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불소수지 및 고부가가치 불소유도체의 기초 원료인 TFE를 값싸게 얻을 수 있는 제조 공정임. 기존의 TFE 제조 공정은 R-22(chlorodifluoromethane)을 분해하여 얻는데 이 공정은 설치비용이 많이 들고 염화수소가 발생하여 부식 및 환경문제를 야기한다. 본 공정은 폐PTFE를 열분해하여 고순도의 TFE를 얻는 방법으로 실험실 규모 및 상업화규모까지 요구에 따라 설치가 가능하다. 설치 비용은 R-22공정에 비하여 1/10 - 1/4까지로 매우 경제적이다.
Phospholipase C (PLC)와 thioredoxin peroxidase (TPx)에 대한 분자 유전학적 연구를 수행하고 이를 바탕으로 관련 인체 질병에 대한 형질전환 모델 동물을 제작하고자 제 1차년도에서 다음과 같은 기반 연구결과를 얻었다. 1. PLC의 분자유전학적 연구Balb/c genomic library에서 PLCβ3 유전자의 exon 5를 함유하는 DNA 절편과 PLCβ4 유전자의 exon 6을 포함하는 DNA 절편을 각각 cloning 하였고, exon/intron의 구조와 위치, 제한효소지도 등을 작성하므로써 gene targeting에 사용될 vector 제작에 필요한 분자유전학적 기반을 마련하였다. 2. TPx의 분자유전학적 연구생쥐의 뇌 cDNA library로부터 TPx 유전자를 분리하여 단백질의 구조를 확인하였고, 생쥐 1292종의 genomic DNA library로부터 3종의 TPx genomic DNA clone을 분리하여 exon/intron의 구조, 제한효소지도 등을 연구한 결과 생쥐 genome에는 적어도 2가지 이상의 밀접히 연관된 TPx 유전자가 존재함이 파악되었다. 이 중 한가지는 적어도 6개의 exon과 5개의 intron으로 형성되는 구조를 가지고 있었으나, 다른 한가지는 단일 exon과 5개의 intron으로 형성되는 구조를 가지고 있었으나. 다른 한가지는 단일 exon으로 구성되어 있다. 두 TPx 유전자 모두 198개의 아미노산으로 구성되는 단백질을 암호화할 수 있었으며, 그 아미노산 서열의 유사성은 약 96%였다. 3. 유전자 발현조절부위의 분리생쥐 129 SVJ의 genomic library로부터 metallotheinein, albumin 등 조직 특이적 발현 유전자의 promoter와 Tpx 유전자의 promoter 등을 분리하였고, 이에 대한 제한효소 지도를 작성하였다. 4. Gene targeting을 위한 기반기술배아간세포 (embryonic stem cell : ES cell)에서의 homelogous recombination을 통한 gene targeting 기법에 의하여 형질전환 동물을 제작하고자, 그 기초기술로써 feeder cell의 제조, ES 세포주의 계대 및 유지기술, ES 세포주를 이용한 chimera 생산방법 등을 해외훈련을 통하여 습득하고 본 연구실에서 확립하였다.
