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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

중간엽 줄기세포로부터 연골세포를 분화시키는 방법 및 상기 방법에 의해 분화된 연골세포

중간엽 줄기세포로부터 연골화분화를 유도하기 위한 방법으로서 초음파를 파장범위 10㎑-100㎒, 출력강도 10-5000mW/㎠ 범위로 중간엽 줄기세포에 처치하여 중간엽 줄기세포가 초음파의 자극에 의해 연골화 분화유도가 증가될 뿐만 아니라 연골화 분화 유도물질로 잘 알려진 성장인자인 TGF-β3의 흡수를 증가시켜 연골화 분화에 특이적 기질의 발현이 증가하는 효과가 있다. 연골세포의 경우 물리적 기계적 자극들 중에서 특히 초음파는 조직내의 세포를 기계적으로 자극시킬 수 있는 수단으로 뼈의 성장, 골절, 근육조직의 치유 등 손상된 조직의 수복에 효과적이며, 골절 수복에 있어 초음파는 연골세포의 증식을 촉진하여 골 유합을 촉진시킨다. 또 type II collagen은 연골조직에 유일하게 존재하며 연골세포의 특정한 마커로 사용되는 데, 사람의 연골세포를 단층 배양시 저주파 초음파 처리하면 세포증식, 연골세포의 특징적인 type II collagem과 세포외기질 분비를 증가시키고, 초음파에 의해 활성화된 연골세포에서 골형성 관련 유전자인 TGF-β, 오스테오칼신, alkaline phosphatase, α(I)-procollagen gene의 발현보다 단백당(proteoglycan)이나 제2교원질 등 연골 형성 유전자의 발현을 상승시켜 연골구조를 유지하고 있는 교원질 망을 보호함으로써 연골 파괴나 분해를 방지하는 데 효과가 있다. 이에 초음파의 연골조직 생성효과가 연골세포의 직접적인 자극효과 외에 중간엽 줄기세포로부터 연골세포로의 분화를 촉진할 가능성을 제시한 방법이다. 분화유도에 성장인자인 TGF-β를 처리하여 연골화 분화에 특이적 기질인 제2교원질(연골세포의 특정한 마커로 사용됨)이 발현되고, 초음파 치료기로부터 발생되는 저강도 초음파로 물리적 자극을 주면 연골세포로의 분화를 유도하는 배양환경을 제공하여 연골세포에 특이적인 제2교원질과 세포외 기질인 당단백의 합성을 증가시킴으로써 연골화 분화유도가 촉진된다. 즉 종래 고전적 방법 외에 기계적 자극에 의해 연골조직과 비슷한 물리적․기계적 물성을 개선시킴으로써 연골세포로 분화가 촉진된다.초음파 치료기를 이용하여 초음파를 중간엽 줄기세포에 처치하여 연골화 분화에 유리한 삼차원 배양 환경에서 다양한 조직으로 분화할 수 있는 잠재력을 가진 중간엽 줄기세포를 연골세포로 분화되도록 유도하는 방법이다. 연골조직의 재생 시 건강한 연골조직을 재생하기 위해 중간엽 줄기세포로부터 연골세포로 분화시키는 간단하면서도 비용이 저렴한 유도 방법이다. 연골화 분화 유도물질로 잘 알려진 성장인자인 TGF-β3의 흡수를 증가시킬 수 있는 분화 유도방법이다.초음파 처리에 의해 중간엽 줄기세포로부터 연골세포로 분화시키는 간단하면서도 저렴한 비용으로 연골세포를 분화시킬 수 있다. 본 방법에 의해 연골화 분화 유도물질로 잘 알려진 성장인자인 TGF-β3의 흡수를 증가시킬 수 있어 연골세포의 분화를 더욱 촉진하는 우수한 효과가 있다. 또 중간엽 줄기세포로부터 연골세포를 용이하게 분화 유도할 수 있으므로 연골재생효과를 더욱 상승시킬 수 있다.

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인하대학교
등록일
2004-04-10
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

