일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 기술은 루미노코쿠수 알부스 유래의 베타-글루코시다제 유전자의 염기서열을 결정하고 이를 도입하여 구축한 발현벡터로 형질전환된 형질전환체를 배양하는 유전공학 기법을 이용하여 베타-글루코시다제 효소를 대량생산하는 것이다. 본 기술은 루미노코쿠스 알부스의 염색체 DNA를 제한효소로 절단하여 DNA 라이브러리를 제조한 후, 이 DNA 라이브러리로부터 얻은 적정 크기의 DNA 단편을 pUC19 벡터에 삽입하고 이 벡터로 대장균을 형질전환시킨 후 배양하여 베타-글루코시다제 유전자를 클로닝하고 상기 클로닝한 베타-글루코시다제 유전자를 지닌 E. coli 형질전환체를 선별한 다음 배양하고 이 배양액의 베타-클루코시다제 효소 활성을 측정하여 베타-글루코시다제 효소발현을 확인함으로써 루미노코쿠스 알부스의 베타-글루코시다제 유전자가 도입되어 형질전환된 대장균 배양에 의해 베타-글루코시다제 효소를 대량 생산할 수 있는 뛰어난 효과가 있다. 생산된 베타-글루코시다제는 섬유소 분해를 필요로 하는 펄프, 건축재, 의류 및 연료 산업에 이용된다.
- 보유기관
- 서울대학교
- 등록일
- 2004-11-24
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 기술은 단일쇄 RNA 바이러스 재조합 벡터내 삽입 서열의 유전적 안정성을 개선하기 위한 방법에 관한 것으로서 보다 상세하게는 단일쇄 RNA 바이러스 벡터, 특히 폴리오바이러스 벡터를 이용하여 생백신을 만들때 삽입되는 되래 DNA 서열의 G/C양의 분포를 전체 외래 DNA 서열에 걸쳐 균일하게 분포되도록 변이시키는 단계와 위 목적을 위해서 결합반응-부재 PCR 방법을 잉요하여 주형이 없이도 500bp길이의 삽입 DNA서열을 합성하는 방법을 포함하는 폴리오바이러스 벡터를 이용한 재조합 생백신의 유전적 안정성을 증가시키는 방법에 관한 것이다.본 기술은 단일쇄 RNA 바이러스 재조합 벡터내의 삽입 외래 DNA의 유전적 안정성을 증가시키는 방법을 제공한다. 또한, 본 기술은 폴리오바이러스 재조합 벡터내의 삽입 외래 DNA의 유전적 안정성을 증가시키는 방법을 제공한다. 한편, 본 기술은 연결반응-부재 PCR방법을 이용한 DNA의 제조방법을 제공한다. 본 기술의 방법은 종래의 폴리오바이러스를 재조합 벡터로 사용하는 것 보다 다양한 항원결정부위를 포함할 수 있는 벡터를 제공하고 외래 유전자의 유전적 안정성을 크게 향상 할 수 있는 방법을 제공함으로써 재조합 생백신으로서의 폴리오바이러스 벡터의 유용성을 크게 향상시킨다.
- 보유기관
- 고려대학교
- 등록일
- 2004-11-29
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 기술은 트랜스포존과 Cre/loxP 부위 특이적 재조합 방법을 이용하여, 염색체의 특정부위를 선택적으로 제거하여 새로운 미생물 변이주를 제조하는 방법에 관한 것이다.본 기술의 트랜스포존과 Cre/loxP 부위 특이적 재조합 방법을 이용함으로써 보다 간편하게 염색체의 특정부위를 제거할 수 있는 방법을 제공한다.
- 보유기관
- 한국과학기술원
- 등록일
- 2004-12-10
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
Receptor-type protein tyrosine kinase의 특징을 갖는 새로운 수용체 단백질을 encoding하는 사람 PTK7 cDNA 및 단백질PTK7 cDNA의 cloning, 아미노산 서열 규명, 발현하는 조직의 규명
- 보유기관
- 연세대학교
- 등록일
- 2004-12-17
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
∙인체에 안정한 GRAS 진핵미생물인 효모 Saccharomyces cerevisiae를 이용한 신개념의 외래단백질 재조합 분비생산 시스템임.∙전통 생리학을 근거로 개발된 기존 시스템의 한계를 획기적으로 극복할 수 있는 고효율 생산시스템으로서 효모 유전체 단위 검색을 통해 구성되는 최적의 단백질 발현 및 분비시스템임.∙인체단백질의 종류 및 고유의 특징에 따라 최적의 발현 및 분비를 유도할 수 있는 맞춤형 분비융합인자(translational fusion partner, TFP)의 초고속 검색 및 이용 기술임.∙다양한 인체 난분비단백질(싸이토카인류, 성장인자류, 치료용항체류 등)을 최적 발현 및 분비 유도할 수 있는 TFP를 효모 유전체(4000-5000 종의 TFP library 함유)로부터 invertase-based autoselection 시스템을 이용하여 초고속 발굴함.∙발굴된 TFP의 추가적 최적화(TFP engineering)를 통해 분비생산율을 극대화함. ∙인체 난분비성단백질인 인터류킨-2 및 G-CSF 등을 포함한 다수의 cytokine을 300-500 mg/liter 수준으로 고효율 분비생산할 수 있음.