-피부에 대한 무독성, 저자극성, 계면활성제로써 우수한 물성을 갖는 비타민E 유도 계면활성제의 제조. 비타민E와 에틸렌옥시드, 무수말레인산의 반응. -내경수성 우수 원료 개발- 비균일 촉매사용에의한 반응성 증대- 정제공정의 단순화- 저온반응에 의한 비타민 E의 분해문제 해결
1. EGF의 대량정제공정 확립 EGF 발현균주인 E. coli JM101/pTE105를 발효시켜 획득한 발효상등액으로부터 3단계 정제공정을 거쳐 1회 정제시 99.5% 이상의 순도를 가지는 EGF를 1.5g 이상 분리정제하는 공정을 확립하였으며 이 정제방법을 특허출원 하였다(대한민국 특허출원 제93-6980호). 2. 구조, 조성 및 물리화학적 특성규명 정제한 EGF의 아미노산 서열 및 조성분석, peptide mapping 및 disulfide 결합위치 분석등을 수행한 결과 천연에 존재하는 EGF와 동일한 아미노산서열 및 구조를 갖는다는 것을 규명하였으며, 또한 SDS-PAGE, Western blotting, Gel filtration FPLC, RP-HPLC등의 분석법을 적용하여 EGF의 분자량 및 면역학적 성질이 천연의 것과 동등하였고, circular dichroism 분석과 NMR의 방법으로 분석하였을 때 2차 및 3차 구조도 천연의 EGF와 동일함을 확인하였다. 3. EGF의 생물학적활성 연구 정제된 EGF의 생물학적 활성을 mitogenic assay와 receptor binding assay를 수행하여 측정한 결과 정제된 EGF 1mg은 국제활성단위(international unit)로 1.37±0.17×106 IU로 측정되었으며, in vivo 실험인 guinea pig의 피부창상에 대해서도 EGF는 유의성있는 피부재생효과를 나타내었다. 4. EGF의 안정성연구 EGF의 안정성시험을 pH 및 온도, 장기보관, 가혹보관등의 조건하에서 수행한 결과, EGF는 중성 pH(pH 5∼7)에서 안정하였으며, -20℃와 4℃에 58주 동안 장기보관시, 분말 혹은 용액상태에 관계없이 함량, 순도, 활성의 유의적인 변화를 보이지 않았다. 한편 온도가 37℃ 이상 및 freezing and thawing등의 가혹조건 하에서는 탈아미노 EGF와 같은 분해산물들이 나타났으나 이들 역시 90% 이상의 생물학적 활성을 나타내었다. 5. 피부재생제 및 각막부활용 의약품으로의 개발 본 연구결과 화상치료 및 각막손상의 근본적 치료제로서 유망한 EGF 단백질원료의 대량생산이 가능해졌으므로, 빠른 시일내 의약품으로의 제품화가 가능할 것으로 기대된다. 현재 대웅제약에서는 본 연구를 통하여 얻어진 EGF를 피부창상, 화상 및 만성피부궤양을 치료하고자 하는 피부상처치료제와 각막수술, 엑시머레이져에 의한 근시교정술시 손상되는 각막의 회복을 촉진시키는 각막상처 치료제로의 개발을 추진하고 있다.
본 기술은 값싸게 자체제작할 수 있는 기포통기형 배양장치에서 영지를 비롯한 몇몇 버섯류의 액체배양에 의해 균사체 및 세포의 다당( 또는 색소류)의 대량생산공법 및 이외 기능성 식품소재화를 달성할 수 있는 일련의 기술임. 영양물질 및 pH 조절에 의해 영지버섯의 형태(morphology)를 조절하므로써 균사체 및 세포의 다당류를 대량생산할 수 있으며, 특히 영지버섯의 주성분인 항암활성 세포의 다당류는 국내의 타 연구자들의 수십배 상당량의 수율(약 13g/l)로 얻을 수 있슴. 이 기술의 초기 기술은 이미 특허 등록되어 있으며(특허등록 제 156986호, 1998년 7월 27일), 신령버섯, 상황버섯, 노루궁뎅이, 동충하초, 팽이, 느타리 등에도 적용할 수 있슴. 또 이들 균사체 및 다당류 소재화를 위한 각종 가공기술도 보유하고 있으며, 자실체 생산기술 제공 및 오염문제 해결도 가능함. 따라서 본 기술은 현행 버섯재배 기술의 공정개선 및 신규 용도개발이나 신규 제품생산을 포함하는 버섯으로부터 고부가가치의 각종 제품화가 가능한 기술임. 그러나, 신규 제품 생산을 위해서는 시설투자가 커지고 새로운 용도제품이므로 벤처성격이 강하여 판로문제가 불투명하므로 버섯자실체생산시설을 갖춘 기업에서 사용하면 유리함. 이 경우 액체종균에 의한 자실체 생산의 공정개선으로 오염감소 및 재배기간 단축이 가능하며, 애체배양에 의한 균사체 및 세포의 다당류의 고부가가치 제품의 생산 판매로 제조경쟁력을 크게 향상시킬 수 있슴. 아울러 본 연구자는 본 기술 구사 및 자실체 생산의 인력팀도 제공할 수 있슴.
