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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

핵이식 복제기술

전국에서 사육중인 한우중에서 육질, 육량에서 우량한 모우를 선발하여 이들에 최적 종모우를 선정하고 이들을 수정시켜 체내에 형성된 16-32세포기의 수정란을 채취한다. 이런 과정에서 획득한 고품질 한우 수정란에서 할구를 분리, 공여핵원으로 이용, 탈핵된 수핵난자의 수란관에 이식함으로서 복제 수정란을 형성 시킨다. 할구 복제 수정란은 체외에서 6-7일간 배양하여 배반포 단계로 발육시킨후 성주기가 동기화된 대리모의 자궁에 착상시켜 복제송아지를 생산하는 기술- 미성숙 난자의 체외 성숙 및 탈핵 기술- 할구핵의 분리 및 탈핵난자에의 핵이식 기술- 체이배양 및 대리모에의 수정란 이식기술- 한우번식 및 개량사업(농림부, 농촌진흥청)- 우량 젖소 개량사업(낙농업 및 서울우유협동조합 등)- 형질전환 동물 생산 사업(제약 및 식품업)

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

허혈뇌조직 미세환경의 분자생물학적 이해를 통한 뇌졸중 치료방안

뇌혈관질화(이하 "뇌졸중"이라 칭함) 은 전세계를 통하여 공히 중요한 사인 중의 하나이며 평균 수명과 고령층의 증가에 따라서 심장질환 및 악성 종양 등과 함께 중요한 성인병의 하나로 꼽히고 있음. 뇌졸중은 우리나라에서도 가장 흔한 단일장기의 질환으로서 예로부터 "풍"이라는 용어로써 가장 기피되어 오던 질병임. 뇌졸중은 혈류를 통한 뇌조직에의 지속적인 산소 및 포도당의 공급부족을 야기함. 본 연구에서는 뇌졸중의 in vivo 및 in vitro 모델을 확립하고 산소 및 포도당 공급부족에 의한 산화성 세포손상이 뇌졸중의 주요 병리기전중의 하나로 작용함을 규명하였으며 신속한 진단 및 치료에 필수적이라 할수 있는 뇌조직 손상정도를 생화학적으로 계측하는 기술을 개발함허혈뇌조직 미세환경조건에 처한 뇌세포에서 이를 극복하고자 특이적으로 발현되는 스트레스 유전자의 기능을 규명하고 HSV vector를 이용한 스트레스 유전자 주입에 의한 뇌세포 손상억제 가능성을 제시함. 세포생리의 분자생물학적 이해에 입각한 치료기술이 개발이라는 학문적 성과 이외에도 환자의 회복과 조속한 사회 복귀를 이룸으로 인한 직접, 간접적인 경제적 효과를 추구하는 바탕이 될 것임

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

혐기성 발효법을 통한 일산화탄소의 다탄소 화합물 전환 공정

혐기성 미생물인 Eubacterium limosum 은 수소와 이산화탄소 또는 일산화탄소(CO)를 아세트산 등으로 전화하면서 생장하는 homoacetogen의 일종임. E. limosum KIST612 지금까지 알려진 같은 성질의 다른 세균에 비해 생장 속도가 빠르며 CO에 대한 내성이 강함. 물에 대한 용해도가 낮은 CO의 공급 속도를 증가시키고 미생물의 생장을 억제하는 아세트산을 회수하는 고농도 균체 연속 발효법을 개발하였음. 폐가스 중에 소량 함유되어 있는 유황 화합물은 산소를 환원시키기 때문에 이 발효에서 미생물의 생장을 촉진하는 효과가 있음- CO를 석유화학 원료로 전환- 폐가스를 자원화- 석유가의 상승에 대비 syn-gas를 석유 대체물로 활용하는 기술- 제철 공업 폐가스 처리 및 활용