- 등록일
- 2005-06-15
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
고복제수의 조절유전자를 포함하는 재조합 Streptomyces peucetius 와 이의 최적화배지를 이용한 독소루비신(doxorubicin)의 생산성을 증대하는 방법이다. 독소루비신의 생합성 과정에서 중요한 조절유전자가 삽입된 고복제수의 발현 플라스미드에 의해 형질전환된 재조합 스트렙토마이세스 페우세티우스 및 재조합 스트렙토마이세스 페우세티우스의 옥수수분말, K2HPO4 및 MgSO4를 포함한 최적화 배지를 이용하여 생산성을 증대시키는 기술로서 기존 야생형 균주에 비해 30배 이상 증가시킬 수 있어 산업적으로 유용하게 이용할 수 있다. 독소루비신은 polyketide에 속하는 안트라사이클린계 항생제로 DNA 염기쌍 사이에 들어가 RNA합성을 저해시키고 한가닥의 DNA를 파괴시키는 작용기전으로 유방암, 간암 등의 항암제로 사용되고 있다. 생산수율이 높은 daunorubicin을 미생물 발효공정으로 생산, 분리하고 화학반응으로 독소루비신으로 전환시켜 생산하나, 공정이 복잡하고 번거로우며 생산비용이 많이 소요된다. 또 스트렙토마이세스 페우세티우스를 이용한 합성법은 복잡하고, 분자유전학적 생합성 조절기작 때문에 수율이 적은 어려움이 있다. 또한 배지조성의 최적화, 순환 무작위 돌연변이 유발로 생산성 향상 노력에도 불구하고, 스트렙토마이세스 페우세티우스의 분자유전학적 배경이 고려되지 않아 만족할 만한 수율로 생산할 수 없었다. 독소루비신의 생합성에 관여하는 조절유전자를 포함한 발현 플라스미드를 제조하고, 발현 플라스미드에 의해 형질전환된 재조합 스트렙토마이세스 페우세티우스를 제조하며, 이를 최적화 배지에서 배양한 다음 생산된 독소루비신을 분리 정제하여 생산하는 것이다. 즉 독소루비신의 생합성에 관여하는 조절유전자(dnrI)를 고복제수의 플라스미드(pESK402)에 삽입하여 이를 스트렙토마이세스 페우세티우스에서 과발현시켜 균주의 최적배양조건을 갖는 배지에서 배양하여 생산성을 증대시켰다. 따라서 독소루비신의 생합성 경로에 영향을 미치는 조절유전자를 고복제수의 발현 플라스미드에 클로닝하고 재조합 발현 플라스미드에 의해 형질전환된 재조합 스트렙토마이세스 페우세티우스를 제조하였으며, 최적의 배지조건에서 배양할 경우 30배 이상 증가됨을 확인하고 생산성 증대방법을 확보하였다.스트렙토마이세스 페우세티우스 균주로 독소루비신을 생합성하는 데에 관여하는 조절유전자(dnrI)는 카테콜 프로모터에 의해 발현되는 발현 플라스미드로서 고복제수인 것을 특징으로 한다. 또한 발현 플라스미드는 카테콜 프로모터 하에 dnrI 조절유전자가 삽입된 고복제수의 pESK402로서, 이에 의해 형질전환된 재조합 스트렙토마이세스 페우세티우스 ATCC27952/pESK402이며, 최적화배지는 옥수수분말, K2HPO4 및 MgSO4를 포함한다. 재조합 스트렙토마이세스 페우세티우스와 이의 최적화 배지를 통해 독소루비신을 생산함으로써 야생형 균주와 비교하여 생산량을 30배 이상 증가시킬 수 있다. 국내 10대 항암제가 차지하는 시장은 '03년 1,149억으로 전체 항암제 추정 시장의 약 40.7%를 차지하며, 10대 제품의 '04년 시장규모는 1,521억으로 '03년 대비 약 32% 증가하였으며 전체 시장의 약 43.0%를 차지한다. 이는 글리벡, 엘록사틴 및 신규로 10대 항암제에 진입한 아스트라사의 이레사 제품의 급격한 매출증대에 의한 것으로 분석된다. 따라서 ‘04년의 국내 항암제 시장은 3,500억 정도이다. 현재까지는 화학요법제인 세포독성제가 차지하는 비중과 성장률이 가장 높으나, 해외와 마찬가지로 향후 이 비중은 점차 낮아질 것으로 보인다. 본 기술은 항암제로 이미 사용되고 있는 독소루비신의 생산성을 증대시킨 기술로서 배양설비를 갖춘 GMP설비에서의 제조생산에는 어려움이 없을 것으로 판단되나, 본 기술로 생산된 독소루비신과 기존 독소루비신과의 생물학적 동등성시험을 거쳐 최종 제품으로 사업화하는 것이 요구된다. 이미 제품화되고 있는 독소루비신의 생산효율을 30배 이상 증대시키는 점에서 생산원가절감에 따른 것으로 차별화전략으로 경쟁할 수 있을 것으로 예상된다.