o C. tropicalis 배양방법 먼저 108배지에 균을 활성화시킨다. 실온에 방치하여 1일 후에 흰색의 colony 들이 관찰됨. 직경 2mm이상됨. 108 agar 배지에서 활성화된 균을 1 loop을 5ml broth tube에 접종하여 정치시켜서 배양함. 실온에서 배양 1일 후에 5ml broth tube에 밑바닥에 균이 성장한 것을 관찰함. 잘 흔들어서 500ml broth에 접종하였다. 배양은 2일간 배양(48시간), 회전배양을 30 C로 조절하고 200rpm으로 회전시켰다. o C. tropicalis 항원제작 48시간 배양이 끝난 후에 formalin으로 3시간 동안 처리하였다. broth total volume이 50ml, 37% formalin을 6.85ml를 첨가, 그러면 total volume에 0.5% formalin을 첨가한 결과가 됨. 3시간 후에 formalin을 첨가한 것과 정상균주를 108 agar plate 에 접종하여 균이 완전히 사멸되었는가 검사. 실제로 포르말린 첨가된 효모는 agar plate에 성장하지 않음. 역시 30 C에서 200rpm으로 회전시켰다. 50ml conical tube에 40ml씩 분주하여 3000rpm에서 30분간 원심하였다. 상충액을 버린다. PBS(pH7.4)로 재부유시킨 후 다시 3000rpm에서 30분간 원심하는 방법으로 2회 세척하였다. 2회 PBS 세척 후에 pellet의 무게를 측정함. o 백신제작 PBS 6.3ml + 항원 (100mg/ml) 0.7ml; 10mg/ml을 되게 했음. Freund's complete adjuvant 7ml 유리 주사기로 잘 혼합. (아쥬반트에 혼합할때 소실양이 많으므로 여유있게 만듬) 2ml을 암탉의 흉근에 접종함. 접종할 때 양쪽 흉근에 나누어서 1ml씩 접종함. 달걀은 접종하기 전에 얻은 것을 냉장보관 채혈은 접종하기 전에 실시. 남은 백신은 -20C에 보관함 위의 실험방법을 이용하여 얻어진 백신을 4회 접종하여 항원을 포함한 수정란을 얻어냄
-태양전지의 광변화 효율을 향상시키기 위하여 태양전지 전극의 최적화 및 이중 반사 방지막 형성연구를 실시하였다. -스크린 인쇄법에 의한 전면전극의 구조연구를 통하여 기존 태양전지보다 0.2%의 효율향상을 얻었고, Oxide Passivation을 통하여 0.4%의 효율향상을 MgF2이중 반사 방지막 형성을 통하여 1.2%의 효율향상을 얻었다 -이를 통하여 16.7%의 광변환효율을 갖는 태양전지를 개발하였다
* 용도 : cytokine의 과다분비로 인한 효과는 인체의 면역체계의 항상성을 파괴하여 여러 질환을 유도하는데, 염증에 경우 injury나 infection에 의해 macrophage 등이 활성화 되고 이에 따라 여러가지 염증유발 cytokine들이 분비되고 이에 따라 secondary 염증 세포들이 다시 활성화되어 여러 염증 mediator를 분비하여 염증으로 진전되는데 이를 근본적으로 억제하기 위해 염증유발 cytokine의 생산억제물질을 screen함.섬오갈피(Acanthopanax koreanum)의 근피로부터 추출한 (-)-피마라-9(11), 15-디엔-19-오산(아칸토산(acanthoic acid)) 및 이를 이용하여 인체의 면역체계를 조절하는 중요한 이자인 인터루킨-1(interleukin-1,IL-1)광 종양 괴사 인자-알팔(tumor necrosis factor-알파, TNF-알파)의 생산을 조절함으로써, IL-1과 TNF-알파 의 생산량과 관련이 있는 콜라겐 생산, 반응성 산소 생산 및 섬유아세포 증식을 억제하여 이로 인한 질병을 치료하고 실험동물의 규폐증을 효과적으로 억제하는 방법임염증유발 cytokine의 작용기작 및 신호전달 기작 이해 및 응용연구. - IL-6의 ELISA Kit를 이용하여 염증, 면역질환/조산 진단법으로 활용. - 분방기 추출물, acnthoic acid를 염증 및 섬유화 질환 치료제로 활용
