산업기술 통합검색
본 발명은 메탄올 자화효모인 한세눌라 폴리모르파에서보다 인체에 적합한 재조합 당단백질을 생산하기 위한 시스템을 개발하기 위한 것으로,한세눌라 폴리모르파에서 당화 과정 돌연변이주를 선별하거나 한세눌라 폴리모르파 당화 과정에 연관된 OCH1유전자 결손 변이주를 제작하여 당외쇄 합성에 의한 과당화가 방지된 균주를 개발하고 이를 재조합 단백질 발현 숙주로 이용하여 원형에 가까운 당쇄가 부착된 재조합 당단백질을 생산하는 방법을 제공하는 것이다○기술성 외래 당단백질의 과당화를 방지하여 재조합 당단백질 당쇄구조를 원형과 유사한 형태로 생산○사업성 메탄올 자화효모인 한세눌라 폴리모르파를 보다 유용한 범용 재조합 단백질 생산 숙주로 개발하기 위한 일환으로 과당화가 방지된 한세눌라 폴리모르파 DL-1유래의 변이주들을 개발
본 발명은 효모로부터 재조합 단백질을 효율적으로 생산하는 방법에 관한 것으로,효모 사카로마이세스 세레비지애 앱신계열의 프로테아제를 코딩하는 YPS6 또는 YPS7 유전자 결손을 포함한 앱신 다중결손 변이주를 제작하고,상기 변이들을 숙주로 하는 형질전환체를 배양하여 고농도 균체 배양시 재조합 단백질의 분해를 극소화함으로써 완전한 형태의 재조합 단백질을 고수율로 생산하는 방법을 제공한다○기술성효모 균주 고농도 균체 배양시 재조합 단백질 분해 방지/재조합 단백질 생산 증대 및 분리정제 공정 간소화○사업성효모 사카로마이세스 세레비시애 단백질 분해효소 앱신을 코딩하는 YPS6 또는 YPS7 유전자 결손을 포함한 앱신 다중 결손 변이주를 재조합 단백질 생산 숙주로 이용하면 고농동 균체 배양시 배양말기에 일어나는 앱신 6 또는 앱신7 활성에 의한 재조합 단백질의 절단을 현저하게 감소시킴으로써 완전한 형태의 재조합 단백질을 높은 수율로 분비생산할수 있어 효모를 이용한 재조합 단백질 대량 생산을 도모하는 생명공학산업에 매우 유용
본 발명은 효모로부터 인체 부갑상선 호르몬(hPTH)을 효율적으로 생산하는 방법에 관한 것으로 효모 아스파틱 단백질 분해효소 앱신1,2와 3에 대한 유전자 YPS1,YPS2와 YPS3가 파쇄된 효모 균주를 제작하여 인체 부갑상선 호르몬의 분해를 방지하여 완전한 형태의 부갑상선 호르몬을 고효율로 생산하는 방법을 제공한다○기술성본 발명은 효모 Saccharomyces cerevisiae로부터 인체 부갑상선 호르몬을 효율적으로 생산하는 방법에 관한 것으로 효모 아스파틱 단백질 분해효소 앱신1,2와 3에 대한 유전자 YPS1,YPS2와 YPS3가 파쇄된 효모 균주를 개발하여 재조합 인체 부갑상선 호르몬의 분해를 90%이상으로 방지하여 완전한 형태의 부갑상선 호르몬을 고효율로 대량 생산하는 방법을 제공한다. 본 발명은 고농도 배양말기에 일어나는 재조합 단백질의 분해에 YPS1외에도 YPS2와 YPS3가 관여됨을 최초로 규명하여 신규성이 있으며 아울러 선행 발명에서 미처 해결하지 못한 배양 말기의 분해문제를 성공적으로 해결하여 진보성이 있다○사업성인체 부갑상선호르몬을 골다공증 치료제로 개발하기 위해 미생물 발현 시스템을 이용하여 재조합 hPTH단백질을 대량 생산하는 연구가 국내외로 활발히 진행.그러나 효모에서 분비 생산된 재조합 hPTH는 효모 숙주자체의 단백질 분해효소에 의해 절단되는 문제가 있었다. 이를 해결하기 위해 본 발명자들은 YPS1유전자가 파쇄된 효모 균주를 제작하고 이를 이용하여 플라스크 배양시 hPTH 분해가 방지되어 완전한 형태의 hPTH를 고수율로 생산할 수 있는 방법을 개발