- 보유기관
- 인하대학교
- 등록일
- 2006-01-18
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 DNA 반복염기서열(repeat sequence)을 선택 농축한 DNA 라이브러리 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 간략하게 포유동물의 조직으로부터 게놈(genomic) DNA를 분리하는 단계와 초음파 파쇄(sonication)를 일정한 크기로 DNA를 절단하는 단계, 및 가열 변성후 재교잡하여 교잡화되지 않은 단일사슬부분을 단일사슬 선택적 뉴클리아제를 이용하여 제거함으로서 반복서열을 선택 농축한 DNA 라이브러리 및 이의 제조방법에 관한 것이다.본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 작동 성능이 우수한 DNA 반복서열이 선택 농축된 DNA 라이브러리를 제공하는 것과 효율적으로 DNA 반복서열을 선택 농축한 DNA 라이브러리 제조방법을 제공하는 것이다. 본 발명에 따른 DNA 반복서열을 선택 농축한 DNA 라이브러리는 DNA 교잡연구 방법에서 비특이적 반응을 효율적으로 차단하며, 본 발명에 의한 DNA 라이브러리 제조방법은 반복염기서열을 효율적으로 선택 농축하고, 작동성능이 우수한 반복염기서열을 제공한다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-05-12
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 HIV의 psi RNA 염기서열에 특이적으로 결합하는 펩티드 및 전기 펩티드를 암호화하는 유전자에 관한 것이다. 본 발명자들은 psi 염기서열과 결합하여 HIV-1의 증식을 저해시킬 수 있는 펩티드를 선별하고자 파지 디스플레이 시스템(phage display system, PDS)을 이용하였다. PDS는 단일 섬유상 박테리오파아지 M13(single strand filamentous bacteriophage M13)의 외피단백질의 일종인 gⅢ 단백질에 무작위 펩티드를 발현시켜서, 특정 타겟 단백질, DNA 또는 RNA와 강력하게 결합하는 펩티드를 선별하는 방법으로서,바이오패닝(biopanning)이라는 단계를 포함한다. 바이오패닝은 플레이트에 특정 타겟 단백질, DNA 또는 RNA을 코팅, 블러킹(blocking), 세척, 파지 디스플레이-펩티드라이브러리 결합, 세척하여 결합되지 않은 파지의 제거, 결합된 파지의 용출 및 용출된 파지를 증폭시키는 일련의 단계를 포함한다. 전기 시스템을 이용할 경우, 리간드를 암호화하는 염기서열을 신속하게 검출할 수 있고, 대량의 펩티드들을 짧은 시간내에 스크리닝할 수 있다는 장점이 있어, 다양한 분야에서 유용하게 활용되고 있다.본 발명은 HIV의 psi RNA 염기서열에 특이적으로 결합하는 펩티드 및 전기 펩티드를 암호화하는 유전자를 제공한다. 본 발명의 psi 염기서열과 결합하여 HIV-1의 증식을 저해시킬 수 있는 펩티드는 SYQWWWHSPQTL의 아미노산 서열을 가지는 펩티드이다. 본 발명의 펩티드는 psi RNA 염기서열에 결합하여, psi RNA 염기서열과 NC 단백질 간의 결합을 저해함으로써, HIV의 증식을 억제하므로, 효과적인 후천성 면역결핍증의 치료에 널리 활용될 수 있을 것이다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 신규 원암 유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질에 관한 것으로, 본 발명의 원암 유전자는 기존의 보고된 원암 유전자와는 전혀 상동성을 나타내지 않는 신규 유전자로서 자궁경부암, 폐암, 백혈병, 림프종, 신장암, 간암, 난소암, 자궁암을 비롯한 암의 진단, 형질전환 동물의 제조 및 안티-센스(anti-sense) 유전자치료 등에 효과적으로 이용될 수 있다.인간을 포함한 고등동물들은 약 100,000 개의 유전자들을 갖고 있으나 이들중 약 15% 만이 각각의 개체에서 발현된다. 