일반기술
생명과학 > 효소공학 (H73)
본 발명은 다음 일반식(I)으로 표시되는 효소의 역가수분해 반응을 이용한 당유도체의 제조법에 관한 것으로 특히 당의 C1위치에서 당을 포함하고 있는 알콜류와 효소반응으로 글리코시드 결합을 형성시키므로써 효소 합성 방법에 의해 당 유도체를 제조하는 방법에 관한 것이다. 당유도체를 제조하는 방법에 화학적인 것과 효소를 이용한 방법 들이 보고되어 있으나 여러 문제점이 있었으므로 탄수화물 유도체의 효소 합성을 유기용매상에서 진행시켜 간단한 방법으로 효소의 입체특이성과 넓은 적용 범위를 가지며 수용액상의 반응의 장점을 갖는 새로운 방법이 연구 되었다. 당의 C1위치에서 당을 포함하는 알콜류의 효소반응으로 글리코시드결합을 형성시키므로써 당 유도체를 제조함에 있어서 유기용매에 불용성인 탄수화물을 상변환체인 유기 붕산을 사용하여 유기용매중에 용해시키고,글리코시드 가수분해효소를 이용하여 역가수분해반응으로 글리코시드 결합을 형성시키므로써 당 유도체를 제조한다. 일반식(I)에서 R은 메틸,에틸,이소프로필, 또는 단당류를 나타낸다. 탄수화물은 단당류,이당류,다당류 중에서 선택된 것이며 유기용매는 친핵반응성이 없는 석유에테르,헥산,옥탄,톨루엔,벤젠,클로로포름,디옥산,아세톤 등을 하나 이상 사용하며 효소로는 탄수화물을 분해하는 글리코시다제,즉 글루코시다제,갈락토시다제 및 만노시다제 중에서 선택된 것을 사용한다.
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- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
융화 단백질에서 원하는 단백질을 효율적으로 분리 정제하는 방법으로서, 친화 펩티드의 도입으로 물성을 변화시켜 금속염을 이용한 선별 방법으로도 쉽게 이들을 분리, 정제하게 된다. 목적 단백질을 코딩하는 유전자를 기타의 펩티드나 단백질을 코딩하는 유전자와 융합시켜 생체 내에서 발현시켜 생성된 융합 단백질로 부터 목적 단백질을 분리, 정제하는 방법에 있어서 목적 단백질을 코딩하는 유전자와 기타의 펩티드나 단백질을 코딩하는 유전자의 연결점에 7-15개의 아미노산을 코딩하는 DNA 서열을 도입하여 기타 펩티드와 단백질 사이에 7-15개로 구성된 친화 펩티드를 생성하고 이에 의한 단백질 물성 변화에 따른 금속염에 대한 친화성의 차이를 이용하는 선별 방법을 포함하는 융합 단밸질로 부터 단백질을 분리,정제할 수 있다.
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- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 효소공학 (H73)
본 발명은 고온성 균주인 더머스 칼도필러스(Thermus caldophilus) CK24로부터 유래된 새로운 내열성 DNA 중합효소에 관한 것이며 또한 유전자 재조합 대장균을 이용하여 상기 내열성 DAN 중합효소를 제조하는 방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는 더머스 칼도필러스 GK24로부터 새로운 내열성 DNA 중합효소를 분리하여 확인한 후 이를 코딩하는 유전자를 클로닝하여 염기 서열을 결정하고 이로부터 상기 단백질의 아미노산 서열을 결정하며 대장균내에서의 발현을 위한 최적화 조건을 구하여 상기 중합효소를 대량으로 제조 및 정제하는 방법에 관한 것이다. DNA 중합효소는 단일 가닥 DNA를 주형으로 하여 뉴클레오티드 삼인을 상보적으로 결합시켜 이중 가닥 DNA의 합성을 촉매하는 효소이다. 이러한 DNA 중합효소는 중온성 균인 대장균을 대상으로 많이 연구되어 왔으며, 이들중 DNA 중합효소 I 는DNA 염기 서열 및 전체 아미노산 서열이 결정되었고, 또한 이 DNA 중합효소 I 의 5'→3' 엑소뉴클레아제(exonuclease) 활성을 갖는 아미노 말단 영역을 제거한 클리나우 단편(Klenow fragment)은 삼차구조까지 밝혀진 바 있다(Jocye, C. M. etal., J. Biol, Chem. 257, 1958-1964(1982) ; Jocye, C. M. and Steitz, T. A., Trends Biochem. Sci. 12, 288-292(1987)). 