본 발명은 메탄올자화 효모 한세눌라 폴리모르팔부터 분비발현된 재조합 단백질의 분해를 방지함으로써 재조합 단백질을 효율적으로 생산하는 방법에 관한 것으로서,한세눌라 폴리모르파 아스파틱 프로테아제 계열의 앱신을 코딩하는 HpYPS1 유전자를 클로닝하고 이를 활용하여 HpYPS1 유전자가 결손된 한세눌라 폴리모르파 균주를 제작하고,상기 균주를 숙주로 하는 형질전환체를 배양하여 재조합 단백질의 분해를 극소화함으로써 완전한 형태의 재조합 단백질을 고수율로 생산하는 방법에 관한 것이다○기술성 재조합 당단백질의 분해 방지세포내 유전자 재조합을 이용한 특정 유전자의 파쇄○사업성 본 발명은 메탄올 자화효모인 한세눌라 폴리모르파를 보다 유용한 범용 재조합 단백질 생산 숙주로 개발하기 위한 일환으로 단백질 분해가 방지된 한세눌라 폴리모르파 DL-1 유래의 변이주를 개발
본 발명은 토양에서 분리된 웨스터디켈라 멀티스포라 균주의 배양액으로부터 분리 정제된,IV형 콜라게네이즈의 활성을 저해하는 신규 화합물,이의 제조방법 및 이를 포함하는 IV형 콜라게네이즈 활성 저해용 조성물에 관한 것으로,본 발명에 따라 웨스터디켈라 멀티스포라의 배양액으로부터 분리 정제된 신규 화합물3-(5-(헥사-2,4-디에닐리덴)-2-옥소-5,6-디하이드로-2H-피란-3-일)-프로피온산은 IV형 콜라게네이즈의 활성을 저해하는 작용이 우수하므로 및 종양의 예방 및 치료제로서 이용될 수 있다○기술성 본 발명은 웨스터디켈라 멀티스포라(Westerdykella multispora)균주의 배양액으로부터 분리된 IV형 콜라게네이즈의 활성을 저해하는 신규 화합물 및 이의 제조방법을 제공하는 것. 또한 상기 신규 화합물을 함유하는 IV형 콜라게네이즈 활성 저해용 조성물을 제공하는 것이다○사업성 본 발명은 IV형 콜라게네이즈 활성을 저해시킬 수 있으므로,암전이 및 종양의 예방 및 치료제로서 이용가능하며, 경구 또는 비경구 투여 가능하다
○본 발명은 유전자 변형 생물체(LMO,Living Modified Organism)을 검출하기 위한 DNA칩,칩을 포함하는 키트 및 키트를 이용한 진단 방법을 제공한다. 본 발명의 DNA칩을 이용하면 신속하고 정확하게 유전자 변형 생물체의 외래 유전자를 정성 및 정량적으로 검출할 수 있으므로,수입농산물의 통관 및 유전자 변형 작물 판정에 널리 활용될 수 있다.○기술성본 발명은 유전자 변형 생물체(LMO,Living Modified Organism)을 검출하기 위한 DNA칩,칩을 포함하는 키트 및 키트를 이용한 진단 방법을 제공한다.○사업성본 발명의 유전자 변형 생물체의 외래 유전자 서열을 가지는 탐침을 포함하는 유전자 변형 생물체를 진단용 DNA칩을 이용하여 유전자 변형 생물체의 정성 및 정량분석이 가능하고 동시에 여러 외래 유전자의 유무를 검사할 수 있어 신속한 진단을 할 수 있어 수입농산물의 통관 및 유전자 변형 작물 판정에 널리 활용될 수 있다.
