일반기술
생명과학 > 효소공학 (H73)
본 기술은 동물, 식물뿐 아니라 일부 박테리아에도 세포내에 수내지 수십 mM수준의 농도로 존재하는 트리펩타이드 수황(tirpeptide sulfhydryl) 화합물인 글루타치온(Glutathione : r-glutamylcysteinylglycine)의 새로운 정량법에 관한 것으로 5,5'-dithiobis(2-nitrobenzoic acid) (DTNB)와 글루타치온 reductase를 이용한 글루타치온 분석 방법에 N-ethylmaleimide(NEM)처리 과정을 도입하여 산화형/환원형 글루타치온의 양을 동시에 정확히 측정하고, microplate를 사용하여 다량의 시료를 한꺼번에 손쉽게 측정할 수 있는 분석 시스템이다. 본 기술은 글루타치온의 신규한 정량적 측정방법에 관한 것으로, 5,5'-디치오비스(2-니트로벤조산) (DTNB)와 같은 산화제와 글루타치온 환원효소를 이용한 글루타치온 분석 방법에 N-에틸말레이미드와 같은 수황화물 불활성화제 처리과정을 도입하여 환원형 글루타치온(GSH)과 산화형 글루타치온(GSSG)을 동시에 정확히 정량할 수 있다.또 다중 홈플레이트를 사용하여 시료를 한번에 손쉬운 방법으로 측정할 수 있다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 기타 생명과학
본 기술은 베타카로텐과 같은 카로테노이드계열 물질들의 색깔(황색)이 자외선 및 태양광에 의해 무색으로 변하는 고유의 특성을 이용하여 자외선에 대한 물체의 노출정도를 나타내는 직/간접의 지표를 개발하는 기술을 제시한다. 카로테노이드계열의 물질인 베타카로텐, 이스타잔틴 등이 이중결합 및 결합형태에 의해 노란색, 황색, 또는 붉은색을 띠고 있으며, 자외선에 의해 파괴된다. 이런 현상을 이용하여, 본 기술은 인체에 해롭지 않은 기름 등을 이용하여 이들 물질을 녹인 후, 종이에 적시거나 액상 그대로 캡슐을 만들어 자외선의 조사량을 색깔의 변화를 통해 쉽게 알 수 있도록 응용하는데 있다. 본 기술은 SPF(sun protection factor)의 간접적 지표수단, 자외선 장치 수명 측정, 인체에 유전 독성을 야기하는 자외선 조사량감지등 산업적으로 유용하게 활용할수 있다. 이러한 도구는 자외선으로부터 피부를 보호하기 위해 자외선 차단제로 이용되고 있는 썬크림 등과 같은 화장품의 효력이 발휘되는 시기, 즉 SPF수치를 눈으로 쉽게 구별하여 간접적으로 측정할 수 있는 도구로 이용될 수 있다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 단백질개량 기술
본 기술은 레트로바이러스 벡터를 이용하여 인터루킨-16 유전자를 활발히 분열하는 인체 암세포에 효과적으로 직접 도입하는 최초의 방법이다. 인터루킨-16 유전자를 HSV-tk유전자와 동시에 한 벡터시스템에서 발현시켜 레트로바이러스 벡터의 염색체 삽입에 의한 새로운 암유발을 방지할 수 있다. 인간 인터루킨-16 유전자 및 헤스페스 심플렉스 바이러스(HSV) 티민 카이네이즈 유전자를 포함하는 레트로바이러스 벡터, 상기 벡터를 포함하는 레트로바이러스를 생산하는 포장 세포주 및, 상기 인터루킨-16및 티민 카이네이즈를 생산하는 동물 세포주에 관한 것으로서, 본 기술의 레트로바이러스 벡터는 C-말단 분비형 인간 인터루킨-16 유전자, IRES서열 및 헤르페스 심플렉스 바이러스(HSV)티민 카이네이즈 유전자를 포함하는것을 특징으로 한다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 기타 유전자 공학
본 기술은 심장비대화 및 심방세동이 일어난 유전자 이식 마우스에 관한 것으로, junctate가 α-myosin heavy chain프로모터의 조절 하에 발현되도록 하는 유전자를 마우스에 이식하여 생산되는 심비대, 저심박동 및 심방세동이 일어나는 유전자 이식 마우스를 말한다.junctate를 과발현 시킨 유전자 이식 생쥐를 이용하여 주요 심장질환들에 포함되는 심장의 비대화와 저심박동 및 부정맥(심박세동)의 치료방법을 연구할 수 있다.생쥐의 심장에서 특이적으로 junctate를 과발현 시키기 위해 α-myosin heavy chain프로모터 및 전령 RNA의 안정성을 높이기 위한 인간 성장 호르몬의 polyadenylation 서열 사이에 삽입된 junctate의 과발현 결과, 유전자 이식 생쥐의 경우 주요 심장질환들에 포함되는 심장의 비대화와 저심박동 및 부정맥(심방세동)이 나타나므로, 유전자 이식 생쥐는 심비대와 심방세동의 기작 및 치료방법의 연구를 위한 모델 동물로서 이용될 수 있다.
