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ㅇ 개발기술(제품) 내용 돼지고기는 한국인들이 가장 많이 소비하는 육류이다. 그러나 한국인들이 돼지고기를 기피하는 원인중의 하나는 바로 돼지고기에서 나는 특이취인 웅취 때문이다. 그러나 웅취는 거세하지 않은 수퇘지에서만 나타나는 현상이며 그 확률 또한 7% 이하에 불과하다. 즉 100마리중 7마리 이하의 빈도로 나타난다. 물론 거세시킨 수퇘지에서는 웅취가 나타나지 않으나 수퇘지를 거세시킬 경우 사료효율과 정육률이 떨어져 약 15%의 경제적 손실이 있다. 따라서 거세 시키지 않은 수퇘지중 웅취가 발현되는 수퇘지를 신속 정확하게 판별할 수 있는 기술을 개발하여 냄새(웅취) 안나는 돼지고기의 유통을 가능토록 하였슴. - 판별시험과정 시료채취 -> 전처리 -> 웅취측정시험 -> 판별 -> 웅취돈(7% 미만) 선별 -> 비웅취돈(93%이상) 유통ㅇ 실용화에 대한 의견 : 국내 돈육 생산업체 또는 유통업체가 상기 기술의 전수를 원할 경우 현장적용 시험을 통하여 기술전수할 예정임.ㅇ 기타 참고 사항 : 농림수산 현장애로사업으로 개발된 기술로서 생산자 단체 혹은 중소기업이 본 기술의 전수를 원할 경우 우선 지원 예정.웅취를 판별하기 위하여 돼지 등지방을 개체당 20g∼ 50g 정도 채취하여 면역학적 방법, 근적외선분광분석법 등의 측정방법을 통하여 신속하게 판별함.
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- 한국식품연구원
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- 2000-04-07
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신기능 생물소재 구조분석과 관련하여 777건의 소형 생리활성물질의 구조분석을 지원하고 adr HBV peptide, α-antitrypsin, hordothionin-α, conotoxin, phpspholipid transfer protein등 수종의 단백질의 구조를 결정함. 신기능 생물소재 탐색연구와 관련하여 방선균 2,353주등 총 3,754 균주와 배양액을 공급 하고 세균 659주등 691 균주의 균동정을 지원하였으며 체계적인 미생물탐색을 위한 균 분리원별 미생물의 다양성등 제반요인을 검토하고 방선균 수치분류 DB를 구축하였음. 면역기능 검색 시험계 및 면역부전 질환 모델동물의 보존기술 및 in vitro 및 in vivo 인체종양 약리활성 시험계를 구축하였으며 본 연구과제로부터 확립된 검색방법을 이용 하여 총 348건의 면역활성과 1,497건의 종양 약리검색을 지원함. 고혈압과 허혈성 심장질환에 대한 생리활성과 순환계 약리 작용기전을 효율적으로 탐색 할 수있는 효능검색체계와 약리연구 기술체계를 단계적으로 확립하고 총 70여건의 신기능 생물소재탐색을 지원함.
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- 한국생산기술연구원
- 등록일
- 2000-04-07
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Peptide library중의 한종류인 soluble 형태이면서 수억종류의 무작위 peptide 서열 혼합물을 함유한 PS-SPCL 합성법을 확립하였으며, 면역활성화제 개발을 위한 탐색용 면역세포주 선정 및 탐색조건을 확립하였다.확립된 탐색법으로 PS-SPCL을 이용하여 1차 검정 결과, 각 position에서 활성화효과가 높은 아미노산을 선정하였으며, 여러차례 반복 검정한 결과, 면역세포 활성화 효과가 높은 PEP-1, PEP-2, PEP-3 및 PEP-4를 개발하였다. 이들 peptide (hexamer)들은 nanompl order에서 아주 강한 효과를 나타내었으며, B lymphocyte중의 하나인 human B myeloma (U266) 세포에서 뿐만 아니라 다른 유래의 세포인 U937 및 HL60 세포에서도 강한 효과를 나타내었다.한편, 면역억제제 개발을 위하여 cyclophilin과 FKBP를 이용하여 신속하고도 예민하게 측정할수 있는 탐색체계를 확립하였다. 즉, immnophilin이 peptidtyl-propyl-cis-trans- isomerase의 활성을 독립적으로 지니고 있다가 그 활성이 면역억제제인 cyclosporin A나 FK506과의 결합에 의해 저해되는 것을 응용하였으며, 확립된 탐색법으로 PS-SPCL로 면역억제제 개발을 위한 초기 검색한 결과, 각 position에서 면역억제 효과가 있는 중요한 아미노산을 결정하였다.