○본 발명은 SYBR Green Ⅰ 염색제를 이용하는 실시간-PCR(real-time PCR)에 적합한 EPSPS(5-enol-pyruvyl-shikimate-3-phosphatesynthase)유전자 특이적 프라이머 쌍과 렉틴 유전자 증폭용 프라이머 쌍을 이용하여 유전자 변형 콩의 혼입률을 분석하기 위한 정량분석 방법,조성물 및 키트를 제공한다.○기술성본 발명은 SYBR Green Ⅰ 염색제를 이용하는 실시간-PCR(real-time PCR)에 적합한 EPSPS(5-enol-pyruvyl-shikimate-3-phosphatesynthase)유전자 특이적 프라이머 쌍과 렉틴 유전자 증폭용 프라이머 쌍을 이용하여 유전자 변형 콩의 혼입률을 분석하기 위한 정량분석 방법,조성물 및 키트를 제공한다. ○사업성본 발명의 EPSPS(5-enol-pyruvyl-shikimate-3-phosphatesynthase)유전자 특이적 프라이머 쌍과 렉틴 유전자 증폭용 프라이머 쌍을 이용할 경우,EPSPS도입된 옥수수,콩,감자,콩나물,물 등의 다양한 식물의 혼입률을 실시간 PCR을 통하여 효율적으로 정량할 수 있다.
본 발명은 MEMS (Micro Electro Mechanical System)소자를 이용한 초소형 핵산분리장치, 핵산분리방법 및 그 핵산분리장치의 제조방법을 제공한다. 본 발명에 따른 초소형 핵산분리장치는 초소형의 MEMS소자로 빗살모양의 전극을 이용하여 핵산을 포함하는 물질을 선택적으로 수집하며, 히터(Heater)과 고상 필터를 이용하여 수집된 물질을 파괴하고 핵산만을 선택적으로 결합시킴으로써 핵산을 포함한 샘플로부터 순수한 핵산만을 효과적인 추출하고 정제할 수 있다. ; 본 발명에 따르면, MEMS소자를 이용함으로써 샘플의 양과 외래물질에 의한 오염을 최소화하면서 높은 정도(Quality)의 핵산을 분리할 수 있다. 또한 고상분리법과 전기분극(Dielectrophoresis), 내부열원을 동시에 이용함으로써 핵산의 선택적 추출의 질을 향상시키고, 부가적인 화학약품에 의한 화학처리공정을 제거할 수 있다. 기판 위에 위치하여 열 발생과 열 검출에 사용되는 히터 및 센서부와, 상기 히터 및 센서부 위에 위치하여 전기장을 형성하는 전극부와, 상기 전극부 위에 위치하여 핵산의 결합을 위한 고상 필터부와, 상기 고상 필터부를 감싸며 용액의 혼합과 반응을 위한 공간을 형성하는 혼합반응 용기와, 상기 혼합반응 용기에 연결된 샘플 투입구 및 퇴출구를 포함하는 것을 특징으로 하는 초소형 핵산분리장치.
대전 분자의 공간 위치를 전자적으로 제어하는 방법 및, 장치가 개시된다. 개시된 방법은 반응 유니트내에서 대전 분자의 공간 위치를 제어하는 것에 관한 것인데, 복수개의 전극들이 배치되고, 전극 배치의 기하는 원형, 사각형 또는 다이아몬드 형상과 같은 폐쇄 시스템이다. 이러한 제어는 대전 분자의 이송뿐만 아니라 대전 분자의 개별적인 종들의 선택적인 분리로 확장된다. 본 발명은 핵산 혼성화, 핵산 증폭, 샘플 준비, 항체/항원 반응, 임상학적 진단 및, 생물 폴리머의 합성과 같은 분자 생물학 반응에서 유용하다. 기판상에 복수개의 외측 전극으로 둘러싸인 중앙 전극을 가진 반응 유니트내에서 대전 분자의 공간 위치를 제어하는 방법으로서, 상기 반응 유니트는 분자의 운동에 마찰 저항을 제공하는 매질로 충전되고, 상기 방법은, (1) 대전 분자를 상기 반응 유니트내에 배치하는 단계; (2) 전기장을 발생시키도록 소정 크기의 제 1 전압들을 중앙 전극과 복수개의 외측 전극들로부터 선택된 적어도 하나의 외측 전극의 한 세트(set)에 인가하는 단계; 및, (3) 대전 분자의 공간 위치를 제어하는 전기장을 회전시키도록 소정 크기의 제 2 전압들을 중앙 전극과 복수개의 외측 전극들로부터 선택된 적어도 하나의 외측 전극의 한 세트에 인가하는 단계;를 구비하고, 선택된 전극들에 인가된 전압에 의해 발생된, 반응 유니트에 걸친 순전하는 제로로 유지되는 것을 특징으로 하는 대전 분자의 공간 위치 제어 방법.