Nurr1 과발현에 의한 도파민성 신경세포의 분화방법

본 연구는 흰쥐태아의 뇌 조직에서 신경줄기세포를 분리하고 배양한 후 도파민분화 관련유전자인 Nurr1을 retro-viral 시스템을 이용하여 과발현시켜 도파민성 신경세포로 분화를 유도하였다. AA와 B27 supplement를 같이 처리하였을 때 전체 세포 중 최대 80%까지 도파민성 신경세포로 분화되었으며, 탈 분극자극에 의하여 분화된 도파민성 신경세포로부터 도파민의 분비가 의미있게 증대하였다. Nurr1 유전자를 과발현시킨 세포를 파킨슨병 모델쥐에 이식하였을 때 파킨슨병의 증상이 완화되었으며 이식된 세포가 적절히 정착하고 잘 분화하였다. 이 결과는 nurr1 유전자 과발현만으로 기능성 도파민성 신경세포분화가 유도되었다는 것을 의미하며 nurr1에 의해 도파민 합성의 key enzyme인 tyrosine hydroxirase (TH)의 발현은 유도되나 도파민성 신경세포로 분화가 유도되지 않는다는 연구(Sakurada, K. et.al, 1999,Development) 와 nurr1에 의한 도파민성 신경세포로의 분화에는 성상세포로부터 분비된 물질이 필수적이라 하는 연구(Wagner, J. et.al, 1999, Nat. Biotechnol.)와 비교되는 결과라 할 수 있다.본 기술은 신경 줄기세포에 Nurr1을 처리하여 신경 줄기세포를 도파민성 신경세포로 분화시키는 방법이다.또한, Nurr1 유전자를 신경 줄기세포에서 발현시켜 파킨슨씨병을 치료하는 방법을 제공한다. 본 기술에 있어서, 신경 줄기세포는 어떠한 태생 일수나 뇌부위에서 얻어진 것에도 적용될 수 있으나, 중뇌(ventral midbrain), 대뇌 피질(cortex) 또는 측면 신경절 융기(lateral ganglionic eminence)(줄무늬체 원기(striatal anlage))에서 분리한 신경 줄기세포를 사용하는 것이 바람직하며, 배아의 중뇌, 대뇌 피질 또는 측면 신경절 융기에서 분리한 것을 사용하는 것이 더욱 바람직하다. 또한, 사용 가능한 동물로는 인간을 포함한 모든 포유동물이 될 수 있다. 본 신경줄기세포는 태생 12일(embryonic day 12, 'E12'), 태생 14일('E14') 또는 태생 16일('E16')이 되는 랫트의 배아 중뇌, 배아 대뇌 피질 또는 측면 신경절 융기에서 분리한 신경 줄기세포를 사용하였다.

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한양대학교
등록일
2004-06-11
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

형광 Embryonic Stem Cell 테스트

일반적 형광 이미지 분석은 광합성 식물의 형광 유전자 분석을 통해 특정 환경에 대한 식물의 반응을 분석하기 위한 사용법이다. 그러나 현재 본 추적 기술은 과학자들에게 외과적인 처리 없이 신체에 영향을 끼치는 잠재적인 약의 효과에 대해 관찰할 수 있도록 개발되었다. 예를 들어, 항암 유전자에, 유전자 조작이 성공적으로 이루어졌는가를 알기 위해 발광유전자를 삽입시킬 수 있다. 따라서 본 기술을 이용하여 미래에 수술 시에 암조직을 제거하는 외과의사들을 도울 수 있는 미래 지향적 기술 인 것으로 사료되고 있다. 그러나 현재까지 이들 기술의 이용은 많은 경제적 부담과 시간적 소모로 인해 매우 미흡하다.본 기술은 쥐의 embryonic stem (ES) 세포에서 본 형광 단백질을 적용함으로써 각 조직의 특이 프로모터 조절 하에서GFP(녹색 형광 단백질) report 유전자를 발현시켜 다른 조직에 ES 세포를 분화시킴을 통해 녹색형광을 유도하여 이를 확인하는 기술개발이다. 형광 정도가 정확하게 조직 발달에 대한 marker로 나타나고, 이를 쉽게 측정할 수 있도록 제작 된 것이다. 본 기술은 기존의 고 비용으로 많은 처리량을 사용할 수밖에 없었던 것을 저가의 비용으로 이용할 수 있도록 개발하였고, 이를 수정(clinic)하는 시간 또한 단축시킴으로써 embryo cell의 유전적 분석에 실리적으로 이용될 전망이다.

보유기관
한국과학기술연구원
등록일
2004-07-07
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