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- 한국생산기술연구원
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- 2000-04-07
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1. 신기능 혈전제 치료제의 개발을 위해 당해년도에는 C-terminal deletion mutagenesis를 수행하여 스트렙토키나제의 C-말단으로부터 각각 5, 26, 33, 37, 40, 46, 47, 70, 97개의 잔기가 결손된 돌연변이 스트렙토키나제를 얻었고 이들을 대장균에서 발현시킨 후 활성을 조사한 결과 C-말단으로부터 40-47 부위의 잔기들이 스트렙토키나제의 활성에 중요함을 규명하였다. 2. 펩티드 호르몬은 대개 생체막의 수용체와 결합하여 생리적 역할을 수행하는데 이러한 기작에서 펩티드 호르몬의 구조가 중요하리라 생각되고 LHRH (Lutenizing Hormone Releasing Hormone) 의 경우도 수용체와 상호작용 이전에 생체막과의 상호작용이 선행되고 이 막을 모사하는 환경에서의 구조가 중요하리라 생각되어 모델 생체막과의 결합 실험과 amphiphilic 환경에서의 구조 연구가 병행되었다. 3. 강력한 항암제 합성효소인 SP6 RNA 중합효소를 만들기 위해 C-말단 부위에 무작위로 돌연변이를 도입하여 새로운 RNA 중합효소를 만들었다. 여러 가지 만들어진 효소 돌연변이의 특징과 활성을 연구하였다. 또 대체 결합 물질로서 무작위로 합성된 DNA pool로부터 인간 TNF(Tumor Necrosis Factor)- 에 특이적으로 결합하는 핵산성 물질(aptamer)을 선별하였다. 선별된 aptamer는 gel mobility shift assay를 통해 결합능력을 확인한 후 플라스미드에 클로닝하였다. 4. 간염 바이러스의 표면항원중 preS2 부위에 특이성을 갖는 키메라 항체의 발현 벡터를 여러 동물세포주에서 강력한 것으로 알려진 인간 -actin promoter와 dhfr 유전자 증폭 system을 응용하여 제작, CHO cell에 그 항체 유전자를 도입 및 증폭하여 고생산성의 세포주를 선발하였다. 또한 바이러스 백신의 대량생산 공정의 개발을 위해 여러 가지 동물세포주와 몇 가지의 바이러스 종에 대하여 새로 개발된 배양 system의 성능을 시험하였다. 그리고 carbon paste를 이용하여 효소를 효과적으로 고정화할 수 있고 그 생성물질을 전기적으로 산화시켜 시료의 농도를 정확하고 빠르게 측정할 수 있는 biosensor를 개발하였다.
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- 한국생산기술연구원
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- 2000-04-07
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.SH2 부위를 갖는 타이로신 인산화효소의 유전자 정보로 부터 디제너레이트 시발체를 이용한 중합효소반응에 의해 사람의 태아 간 조직의 cDNA 라이브러리로 부터 SH2부위를 갖는 새로운 유전자 탐색방법.