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

형질 전환 동물 제조를 통한 피부 질환 및 이식의 면역학적 병태 기전

인체 피부질환 및 이식의 모델동물 확립을 비롯한 기초 기술 및 지식을 확립하고자 interleukin-10을 피부에서 과발현하는 형질전환 생쥐를 제조하여 이종간의 피부이식 후 이들 생쥐에서는 이식 거부반응이 지연됨을 확인하였다. 또한 , 피부 이식 후 면역 반응에 관여하는 생쥐 C1r 유전자를 최초로 clonning 하였으며, 이에 대한 항체도 제조하였다. 그리고 , 보다 효과적인 면역학적 연구 관찰을 위해 ecdysone-inducible expression system을 도입하여 IL-10의 발현을 인위적으로 조절할 수 있는 형질전환 생쥐를 개발하였다. 또한 유선상피세포에서 IL-10을 발현하는 형질전환 생쥐를 개발하여, IL-10이 유선 조직의 이유기에 유선 상피세포의 apoptosis에 적용함을 밝힘- 피부특이적 keratin-14 promoter를 이용하여 IL-10을 피부에서 과발현하는 생쥐 개발- ecdysone-inducible expression system을 도입하여 IL-10의 발현을 인위적으로 조절할 수 있는 형질전환 생쥐를 개발- 피부이식후 거부반응에 관여하는 생쥐 C1r 유전자의 최초 clonning- 피부질환에 관여하는 IL-10의 면역학적 연구를 통해 향후 피부 면역 질환에서의 동물 모델 확립과 이들 생쥐의 응용 가능성 제시- 피부질환의 면역학적 병태 기전 연구- 피부 이식시 야기되는 각종 면역 반응 연구를 위한 모델 동물 확립- IL-10의 생체내 면역작용에 대한 연구

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

환경오염물질 분해 미생물을 육종한 자연계에서의 오염원 제거

- 환경오염물질을 분해하는 우수균주의 확보와 분해과정연구를 통하여 환경에 적용할 수 있는 기술- 아미노산 생산을 위한 연구를 통하여 아미노산 발효 산업에 기여하고자 함- 분해 균주의 확보와 활용조건을 규명중에 있음- 아미노산 생산조건의 연구와 활용에 관한 기초연구- 환경오염 물질 분해하여 환경정화를 위하여 기반기술 연구중에 있음- 아미노산 생산 이용 분야

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

Antibody displayed phage library를 이용한 특정항체의 선별

Antibody displayed phage library(ADPL)는 phage의 표면에 다양한 항체를 발현시켜 놓은것임. 이는 항체의 유전자들을 분자생물학적 방법으로 분리, 증폭한 뒤 phage 단백질의 유전자와 융합시킴으로써 제작이 가능함. ADPL를 제작한 뒤에는 적절한 선별과정을 거쳐 특정 항원에 대한 특이적 결합능을 갖는항체의 선별이 가능함. 항체의 선별은 정제된 항원과 ADPL를 섞어주고 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 항체를 가지고 있는 phage를 선택하는 방식으로 이루어짐. ADPL은 면역반응을 유발시키거나 시키지 않은 쥐, 또는 정상인의 혈액으로 부터도 제작이 가능함. ADPL의 선별과정을 거치면 단백질과 분자에 대하여 특이적 결합능을 갖는 항체를 선별해 낼 수 있음- 기존의 다클론 항체와는 달리 사람의 항체도 혈액내의 B림프구를 이용하여 제작이 가능- 면역원성이 낮은 항원에 대한 항체의 개발에도 이용- 항체의 유전자를 바로 얻을 수 있으므로 분자생물학적 기법을 이용하여 항체의 변형이 가능- 다양한 단백질 뿐만 아니라 면역원성이 없는 항원이나 저분자에 대한 항체의 개발, 사람항체의 개발 등에 이용가능- 유전자를 변형하여 항체의 친화력을 높이거나, 암관련 항원을 인식하는 항체에 독소를 연결하여 항암제를 개발하는 등 의약품 개발에 응용 가능