스탓3 활성화 줄기세포

유전적 변형 또는 단백질 전달을 통해 스탓3의 활성형을 발현하기 위해 변형된 줄기세포와 스탓3의 활성형을 발현하는 세포로 동시배양된 줄기세포는 생체 외 증폭을 증가시키고, 대조군에 비해 줄기세포의 자가 재생산의 수적 증가에 의해 동반되는 생체 내 재생을 증진시킨다.줄기세포 치료는 많은 종류의 치료 불가능한 질환들에 대한 새로운 의학적인 접근이다. 두 종류의 줄기세포인 성체줄기세포와 배아 줄기세포가 조직의 재생을 위해 사용될 수 있다. 탯줄혈액의 줄기세포와 골수기원의 줄기세포, 췌장줄기세포나 간 줄기세포 등을 포함하는 성체 줄기세포는 특정조직에서 얻을 수 있는 수가 매우 제한되어 있다.다분화능을 가진 성체 줄기세포는 스스로 자가 재생산하는 능력과 다계열 분화를 할 수 있는 능력을 갖고 있다. 하지만 이러한 자가 재생산이나 성체 줄기세포의 증폭을 조절하는 분자적인 기전(molecular mechanism)은, 특히 조혈모세포의 경우, 잘 알려져 있지 않다.본 발명은 자가 재생산을 증가시키며 시험관내 및 생체내 줄기세포의 증가를 통해 조직 및 장기의 재생을 촉진하는 방법을 지향한다. 줄기세포에서의 스탓3 기능의 증가를 통해 줄기세포는 미분화 줄기세포의 수적증가를 동반한 높은 자가 재생산능력과 증가된 재생능력을 보인다.줄기세포 내로 스탓3 유전자의 활성형(스탓3-C)을 이입하거나 이러한 단백질(His-TAT-STAT3-C 융합단백질)의 전달을 통해 증가된 스탓3 활성은 줄기세포의 증식이나 재생능력을 증가시키는 데 유사한 효과를 보인다.그러므로 줄기세포의 증폭과 재생능력의 증가는 유전자치료적 접근이나 단백 질치료를 통해서 얻을 수 있다.줄기세포의 증식능력의 이러한 증가는 스탓3의 활성형을 발현하는 중간엽 줄기세포의 지지세포층과 동시배양을 통해서도 얻을 수 있다.

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가톨릭대학교
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

중간엽 줄기세포의 분화조절 조성물 및 이를 이용한 분화촉진방법

본 발명은 중간엽 줄기세포(MSC)의 분화조절 조성물에 대한 것이다. 본 발명에 따르면, 중간엽 줄기세포(MSC)의 골분화유도시 Toll like receptor의 리간드인 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide, LPS)와 펩티도글리칸(peptidoglycan,PGN), poly I:C, CpG motif(ODN2006, ODN2216)의 처리와 항산화화합물인 케르세틴(quercetin)의 분화 전처리는 중간엽 줄기세포에서 골, 지방 및 혈관내피 세포분화유도효과를 조절함을 알 수 있다. 따라서 이들 조성물에 의하여 중간엽 줄기세포의 분화가 조절되는 것을 바탕으로 분화촉진에 관련하는 조성물을 제조하여 분화유도제를 이용한 세포재생기술개발에 이용할 수 있다.본 발명에 따르면 인체 중간엽 줄기세포 (MSC 포함)에서 Toll likereceptor의 리간드인 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide, LPS)와 펩티도글리칸(peptidoglycan, PGN), poly I:C의 분화유도시 처리와 케르세틴(quercetin)의 전처리는 골세포로의 분화를 현저히 촉진하는 효과를 보임을 알 수 있다. 따라서 이들 약물에 의해 골세포로의 분화가 촉진되는 기전을 바탕으로 분화유도제를 제조하여 골질환 치료제 개발에 이용할 수 있다. 또한 Toll like receptor의 리간드인CpG motif(ODN2006, ODN2216)와 케르세틴(quercetin)이 혈관내피세포로의 분화를촉진함을 알 수 있어, 이들 약물에 의한 기전을 바탕으로 혈관질환치료제 개발에이용할 수 있다.즉, 본 발명은 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide, LPS), 펩티도글리칸(peptidoglycan, PGN), poly I:C 등 Toll-like receptor(TLR) 작용물질과 케르세틴(quercetin) 계통약물을 골재생 및 골관련 질환의 치료용도로 제공할 수 있다. 또한 CpG motif(ODN2006)와 케르세틴(quercetin) 유도약물을 혈관재생 및 혈관관련질환의 치료용도로 제공할 수 있다.