이에 비해 고온성 균주들로부터 생성되는 내열성 DNA 중합효소에 관한 연구는 상대적으로 적었으며, 대표적인 것이 더머스 아쿠아티커스(Thermus aquaticus) YT-1의 Taq DNA 중합효소이다(Lawyer, F. C. et al., J. Bio. Chem. 264, 6427-6347(1989)). 이러한 DNA 중합효소들은 분자 생물학 분야에서 DNA의 염기 서열 결정 및 염기 치환 반응(nick-translation)등 여러 용도로 광범위하게 이용되고 있다. 특히 최근 개발된 DNA 중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction, 약칭 PCR)은 DNA증폭을 비롯한 각종 유전병 진단에 유용하게 활용되고 있는데, 이 기술의 특징은 55~60℃의 프라이머 어닐링, 72℃에서의DNA 중합 반응 및 94℃에서의 주형 DNA 변성등 세단계 반응과정을 약 30회 정도 반복함으로써 목적 DNA 단편을 증폭시키기 때문에 고온에서 안정한 내열성 DNA 중합효소의 사용이 필수적이다(Erlich, H. A,. PCR Technology, 1989, StocktonPress, New York). 따라서 본 발명은 기존의 Taq DNA 중합효소와의 새로운 내열성 DNA 중합효소를 찾아내고 유전공학 기술에 의한 대량 생산이 가능하게 하여 보다 저렴한 가격으로 상기 효소의 다양한 활용을 가능하게 하는 것을 목적으로 하고 있다.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 효소공학 (H73)
고온성 균주인써머스써모필러스 HB27로부터 신규한 내열성 TOP DNA 중합효소 유전자를 분리해내고, 그의 뉴클레오티드 서열 및 TOPDNA 중합효소의 아미노산 서열을 밝혔으며, 상기 효소의 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후, 그에 의해 형질전환된대장균을 배양하여 TOP DNA 중합효소를 대량 생산하고, 이를 정제함으로써 본 발명을 완성하였다. 본 발명의 목적은 신규한 내열성 DNA 중합효소를 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 효소의 유전자를 포함하는 발현벡터 및 그에 의해 형질전환된 대장균을 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 목적은 상기 형질전환된 대장균을 배양하여 신규한 내열성 DNA 중합효소를 대량 생산하는 방법 및 생산된 중합효소를 효과적으로 정제하는 방법을 제공하는 것이다.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 효소공학 (H73)
본 발명은 고온성 균주인 더머스 칼도필러스 GK-24 로부터 분리·정제된 고온에서 활성이 큰 내열성 ADP-포도당 합성효소, 그의 제조방법 및 그의 아미노 말단과 내부에서 얻은 단백질 단편의 아미노산 서열에 관한 것으로서, 이들 ADP-포도당 합성효소를 이용하면 ADP-포도당을 경제적으로 얻을 수 있고 본 아미노산 서열을 통해 본 효소의 유전자를 얻는 것도 용이하다.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 효소공학 (H73)
[구성]더머스 칼도필러스(Thermus caldophilus)GK24로 부터 정제된93,000 내지 95,000달톤의 분자량을 갖는 DNA 중합효소인 TcaDNA 중합효소.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 효소공학 (H73)
본 발명은 고온성 균주인 더머스 칼도필러스 GK-24 로부터 분리·정제된 고온에서 활성이 큰 내열성 ADP-포도당 합성효소, 그의 제조방법 및 그의 아미노 말단과 내부에서 얻은 단백질 단편의 아미노산 서열에 관한 것으로서, 이들 ADP-포도당 합성효소를 이용하면 ADP-포도당을 경제적으로 얻을 수 있고 본 아미노산 서열을 통해 본 효소의 유전자를 얻는 것도 용이하다.