본 발명은 식물체에 여러 종류의 바이러스에 대한 복합 저항성을 부여하는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 동물 또는 효모, 바람직하게는 인간으로부터 유래한 이중가닥 RNA에 의해 활성화되는 단백질 인산화 효소(ds RNA-dependent protein kinase, 이하 PKR이라 한다) 유전자로 식물체를 형질전환 시킴으로써 ds RNA를 복제 중간체로 갖는 다양한 식물 바이러스에 대해 복합적인 저항성을 나타내는 식물체를 제조하는 방법을 제공한다. 아울러 본 발명의 방법은 동물 또는 효모의 유전자를 식물체에 도입하기 때문에, 바이러스 유래의 유전자를 도입하였을 때 생길 수 있는 재조합으로 인한 변형된 바이러스의 출현 위험성을 차단할 수 있으며, 식물체에 복합 바이러스 저항성을 부여하기 위한 기존의 방법과는 달리 식물체에 형태 및 생리적인 부작용을 유발하지 않는 장점을 가지므로, 유용식물의 기능을 최대화하면서 안정적으로 다양한 바이러스에 대해 저항성을 갖는 식물체를 제조하는 데 유용하게 이용될 수 있다. 이중가닥 RNA에 의해 활성화되는 단백질 인산화 효소(dsRNA-dependent protein kinase; PKR)를 암호화하는 유전자를 포함하는 식물형질전환용 재조합 벡터로 식물체를 형질전환 시킴으로써 식물체에 복합 바이러스 저항성을 부여하는 방법.
본 발명은 애기장대 ( Arabidopsis thaliana )에서 분리된 잎 수명 조절 유전자 ORE9, 상기 유전자의 돌연변이형으로서 식물의 노화와 관련된 각종 생리적, 생화학적 변화를 억제하여 식물의 수명을 연장하는 변이형 유전자 ore9 및 이들 유전자의 이용에 관한 것이다. 구체적으로, 잎 수명 조절 유전자 ORE9 은 693개의 아미노산으로 구성되는 ORE9 단백질을 암호화하는데, 상기 ORE9 단백질은 F-박스 모티프 (F-box motif)와 18개의 류신이 풍부한 반복 서열 (leucine-rich repeat)을 포함하며, F-박스 모티프를 통해 노화 개시에 관여하는 단백질의 상호 작용에 영향을 미침으로써 식물의 노화를 조절한다. 또한, 상기 ORE9 유전자의 변이형으로서 번역이 조기에 종료되어 야생형에 비해 류신 반복 서열이 짧은 단백질을 암호화하는 변이형 유전자 ore9 을 갖는 식물체는 야생형에 비해 잎이 수명이 평균 27% 이상 길고, 노화 촉진 호르몬을 처리한 후에도 수명이 연장된다. 따라서, 본 발명에서 제공되는 잎의 수명 조절 유전자 및 그 변이체를 이용하여 수명 연장을 통한 식물의 생산성 향상 및 저장 효율을 증대할 수 있으며, 식물의 수명 조절에 관련된 유전자 또는 식물 노화 억제 물질을 탐색하기 위한 생체 표지 개발에 상기 유전자들을 이용할 수 있다. 서열번호 2 의 아미노산 서열을 갖는 식물의 수명 조절 단백질 ORE9.