보유기관
부산대학교
등록일
2006-05-18
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

지방세포 분화 조절기능을 갖는 PBR리간드 및 그유도체 화합물, 및 이를 함유하는 지방세포 분화 조절용조성물

본 발명은 중간엽 줄기세포(MSC)에서 발현되고 지방세포 분화와 관련된 것이 처음으로 밝혀진 말초형 벤조디아제핀 리셉터(Peripheral type benzodiazepine receptor: PBR) 단백질, 이를 이용하여 스크리닝된 지방세포 분화 억제기능을 갖는PBR 리간드 및 그 유도체 화합물, 및 이를 함유하는 지방세포 분화 억제용 조성물에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 인체 중간엽줄기세포에서 PBR은 기질세포의 증식을 억제하면서 지방세포로의 분화를 억제하는 효과를보임을 알 수 있다. 따라서, PBR에 의해 지방세포로의 분화가 억제되는 기전을 바탕으로 PBR 리간드 유도체 약물을 제조하여 지방분화유도제를 이용한 지방조직재생기술 및 비만 예방 및 치료제 개발에 이용할 수 있다.본 발명에 따르면 인체 기질줄기세포(MSC 포함)에서 PBR은 기질세포의 증식을 억제하면서 지방세포로의 분화를 억제하는 효과를 보임을 알 수 있다. 따라서, PBR에 의해 지방세포로의 분화가 억제되는 기전을 바탕으로 PBR ligand 유도체 약물을 제조하여 비만 예방 및 치료제 개발에 이용할 수 있다. 즉, 본 발명은 PBR ligand 유도체 약물이 지방조직재생및, 비만 또는 비만 관련 질환의 예방 및 치료에서의 그 용도를 제공할 수 있다. 또한 비만 또는 비만 관련 질환의 예방 및 치료 방법, 체중감소를 촉진하거나 보존하는 방법과 이와 관련된 PBR ligand 유도체 화합물의 용도를제공할 수 있다.

보유기관
부산대학교
등록일
2006-05-18
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

체세포 핵치환 복제수정란의 대량 생산 방법

본 발명은 핵이 제거된 성숙된 난자와 분화가 이루어진 체세포 유래 핵을 전기자극에 의해 융합하고 1~6시간 정도 난자의 재구성 시기를 부여한 다음 수득된 체세포 핵치환 복제수정란에 2차 전기자극을 주어 활성화시킴으로써, 핵치환 복제수정란이 착상 전단계인 부화 배반포기까지 효과적으로 발생할 수 있게 하는 체세포 핵치환 복제수정란의 대량생산방법에 관한 것이다. 따라서, 이러한 본 발명에 따르면 아직까지 성공하지 못한 돼지 복제의 필수적인 단계인 착상단계로 진입할 수 있는 결정적인 방법으로 활용될 수 있을 뿐만 아니라, 인공장기용 형질전환동물의 개발하는 데에도 활용될 수 있는 효과가 있다.○기술성 본 발명은 돼지 체세포 복제 수정란을 생산함에 있어 재구성 난자의 활성화 유기시 기존에는thimerosal/dithiothreitol 처리, 전기자극에 의한 융합 및 활성화를 동시에 유기하는 방법 등을 사용하였으나, 본 건에서는 전기자극에 의한 융합 후 1~2시간째에 재차 전기자극에 의한 새로운 활성화법을 개발하였다. 본 실험 방법에 따른 핵치환 난자의 배반포 단계까지의 발달율은 10.7%였으며, 이들 배반포의 평균 세포수는 30.4 ±10.4개로써, 기존 보고 된 5%미만의 발달율 및 15개 미만의 세포수 보다 월등히 뛰어난 결과로 보여 주었다. 이러한 발명은 아직 세계적으로 성공되고 있지 못하고 있는 체세포복제의 생산을 가능케 하고 인공장기용 형질전환돼지의 개발을 촉진할 것이다.○사업성 돼지 체세포를 이용하여 돼지를 복제하는 방법으로서, 향후 시장 진입 시 우수한 경쟁력을 확보할 수 있으며, 이에 따른 고부가가치 창출을 도모할 수 있다.

보유기관
한국생명공학연구원
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

인간 배아줄기세포 증식 측진 인간 태반기질세포 생산 및인간 배아줄기세포 증식배양 기술

본 기술개발의 목적은 정상 산모로부터 정상 분만 후 제공자에 해가 없이 채집 가능하면서 추가적 비용 없이 충분한 공급이 가능한 인간 태반기질세포를 지지세포로 이용하여 인간 배아 줄기세포의 증식배양 효과가 동물 유래 지지세포와 비견되거나 우월함을 증명함으로써 보다 안전하고 효율적으로 인체에 적용할 수 있는 인간 배아 줄기세포 증식배양 기술을 개발함에 있다. 이를 위하여 출원인 등은 인간 태반기질세포를 지지세포 적용한 인간 배아 줄기세포의 증식배양을 시도하면서 그를 쥐 유래 STO 세포를 지지세포로 증식배양한 인간 배아줄기세포와 비교하고 면역화학염색, RT-PCR, 그리고 염색체, 유전자 지문 분석 등을 통하여 증명하였다.본 기술 발명은 인간 배아 줄기세포의 증식배양 산물을 실제 인간의 세포치료를 위하여 매우 유용하게 응용될 수 있다.본 발명으로 정상 인간 태반기질세포가 인간 배아줄기세포의 증식배양을 위한 지지세포로 탁월한 기능을 나타냄을 확인할 수 있다. 또한 상기 인간 태반기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하면서도 효율적으로 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포를 생산할 수 있으리라고 기대된다.본 발명으로 정상 인간 태반기질세포가 인간 배아줄기세포의 증식배양을 위한 지지세포로 탁월한 기능을 나타냄을 확인할 수 있다. 또한 상기 인간 태반기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하면서도 효율적으로 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포를 생산할 수 있으리라고 기대된다.