따라서, 어떠한 유전자가 선택되어 발현되느냐에 따라서 생명의 모든 현상 즉 발생, 분화, 항상성(homeostasis), 자극에 대한 반응, 세포분열 주기조절, 노화, 및 아폽토시스(apoptosis; programmed cell death)등이 결정된다(Liang, P. and A. B. Pardee, Science,257: 967-971(1992)).종양발생과 같은 병리학적 현상은 유전자 변이과정으로 유발되어 결국에는 유전자 발현의 변화를 유도하게 된다. 따라서 상이한 세포들 사이에서 나타나는 유전자 발현들의 비교는 여러 생물학적 현상을 이해하는데 기본적이고 효과적인 접근방법이라고 할 수 있다.본 발명의 목적은 신규 원암 유전자 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 다른 목적은 상기 원암 유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암 유전자에 의해 코드되는 단백질 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암 유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암 유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA에 상보적인 염기서열을 지닌 안티센스 유전자를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 안티센스 유전자를 사용하여 암을 치료 또는 예방하는 것이다.본 발명의 한 태양에 따라, 서열번호: 1의 뉴클레오티드 서열을 갖는 신규한 원암유전자 또는 그의 단편이 제공된다.본 발명의 다른 태양에 따라, 상기 원암 유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물이 제공된다.본 발명의 또 다른 태양에 따라, 서열번호: 2의 아미노산 서열을 갖는 단백질 또는 그의 단편이 제공된다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-06-12
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 급성 출혈열을 일으키는 신규 바이러스, 이 바이러스의 항원 단백질, 이 바이러스의 검출 방법 및 이 바이러스를 사용한 백신에 관한 것으로, 상세하게는 본 발명에 따른 바이러스는 급성 출혈열을 일으키고, DNA 핵산을 포함하는 직경 25 내지 35 ㎚ 크기의 정20면체 뉴클레오캡시드(nucleocapsid)가 외피로 둘러싸인 직경 60 내지 70 ㎚의 비리온(virion) 구조를 가지며, 감염세포에서 다핵 거대세포를 형성하는 것을 특징으로 하는 율리 바이러스로서, 약 72.1 kDa, 55.7 kDa, 52.6 kDa 및 50.1 kDa 의 분자량을 갖는 항원 단백질을 포함하며, 혈액 시료를 이 바이러스, 이로부터 분리된 항원 단백질, 이에 대한 항체 또는 이의 유전자와 반응시킴으로써 검출할 수 있으며, 이 바이러스 또는 이로부터 분리된 항원 단백질은 급성 출혈열의 예방에 유용한 백신으로 제조될 수 있다.본 발명은 급성 출혈열을 일으키는 신규 바이러스, 이 바이러스의 항원 단백질, 이 바이러스의 검출 방법 및 이 바이러스를 사용한 백신에 관한 것이다.현재 국내에서 발생하는 급성 출혈열 질환(acute febrile hemorrhagic disease)은 발진열(murine typhus), 쭈쭈가무시병(scrub typhus), 렙토스피라병(leptospirosis) 및 신증후 출혈열(hemorrhagic fever with renal syndrome: HFRS) 등이 알려져 있다. 이 중 발진열, 쭈쭈가무시병 및 렙토스피라병은 세균 병원체인 리켓치아 타이피(Rickettsia typhi), 리켓치아 쭈쭈가무시(R. tsutsugamushi) 및 렙토스피라 인테로간스(Leptospira interrogans)에 의해 각각 일어나며, 신증후 출혈열은 바이러스 병원체인 한타 바이러스(Hantavirus)에 의해 일어나는 것으로 알려져 있다.특히 한타 바이러스는 3개로 분절된 단일가닥의 RNA를 핵산으로 포함하고 외피(envelop)로 둘러싸여 있으며 나선 대칭(helical symmetry)의 비리온을 형성한다.