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- 2000-04-07
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생명과학 > 기타 유전자 공학
.유전자 발현정도 조절 소 베타-카제인 유전자및 형질전환된 대장균 .소 베타-카제인 유전자, 재조합 플라스미드, 형질전환대장균
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 기타 유전자 공학
항균성을 갖는 한국산 흑염소 유래의 락토페린및 이의 유전자에 관한 것으로, 한국산 흑염소의 유선으로 부터 정제된 락토페린은 염소의 락토페린과는 달리 항균력을 가진다.
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- 2000-04-07
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
.소의 베타 카제인 유전자, 하이브리드 인트론 및 인체 락토페린 유전자를 포함하는 발현벡터의 포유동물 수정란에 주입 형질전환동물 창제 및 락토페린 분리방법
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
.흰쥐의 베타카제인 유전자와 인체 성장호르몬 유전자를 포함하는 발현벡터, 및 이를 이용한 포유동물창제
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 발명은 인간 락토페린의 대량 생산 방법에 관한 것으로, 소의 베타-카제인 유전자와 인간 락토페린의 게놈(genomic) DNA를 함유한 플라스미드를 제작하여 상기 플라스미드로 포유동물을 형질전환시킨 후 형질전환된 동물의 유즙으로부터 인간 락토페린을 생산하는 본 발명에 의하면 인간 락토페린의 발현량이 현저히 증가하여 영양학적 및 의학적으로 유용한 인간 락토페린을 대량으로 생산할 수 있다.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 기타 생물공정·대사공학
유전자 주입된 소 수정란의 대량생산을 위한 체외배양 및 형질전환젖소 개발을 위한 수정란의 동결보존
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생명과학 > 동물자원
본 발명은 SINE 서열을 포함하는 형질전환율이 높은 포유동물세포용 발현 벡터 및 이를 이용한 형질전환 방법에 관한 것이다..
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 동물자원
흑염소 베타-카제인 유전자의 프로모터를 이용하여 인체성장호르몬을 포유동물의 유즙을 통하여 안정적으로 대량 분비하는 유선 특이적 발현 벡타.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 기타 세포·조직공학
.아칸토산 제조방법및 약학적 조성물, 인터루킨-1과 TNF-알파관련 질병치료제, 패혈증, 관절염, 류마티스, 강경변, 규폐증치료제
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 기타 세포·조직공학
본 발명은 인체 자연살상세포 (human natural killer cell)의 표적세포를 인식하는 단일클론항체 및 이를 생산하는 융합세포주에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 항종양 면역, 미생물에 대한 보호 면역, 골수이식시의 거부 반응 및 자가면역 질환 등에 관여하는 자연살상세포의 표적세포인 K562 세포를 인식하는 단일클론항체 및 이를 생산하는 융합세포주에 관한 것으로서, 상기 단일클론항체는 자연살상세포의 표적세포 파괴 및 세포 증식 등을 조절할 수 있다.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 기타 세포·조직공학
본 발명은 골수 스트로말 세포를 인식하는 단일클론항체 및 이를 생산하는 융합세포주에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 B 세포의 증식과 분화를 조절하는 골수 스트로말 세포를 다발성 골수종 환자에서 분리하여 쥐에 면역시킴으로 제조한 융합세포주 및 이로부터 생산된 골수 스트로말 세포를 인식하는 단일클론항체에 관한 것이다.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 기타 유전자 공학
. 인간 정상의 각질세포(keratinocyte)로 부터 새로운 단백질 탈인산화효소 k(protein phospahtase k) 유전자, 그 염기서열, 아미노산서열로 단백질 인산화의 가역적 장용을 통하여 각종 암을 포함한 세포내 신호전달이상 질병 치료및 예방
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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일반기술
생명과학 > 기타 유전자 공학
.인간의 정상피부의 각질세포 케라티노사이트로 부터 클로닝한 새로운 단백질 변이 인산화효소 유전자, 염기서열, 해독 효소단백질로 세포분열, 분화, 발생등을 조절하는 효소로, 신호전달이상 질병 예방, 치료
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- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2000-04-07
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