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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생리활성물질 검색시스템으로 염증유발인자와 세포사멸조절인자 발현에 중요한 전사인자의 활성조절 검색법
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- 한국생명공학연구원
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- 2000-04-07
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바이러스 감염, 악성 종양, 유전체계의 이상과 연관된 질병등 다양한 질병의 치료를 위해서는 다양한 약물이 세포막의 인지질층을 통과해야 한다는 것은 잘 알려진 사실이다. 이와 같이 세포막의 인지질층을 통과하기 위해서는 역시 인지질이 사용되는데 이는 두 가지 방법으로 이루어진다. 하나는, 약물에 인지질을 결합시켜서, 이 인지질 부분이 세포막에 부착하고 알짜의 약물 부분은 세포막으로 들어가서 그 치료 기능을 수행하는 것이다. 다른 하나는 인지질과 약물이 결합하여 거대분자 복합체(라이포좀)을 형성하여 약물의 이동을 돕는 것이다. 후자의 경우에 있어서 인지질은 라이포좀에 특수한 성질을 띄게 만드는데 그 성질은 라이포좀의 fusogenecity, pH민감도, 형태, 크기등의 결정이다.본 프로젝트의 목적은, 새로운 지질과 인지질의 정제를 위한 새로운 기술의 개발과, 그 개발의 토대 아래서 물질의 운반을 위한 소포(vesicles)의 개발, 그리고 유전자가 진핵세포내로 운반될 수 있는 최적의 상태를 찾는데 있다.
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- 특허법인충정
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- 2000-04-24
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생물학적 활성물질(BAS)의 화학적인 변형은 잘 알려진 과정이며 이는 많은 분야에서 사용되고 있다. 친수성의 중합체를 사용하여 BAS를 다기능적으로 변형하게 되면, 한 편으로는 안정성이 상승되고 다른 한편으로는 높은 투과성을 지닌 고분자 구조의 최종 산물을 얻을 수 있다. BAS를 변형시키게 되면, 고분자의 중합체 내에서 화학 결합의 숫자를 조절할 수 있고, 그 결과 물질의 안정성과 생리학적 활동성이 또한 조절된다. BAS에 반투과성의 친수성 중합체를 결합시키게 되면 항원성(antigenicity)이 감소되며, 생체적 합성능력이 증가되어, 그 결과 적절한 약물을 획득할 수 있다. 일반적으로, BAS의 아미노 기와 중합체의 알데하이드 기와의 상호작용을 통하여 이러한 변형이 가능하게 된다.젤이나 연고, 좌약과 같은 형태로 새로운 형태를 띈 terridecase의 개발, collagenase 와 superoxydismutase같은 효소의 변형에 대한 연구, 단백질의 변형과 그에 따르는 생리학적 활동의 변화의 관계에 대한 연구, conjugate의 정확한 구조와 그 구조에 따른 특수한 활동성과의 관계에 대한 연구
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- 특허법인충정
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- 2000-04-24
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생화학적이고 생물학적인 반응의 과정을 통해서 free radical이 형성되는데, 이 반응에는 아주 미약한 빛의 방출이 뒤따르게 된다. 화학발광 측정 시스템은 이러한 빛의 반응을 기록하기 위해서 개발되어 왔다. 반응이 상당히 격렬하건, radical이 아주 빨리 사라지는 반응이건 간에 화학발광적인 측정을 통해서 이 radical의 존재를 탐지할 수 있다. 이 방법이 free radical을 측정하는 유일한 방법이다. 그런데 이 측정방법을 사용할 때는 특별한 샘플을 만들 필요도 없고, 특수한 실험실의 조건설정도 요구되지 않는다. 그리고 분석에 필요한 모든 조건을 그 자체로서 만족시킨다.이와 같은 방법의 장점과 주요한 특질은 다음과 같다: 높은 반응성과 정확성, 넓은 규모의 기능적인 가능성, 다양한 물질을 탐구할 수 있는 가능성, 유지의 간편함, 얻어진 자료의 자동적인 분석 등이다.화학발광 측정 기술과 방법의 지속적인 개발. 이 방법을 응용할 수 있도록 점차적으로 연구하는 것. free radical 산화의 연구와 그의 생물학, 의학, 생태학, 그리고 기타 기술적인 분야에서의 역할에 대한 연구
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- 특허법인충정
- 등록일
- 2000-04-24
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오직 inositol 회로에 의해서만 조직과 세포의 분화과정이 조절된다는 것은 오늘날 잘 알려진 사실이다. 이 회로에 있어서, phosphatidyl inositol의 가수분해 산물인 1,2-diacylglycerol과 1,4,5-threephosphoinositol이 inositol 전령체로서 중요한 역할을 담당한다. 오늘날 M.K Gilmanov와 그의 공동 연구자들은 phosphatidyl inositol로부터 조직과 세포의 성장을 촉진하는 새롭고 효과적인 생체물질을 개발했다. 이 생체물질은 바이러스학에 널리 이용된다.이전에 phosphatidylinositol과 그 유도체들에서 유래한 생체조절물질들은 바이러스학에 이용되지 않았다. 세포의 성장을 촉진하는 새로운 생체조절물질들을 사용하면, 조직과 세포배양에 있어서 배양시간을 상당히 단축시킬 수 있으며, 그 결과 실험시간의 단축도 가능하게 될 것이다. 또한 실험비용의 측면에 있어서도 상당한 경제적인 효과를 가져올 수 있을 것이다.이 프로젝트가 완성되면, 이러한 생체촉매물질들은 바이러스 연구와 조직과 세포배양실험에 널리 이용될 수 있을 것이다.