폐기가 곤란하며 포화 상태가 된 폐타이어를 재활용하여 합성수지 제품과 시멘트 제품을 대용할 수 있는 아주 우수한 물질의 신소재를 얻었기에 국내를 비록하여 미국 일본 등 선진 10개국에 특허를 출원하였고 개발한 신소재를 이용하여 우리 생활주변에 필요한 여러 가지 제품을 성형 제작햐여 고부가 가치를 창출하며 페기물의 자원화와 오염과 공해를 줄여 국토 환경 보전에 일익을 담당하고자 하여 개발 하였다.◎ 폐타이어를 재활용할 수 있는 곳 1. 공항활주로 2. 도로포장재 3. 고속도로중앙분리대 4. 해양 구조물(방파제 방계) 5. 철도침목 6. 보도블록 7. 농경지 수도관 8. 하수관 9. 정화조 10. 인테리어용 내장재 11. 담장지붕 12. 산사태 방지용 축대 13. 각종화분 14. 각종 판재 15. 지하철 트로후 16. 각종 합성수지 제품 대용 17. 각종 시멘트 제품 대용 18. 각종 목재 제품 대용 등
유용생물소재의 대량생산 공정기술 개발을 위하여 그 핵심 기술인 대사산물의 과생산 최적화, 고농도 세포배양시스템, 생리활성물질의 대량 분리정제 기술을 연구하였다. 대사산물의 과생산 최적화를 위해서는 대장균의 생리와 대사공학 연구에서 중요한 위치를 차지하는 부대사산물인 acetate의 생성 메카니즘의 생리학적 기능 규명, acetate 생성방지와 그에 대한 저항성 연구, 제한 성장 및 정지기에서의 대사능력에 대한 연구와 starvation promoter의 응용기술을 확립하였다. 고농도 세포배양 시스템 개발을 위해서는 세포집적 장치 및 세포농도의 onOline monitoring 장치를 개발하였다. 이러한 시스템은 간편하여 고농도로 세포를 배양하기 위한 영양성분의 적절한 공급 전략을 확립하고 세포배양 부산물로 분비되는 독성물질들을 처리하는 시스템의 구축에 이용된다. 또한, 생리활성 물질의 대향 분리정제 기술개발을 위해서는 난황과 난백으로 부터 Igy, 레시틴, 리소짐의 대량 분리 정제 기술을 확립하였다.
포유동물의 수정란에 조직특이적 발현벡터를 도입시키기 위하여 염소의 β-lactoglobulin (BLG)의 5' -조절 부위와 polyadenylation 신호 서열을 갖는 벡터로 삽입하여 제조하였다. 사람 α1-antitrypsin (α1-AT)과 erythropoietin (EPO) 유전자의 genomic 염기서열을 BLG의 5' -조절 부위 서열을 갖는 pBluescript에 각각 삽입하여 p1692g-AT와 p1692epo 벡터를 만들었다. 형질 전환된 유선 세포 HC11에서의 α1-AT 및 EPO mRNA 발현을 확인하였으며, 형질 전환된 유선 세포에서의 α1-AT 및 EPO 단백질 발현 및 분비를 면역블랏 방법으로 확인하였다. 또한 조직특이적 유용단백질 발현 효율증진을 위하여 유선 특이적 actiavtion element를 포함하는 것으로 추정되는 -470∼-740 지역을 Gel-shift 및 Foot-printing 방법으로 분석하여 actiavtion element로 추정되는 -697∼-744 부위를 올리고뉴클레오타이드로 합성하였다. 이 올리고뉴클레오타이드는 BLG의 205 프로모터의 상류에 세벌로 결합되었을 때 205 프로모터를 크게 활성화 시켰을뿐만 아니라, 이 oligonucleotide는 젖 생산 호르몬들을 처리 했을 때 프로모터 활성을 약 6배 정도 증가 시켰다. 이상과 같은 유선 특이적 actiavtion element는 유선 조직-특이적 고활성 프로모터의 제작에 이용될 수 있을 것이다. 이상과 같이 제조된 사람 α1-antitrypsin 과 EPO 유전자 발현용 재조합 DNA를 생쥐 수정란에 미세주사하여 유전자이식 생쥐를 만든 결과 여러 마리의 founder mice를 만드는데 성공하였고, 이 founder mice를 다시 교배시켜 외부 유전자의 삽입이 확인된 유전자이식생쥐 Line을 얻었다. 특별히 EPO 발현 유전자이식생쥐의 line들을 분석한 결과 유전자이식생쥐에서 EPO가 혈액으로 다량을 분비되는 polycythemia와 유사한 phenotype이 발견되었다. 