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- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-06-12
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
PCR 반응혼합물, AML1-ETO 융합유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, ABL 유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, AML1-ETO 표준 플라스미드 DNA, ABL 표준 플라스미드 DNA, AML1-ETO 음성대조군 및 ABL 음성대조군을 포함하는 AML1-ETO 정량키트 및 전기 키트를 이용하여 AML1-ETO 융합유전자를 정량하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 AML1-ETO 정량키트를 사용할 경우, 급성 골수성 백혈병의 원인이 되는 AML1-ETO 융합유전자의 재조합 정도를 보다 간편하고, 정확하게 정량할 수 있으므로, 급성 골수성 백혈병의 정확한 진단에 널리 활용될 수 있을 것이다.AML1-ETO 정량키트에 관한 것이다. 좀 더 구체적으로, 본 발명은 PCR 반응혼합물, AML1-ETO 융합유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, ABL 유전자를 검출할 수 있는 프로브 및 프라이머 혼합물, AML1-ETO 표준 플라스미드 DNA, ABL 표준 플라스미드 DNA, AML1-ETO 음성대조군 및 ABL 음성대조군을 포함하는 AML1-ETO 정량키트 및 전기 키트를 이용하여 AML1-ETO 융합유전자를 정량하는 방법에 관한 것이다.급성 골수성 백혈병(acute myelogenous leukemia, AML)은 다양한 발병원인이 밝혀지고 있으나, 가장 일반적인 원인은 염색체의 전좌(translocation)에 의하여 발생하는 것으로 알려져 있는데, 특히 8번 염색체와 21번 염색체의 전좌가 주된발병원인으로 알려져 있는데, 전기 21번 염색체의 AML1유전자가 8번 염색체의 ETO유전자 부위에 전좌되어 융합된 유전자 재배열을 AML1-ETO 재배열(AML1-ETO rearrangement)이라고 한다. 전기 AML1-ETO 재배열은 세포학적으로 발견이 어려우나, 환자의 치료방향 결정과 예후 판단에 중요하므로, 분자생물학적 결과가 중요한 의미를 가진다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-1로부터 발현된 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 항원-항체 결합반응으로 검체 시료 중의 HCCR-1 단백질을 검출하는 방법 및 이를 이용한 간암 진단키트에 관한 것으로, 본 발명의 HCCR-1 특이적인 항체를 이용한 검출방법 및 진단키트는 기존의 AFP (alpha-fetoprotein) 검사법보다 진단의 정확도 및 재현성이 높아 간암의 조기진단 및 소간암의 진단에 매우 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-1로부터 발현된 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 항원-항체 결합 반응으로 검체 시료중의 HCCR-1 단백질을 검출하는 방법 및 이를 이용한 간암 진단키트에 관한 것이다.본 발명의 목적은 간암의 효과적인 조기진단을 위하여 인간 원암유전자를 이용한 간암 검출방법 및 진단키트를 제공하는 것이다.상기 목적에 따라, 본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-1로부터 발현된 단백질에 특이적인 항체를 구성요소로 하며, 항원-항체 결합반응을 통해 생체 시료 중 HCCR-1 단백질의 발현정도를 측정하여 간암을 진단하는 방법 및 이를 이용한 간암 진단키트를 제공한다.HCCR-1 단백질을 특이적으로 인식하는 항체를 제조하기 위해서는, 우선 HCCR-1 단백질을 입수하여야 한다. HCCR-1 단백질은 공지된 아미노산 서열을 이용하여 합성하거나 유전공학적 방법에 의해 재조합 단백질의 형태로 생산할 수 있다. 예를 들면, NIH 프로그램 GenBank 상에 등재된 HCCR-1 유전자의 염기서열을 이용하여 HCCR-1 단백질을 재조합 단백질 형태로 발현하는 발현벡터를 제조하는 단계; 상기 발현벡터를 대장균에 형질전환시켜 HCCR-1 재조합 단백질을 생산하는 형질전환체를 얻는 단계; 및 상기 형질전환체를 배양하여 인간 원암유전자 HCCR-1 재조합 단백질을 분리·정제하는 단계에 의해 HCCR-1 재조합 단백질을 제조할 수 있다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 신규 원암유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질에 관한 것으로, 본 발명의 원암유전자는 기존의 보고된 원암유전자와는 전혀 상동성을 나타내지 않으며 암전이 (metastasis) 유발능을 나타내는 신규 유전자로서 백혈병, 자궁암, 림프종, 대장암, 폐암, 및 피부암 등을 비롯한 암의 진단, 형질전환 동물의 제조 및 안티-센스 (anti-sense) 유전자 치료 등에 효과적으로 이용될 수 있다.종양발생과 같은 병리학적 현상은 유전자 변이과정으로 유발되어 결국에는 유전자 발현의 변화를 유도하게 된다. 따라서, 상이한 세포들 사이에서 나타나는 유전자 발현들의 비교는 여러 생물학적 현상을 이해하는데 기본적이고 효과적인 접근방법이라고 할 수 있다. 예를 들면, 리앙과 파디 (Liang, P. and A. B. Pardee, Science 257: 967-971, 1992)에 의해 제안된 mRNA 감별전개 (differential display) 방법은 현재 종양억제 유전자나 세포분열 주기 (cell cycle)에 관련된 유전자 및 아폽토시스에 관련된 전사조절 유전자 (transcriptional regulatory gene) 등의 탐색에 효과적으로 이용되고 있으며, 또한 하나의 세포에서 일어나는 다양한 유전자들의 상호 관련성의 규명에도 다양하게 활용되고 있다.본 발명의 목적은 신규 원암유전자 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자에 의해 코드되는 단백질 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA에 상보적인 염기서열을 지닌 안티센스 유전자를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 안티센스 유전자를 포함하는 항암 및 항전이 조성물을 제공하는 것이다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-06-12