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2000-04-24
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생명과학 > 기타 생명과학
오직 inositol 회로에 의해서만 조직과 세포의 형태형성과 분화과정이 조절된다는 것은 오늘날 잘 알려진 사실이다. 이 회로에 있어서, phosphatidylinositol의 가수분해 산물인 1,2-diacylglycerol과 1,4,5-threephosphoinositol이 inositol 전령체로서 중요한 역할을 담당한다. 오늘날 M.K Gilmanov와 그의 공동 연구자들은 phosphatidylinositol로부터 식물세포와 조직의 형태형성과 분화를 촉진하는 새롭고 효과적인 생체촉진제를 개발했다. 이 생체촉진제는 생명공학에 널리 이용된다.본 프로젝트의 목적은, 식물세포와 조직의 형태형성과 분화를 가속화 시키기 위하여 새로운 생체촉매물질을 정제하고 개발하는데 있다. 이전에 phosphatidylinositol과 그의 유래물질에 기초한 생체촉매물질은 생명공학에 이용되지 않았다. 이러한 생체촉매물질들을 사용하면, 식물 조직과 세포배양에 있어서 배양시간을 상당히 단축시킬 수 있으며, 그 결과 실험시간의 단축도 가능하게 될 것이다. 또한 실험비용의 측면에 있어서도 상당한 경제적인 효과를 가져올 수 있을 것이다.이 프로젝트가 완성되면, 이러한 생체촉매물질들은 생명공학에 널리 이용될 수 있을 것이다.
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2000-04-24
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정성적 조직 분석(QTA)은 다중 결정 재료의 물리적 성질을 생성시 생기는 조직과 관련시켜 사용하는 방법중의 하나이다. 조직을 실험적으로 조사하는데 사용되는 현재 존재하는 모든 기술들은 시료에 있어서의 결정의 수량을 측정하는데 바탕을 두고 있으며 다른 종류의 (통계적 및 기기분석적인) 불확실성을 포함하고 있다.중성자, X-ray, 전자 이메지 현미경 검사 시설에 의한 조직 실험의 적정화. 이러한 적정화에 바탕을 둔 QTA 처리방법의 개선
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- 특허법인충정
- 등록일
- 2000-04-24
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자외 또는 가시영역의 광에너지를 흡수하여 형광 또는 자외선으로서 발광하는 발광성 관능기 또는 원자단에 B(OH)2 결합한 영역을 가지며 핵산에 결합하는 성질을 갖는 보론산 유도체로부터 만든 핵산 처리시약을 제공하는 것이다.유전자 조작에 있어서 핵산을 분석하거나 절단 또는 연결하여 표식화하는 것을 목적으로 하며 핵산의 정량, 표식, 절단이 가능하다.