지금까지 얻은 결과들로 미루어 보아 염소의 BLG promoter가 생쥐의 생체내에서 확실히 발현된다는 것을 알 수 있었고, 유전자이식생쥐의 polycythemic phenotype에 의한 교배의 어려움으로 인해 유즙생산을 위해 비교적 오랜 시간이 필요할 것으로 예상되나, 궁극적으로 조직특이적 발현의 개선과 함께 성공적인 유전자이식생쥐의 개발과 유즙 내에서의 EPO 대량생산이 가능하라리 기대된다. 현재 얻은 EPO 유전자이식생쥐는 세계에서 처음으로 개발된 것으로서 유용단백질 생산의 차원을 떠나 polycythemia의 질병모델로도 그 가치가 높이 평가되고 있다. 적혈구수, hematocrit, 혈액중 EPO 농도, 거대비장증(splenomegaly) 등 여러 가지가 인간의 polycythemia와 극히 유사하여, 이 질병의 기전연구와 치료를 위한 중요한 실험동물로 쓰일 수 있다.
- 인체 유용 생리활성 물질 2종 (G-CSF, GM-CSF)의 유전자를 PCR 방법으로 cloning 하였음 - 산양(goat) 유선조직에서 특이적으로 발현되는 유전자인 β-casein 유전자의 promoter 부위 (약 2kb)를 cloning하였음 - 유선조직특이적 발현 vector 2종을 construction 하였음 - G-CSF 및 GM-CSF의 유전자를 산양 유선조직특이적 발현벡터 2종에 각각 subcloning하였음 - 한국재래산양에서의 수정란 다배란 유기방법 확립 - 외래 유전자 주입을 위한 1세포기 산양 수정란의 채취시기 및 방법을 확립하였음 - 체외수정용 난포란의 채취를 위한 호르몬의 적정투여량과 투여방법 확립 - 체외수정 및 인공수정에 사용될 정액의 채취방법 확립 - 산양 수정란의 체외배양조건 확립 - 외래유전자가 주입된 산양 수정란의 체외발달을 시도하여 배양조건을 확립하였음
* 녹말합성 관련 유전자 탐색 및 형질전환 식물체 선발: ADP glucose pyrophsphorylase, sucrose synthase, starch branching enzyme 등의 유전자를 크로닝, sequencing하여 insert된 유전자를 확인하였다. 감자 UDP glucose pyrophosphorylase 유전자를 antisense발현시키도록 고안된 vector를 이용하여 세 가지 감자 품종에서 형질전환 감자를 확인하였다. 각종 주요한 감자바이러스들인 PSTV유전자와 Potato leaf roll virus, potato virus S의 coat protein와 Potato virus X의 replicase유전자를 antisense저해하도록 vector를 개발하여 각각 형질 전환된 감자를 확인하였고 이들을 포장실험에 의한 저항성 여부를 검사 중에 있다. Bar유전자를 가진 제초제 내성 형질전환된 감자식물체를 획득하여 포장 실험을 거쳐 완벽한 제초제 내성 감자 품종을 확인하여 획기적인 결과를 얻었다. 새로운 표지유전자인 동물에서 유래한 ADA(Adenine deaminase) 유전자를 이용한 감자의 형질전환하여 PCR 및 ADA assay를 거쳐 형질전환된 감자를 확인하였다. 그외에 색소합성에 관련된 chalcone synthase유전자를 저해하는 그리고 내한성 유전자를 확보, 설계하여 형질전환된 감자를 만들었다. 이들 감자들로부터 이 유전자가 괴경형성에 미치는 영향과 현재 내한성여부를 실험하고 있다.* 인공씨감자 생산수율 증대를 위한 개량배양기술: 인공씨감자의 생산수율을 보다 증대할 수 있는 배지조성의 최적화와 이를 위한 새로운 배양용기의 개발에도 성공하였다. * 저장조직내의 필수 아미노산의 함량증가를 위한 유용유전자 탐색: 필수아미노산의 하나인 asparasine대사에 관련된 asparasinase를 벼의 genomic DNA library로부터 이를 screen하여 8개의 clones을 얻어 현재 염기서열을 분석하고 있다.