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생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 신규 원암유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질에 관한 것으로, 본 발명의 원암유전자는 기존의 보고된 원암유전자와는 전혀 상동성을 나타내지 않으며 암전이 (metastasis) 유발능을 나타내는 신규 유전자로서 백혈병, 자궁암, 림프종, 대장암, 폐암, 및 피부암 등을 비롯한 암의 진단, 형질전환 동물의 제조 및 안티-센스 (anti-sense) 유전자 치료 등에 효과적으로 이용될 수 있다.종양발생과 같은 병리학적 현상은 유전자 변이과정으로 유발되어 결국에는 유전자 발현의 변화를 유도하게 된다. 따라서, 상이한 세포들 사이에서 나타나는 유전자 발현들의 비교는 여러 생물학적 현상을 이해하는데 기본적이고 효과적인 접근방법이라고 할 수 있다. 예를 들면, 리앙과 파디 (Liang, P. and A. B. Pardee, Science 257: 967-971, 1992)에 의해 제안된 mRNA 감별전개 (differential display) 방법은 현재 종양억제 유전자나 세포분열 주기 (cell cycle)에 관련된 유전자 및 아폽토시스에 관련된 전사조절 유전자 (transcriptional regulatory gene) 등의 탐색에 효과적으로 이용되고 있으며, 또한 하나의 세포에서 일어나는 다양한 유전자들의 상호 관련성의 규명에도 다양하게 활용되고 있다.본 발명의 목적은 신규 원암유전자 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자에 의해 코드되는 단백질 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA에 상보적인 염기서열을 지닌 안티센스 유전자를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 안티센스 유전자를 포함하는 항암 및 항전이 조성물을 제공하는 것이다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-06-12
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본 발명은 신규 원암유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질에 관한 것으로, 본 발명의 원암유전자는 기존의 보고된 원암유전자와는 전혀 상동성을 나타내지 않으며 암전이 (metastasis) 유발능을 나타내는 신규 유전자로서 백혈병, 자궁암, 림프종, 대장암, 폐암, 및 피부암 등을 비롯한 암의 진단, 형질전환 동물의 제조 및 안티-센스 (anti-sense) 유전자 치료 등에 효과적으로 이용될 수 있다.종양발생과 같은 병리학적 현상은 유전자 변이과정으로 유발되어 결국에는 유전자 발현의 변화를 유도하게 된다. 따라서, 상이한 세포들 사이에서 나타나는 유전자 발현들의 비교는 여러 생물학적 현상을 이해하는데 기본적이고 효과적인 접근방법이라고 할 수 있다. 예를 들면, 리앙과 파디 (Liang, P. and A. B. Pardee, Science 257: 967-971, 1992)에 의해 제안된 mRNA 감별전개 (differential display) 방법은 현재 종양억제 유전자나 세포분열 주기 (cell cycle)에 관련된 유전자 및 아폽토시스에 관련된 전사조절 유전자 (transcriptional regulatory gene) 등의 탐색에 효과적으로 이용되고 있으며, 또한 하나의 세포에서 일어나는 다양한 유전자들의 상호 관련성의 규명에도 다양하게 활용되고 있다.본 발명의 목적은 신규 원암유전자 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자에 의해 코드되는 단백질 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA에 상보적인 염기서열을 지닌 안티센스 유전자를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 안티센스 유전자를 포함하는 항암 및 항전이 조성물을 제공하는 것이다.
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본 발명은 신규 원암유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질에 관한 것으로, 본 발명의 원암유전자는 기존의 보고된 원암유전자와는 전혀 상동성을 나타내지 않으며 암전이 (metastasis) 유발능을 나타내는 신규 유전자로서 백혈병, 자궁암, 림프종, 대장암, 피부암, 신장암, 유방암, 난소암, 위암 및 간암 등을 비롯한 암의 진단, 형질전환 동물의 제조 및 안티-센스(anti-sense) 유전자 치료 등에 효과적으로 이용될 수 있다.종양발생과 같은 병리학적 현상은 유전자 변이과정으로 유발되어 결국에는 유전자 발현의 변화를 유도하게 된다. 따라서, 상이한 세포들 사이에서 나타나는 유전자 발현들의 비교는 여러 생물학적 현상을 이해하는데 기본적이고 효과적인 접근방법이라고 할 수 있다. 예를 들면, 리앙과 파디 (Liang, P. and A. B. Pardee, Science 257: 967-971, 1992)에 의해 제안된 mRNA 감별전개 (differential display) 방법은 현재 종양억제 유전자나 세포분열 주기 (cell cycle)에 관련된 유전자 및 아폽토시스에 관련된 전사조절 유전자 (transcriptional regulatory gene) 등의 탐색에 효과적으로 이용되고 있으며, 또한하나의 세포에서 일어나는 다양한 유전자들의 상호 관련성의 규명에도 다양하게 활용되고 있다.본 발명의 목적은 신규 원암유전자 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자에 의해 코드되는 단백질 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA에 상보적인 염기서열을 지닌 안티센스 유전자를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 안티센스 유전자를 포함하는 항암 및 항전이 조성물을 제공하는 것이다.상기 목적에 따라, 본 발명에서는 서열번호: 1의 염기 서열을 갖는 원암유전자 또는 그의 단편을 제공한다.상기 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공한다.상기 또 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 서열번호: 2의 아미노산 서열을 갖는 단백질 또는 그의 단편을 제공한다.상기 또 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공한다.상기 또 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 상기 원암단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공한다.상기 또 다른 목적에 따라, 본 발명에서는 상기 원암유전자 또는 그의 단편으로부터 전사되는 mRNA 서열의 전부 또는 일부와 상보적인 염기서열을 지니고, 상기 mRNA에 결합하여 상기 원암유전자 또는 단편의 발현을 억제하는 안티-센스 유전자를 제공한다.