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학

B형 간염바이러스 감염저해제 개발 연구

HBV의 수용체를 밝히면, HBV 감염의 기작을 이해에 도움이 되며 HBV 수용체에 대한 단일클론항체는 HBV 감염의 저해제로서 활용될 수 있음. 간세포 수용체를 밝히기 위하여, 사람 간세포주 HepG2 세포 표면을 biotin으로 표지한 후 막단백질을 분리하여 HBV preS1 리간드에 결합시켜 특이적으로 결합하는 단백질을 동정한 결과, 80kDa의 단백질이 preS1 리간드에 결합함을 확인함. 80kDa의 단백질이 세포표면에 존재하는 단백질임과 HBV preS1의 aa 12-20 과 aa 80-90의 영역에 결합함을 증명하였음. 재조합 preS1 뿐만 아니라 HBV 바이러스 particle 과도 결합함을 증명함. 따라서, 80 kDa의 단백질이 간세포의 표면에 존재하여 HBV 에 결합하는 단백질로 추정됨- HBV에 결합하는 간세포 표면 단백질의 동정하기 위한 assay system을 확립함- 간세포 표면에 존재하는 p80 단백질이 HBV에 결합함을 확인함- p80 단백질에 대한 단일클론항체를 개발하면 HBV 감염 저해제로 활용할 수 있을것으로 전망- HBV 감염 기작의 이해- HBV 감염 저해제의 개발에 활용

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학

C형 간염바이러스의 외피당단백질 발현벡터

- 재조합 아데노바이러스를 이용한 HCV 외피당단백질 E1E2의 인체 세포에서의 생산, 분리정제- 생산, 분리정제된 E1E2 단백질은 HCV 진단시약 및 E1E2 단일 클론항체 제작에 활용할 수 있음- native conformation을 갖는 인체세포에서의 HCV E1E2당단백질의 생산- E1E2단백질의 HCV 양성환자와의 특이적 반응- HCV 구조단백질 유전자가 도입된 복제가능 및 비복제 재조합아데노바이러스는 HCV에 대한 치료용 생백신으로 활용가능- 아데노바이러스 벡터를 이용하여 HCV 외피당단백질 E1E2를 인체세포에서 생산, 분리정제한 후 E1E2단백질을 고감도 진단시약 및 항체제작용 면역원으로활용가능- 인체세포에서 분리정제된 HCV외피당단백질 E1E2 HCV 세포수용체 탐색에 활용가능

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

D-(-)-β-Hydroxyisobutyric acid (D-HIBA)제조기술

- 고혈압 치료제인 Captopril 중간체 제조- 광학활성물질제조에 유용한 주요 광학활성 중간체- D-HIBA분해능력을 상실한 D-HIBA생산용 효모주- 생산용 효모주를 이용한 Isobutyric acid, Methacryric acid로부터 D-HIBA발효방법 (전환수율 95%이상)- 발효생산된 D-HIBA의 정제방법(전제수율 90%)- D-HIBA를 이용하여 다양한 광학활성유도물질의 제조응용이 가능

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 미생물자원

D-아미노산 함유 D-펩타이드 합성 생물전환기술

- 저칼로리 고감미도의 D-아미노산 함유 펩타이드성 감미료(L-Asp-D-Ala등) 합성 생물전환 기술- 국내의 토양에서 분리된 신규 고온성미생물 유래의 내열성 효소를 생물촉매로 사용한 생물전환 공정기술- 기존의 화학합성공정기술을 대체하는 청정 생물전환기술- 저칼로리 고감미도의 D-아미노산 함유 펩타이드 감미료의 생물전환 합성기술 확립- 신규 내열성 효소를 이용한 유용 생물소재 생산 생물전환기술확립에 기여- 기존 화학합성기술을 대체하는 환경조화형 대체기술개발에 기여