보유기관
고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

인간 배아줄기세포의 배아체 분화를 위한 인간태반기질세포 생산 및 배아체 분화배양 기술

본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 배아체(embryoid bodies) 생산을 목적으로 분화배양 시 지지세포(feeder cells)로 인간 태반기질세포(human placenta stromal cells)를 적용시키는 기술에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 인간 배아줄기세포로부터 배아체 생산을 위한 지지세포로 인간 태반기질세포를 사용한 경우 기존의 쥐 유래 지지세포(STO cells)를 적용한 경우보다 그 증식배양 효율은 비슷하거나 매우 양호함을 증명함으로써 인간 배아줄기세포로부터 배아체 생산을 위한 분화 배양을 위하여 인간 태반 기질세포를 적용시키는 본 기술은 인간 배아 줄기세포 분화배양 산물들의 실제 세포치료에 유용하게 응용될 수 있다.본 발명으로 정상 인간 태반기질세포가 인간 배아줄기세포로부터 분화배양을 통한 배아체생산을 위한 지지세포로 탁월한 기능을 나타냄을 확인할 수 있다. 또한 상기 인간 태반기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하면서도 효율적으로 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포 유래 배아체를 생산할 수 있으리라고 기대된다.본 발명으로 정상 인간 태반기질세포가 인간 배아줄기세포로부터 분화배양을 통한 배아체생산을 위한 지지세포로 탁월한 기능을 나타냄을 확인할 수 있다. 또한 상기 인간 태반기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하면서도 효율적으로 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포 유래 배아체를 생산할 수 있으리라고 기대된다.

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고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

인간 배아줄기세포 증식 측진 인간 골수기질세포 생산 및 인간 배아줄기세포 증식배양 기술

본 발명은 인간 배아 줄기세포의 증식배양을 위한 지지세포(feeder cells)로 인간 골수기질세포(human bone marrow stromal cells)를 적용시키는 기술에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 인간 배아 줄기세포을 위한 지지세포로 인간 골수기질세포를 사용한 경우 그 증식배양 효율은 양호함을 증명함으로써 인간 배아줄기세포 증식배양을 위하여 인간 골수기질세포를 적용시키는 본 기술은 인간 배아 줄기세포 증식배양 산물들의 실제 세포치료에 유용하게 응용될 수 있다.본 발명으로 정상 인간 골수기질세포가 인간 배아줄기세포의 증식배양을 위한 지지세포로 역할을 할 수 있음을 확인할 수 있다. 상기 인간 골수기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하게 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포를 생산할 수 있으리라고 기대된다.본 발명으로 정상 인간 골수기질세포가 인간 배아줄기세포의 증식배양을 위한 지지세포로 역할을 할 수 있음을 확인할 수 있다. 상기 인간 골수기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하게 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포를 생산할 수 있으리라고 기대된다

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고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

인간 배아줄기세포의 배아체 분화를 위한 인간골수기질세포 생산 및 배아체 분화배양 기술개발

본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 배아체(embryoid bodies) 생산을 목적으로 분화배양 시 지지세포(feeder cells)로 인간 골수기질세포(human bone marrow stromal cells)를 적용시키는 기술에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 인간배아 줄기세포로부터 배아체 생산을 위한 지지세포로 인간 골수기질세포를 사용한 경우 그 증식배양 효율이 양호함을 증명함으로써 인간 배아줄기세포로부터 배아체 생산을 위한 분화 배양을 위하여 인간 골수 기질세포를 적용시키는 본 기술은 인간 배아 줄기세포 분화배양 산물들의 실제 세포치료에 유용하게 응용될 수 있다.본 발명으로 정상 인간 골수기질세포가 인간 배아줄기세포로부터 분화배양을 통한 배아체생산을 위한 지지세포로 역할을 할 수 있음을 확인할 수 있다. 또한 상기 인간 골수기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하게 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포 유래 배아체를 생산할 수 있으리라고 기대된다.본 발명으로 정상 인간 골수기질세포가 인간 배아줄기세포로부터 분화배양을 통한 배아체생산을 위한 지지세포로 역할을 할 수 있음을 확인할 수 있다. 또한 상기 인간 골수기질세포는 기존 기술인 쥐 배아 섬유아세포를 이용하는 경우보다 안전하게 인체에 적용할 수 있는 인간 배아줄기세포 유래 배아체를 생산할 수 있으리라고 기대된다.