본 발명은 애기장대 ( Arabidopsis thaliana )에서 분리된 잎 수명 조절 유전자 ORE4 , 상기 유전자의 돌연변이형으로서 식물의 노화와 관련된 각종 생리적, 생화학적 변화를 억제하여 식물의 수명을 연장하는 변이형 유전자 ore4 및 이들 유전자의 이용에 관한 것이다. ; 본 발명에 따르면, 본 발명의 잎 수명 조절 유전자 및 그 변이형 유전자를 이용하여 수명 연장을 통한 식물의 생산성 향상 및 저장 효율을 증대할 수 있으며, 식물의 수명 조절에 관련된 유전자 또는 식물 노화 억제 물질을 탐색하기 위한 생체 표지 개발에 상기 유전자들을 이용할 수 있다. 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 식물의 수명 조절 단백질 ORE4.
본 발명은 식물의 개화시기를 조절하는 유전자 및 이를 이용한 식물의 개화시기 조절방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 애기장대로부터 분리된, 서열번호 1로 표시되는 식물의 개화 조절 유전자 COG 및 상기 COG 유전자를 식물 형질전환용 벡터에 정방향 또는 역방향으로 삽입한 후, 상기 벡터로 형질전환된 식물체에서 COG 유전자를 과발현시켜 식물체의 개화시기를 지연시키거나, COG 유전자의 발현을 억제하여 식물체의 조기 개화를 유도하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 COG 유전자 및 상기 유전자로부터 발현되는 COG 단백질은 식물의 개화관련 형질의 개선 및 타 식물체의 개화 조절 유전자의 탐색 등에 유용하게 이용될 수 있다. 또한, 상기 식물의 개화 조절 유전자 COG 를 이용하여 식물체를 형질전환시킴으로써, 식물의 조기 개화 및 왜성 현상을 유도하여 생육 기간을 단축하고 작물 생산량을 증대시킬 수 있다. 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 식물의 개화조절 단백질 COG.
본 발명은 식물의 잎의 수명을 조절하는 유전자 및 이를 이용한 식물의 수명 조절 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 애기장대로부터 분리된 서열번호 1로 표시되는 염기서열을 갖는 식물의 잎 수명 조절 유전자 ORE7 및 상기 유전자를 식물체내로 도입하여 과발현시킴으로써 식물의 노화를 지연시키는 수명 조절 방법에 관한 것이다. 본 발명의 식물의 잎 수명 조절 유전자 ORE7 을 이용하여 식물체를 형질전환시킴으로써 식물의 수명을 연장시켜 생산성 향상 및 저장 효율 증대 등을 도모할 수 있다. 또한, 본 발명의 ORE7 유전자 및 상기 유전자로부터 발현되는 ORE7 단백질은 식물의 노화 기작 연구, 노화 관련 유전자 또는 노화 억제 물질의 탐색 등에 유용하게 쓰일 수 있다.서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 단백질을 암호화하는 유전자를 식물체 내로 도입하여 과발현시킴으로써 식물의 노화를 지연시키는 것을 특징으로 하는 식물의 수명을 조절하는 방법.
본 발명은 식물의 노화 활성을 가지는 단백질, 이를 코딩하는 유전자, 상기 유전자를 포함하는 재조합 벡터, 및 상기 재조합 벡터로 형질전환된 대장균을 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 단백질을 이용한 식물의 노화 조절 물질의 탐색방법 및 식물의 노화 조절 유전자 또는 단백질의 탐색방법을 제공한다. 상기 식물의 노화 활성을 가지는 단백질은 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖거나 상기 서열과 95% 이상의 상동성을 가지고, 식물의 노화 활성을 가지는 단백질이다. 서열번호 2의 아미노산 서열로 표시되고, 식물의 노화 활성을 갖는 단백질.