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 유전자 치료 기술

DN4 항체의 생산, 정제 및 임상적 활용

DN4 단백은 인체 흉선 피질세포(thymic epithelial cell)에 표현되는 항원으로 DN4 항원의 성상을 밝히고, 항원의 유전자를 찾아 본 항원의 정상세포 및 각종 종양조직에서의 분포를 조사- DN4 단백질을 affinity column 을 이용하여 분리하고 peptide sequencing을 수행함. 그 결과를 토대로 degenerative probe를 만들어 PCR과 plaque hybridization을 이용하여 유전자 규명- DN4가 높게 발현 감마 인터페론을 처리한 THP-1 cell line을 대량 배양하여 이로부터 cDNA library를 확립하였고 COS-7에 transfection하여 Brain-Seed expression cloning을 수행- 인체 흉선 세포 자체를 면역원으로 사용함- random immunization 후 screening system 을 사용- 새로운 단 클론 항체를 개발하는 것은 대단히 힘들고 비용이 많이 든다. 특히 면역학연구에서 단클론 항체는 필수 불가결한 요소임- DN4 항체는 인체 흉성 피질 세포의 미지의 항원을 인지함. 이 항체는 인체 흉성 연구의 기본적 재료로 사용가능- 몇몇 임상적 질환을 진단하는 표시자로서 활용- 인체 흉선 연관 단백에 관한 항체 생산 방법을 확립

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

GABA 신경계 관련 뇌질환 치료제 개발을 위한 신경분자생물학적 기술

GABA (r-aminobuyrate)는 중추신경계에서 주억제성 신경전달물질로 알려져 있으며, GABA의 농도가 낮아질 때, 간질, 경련, 발작 등의 신경질환을 야기시킨다. GABA의 농도는 GABA shunt 조절효소들인 GAD, GDH 그리고 GABA transaminase(GABA-T), SSADH, SSAR 효소들이 의해 조절되며, GABA 합성효소인 GAD, GDH의 활성제나 GABA 분해효소들인 GABA-T, SADH, SSAR의 저해제들은 GABA의 레벨을 높일수 있는 항간질, 항경련 치료제로의 개발이 가능함. 새롭고 효과적인 항간질, 항경련 치료제 개발을 위하여 GABA shunt 조절 효소들의 인간유전자 크로닝, 발현, 대량 생산을 확립하는 기술을 개발- GABA shunt 조절효소들의 분리, 정제 기술- GABA shunt 조절효소들의 유전자 크로닝, 발현기술- GABA shunt 조절효소들의 저해제, 활성제 탐색기술- 항간질, 항경련 치료제 개발- 마취제, 수면제 개발- 유전병(GABA-Transaminase, Succinic semialdehyde dehydrogenase deficiency genetic disease)의 원인 규명 및 진단법 개발- GABA관련 뇌질환의 단백질 치료법 개발

등록일
2004-03-10
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

Marfan 증후군의 유전자 진단

한국인의 FBN1 유전자 다양성 분석으로 구축된 FBN1 유전자 데이터 베이스는 한국인 Marfan 증후군 환자 진단의 유전적 기초자료로 제공 될 것이다. Marfan 증후군 환자 3대에 걸쳐 분석한 결과 남녀 차이 없이 Marfan 환자인 부모에서 50%의 자녀로 우성 유전되었고, intragenic sites의 DNA repeat sequence variation haplotype은 21/27/6/15/2(mts1, mts2, mts3, mts4, T6236C)이 일반집단에서는 0.0043으로 낮은 빈도이지만 Marfan 증후군 가족은 모두 이 haplotype을 가지는 완전 침투율을 보이므로, intragenic sites의 DNA repeat sequence variation haplotype21/27/6/15/2의 haplotype은 Marfan 증후군의 산전, 조기 진단에 사용이 가능Marfan 증후군의 증상은 개인차가 심하고 FBN1의 DNA 변이도 Marfan 증후군 가계에 따라 특성이 나타나기 때문에 이 질환의 명확한 유전자 진단을 위한 유전자 분석이 필요하며, 민족간, 개인간에 유전적, 다양성의 차이를 보이는 intragenic sites의 microsatellite 다양성과 FBN1의 양 형성에 관여하는 3' 비전사 부위 다양성과 기능에 관여하는 엑손 부위의 SNPs등 8 site 의 다양성을 분석함으로써 한국인 Marfan 증후군 환자 진단 marker 유전자로 활용 가능- FNB1 유전자 데이터베이스 구축으로 Marfan 증후군 환자의 조기 진단 또는 산전 진단이 가능해 짐으로써, 소아는 증세가 나타나기 전 또는 초기에 증상 진행 억제 및 예방이 가능해 졌고, 또 초기 치료가 가능하여 수명 연장이 될 수 있음