최근 선진국에서는 생물공학 기술중 하나인 기내배양에 의하여 식물조직과 세포로부터 2차대사산물들을 분리 추출하여 의약품, 생리활성물질, 화장품원료, 색소, 건강식품 및 향신료 등의 생산에 이용하려는 연구들이 활발히 진행되고 있으며 몇몇 식물에서는 실용화 단계에 있다. 세포배양에 의한 2차대사산물의 생산은 세포주의 선발, 6-7년여에 걸친 세포의 안정화 과정, 식물세포의 생장속도조절, 2차대사산물의 생성을 증진시키는 과정 및 2차대사산물의 분리, 정제 및 bioassay 등의 일련의 과정을 거쳐서 500-600L의 대형 발효조를 이용하여 기업화 과정으로 진입하게 된다. 특히 인삼은 다년생 약용식물로서 파종에서 수확까지 5-6년이 소요되며 기후, 토양조건, 재배관리 등의 어려운 환경여건 때문에 안정되게 인삼을 생산할 수 없는 실정이다. 최근에는 일본, 러시아뿐만아니라 독일에서도 ginsenoside고함유 인삼세포주를 선발하여 발효조를 이용한 대량생산체계를 확립한 실정이다. 본 연구에서는 2차년도에 선발한 인삼세포주 KGC 2, KGC 15 및 KGC 16의 세포생장안정화와 재배인삼의 ginsenoside Rb1, Re 및 Rg1와 캘루스의 ginsenoside분획과 일치하는가를 검증하였던바 기선발된 인삼세포주는 계대배양회수에 따라서 생장과 ginsenoside의 함량에 많은 변화가 있었다. 그러나 캘루스에서 합성된 ginsenoside Rb1, Re 및 Rg1은 재배인삼의 ginsenoside Rb1, Re 및 Rg1과 동일하였다. 4.5L bioreactor를 가동하여 인삼세포주KGC 13세포주를 배양하였으며, 대량배양시 KGC 13세포의 생장특성을 구명하였다. KGC 13세포주의 배지내 수소이온 농도는 배양시간에 따라서 감소하였으며, 당 농도는 세포배양 21일이되면 4.0%로 다소 증가하였다. 4.5L 액체배양시 KGC 13세포주는 산소소모가 거의 없는 세포주였다. 4.5L의 액체배양시 KGC 13세포주의 세포생장은 새로운 배지를 첨가할 때마다 현저하게 증가하였으며, 배양시기별로 총 ginsenoside의 함량은 9.99, 19.08과 34.49mg/g dry weight로 증가하였다. M1stage보다 M3 stage에서 ginsenoside분획 Rb1은 4.5배, Rb2은 5배, Rd은 2.8배, Re는 5배 그리고 Rg1은 1.9배가 증가하였다. Agrobacterium rhizogenes 두 균주를 인삼 disc에 접종하여 인삼모상근을 유기시켰으며 생장이 매우 빠른 모상근 세포주 B15 line을 선발하였다. 인삼모상근은 식물호르몬을 첨가하지않은 MS배지를 사용한 현탁배양시에도 air bubble type의 5L 발효조에서도 생장이 왕성하였다. 인삼 현탁배양에서 생장 pattern이 다른 6종류의 모상근을 선발하였다.