- 보유기관
- 특허법인충정
- 등록일
- 2000-04-29
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토양방선균, 담자균, 혐기성 세균 및 천연물로부터 항균항생활성 선도물질을 탐색한 후 활성물질을 추출정제하고 화학구조를 결정하였다. 얻어진 결과는 다음과 같다. 1. 방선균으로부터 terphenyl계 신규 항암활성물질인 polyozellin을 분리정제 후 화학구조를 결정하였다. 본 물질은 녹색분말로 C22H14O10 분자량 438의 신물질이었으며, 0.1∼5ppm 전후에서 암세포주에 활성을 나타냈다. 2. 방선균으로부터 레지오넬라 균에 강한 항균력을 나타내는 glycerol계 항생물질을 분리정제하고 화학구조를 규명하였다. 본 물질은 분자량 649, 분자식 C4174O8의 신물질이었다. 3. 방선균으로부터 gram 양성세균에 강한 항균활성을 나타내는 신규 macrolide계 항생물질을 발견하였다. 본 물질은 흰색분말로 분자량 702, 분자식 C35H58O14의 신물질이었다. 4. 담자균으로부터 항암면역 증강활성을 나타내는 polysaccharide를 분리정제하고 구조를 규명하였으며 그 밖에 꾸지뽕 나무로부터는 신규 dihydroflavonol 구조를 갖는 gericudranin A, B, C, D, E를 창출하였다.
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- 한국생산기술연구원
- 등록일
- 2000-09-07
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·국내에 기술확립이 시급히 요청되고 있는 화학물질의 면역독성 시험기술의 정착을 위해 수년전부터 범국제적 면역독성 공동연구에 참여하고 있는 일본의 국립위생시험소와 공동연구를 수행하였다. ·일본측이 제공한 시험기술에 관한 자료를 토대로 각종 면역기능시험법을 한국화학연구소 안전성연구센터에 기술확립을 하므로써, 산업계 수탁지원연구의 수행준비를 효율적으로 이룩하였다. ·1994년부터 국내 <의약품등의 독성시험기준>에 포함된 면역기능시험 10종과 기타 선진각국에서 추천하고 있는 면역기능시험법을 마우스 및 랫트 등의 실험동물을 이용하여 확립하였다. ·독성시험결과의 공인에 필요한 GLP 관련 표준작업지침서의 작성을 완료하여 산업계 수탁지원연구가 주기능중 하나인 본 안전성연구센터의 연구체제에 부합하도록 노력하였으며, 앞으로 면역계에 작용하는 신의약품의 개발시에도 적극적으로 활용할 수 있도록 하였다. ·연구결과를 국제 전문학술지에 발표하므로써 본 안전성연구센터에서 수행된 면역독성시험이 국제적인 공인을 받고 있음을 입증할 수 있었으며 이는 면역독성시험을 위해 외국의 수탁기관으로 의뢰할 필요없이 국내기술로 대체할 수 있음을 보여준 것으로 사료되었다.
- 보유기관
- 한국생산기술연구원
- 등록일
- 2000-09-07
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본 발명은 쌀 품종을 비롯한 다양한 식물체, 동물 및 미생물을 포함한 다양한 생물 종간, 종내의 유전적 식별에 적용할 수 있는 다범위 적용 프라이머(Universal primer)인 URP에 관한 것으로, 벼로부터 분리한 1.2kb 크기의 유전자 단편인 pURP로부터 제작되고, 18∼20mer 크기의 유전자 단편이며, GC 함량이 50%이상인 프라이머이기 때문에 게놈 DNA와의 접촉온도를 55℃이상으로 하여 PCR반응을 실시할 수 있어 높은 재현성으로 식물, 동물, 미생물등 다양한 생물종 또는 품종에 특이적으로 DNA 다형성을 검출해낼 수 있다.DNA 변성단계, 프라이머 부착단계 및 DNA합성단계로이루어진 PCR반응에 적용되어, 쌀, 옥수수, 보리, 귀리, 고추, 배추, 콩, 토마토, 참깨, 대나무, 마늘, 카네이션, 아라비듭시스, 시금치, 담배, 쥐, 사람, 소, 산타모나스(Xanthomonas)종의 식물병원세균, 슈도모나스(Pseudomonas)종의 식물병원세균, 대장균, 누에, 느타리버섯 및 리조토노아 솔라니(Rhizotonoa. solani) 종의 식물병원사상균들을 유전적으로 식별하는데 사용됨을 특징으로 하는 프라이머.