등록일
2004-03-10
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

NMR분광학을 이용한 생체분자 구조해석 기술

- 다차원 NMR분광학을 이용한 단백질 및 생체분자의 물리화학적 성상 (구조포함)을 고찰 규명- SAR-by NMR에 의한 HTS : 특정 단백질 결합 기질의 초고속 탐색- 인간의 암에 관여된 p53 단백질 TAD의 동력학적 구조적 특성을 규명하기 위하여 target 단백질 인식에 중요한 역할을 하는 amphipathic helix를 함유하고 있음을 규명- nAChR 단백질과 기질간의 결합기전을 NMR분광학적 정밀 3차원 구조 규명- 당뇨병 치료제 개발에 요긴한 혈당강하 작용이 있는 올리고당의 조성 및 구조 규명- 재조합 단백질 등의 제품품질 관리- 단백질/펩타이드 구조를 이용한 제약 설계

등록일
2004-03-10
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

pCel1™ vector

pCel1™ vector는 새로운 신개념의 벡터로서 기존의 X-GAL과 IPTG를 이용한 blue/white selection 방법이 아닌 cellulose를 분해하는 효소인 유전자 (celA)를 selection marker로 이용한 cloning vector이다. celA 유전자에 의해 발현되는 cellulose는 Cellomix™가 함유된 선택 배지에서 colony 주변에 환을 형성하게 하는데, insert DNA에 의해서 celA 유전자가 파괴되는 경우에 있어서는 insertional inactivation에 의해 환이 없는 colony를 형성- CelA gene을 이용한 세계 최초의 벡터로서 값비싼 X-gal이 아닌 저렴한 Cellomix™을 사용- plate 제작이 간편하며, X-gal과 IPTG를 사용하지 않으므로, 실험이 간편- Blue/White selection 보다 명확한 형질 전환체 선별 가능 - 형질 전환 효율이 매우 높음- 형질 전환 균주 선별시간 단축 가능- 생명공학 연구분야에서 유전자 coning시 벡터로 사용됨- cellomix인 substrate는 cellulase 연구에 사용하여 cellulase 발현 균주 screening에 사용됨

등록일
2004-03-10
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

PMMV 바이러스 유전자 도입을 통한 바이러스 저항성 유도 기술

고추의 생산 감수에 치명적인 요인이 되는 Tobamovirus 계통의 바이러스에 대한 저항성을 부여할 수 있는 기술임바이러스 유전자 도입에 의한 내성 유도 기술은 식물체에 바이러스 저항성만을 유도하는 효과를 줌. 즉 식물 성장 및 발달에 문제가 되는 side effect가 전혀 없음- 기술적 측면 : Tobamovirus 계통의 바이러스에 감염하는 타 작물의 내성 도입에 이용- 경제적 측면 : 고추 농가의 생산성 향상 및 안정에 기여. 우수 종묘의 해외 경쟁력 강화 및 수출

등록일
2004-03-10
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일반기술 생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학

Staphylokinase의 대량 생산과 단백질 공학

스타필로키나제를 발현하는 벡터와 그것으로 형질전환된 재조합 미생물로부터 스타필로키나제를 제조하는 공정에 관한 기술이다. 스타필로키나제는 혈액속의 흘라스미노겐을 활성화시켜 혈전을 분해하는 기능을 가지고 있어 혈관 내 혈액응고에 의하여 유발되는 뇌졸증 및 급성심근경색 등의 치료제로서 사용될 가능성이 있어 현재 연구가 활발히 진행되고 있는 단백질이다. 지금까지 스타필로키나제의 발현은 대장균의 세포질 내로 이루어지게 하여 복잡한 정제과정을 거쳐야만 하는 문제점이 있었으나 본 기술은 스타필로키나제를 대장균에서 대량으로 생산할 뿐 아니라 페리플라즘으로 분비 및 축적시킴으로써 보다 분리하기 쉽고 손쉬운 정제가 가능하도록 개발됨- 스타필로키나제 대량생산 가능한 벡터제작- 스타필로키나제를 대장균의 페리플라즘으로 대량생산- 손쉬운 정제과정으로 고순도, 고농축의 혈전용해제 획득 가능- 스타필로키나제의 대량생산 미생물의 산업적 이용- 혈전용해제인 스타필로키나제의 의학적 이용- 스타필로키나제 대량생산 미생물의 학문적 이용