보유기관
고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

인간 배아줄기세포 및 배아체로부터 조혈모세포로의 분화를위한 인간 태반기질세포 생산 및 인간 배아줄기세포 및배아체로부터 조혈모세포로의 분화배양 기술

본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 제조된 배아체를 인간 태반기질세포와 복합배양함으로써 CD34+38- 인간 조혈모세포로의 분화를 촉진시키는 기술에 관한 것이다. 본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 5일간 분화된 배아체를 정상 인간 태반기질세포와 복합배양한 경우에 현저하게 CD34+38- 인간 조혈모세포로의 분화를 촉진시킴을 증명함으로써 본 기술은 인간 배아 줄기세포로부터 조혈모세포의 분화/ 증식 촉진을 통하여 세포 치료를 위한 면역세포 공급 및 인공 혈액의 생산에 유용하게 응용될 수 있다.본 발명으로 인간 태반기질세포가 인간 배아줄기세포 및 배아체로부터 조혈모세포로의 분화를 촉진함을 확인할 수 있었다. 특히 인간 유래 지지세포를 사용한 연구, 발명으로는 처음으로 인간 태반기질세포가 인간 배아줄기세포 자체로부터 조혈모세포로의 분화를 촉진함을 증명하였다. 뿐만 아니라 배아체와의 복합 배양에서는 그 효율이 18.47%, 7.43%로 성정촉진인자를 사용하지 않은 점을 감안하면 매우 높은 분화효율을 보이고 있음도 확인할 수 있었다. 결국 상기 인간 태반기질세포는 동물 유래 지지세포를 이용하는 경우보다 안전하게 인체에 적용할 수 있는 조혈모세포를 생산할 수 있으리라고 기대된다. 본 기술 발명은 특히 세포 치료에 필요한 혈액세포 생산 및 인공 혈액의 생산에 매우 유용하게 응용될 수 있을 것이다.

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고려대학교
등록일
2008-04-11
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

안티센스 텔로머라제를 생산하는 아데노바이러스 및 이를이용한 조혈모세포의 증식 및 분화 방법

본 발명은 조혈모세포의 자가갱신(self-renewal)과 관련이 있는 텔로머라제 효소 활성의 억제가 가능한 안티센스를 생산하는 아데노바이러스 및 이를 조혈모세포 분화, 증식 촉진에 사용하는 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 조혈모세포를 비롯한 줄기세포에서 자가갱신을 위하여 필수적인 텔로머라제의 활성 억제가 가능한 아데노바이러스 벡터와 그의응용방법에 관한 것으로서, 본 발명의 아데노바이러스 클론 Ad-OA는 조혈모세포의 분화/증식 촉진을 통하여 세포 치료를위한 면역세포 공급 및 인공혈액의 생산에 유용하게 응용될 수 있다.이상 설명한 바와 같이, 본 발명의 아데노바이러스 발현 벡터 및 이로부터 얻은 바이러스 클론 Ad-OA 는 조혈모세포의 증식, 분화를 유도하는데 탁월한 효과를 나타냄을 확인할 수 있다. 또한 상기 아데노바이러스 클론은 다양한 중합효소 연쇄반응 등을 수행한 결과 증식성 변이 바이러스를 전혀 만들어내지 않으므로 안전하고 용이하게 사용될 수 있기 때문에 난치성 질환을 대상으로 하는 면역세포를 이용한 세포치료를 위한 면역세포의 생산 및 인공 혈액의 생산에 상당한 기여를 할수 있으리라고 기대된다. 그리고, 본 발명의 아데노바이러스 Ad-OA 는 기존의 안티센스 올리고머에 비해 독성이나 부작용이 적은 반면 기존의 안티센스 올리고머와 거의 같은 효과를 내는 것으로 생각되어 매우 우수한 안전성을 나타낸다.

보유기관
고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

텔로머라제 억제 siRNA 발현 벡터 및 이를 이용한유전자 치료제

본 발명은 종양 발생 및 줄기 세포 분화와 관련있는 텔로머라제 효소 활성을 RNAi 기술을 이용하여 조절 가능한 텔로머라제 억제 siRNA 발현 벡터 및 이를 이용한 유전자 치료제에 관한 것이다.구체적으로, 본 발명은 90 % 이상 종양 및 줄기세포에서 그 활성이 보고되는 텔로머라제의 활성 억제가 가능한 유전자 치료 벡터와 그의 응용방법에 관한 것으로서, 본 발명의 플라스미드 벡터는 다양한 종양 치료 및 줄기세포 분화조절에 유용하게 사용될 수 있다.이상 설명한 바와 같이, 본 발명의 siRNA 발현 벡터는 암세포 및 줄기 세포의 텔로머라제 활성의 조절이 가능하고 이로써암세포를 사멸시키거나 성장을 억제시키거나 줄기세포의 분화조절에 이용이 가능하다. 또한 상기 발현 벡터는 바이러스벡터에 의한 부작용이 없고 인체 게놈 중 유사 부위가 존재하지 않아 텔로머라제 특이적 활성 억제가 가능하다. 본 발명의siRNA 발현 벡터는 기존의 안티센스 올리고머나 바이러스 벡터에 비해 독성이나 부작용이 적은 반면 기존의 안티센스 올리고머보다 월등하게 우수한 효과를 내는 것으로 생각되어 항암 유전자 요법이나 줄기세포 분화 조절에 사용하는 경우 매우 우수한 안전성 및 효과를 나타내게 된다.