- 등록일
- 2001-02-19
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극히 빠른 속도로 DNA 염기서열을 결정하는 장치로서, 자동화 판 겔 전기영동 시스템보다 더 신속하게 DNA 염기서열을 결정한다. 본 분석장치는 모세관으로 전개한 시료에 광을 조사하여 시료를 분석함에 있어, 시료에 조사되기 위한 서로 다른 파장의 광을 제공하기 위한 광원수단과, 시료가 광에 의해 스캔되도록 모세관을 이동시키는 수단, 광을 시료에 조사하여 발생한 빛을 집속하기 위한 수단과 상기 집속된 빛에서 시료와 상호작용하는 파장을 선택하기 위한 수단 및 상기 선택된 파장의 광을 검출하기 위한 수단을 포함하여 구성된다. 본 기술에 의한 분리후 스캔-검출 장치는 모세관으로 전개된 시료를 신속히 검출하여 매우 빠르게 시료를 분석할 수 있으며 특히 DNA염기서열을 결정하는데 유용하게 사용될 수 있다. 더욱이, 여러 가지 시료를 분석해야 하는 경우에 전체 분석시간을 단축시킬 수 있으며, 광원으로 레이저를 사용하는 경우에 값비싼 레이저의 실제 사용시간을 줄일 수 있다DNA 염기서열 결정은 생명과학에서 매우 중요한 연구 수단이다. 현재 일반적으로 사용되고 있는 방법은 동위원소가 치환된 염기서열 결정반응 생성물의 폴리아크릴마이드 겔 전기영동으로 분자량에 따라 분리하고 방사선 자동사진법으로 각 성분을 검출하여 DNA 염기서열을 결정하는 것이다. 최근에는 분리 속도가 빠른 모세관 때문에 겔 전기영동(CGE)을 DNA 염기서열 결정에 이용하려는 연구가 많이 수행되고 있다. CGE는 판 겔 전기영동보다 개별적인 분리속도가 월등히 빨라 DNA 염기서열 결정법에 유용한 분리 방법이지만, 일반적인 CGE에서는 염기서열 결정반응 생성물을 하나의 모세관을 사용하여 전개, 분리하면서 검출하기 때문에 여러 개의 시료를 동시에 분리, 검출할 수 없다는 단점이 있다. 본 기술에서는 CGE의 빠른 분리속도가 갖는 이점을 충분히 실리기 위하여, DNA 시료를 CGE로 일단 분리한 다음 모세관을 레이저로 스캔(scan)하여 DNA 염기서열을 결정하는 방법을 개발하였다. 스캔에 소요되는 시간은 수 분 정도로써 CGE에 걸리는 시간보다 훨씬 짧으므로, 여러 개의 시료를 여러 개의 모세관으로 동시에 CGE 시킨 뒤 모세관 하나씩을 레이저로 스캔하면서 이때 발생하는 레이저 유발형광을 검출하여 DNA 염기서열을 결정하면, 전체적인 염기서열 결정속도가 몇십배 빨라진다.즉, 모세관 겔 전기영동 전개와 검출과정을 따로 분리함으로써, 단위시간에 분석할 수 있는 시료의 수가 현저히 증가될 수 있다. 또한, DNA 염기서열결정법외에도 모세관 크로마토그래피 등에 본 기술의 장치를 이용하여 모세관으로 전개한 시료에 상호작용하는 적합한 파장의 광원을 선택함으로써 시료를 분석할 수도 있다.