등록일
2004-03-10
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

System for recodring physilolgical signals with photomultipier

세포 및 조직 내 다양한 생리신호를 실시간으로 동시에 기록하기 위한 장비 (예, 세포내 pH, Ca이온 농도 변화, 수축 및 세포막 이온젼류를 동시에 실시간으로 기록)- 4개의 photomultipier를 사용하여 미세한 세포내 형광변화를 기록할 수 있음- 다양한 형광신호를 분리 기록할 수 있으므로 형광과 관련된 여러가지 세포내 신호를 동시에 실시간으로 기록할 수 있음- 수축 및 세포막 이온전류를 동시에 기록할 수 있음- 세포 및 조직내 다양한 생리신호를 실시간으로 동시에 기록하여 실험을 하고자 할 때 활용

등록일
2004-04-30
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

Thrombopoietin의 분자적 인식기능 및 기능 조절 연구

- TPO의 활성부위 특성 및 구조 연구 : TPO가 사람의 성장호르몬이나 erythropoetin과는 다른 수용체 인식기작을 갖는다는 것을 증명- TPO-수용체 상호작용의 생화학적 특성연구 : TPO 수용체를 이용한 분석연구를 수행하기 위하여 soluble 수용체를 생산하고 항체를 생산함. TPO-수용체 interaction을 분석- TPO의 기능 개량 연구 : TPO의 활성이 증진되거나 in vivo half life가 증가된 TPO를 개발하기 위하여 TPO의 3차구조 모델에 근거하여 TPO 분자를 변이시킨 후 in vitro 생물활성을 측정. 활성이 있는 mutants들을 몇개 선발하여 이들의 대량생산 세포주를 제조- TPO의 활성부위 특성 및 구조 연구- TPO-수용체 상호작용의 생화학적 특성연구- TPO의 기능 개량 연구- 기능이 개량된 혈소판 감소증 치료제의 개발에 활용- 리간드-수용체 상호작용이 분자적기작의 이해에 기여- TPO 수용체의 발현세포주를 이용한 assay system은 신규 혈소판 감소증 치료제의 개발에 활용

등록일
2004-03-10
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일반기술 생명과학 > 기타 생명과학

쑥뜸기 제조

자연연소 방식으로 연소시 쑥진이 대류현상에 의하여 하부로 내려와 환부에 도포된 후 연기만 상승하고 쑥뜸 시에 온도를 조절 할 수 있으며 쑥봉을 직접 제조 할수 있도록 제조기를 한조로 하며 하부에는 패킹이 착탈식으로 구성되어 있어 소독이나 노후시 교환이 가능하도록하였고 재료는 도자기로 되어 있음. 내피와 외피로 구분되어 제작되어 있고 외피는 도자기이며 내피는 동파이프이고, 온도 조절기는 회전식으로 좌우측으로 돌려 조절하며 실리콘 패킹으로 만들어 졌음.쑥봉을 직접 제조하여 사용하므로 따로 구입 할 필요가 없으며 제조방법이 간단하고 쑥뜸의 온도를 임의로 조절 할수있으므로 데일염려가 없고 쑥뜸기를 올려놓기 전에 미리 제작된 커버를 몸의 뜸뜨고져 하는 부위에 올려 놓으므로 넘어 지거나 할염려가 없으며 모든제조 준비가 되어 있으므로 즉시 생산이 가능함. 내피와 외피는 중간에 끼음파이프를 사용하여 고정 하고 온도 조절손잡이는 내부에 있는 쑥종지의 축과 연결된 회전대에 결속하여 강력접착제로 고정하므로 제조에 어려움이 적음.

등록일
2004-03-10
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