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고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

안티센스 텔로머라제를 생산하는 아데노바이러스 및 이를이용한 배아줄기세포로부터 조혈모세포의 분화 유도 및증식 방법

본 발명은 조혈모세포의 자가갱신(self-renewal)과 관련이 있는 텔로머라제 효소 활성의 억제가 가능한 안티센스를 생산하는 아데노바이러스 및 이를 조혈모세포 분화, 증식 촉진에 사용하는 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 조혈모세포를 비롯한 줄기세포에서 자가갱신을 위하여 필수적인 텔로머라제의 활성 억제가 가능한 아데노바이러스 벡터와 그의응용방법에 관한 것으로서, 본 발명의 아데노바이러스 클론 Ad-OA는 인간 배아 줄기세포로부터 조혈모세포로의 분화/ 증식 촉진을 통하여 세포 치료를 위한 면역세포 공급 및 인공혈액의 생산에 유용하게 응용될 수 있다이상 설명한 바와 같이, 본 발명의 아데노바이러스 발현 벡터 및 이로부터 얻은 바이러스 클론 Ad-OA 는 인간 배아 줄기세포로부터 조혈모세포로의 분화를 유도하고, 조혈모세포의 증식, 분화를 유도하는데 탁월한 효과를 나타냄을 확인할 수있다. 또한 상기 아데노바이러스 클론은 다양한 중합효소 연쇄반응 등을 수행한 결과 증식성 변이 바이러스를 전혀 만들어내지 않으므로 안전하고 용이하게 사용될 수 있기 때문에 인간 배아 줄기세포로부터 조혈모세포의 안전한 분화, 증식 유도를 통하여 난치성 질환을 대상으로 하는 면역세포를 이용한 세포치료를 위한 면역세포의 생산 및 인공 혈액의 생산에 상당한 기여를 할 수 있으리라고 기대된다. 그리고, 본 발명의 아데노바이러스 Ad-OA 는 기존의 안티센스 올리고머에 비해 독성이나 부작용이 적은 반면 기존의 안티센스 올리고머와 거의 같은 효과를 내는 것으로 생각되어 매우 우수한 안전성을 나타낸다.

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고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

인간 골수기질세포를 이용한 인간 배아체로부터조혈모세포로의 분화 촉진 방법

본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 제조된 배아체를 인간 골수기질세포와 복합배양함으로써 CD34+45- 인간 조혈모세포로의 분화를 촉진시키는 기술에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 5일간 분화된 배아체를정상 인간 골수 기질세포와 복합배양한 경우가 배아줄기세포 자체를 정상 인간 골수 기질세포와 복합배양한 경우나 배아체 자체를 계속 분화시킨 경우보다 매우 현저하게 CD34+45- 인간 조혈모세포로의 분화를 촉진시킴을 증명함으로써 본기술은 인간 배아 줄기세포로부터 조혈모세포의 분화/ 증식 촉진을 통하여 세포 치료를 위한 면역세포 공급 및 인공혈액의생산에 유용하게 응용될 수 있다.이상 설명한 바와 같이,본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 제조된 배아체를 인간 골수기질세포와 복합배양함으로써CD34+45- 인간 조혈모세포로의 분화를 촉진시키는 기술에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 인간 배아 줄기세포로부터 5일간 분화된 배아체를 정상 인간 골수 기질세포와 복합배양한 경우가 배아줄기세포 자체를 정상 인간 골수 기질세포와 복합배양한 경우나 배아체 자체를 계속 분화시킨 경우보다 매우 현저하게 CD34+45- 인간 조혈모세포로의 분화를 촉진시킴을 증명함으로써 본 기술은 인간 배아 줄기세포로부터 조혈모세포의 분화/ 증식 촉진을 통하여 세포 치료를 위한 혈액세포 공급 및 인공혈액의 생산에 유용하게 응용될 수 있을 것이다. 또한, 본 발명으로 정상 인간 골수 기질세포가 인간배아체로부터 비롯한 배아체로부터 조혈모세포로를 분화 촉진을 유도하는 탁월한 효과를 나타냄을 확인할 수 있다. 또한상기 인간 골수 기질세포는 기조 기술인 쥐의 골수 기질세포를 이용하는 경우보다 안전하게 인체에 적용할 수 있는 조혈모세포를 생산할 수 있으리라고 기대된다.