배추와 고추로부터 유전자 개발 및 조작기술과 형질전환 기술 등을 이용하여 개화시기의 조절, 웅성불임의 유도 및 환경 내성을 간직한 신기능 작물을 개발하기 위하여 배추의 약, 화사 및 암술로부터 부터 poly(A)+ RNA를 분리하고 이를 이용하여 cDNA library를 제조하였다. 약의 cDNA library로부터 약 특이 cDNA clone을 분리하기 위하여 차별혼성화 반응을 수행함으로써 43개의 약 특이 cDNA clone을 확보하였으며, 이들중에서 5개의 clone이 기존의 유전자와 유사성을 보였다. 배추 약 특이성 clone 중에서 유채의 화분 특이 clone인 BAN215에 해당하는 유전자를 genomic library로부터 분리해 내고 이의 promoter에 GUS 유전자를 부착하여 담배에 도입시켜 발현을 조사한 결과 GUS 활성이 화분에서만 특이하게 발현되는 것을 관찰하였다. 배추의 화사 cDNA library를 탐색하여 화사 특이성 clone인 C38을 분리하였다. 또한 암술 cDNA library에서 분리된 111개의 cDNA clone에 대하여 부분적인 염기서열을 결정하고 database를 탐색한 결과 27개의 clone이 기존의 유전자와 동질성을 보여주었는데 이들에는 가뭄에 의하여 유도되는 유전자와 자가불화합성 관련 thioredoxin 유사 유전자가 포함되었다. 또한 고추에서 유용유전자를 분리하기 위하여 genomic library를 제조하였다
상업적 가치가 상대적으로 낮은 파란 상태의 명란, 청어알 등의 어란을 혐기적 조건에서 1차 숙성발효 시킨 후 소시지 케이싱 등에 충전하여 건조 및 2차 숙성 발효과정을 거침으로써 전통 어란제품의 물성 및 풍미와 유사한 품질특성을 갖도록 한 재조립 어란의 제조기술식욕 촉진용 또는 고급 술안주용 진미 가공식품으로서 전통 어란 제품에 비해 생산비의 현저한 절감 가능. - 생산 공정설비의 단순화 특성 및 제조기술의 특허출원 가능 저식염 양념젓갈의 제조 기술 - 원료의 수분활성(Water activity) 조절, 효소활용 및 진공포장에 의한 염도 5% 전후의 저식염 양념젓갈 제조 기술 - 오징어젓, 조개젓, 멸치젓 등의 제조기술에 활용 가능 - 오징어를 주원료로 하고 다양한 부재료 활용으로 다양한 형태의 진미 숙성제품화에 응용 가능.
유전공학기술의 발전은 바이러스 표면항원 단백질등을 항원으로 하는 재조합 백신의 개발에 큰 기여를 했지만, 현재 인류의 복지건강에 큰 위협이 되고 있는 HIV(Human Immunodeficiency Virus), HCV(Hepatitis C Virus)등의 Vacicne은 아직 개발되지 못했다. 이는 면역성을 향상시키는데 필수적인 백신 보조제 개발부진 때문이며, 따라서 재조합 항원 단백질의 백신 효율성을 증대시키기 위한 새로운 신규 면역보조제의 개발이 매우 시급한 실정이다. 현재 면역 보조제로는 Aluminum Hydroxide (이하 Alum)외에 선진국에서 신규 면역 보조제를 개발중에 있으며 이들 중에는 Saponin계, Oil emulsion계, Monophosphoryl lipid A계, Cytokines계 등이 있다. 이들 중에는 특히 Saponin계 역역보조제와 Oil emulsion계 면역보조제 등이 속하며, 이로부터 새로운 신규 면역보조 성분을 개발하려하고 있다. 특히 남미산 식물인 Quilaja Saponaria Molina로부터 추출한 Saponin은 체액 및 세포성 면역반응을 증가시키는 것으로 밝혀졌다. 우리는 Quiliaja saponaria molina의 표피추출물을 한외 투석막으로 투석후, 이를 C4 RP-HPLC로 분리하여 개개의 사포닌 분획물들 분리정제하였다. 이 방법에 따라 32개 이상의 사포닌 변이체가 분리되는데 이중 비교적 수율이 높으면서 높은 면역보조 활성을 갖는 5개의 peak을 QS-L1, QS-L2, QS-L3, QS-L4, QS-L5로 명명하였으며, 이 peak들의 면역보조활성 및 생쥐에서의 독성을 측정하였다. 실험결과들을 종합해 볼때 QS-L1은 Alum과의 혼합사용시 탁월한 면역보조 효과를 나타내며, 또한 CD-1 생쥐 독성시험에서도 QS-L5을 포함한 다른 사포닌 분획물보다 훨씬 낮은 독성을 보여 면역보조제로서의 인체사용 가능성을 높게해 준다.