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- 포항공과대학교
- 등록일
- 2001-05-16
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세포내 신호전달체계에 관여하는 포스포리파아제 C 감마 1(PLC-γ1) 동위효소와 결합하는 단백질 상호간의 결합효율을 엘라이자(ELISA)를 통해 정량적으로 분석할 수 있는 방법에 관한 것으로, 신호 전달과정에서 PLC-γ1과 결합하는 단백질 상호간의 결합 효소 및 이러한 결합에 의해 유발되는 세포내 또는 생체내의 비정상적인 현상, 특히 악성 종양의 발생 등에서의 중요성을 확인하기 위하여, PLC-γ1 동위효소의 SH 영역들을 가지고 효모 하이브리드시스템을 이용하여 두 단백질 상호간의 결합효율을 정량적으로 분석할 수 있는 변형된 ELISA 방법을 제공한다. 즉, PLC-γ1 동위효소로 ELISA 반응 플레이트를 코팅한 후, 글루타티온S 전이효소 결합 형태의 단백질을 상기 코팅된 플레이트에 결합시키고, 항 글루타티온 S 전이효소 항체를 반응시키고, 퍼옥시다제가 결합된 2차 항체를 반응시키고, 효소에 대한 기질을 주입하여 반응시키는 단계로 구성된, PLC-γ1 동위효소와 단백질 상호간 결합효율의 정량적 분석방법이다. 본 기술에 의하면 두 단백질 상호간의 결합정도를 단백질이 변성되지 않은 상태에서 정량적으로 분석할 수 있으며, 적절한 항체만 있으면 간단하고 편리할 뿐 아니라 경제적으로 이용할 수 있다. 또한, 이를 토대로 PLC-γ1 동위효소와 관련된 신호전달체계를 차단할 수 있는 물질을 개발, 확인하여 궁극적으로는 PLC-γ가 관련된 암환자에서 화학적 치료제의 개발에 기여할 수 있을 것으로 기대된다포스포이노시티드에 특이적인 포스포리파아제 C(PLC) 동위효소들은 여러 성장인자들과 세포분열 촉진인자들에 대한 몇몇 초기 세포반응의 하나로서 활성화된다. 그중 PLC-γ는 수용체 티로신 키나아제와 세포내에 있는 티로신 키나아제에 의해 활성화되는데, PLC-γ를 과발현시킨 NIH3T3 세포를 누드 마우스에 이식시켰을 때 종양이 발생하는 것이 관찰되었고, 암조직중 유방암과 결장암에서 PLC-γ가 과발현 되어 있음이 알려졌다. 이러한 PLC-γ1 동위효소와 관련된 신호전달체계 연구와 이 동위효소의 활성을 저해하는 물질의 개발을 위해서는 PLC-γ1 동위효소와 다른 단백질간의 결합 역가를 분석할 필요가 있어서, 본 기술을 개발하게 되었다. 본 기술은 동시면역 침전 반응에서 볼 수 있는 세포내에서의 단백질 상호작용에 대한 정성적인 분석을 넘어서 시험관 내에서의 정량적인 분석이 가능하여, 생체내 또는 세포내 조건에서 하기 어려운 실험들에 대한 대체실험으로도 이용할 수 있다. 즉, 두 단백질간의 상호작용을 촉진 또는 저해시키는 물질을 많은 시료들로부터 탐색하는데 유리하게 이용할 수 있다. 특히 본 기술의 글루타티온 S 전이효소가 결합된 형태의 단백질들을 이용한 분석방법에 있어서는 글루타티온 S 전이효소에 대한 항체를 이용함으로써 원하는 단백질들의 상호작용이 항체에 의해 방해받는 것을 피할 수 있다는 장점도 있다
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2001-05-16
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포스포리파제 C-베타4 (PLC-β4) 동위효소를 특이적으로 인지하여 결합할 수 있는 단클론성 항체 단백질와 이 항체를 분비하는 융합세포주로서 PLC-β4 동위효소를 통한 신호전달 및 조절기전에 대한 분자단계의 연구를 위해, PLC-β4를 생체 또는 병리학적 시료로부터 간편하고 민감하게 검출 및 정량할 수 있는 수단으로서의 단클론성 항체 및 이를 생산할 수 있는 융합세포주를 개발하고, 이 융합세포주를 배양하여 상기 단클론성 항체를 대량 생산하는 방법 및 상기 단클론성 항체를 이용하여 PLC-β4를 검출하는 방법을 제공한다. 