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본 발명은 신규 원암유전자 및 이에 의해 코드되는 단백질에 관한 것으로, 본 발명의 원암유전자는 기존의 보고된 원암유전자와는 전혀 상동성을 나타내지 않으며 암전이 (metastasis) 유발능을 나타내는 신규 유전자로서 자궁암, 난소암, 유방암, 신장암, 간암, 폐암 및 위암 등을 비롯한 암의 진단, 형질전환 동물의 제조 및 안티-센스 (anti-sense) 유전자요법을 비롯한 항암유전자 치료 및 항암전이 요법 등에 효과적으로 이용될 수 있다.종양발생과 같은 병리학적 현상은 유전자 변이과정으로 유발되어 결국에는 유전자 발현의 변화를 유도하게 된다. 따라서, 상이한 세포들 사이에서 나타나는 유전자 발현들의 비교는 여러 생물학적 현상을 이해하는데 기본적이고 효과적인 접근방법이라고 할 수 있다. 예를 들면, 리앙과 파디 (Liang, P. and A. B. Pardee, Science 257: 967-971, 1992)에 의해 제안된 mRNA 감별전개 (differential display) 방법은 현재 종양억제 유전자나 세포분열 주기 (cell cycle)에 관련된 유전자 및 아폽토시스에 관련된 전사조절 유전자 (transcriptional regulatory gene) 등의 탐색에 효과적으로 이용되고 있으며, 또한 하나의 세포에서 일어나는 다양한 유전자들의 상호 관련성의 규명에도 다양하게 활용되고 있다.본 발명의 목적은 신규 원암유전자 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 재조합 벡터 및 이에 의해 형질전환된 미생물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자에 의해 코드되는 단백질 및 그의 단편을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 단백질 또는 그의 단편을 포함하는 암 진단용 키트를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA에 상보적인 염기서열을 지닌 안티센스 유전자를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 안티센스 유전자를 포함하는 항암 및 항전이 조성물을 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 원암유전자 또는 그의 단편으로부터 유도되는 mRNA와 동등한 염기서열을 지닌 짧은 단편의 특징을 갖는 이중가닥 RNA를 제공하는 것이다.본 발명의 또 다른 목적은 상기 이중가닥 RNA를 포함하는 RNAi 유전자 치료용 항암 및 항전이 조성물을 제공하는 것이다.
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- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-06-12
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-2로부터 발현된 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 항원-항체 결합반응으로 검체 시료 중의 HCCR-2 단백질을 검출하는 방법 및 이를 이용한 간경변증 진단 키트에 관한 것으로, 본 발명의 HCCR-2 특이적인 항체를 이용한 검출방법 및 진단 키트는 간경변증에 대한 진단의 정확도 및 재현성이 높아 간경변증의 조기진단에 매우 유용하게 사용될 수 있다.간경변증은 간의 염증이 오래 지속된 결과 간의 표면이 우둘두둘해지는 증상을 나타내는데, 이는 임상적으로는 범위가 넓어서 외관상 정상인과 별 차이가 없고 멀쩡한 환자에서부터 병색이 완연하고 수척하고 복수가 차 있는 환자에 이르기까지 증상이 다양하다. 간경변증은 있으나 합병증을 동반하지 않고 임상적으로는 정상인 전자(前者)와 같은 상태를 대상성(代償性) 간경변증이라 하고, 각종 합병증을 동반하는 후자(後者)와 같은 상태의 간경변증을 비대상성(非代償性) 간경변증이라 한다.본 발명의 목적은 간경변증의 효과적인 조기진단을 위하여 혈청 중 인간 원암단백질을 검출하는 방법 및 이를 이용한 간경변증 진단 키트를 제공하는 것이다.상기 목적에 따라, 본 발명은 인간 원암유전자 HCCR-2로부터 발현된 단백질에 특이적인 항체를 포함하며, 항원-항체 결합반응을 통해 생체 시료 중 HCCR-2 단백질의 발현을 검출하는 방법 및 이를 이용한 간경변증 진단키트를 제공한다.간경변증의 효과적인 조기진단을 위한 검사방법을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 인간 원암유전자인 HCCR-2 (대한민국 특허공개 제2002-41550호, GenBank Accession No. AF315598)로부터 발현되는 단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하여 항원-항체 결합반응으로 간경변증을 효과적으로 검출할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-06-12