1.받침목을 2단으로 설계한다 2.안쪽 받침목에는 5cm마다 홈을만든다 3.밖깥쪽에는 고정 레바 장치를 설치한다 4.낚시대처럼 넣었다 뺐다 할수 있다 5.단계별로 길이조정을 하여 높낮이 조정을 자유롭게 하도록 한다 6.최상단에는 유(U)자 형태의 나무괴임(홈) 장치를 만든다 7.하단에는 원반형 받침대(지름:10cm)를 만든다 *단수는 1단,2단~n단까지 다양하게 기획중임.*효과:과수의 나무가지를 처음보다 수확기로 접어들면서 높낮이를 조절할 필요가 있을때 기존제품들은 각도를 조절해서 했는데 반해, 지면의 고정위치에서 높낮이를 곧바로 조절할수 있어 나무 보호,과실(열매)보호,작업능률향상등 을 꿰할수 있다 *용도:각종 과수나무및 가로수,천연기념나무 등 모든 나무및 식물등 받침대가 필요 한 곳에 편리하게 사용이 가능함.
대두가공부산물은 영양이 풍부한 자원임에도 불구하고, 적당한 가공방법이 개발되어 있지 않아 식품소재로서의 이용에 한계가 있었다. 본 연구는 1차년도에 확립된 대두유 제조시 부산물로 발생되는 착유박과 대두피를 초미세분쇄 및 공기분급 기법을 이용한 특정 유용성분의 농축, 분리기술을 토대로 하여 효율적인 식품소재의 회수기술과 이들 분획의 가공식품으로의 응용실험을 실시하였다. ○착유박 및 대두피의 최적 분쇄기술 확립: -착유박은 조쇄 후 ACWS 10,000-17,500rpm에서 4분획으로 시료 제조. -대두피는 impact milling으로 15,000rpm, COWS 10,000 rpm에서 시료 제조 후 ACWS 10,000-15,000에서 공기 분급. ○각 분획의 식품가공소재로의 이용가능성 검토: -착유박은 rpm별로 회수된 분획을 제빵에 적용하였을 경우 약 20%정도밀가루와 대체가능. - 대두피는 각 분획으로 회수된 분획의 경우 식이섬유가 약 70%이상 회수되어 식이섬유소재로서의 이용이 가능. ○착유박 및 대두피의 대두취의 문제: -착유박은 밀가루에 대체하여 제과 및 제빵에 적용하였을 경우 약 20%까지는 거의 대두취가 없었고, 대두피의 경우는 약 10%내외까지 활용 가능. ○제품의 다양화 및 제품의 기호도 조사: -대두부산물의 특정분획을 취하여 식빵, 머핀, 및 쿠키에 일정량 첨가하여 시제품 생산을 한 후 소비자를 대상으로 기호도를 조사한 결과 상업용 식품소재화 가능이 높게 평가됨.
키토산은 게의 껍질내에 존재하는 키틴을 재처리한 다당의 일종으로 면역증강, 항종양활성, 콜레스테롤 저하, 식물세포의 활성화 등의 기능성을 나타내는 물질로 알려지고 있다. 그러나 키토산은 물에 녹지 않고 생체흡수율이 낮으며 맛이 떫어 각종 식품 첨가물 및 의약품 등에의 이용면에서 크게 제약되어 키토산의 물성을 개량한 키토산 올리고당의 생산기술개발이 요구되어 왔다. 키토산 올리고당의 생산은 산분해법과 효소법으로 대별되는데 산분해는 유해성이 문제로 대두되어 산분해물의 이용에 어려움이 있고 효소적 분해방법의 경우 효소비용 및 반응조절기술이 어려워 올리고당을 경제적으로 생산하는데 장애가 되고 있다. 본 방법은 키토산 올리고당의 조성을 쉽게 조절하고 생성수율이 높을 뿐만 아니라 생산공정이 간단한 경제적인 생산법을 특징으로 하고 있다. 키토산 올리고당은 특히 건강식품시장에서 1위로 부상할 만큼 유망한 품목이며 연간 300억원 이상의 매출을 올리고 있다. 현재 키토산 올리고당의 가격은 25-30만원/kg이나 본 방법의 개발로 키토산 올리고당의 국내 자급은 물론 관련산업에 파급효과가 매우 클 것으로 기대된다. 개발기술공정은 다음과 같다. 키토산 가용화 공정----분해공정----반응정지공정----여과공정----탈염공정----건조공정