본 기술은 PLC-β4 동위효소를 순수 분리 정제하고, 이것으로 생쥐(Balb/c)를 면역시킨 후, 이들로부터 비장세포를 분리하여 생쥐의 골수종 세포인 V653 세포와 융합시킴으로써, 상기 단클론성 항체를 분비하면서 계속적으로 세포 배양이 가능한 새로운 잡종 세포주를 제조하고, 이 세포주를 배양하여 배양액의 상층액 또는 복강액을 크로마토그래피하여 균질의 항체를 대량으로 생산하는 방법이며, 이 단클론성 항체 단백질을 이용하여 PLC-β4 동위효소를 검출 및 측정한다.포스포이노시타이드에 특이적인 PLC는 외부의 신호를 받아 세포내 현상, 특히 세포의 물질 분비, 근수축, 감각 기작, 그리고 세포의 성장과 분화를 조절하게 하는 신호전달계의 중심효소이다. 최근 소의 소뇌를 대상으로 신호전달의 핵심효소인 PLC의 새로운 동위효소로서, PLC-β4가 분리 정제되었다. PLC-β4는 초파리의 빛 신호전달에 필수적인 norp A PLC와 일차구조상의 유사성이 높고, 소의 망막에 많은 것으로 알려졌다. 따라서 PLC-β4는 망막에서의 빛 신호전달에 대한 생리적 기능과 소뇌에서의 신경 전달에 대한 기능을 함께 가질 것으로 추측되어 그 역할에 대한 관심이 높아지고 있다. 이에 세포내에 극미량으로 존재하고 있는 PLC-β4 동위효소에 대한 연구를 수행하기 위해서는 PLC-β4 동위효소를 특이적으로 인지하는 단클론성 항체를 이용한 면역 블롯법이 요구되고 있다. 본 기술의 항체는, PLC-β4에 대한 상보핵산의 일부를 글루타티온 트랜스퍼레이스 융합단백질로 만들어 과발현시킨 후 순수 분리 정제하여 얻은 융합단백질을 생쥐에 면역시키고, 면역된 생쥐의 비장세포와 골수종 세포를 융합시켜 잡종 세포주를 얻은 다음, 이 세포를 클로닝하여 PLC-β4 동위효소만을 인식할 수 있는 항체를 생산하는 단일 클론을 선별한 후 이 클론을 배양하여 단클론성 항체를 대량 생산할 수 있다. 본 단클론성 항체는 소뿐만 아니라 다른 포유동물의 PLC-β4 동위효소에 대해서도 특이적인 반응성을 갖고 있으며, 포유동물 세포의 생리활성, 분화 및 성장조절을 연구하는 기초 생물학 연구의 수단으로 이용될 수 있다
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2001-05-15
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본 기술은 국내산 누에 핵다각체병 바이러스 브이비2(KCTC8873P)의 p10 단백질 유전자를 클로닝하고 그 유전자 구조를 분석하였으며 이를 이용하여 외래유전자 발현용 전이벡터 피비엠10을 제작하고, 그 전이벡터에 표지유전자로 베타-갈락토시다아제 유전자를 삽입하여 누에 세포주에서 발현 여부를 분석한 결과, 그 전이벡터에 의한 재조합 바이러스는 다각체를 형성하면서 베타-갈락토시다아제를 발현하여 전이벡터로서 기능을 가지고 있음을 확인하였다. 따라서 본 기술은 국내산 누에 핵다각체형 바이러스 브이비2의 p10 단백질 유전자를 이용한 전이벡터 피비엠10과 이에 의한 재조합바이러스 제작과 외래유전자 발현 및 유용물질 생산에 적용할 수 있다. 본 기술은 유용물질의 대량 생산시 경구접종에 적합한 다각체를 형성하는 재조합 바이러스를 제작할 수 있는 새로운 전이벡터를 국내산 누에 핵다각체병 바이러스 브이비2의 p10 유전자를 이용하여 제작하였으며, 이를 이용하여 효율적으로 외래유전자 발현 및 물질생산에 응용하는 방법을 제공하는데 그 목적이 있다.본 기술의 누에 핵다각체병 바이러스 브이비2의 피10 유전자 발현 벡터는 생물공학과 곤충 바이오텍에 있어서 유용물질 대량생산 수단으로 활용할 수 있으며, 특히 발현효율을 고려하여 누에 생체를 이용할 경우에 유용하다.
- 보유기관
- 한국산업은행
- 등록일
- 2001-05-18
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