본 발명은 식물의 잎 수명을 조절하는 유전자를 이용하여 식물의 노화를 지연시키는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 애기장대로부터 분리된, 서열번호 1로 표시되는 염기서열을 갖는 ORE8 유전자를 이용하여 식물체를 형질전환시킴으로써 식물의 노화를 지연시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 방법에 따라 ORE8 유전자를 이용하여 식물체를 형질전환시킴으로써 산화적 스트레스나 고농도의 염에 대한 식물의 저항성이 증진되고, 식물의 노화가 지연되어 식물의 생산성 향상 및 저장 효율 증대 등이 도모될 수 있다. 서열번호 2로 표시되는 아미노산 서열을 갖는 단백질을 암호화하는 유전자를 이용하여 식물의 노화를 지연시키는 방법.
본 발명은 DNA의 서열 특이적 재조합 방법을 개시한다. 구체적으로 본 발명은 장내 구균 용원성 파지 Φ FC1의 인테그라제 MJ1 효소와 그것의 기질인 att 서열을 이용한 DNA의 서열 특이적 재조합 방법을 개시한다.
본 기술은 인간 사이클린 B2 유전자와 항체 조제 및 이를 인간 조직이나 세포의 증식, 분열 및 암분화의 진단 및 치료에 이용하는 방법에 관한 것으로, 세포주기에서 세포분열을 조절하는 세포분열 촉진인자(M-phase/maturation promoting factor ; MPF)의 조절 서브유니트로 알려진 (1)인간 사이클린 B2 유전자 클론닝에 의한 분리 및 동정, (2) 이 유전자의 유전자 재조합법에 의한 발현벡타의 제작, (3) 발현벡타에 의해 생산된 인간 사이클린 B2 단백질의 정제 및 추출, (4) 이 단백질을이용하여 폴리클론 및 모노클론 항 인간 사이클린 B2 항체 제조, (5) 항 인간 사이클린 B2 항체를 이용한 암검사법에 관한 기술이다. 또한 본 기술의 인간 사이클린 B2 유전자는 인간 세포의 세포주기 및 증식을 연구하는데 있어서 귀중한 재료로 사용될 수 있을 뿐만 아니라 인간 정상 조직세포, 양성 암 조직세포, 악성 암 조직세포에서 세포증식도 및 암분화도를 명확하게 나타내므로 특히 양성암과 악성암을 구별할 수 있는 암진단 시약으로 사용된다. 본 기술의 인간 사이클린 B2 유전자와 단백질 그리고 항체는 정상세포, 양성 종양세포, 악성 암세포에서의 세포 증식도를 유전자 및 단백질 발현 수준에서 측정할 수 있으며, 기타 암세포의 역동성과 암의 진단, 예후판정, 전이 등의 검사방법에 사용될 수 있다. 또한 암 유전자 치료 및 항체이용 항암치료 등에 이용되어 의학발전에 크게 기여할 것으로 판단된다.
본 기술은 사이클로이눌로올리고사카라이드 프룩타노트란스퍼라제 효소를 생산하는 토양 유래의 신규 미생물과 이를 이용하여 사이클로프룩탄을 생산하는 방법에 관한 것이다.본 기술은 바실러스 폴리믹사(Bacillus polymyxa) MGL21 유래의 사이클로이눌로올리고사카라이드 플룩타노트란스퍼라제(Cycloinulooligosaccharide fructano transferase; CFTase) 효소 활성을 가지고 단백질을 이눌린으로부터 사이클로프룩탄(cyclifrutan;CF)을 생산하는 효소 공정에 활용하여 식품 폐자원으로부터 고부가가치의 당을 생산하는 효과를 제공하는 것이다.본 기술은 신규의 미생물 즉 바실러스 폴리믹사(Bacillus polymyxa) MGL21으로부터 분리한 신규한 과당전이효소 사이클로이눌로올리고사카라이드 프락타노트랜스페라제를 제공하는 효과가 있다.
본 발명의 헥소스아미니데이즈 효소 활성 저해 방법은 2-아세트아미도-1,2-디데옥시노지리마이신 첨가 등의 공정을 포함하며, 이에 따라 곤충 세포주에서 헥소스아미니데이즈 효소의 활성을 억제함에 따라 곤충 세포에서 발현되는 단순한 당잔기 구조를 복합 구조로 변경시킬 수 있다.