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고려대학교
등록일
2007-03-15
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

간엽 줄기세포를 신경세포로 분화시키는 방법

본 발명은 염기성 나선-고리-나선(basic helix-loop-helix, bHLH) 계열의 전사인자(transcription factor)를 이용함으로써 간엽 줄기세포(mesenchymal stem cells)를 신경세포로 분화(transdifferentiation)시키는 방법 및 상기 간엽 줄기세포로부터 분화(transdifferentiation)되는 신경세포(neural cells)를 유효성분으로 하는 신경 질환에 대한 세포 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따라 간엽 줄기세포로부터 분화 및 증식된 신경세포는 파킨슨씨병, 알쯔하이머, 뇌졸중, 국소빈혈 등의 뇌신경계 질환과 척수손상에 의한 장애 등을 치료하기 위한 세포 대체 요법과 유전자 치료요법에 이용되거나, 신약개발에 있어 약물효과 검정 또는 각종 연구를 위한 재료로 폭넓게 이용될 수 있다.

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아주대학교
등록일
2008-03-24
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

스핑고실포스포틸콜린을 함유하는 중간엽 줄기세포의 근섬유아세포로의 분화 유도용 조성물

"본 기술은 스핑고실포스포릴콜린 (Sphingosylphosphorylcholine)을 유효성분으로 함유하는 중간엽 줄기세포의 근섬유아세포 (myofibroblast)로의 분화 유도용 조성물에 관한 것이다.본 기술에 따르면 스핑고실포스포릴콜린 (SPC)은 중간엽 줄기세포에서 transforming growth factor-β1 (TGF-β1)의 분비를 촉진함으로써 근섬유아세포 (myofibroblast)의 특이적 유전자인 α-smooth muscle actin (α-SMA), calponin, SM22α 등의 발현을 증가시킬 뿐만 아니라 세포외 기질 (extracellular matrix protein)인 피브로넥틴 (fibronectin) 등을 생산한다. 따라서, SPC는 중간엽 줄기세포를 이용한 피부 상처치료용 세포치료제의 약효를 증가시키는 약물로 사용될 수 있으며, SPC에 의한 중간엽 줄기세포의 근섬유아세포로의 분화 유도 및 측정방법은 상처회복 촉진 또는 흉터생성의 억제 물질의 탐색에 활용될 수 있다."

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부산대학교
등록일
2008-12-31
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

CD9를 발현하는 인간 중간엽 줄기세포의 선별 및 배양방법

"본 발명은 동물혈청 없이 인간혈청을 포함하는 세포 배양 배지 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 50~60 %(v/v) DMEM , 40~50 %(v/v) IMDM, 4~6 μg/ml 인슐린 (insulin), 4~6 μg/ml 트랜스페린 (transferrin), 4~6 μg/ml 셀레니움 (selenium), 10-7~10-9 M 덱사메타손 (dexamethasone), 80~120 U 페니실린 (penicillin)/800~1200 U 스트렙토마이신 (streptomycin), 5~15 ng/ml FGF, 및 1~10 % 인간혈청을 포함하는 것을 특징으로 하는 인간 중간엽 줄기세포 배양 배지 조성물에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 인간 중간엽 줄기세포의 배양에 사용하는 자가혈청의 농도를 감소시키기 위하여 F-12를 대체하는 배지를 검색한 결과 DMEM/F-12 대신 DMEM/IMDM 배지를 사용하였을 때 인체혈청농도를 5%로 감소시켜도 세포증식능이 대조군 (DMEM/F12, 10% HS)과 유사한 수준으로 유지되어 인체혈청사용을 최소화하며 생체 안전성을 확보한 배양방법을 확립하였다. 또한, CD9 표지인자의 발현이 중간엽줄기세포의 증식능, 부착능 및 생체생존능을 증가시킴과 DMEM/IMDM배지사용시 CD9발현이 증가됨을 발견하고 CD9 표지인자를 띄는 세포개체를 분리하여 DMEM/IMDM배지에 배양함으로써 중간엽 줄기세포의 세포치료효과를 증진시킬 수 있는 방법을 확립하였다."

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부산대학교
등록일
2008-12-31
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일반기술 생명과학 > 줄기세포 분화 기술

줄기세포의 분화유도 방법

해당 기술은 줄기세포의 분화유도 방법 및 그로부터 분화된 세포에 관한 것으로, 상세하게는 줄기세포로부터 배상체를 형성하는 단계 및 상기 배상체에 염화리튬을 첨가 배양하는 단계를 포함하는 줄기세포의 분화유도 방법, 상기 방법으로 제조된 세포 및 이를 포함하는 치료용 조성물에 관한 것이다.

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고려대학교
등록일
2009-01-22
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