피토스핑고신 및 N-아세틸 피토스핑고신으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 유효성분에, 추가로 UVB를 조사한 세포의 배지를 유효성분으로 함유하는 각질화성 질환 또는 피부암의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.본 발명의 조성물은 아폽토시스 유도 활성을 갖는 약학 조성물 또는 화장료 조성물을 포함한다.

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가톨릭대학교
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2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

세포독성 분석법과 결합된 다층 암세포 배양계를 이용한항암물질의 활성 측정 방법

세포독성 분석법과 결합된 다층 암세포 배양계(multicellular layer, 이하 "MCL"로 칭함)를 이용한 항암물질의 활성 측정 방법에 관한 것으로, 구체적으로 고형암에 유효한 항암 후보물질의 발굴을 위한 검색계 중의 하나인 다층 암세포 배양계 모델을 세포독성 분석(cytotoxicity assay) 방법과 결합시킴으로써 항암제의 조직 투과 후 항암활성을 직접 평가할 수 있도록 설계한 항암물질의 활성 측정 방법에 관한 것이다. 본 발명의 다층 암세포 배양계를 이용한 항암물질의 활성 측정 방법은 항암 물질의 암조직 투과성을 정량하는 기존의 방법과는 달리, 생물학적 방법을 이용하여 항암제의 암조직 투과후 활성을 실제로 분석하기 때문에 고형암에 대한 새로운 항암제 혹은 항암병용요법의 효능을 검색하거나 평가하는데 유용하게 이용될 수 있다.세포독성 분석법과 결합된 다층 암세포 배양계(multicellular layer, 이하 "MCL"로 칭함)를 이용한 항암물질의 활성 측정 방법에 관한 것으로, 구체적으로 고형암에 유효한 항암 후보물질의 발굴을 위한 검색계 중의 하나인 다층 암세포 배양계 모델을 세포독성 분석(cytotoxicity assay) 방법과 결합시킴으로써 항암제의 조직 투과 후 항암활성을 직접 평가할 수 있도록 설계한 항암물질의 활성 측정 방법에 관한 것이다.본 발명자들은 고형암에 유효한 항암후보물질 발굴을 위한 검색계로서 인체 직장결장 암세포주 DLD-1을 이용한 MCL 모델을 세포독성 분석법(cytotoxicity assay)과 결합시킴으로써 항암제의 조직 투과 후 항암활성을 직접 평가할 수 있도록 설계한 항암물질의 활성 측정 방법을 개발하였으며, 임상에서 직장결장암에 쓰이는 항암제를 모델 항암약물로 선정하여 이들의 암세포 조직 투과후 활성을 효과적으로 측정할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

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2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 유전자 치료 기술

단백질 형질도입 도메인 유전자를 함유하는 재조합베큘로바이러스 발현벡터

목적 단백질의 전달효율이 우수한 재조합 베큘로바이러스 발현벡터에 관한 것으로, 수포성 구내염 바이러스 당단백질(vesicular stomatitis virus glycoprotein) 유전자와 HIV-1 (human immunodeficiency virus-1)의 Tat(transactivator) 유전자의 일부인 단백질 PTD(protein transduction domain) 유전자를 포함하는 본 발명의 재조합 베큘로바이러스 발현벡터는 숙주세포로의 목적 유전자의 전달효율이 매우 우수하여 유전자 치료에 유용하게 사용될 수 있다.목적 단백질의 전달효율이 우수한 재조합 베큘로바이러스 발현벡터에 관한 것으로, 보다 상세하게는 수포성 구내염 바이러스 당단백질 (vesicular stomatitis virus glycoprotein, VSVG) 유전자와 HIV-1 (humanimmunodeficiency virus-1)의 Tat 유전자의 일부인 PTD(protein transduction domain, PTD) 유전자를 포함하는 재조합 베큘로바이러스 발현벡터에 관한 것이다.최근 유전자치료에 사용되는 바이러스 벡터(viral vector)로 아데노바이러스(adenovirus)를 비롯하여 아데노-관련 바이러스(adeno-associate virus), 레트로바이러스(retrovirus), 헤르페스 심플렉스 바이러스(herpes simplex virus), 렌티-바이러스(lenti-virus), 랩도바이러스(rhabdovirus) 등이 연구되고 있는데, 이러한 바이러스들은 여러 가지 면에서 한계점을 가지고 있다. 특히, 많이 이용되고 있는 아데노바이러스의 경우 벡터의 조작이 어렵고 인체에서 면역반응을 유발시키는등의 문제로 인하여 이를 대체할 수 있는 새로운 유전자 전달체가 요구되고 있는 실정이다.

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가톨릭대학교
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2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 유전자 재조합 기술

인간 HCCR-1 단백질 검출 방법 및 이를 이용한 간암진단키트

본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-1로부터 발현된 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 항원-항체 결합반응으로 검체 시료 중의 HCCR-1 단백질을 검출하는 방법 및 이를 이용한 간암 진단키트에 관한 것으로, 본 발명의 HCCR-1 특이적인 항체를 이용한 검출방법 및 진단키트는 기존의 AFP (alpha-fetoprotein) 검사법보다 진단의 정확도 및 재현성이 높아 간암의 조기진단 및 소간암의 진단에 매우 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-1로부터 발현된 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 항원-항체 결합 반응으로 검체 시료중의 HCCR-1 단백질을 검출하는 방법 및 이를 이용한 간암 진단키트에 관한 것이다.본 발명의 목적은 간암의 효과적인 조기진단을 위하여 인간 원암유전자를 이용한 간암 검출방법 및 진단키트를 제공하는 것이다.상기 목적에 따라, 본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-1로부터 발현된 단백질에 특이적인 항체를 구성요소로 하며, 항원-항체 결합반응을 통해 생체 시료 중 HCCR-1 단백질의 발현정도를 측정하여 간암을 진단하는 방법 및 이를 이용한 간암 진단키트를 제공한다.HCCR-1 단백질을 특이적으로 인식하는 항체를 제조하기 위해서는, 우선 HCCR-1 단백질을 입수하여야 한다. HCCR-1 단백질은 공지된 아미노산 서열을 이용하여 합성하거나 유전공학적 방법에 의해 재조합 단백질의 형태로 생산할 수 있다. 예를 들면, NIH 프로그램 GenBank 상에 등재된 HCCR-1 유전자의 염기서열을 이용하여 HCCR-1 단백질을 재조합 단백질 형태로 발현하는 발현벡터를 제조하는 단계; 상기 발현벡터를 대장균에 형질전환시켜 HCCR-1 재조합 단백질을 생산하는 형질전환체를 얻는 단계; 및 상기 형질전환체를 배양하여 인간 원암유전자 HCCR-1 재조합 단백질을 분리·정제하는 단계에 의해 HCCR-1 재조합 단백질을 제조할 수 있다.

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2006-05-24
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