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
○ 기술발명의 목적: 무라인 GM-CSF를 대량 생산하기 위한 재조합 벡터○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 재조합 싸이토카인을 포함하는 벡터와 그것을 발현하는 재조합 숙주에 관한 발명으로, 더욱 상세하게는 무라인 그래뉼로사이트-매크로파지 콜로니 자극 인자를 포함하는 재조합 벡터와 그것을 발현하는 형질 전환된 재조합 숙주인 Aspergillus niger에 대한 발명으로 본 발명에 의해 특이성이 높은 무라인 그래뉼로사이트-매크로파지 콜로니 자극 인자를 대량으로 얻어서 여러 임상에 적용할 수 있다.○ 색인어: 무라인 GM-CSF, 재조합 벡터, 재조합 아스포질러스 나이거본 발명은 글리셀알데히드 3-인산 탈수소효소(GPD)의 프로모터와 터미네이터를 갖는 무라인 GM-CSF를 갖는 재조합 벡터를 제공한다.본 발명의 재조합 벡터는 pANGM-CSF 프라즈미드가 적당하다. 또한 본 발명은 상기 재조합 벡터를 발현하는 재조합 숙주세포인 사상성 진균을 제공한다.본 발명의 사상성 진균은 Aspergillus niger가 적당하다.본 발명의 Aspergillus niger는 Aspergillus niger KCTC 0661BP가 적당하다.사상성 진균는 완전세대가 밝혀지지 않은 불완전균에 속하며, 따라서 무성포자만을 형성한다. GM-CSF를 생산하는 재조합 A. niger는 다양한 종류의 배지에서 생장이 가능하나, 균체 생장을 위하여서는 2% malt extract, 2% glucose, 0.1% peptone을 포함하는 CM 배지가 사용되었고, 재조합 단백질 GM-CSF의 생산을 위하여서는 A. niger고유의 단백질 분해효소 생산능력을 억제시키기 위하여, 1% yeast extract, 2% peptone, 2% glucose, 100mM NH4 Cl, 0.6% urea를 포함하는 배지가 사용되었다.생육조건으로는 다양한 pH와 온도에서 생육이 가능하나 pH 5.0-6.0 와, 30℃-37℃에서 생장이 재조합 단백질 발현의 최적조건이었다.본 발명에서 특별한 언급이 없으면, 본 발명에 사용된 모든 화학물질, 배지 및 효소는 각각 Sigma Chemical CO.(St.Louis, MO), Difco Laboratories(Detroit,MI) 또는 Boehringer Mannheim(Mannheim, Germany)에서 구입하여 사용한다.
- 보유기관
- 전북대학교
- 등록일
- 2006-05-18
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생명과학 > 유전자 재조합 기술
본 발명은 글루타치온(glutation:GSH)생합성에 관여하는 감마-글루타밀시스테인 합성효소를 코딩하는 메탄올자화 효모 한세눌라 폴리모르파 유전자 HpGSH2에 관한 것이다.HpGSH2에 의해 코딩되는 단백질은 아미노산 서열 면에서 캔디다 알비칸스 상동체인 Gsc1p와 비교하여 53% 동일성과 69%유사성을 보이며,사카로마이세스 세레비시에의 상동체에 비교하면 47%동일성과 61%유사성을 보인다.HsGSH2 유전자가 글루타치온 생합성 결손 변이주인 한세눌라 폴리모르파 gsh2 세포내로 도입되면 GSH생합성 기능과 더불어 중금속 내성 및 세포 증식기능을 회복시킨다.특히 HpGSH2 유전자는 다중으로 도입된 경우 숙주 세포의 중금속 내성을 증가시키는 기능을 지녔다○기술성글루타치온 생합성 관련 감마-글루타밀시스테인 합성효소/HsGSH2유전자 클로닝/HpGSH2 유전자 다중도입 및 과발현/글루타치온 생합성능 및 중금속 내성 증가 재조합 균주 개발○사업성글루타치온 합성에 관여하는 효소의 유전자를 대장균 또는 효모에 다중 도입함으로써 유전자 재조합 기술의 발달로 인해 치료제나 건강 보조를 위한 식품 첨가제로 사용할수 있는 글루타치온 대량생산 기술개발에 관한 연구와 글루타치온 생합성관련 유전자들의 프로모터 활성이 독성물질 존재시높이 유도되므로 독성물질 모니터링을 위한 바이오센서 개발에 글루타치온 관련 유전자들의 프로모터들이 활용
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2006-05-24
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