- 보유기관
- 호남제주공공기술이전컨소시엄
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 기타 생명과학
본 기술은 인체에 사용이 가능한 폐 계면활성능을 지닌 합성 펩타이드 및 이를 이용한 폐 계면활성제와 그 제조방법에 관한 것이다. 본 기술은 인체에서 면역반응을 유발하지 않으므로 폐계면 활성제에 이용될 수 있는 합성 펩타이드 및 인지질과 조합한 폐 계면활성제와 그 제조방법에 관한 것으로서, 본 기술의 합성 펩타이드와 인지질이 조합된 약학적 조성물은 신행아 호흡불량증후군 등의 치료제로 사용될 수 있다. 미숙아 사망 방지에 큰 역할을 하는 폐계면활성제는 주로 소나 돼지와 같은 동물의 폐로 부터 추출해야하므로 원료의 제한이 있을 수 있고 동물유래의 단백질이 유입되므로 환아에게 면역반응을 일으키는 등 부작용이 나타날수 있으며 또한 수율이 매우 낮으므로 제품이 고가인 원인이 된다. 따라서 계면활성능에 필수적인 소수성 펩타이드인 SP-B의 일부를 합성하고 이것들을 (SP1, SP2)인지질과 조합하여 인공 폐 계면활성제를 조제하였으며, 이들의 표면활성능을 modified Wilhemly Plate method로 측정한 결과 신생아호흡불량증후군의 치료제로 사용이 가능한 정도의 표면활성능을 갖고 있음을 확인하였다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 기타 생명과학
본 기술은 대추 추출물을 포함하는 혈압강하용 조성물에 관한 것으로서 본 기술의 조성물은 의약용 및 식품용 조성물을 포함한다. 본 기술의 조성물은 동물체내의 혈압을 강하시키므로 고혈압 치료제 또는 건강식품의 성분으로서 유용하게 사용될 수 있다. 본 기술의 목적은 대추 추출물을 함유하는 혈압 강하용 조성물을 제공한다. 또한 대추로부터 혈압강하 성분을 추출하는 방법을 제공하는 것이다. 본 기술의 대추 추출물은 흰쥐에게 0.3내지 1.0g/kg의 양으로 투여할 때 24시간 동안 지속적인 혈압강하 작용을 나타낸다. 혈압을 강하시키기 위하여 대추추출물, 이의 농축액 또는 건조분말을 유효성분으로서 약제학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 혈압강하제 조성물을 제조할 수 있다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 기술은 대추 추출물을 포함하는 콜레스테롤 에스테르 전이 단백질(cholesterol ester transfer protein, CETP)활성 저해제 조성물에 관한 것으로서, 본 기술의 조성물은 의약용 및 식품용 조성물을 포함한다. 본 기술의 조성물은 동물체내의 CETP활성을 저해하여 혈중 콜레스테롤을 감소시키므로 각종 심혈관계 질환의 예방 및 치료제로서 또는 건강 식품의 성분으로서 유용하게 사용될 수 있다. 대추 추출물을 활성 성분으로서 약학적으로 허용되는 담체와 함께 포함하는 혈중 콜레스테롤 강하용 약학조성물 및 대추 추출물을 호함하는 혈중 콜레스테롤 강하용 식품 조성물이 제공된다. 또한 대추 출출물중 CETP저해물질을 활성 성분으로 약학적으로 허용되는 담체와 함께 포함하는 CETP저해용 약학조성물 및 대추 추출물을 포함하는 CETP저해용 식품 조성물이 제공된다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 기타 생명과학
본 기술은 플라본 유도체 및 이를 포함하는 항암제에 관한 것으로서, 대장암세포 증식억제용 플라본 유도체를 제공한다. 본 기술의 플라본 유도체는 대장암세포에 증식을 효과적으로 억제하며 동시에 정상적인 소장세포의 증식에 부작용을 발생시키지 않아 항암제로 유용하게 사용 가능하다. 따라서 대장암 예방 및 치료효과가 우수하며 부작용없이 안전하게 사용할 수 있다. 본 기술의 항암제는 약제, 식품 또는 식품첨가제로 사용할 수 있으며, 약제로 사용하는 경우 투여방법은 경구 또는 비경구 모두 가능하다. 본 기술의 플라본 유도체는 대장암세포의 증식을 현저히 억제하여 항암제로 유용하게 사용될 수 있다. 또한 플라본 유도체들은 정상 소장세포에는 유의적인 세포증식 억제효과를 나타내지 않는 것으로 확인되어 인체에 안전적으로 사용할 수 있다. 본 플라본 유도체는 통상의 화학반응을 통하여 용이하게 합성할 수 있다. 본 기술에서 채택한 방법은 염기-촉매된 축합반응을 통하여 칼콘 유도체를 제조한 후 이를 용매화에 고리화반응을 실시하여 제조하는 것이다.
- 보유기관
- 한림대학교
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 시클라멘 페르시쿰(Cyclamen persicum Mill)으로부터 분리된 화색관련 효소유전자인 다이하이드로플라보놀-4 리덕타아제(dihydroflavonol -4 reductase; DFR)의 유전자에 관한 것으로서, 식물 형질전환시 화색을 변화시킬 수 있는 뛰어난 효과를 제공한다. 시클라멘 페르시쿰의 화색관련 효소를 PCR 방법을 이용하여 분리하고 이들의 염기서열을 밝혀 그 염기서열을 제공하는 것을 목적으로 한다. 그리고 상기 유전자를 식물발현 벡터에 클로닝한 후, 형질전환시키는 것을 그 목적으로 한다. 시클라멘 페르시쿰(Cyclamen persicum Mill)에서 화색관련 효소유전자를 분리하기 위해 프라이머를 작성하고 이를 이용하여 PCR과정을 거쳐 시클라멘 페르시쿰의 DFR 유전자의 염기서열을 밝힌다. 본 기술에 사용된 시클라멘 페르시쿰은 화색이 빨간 품종을 사용하였으며 완전 전개된 화판을 -70℃에 보관하여 RNA 분리에 사용하였다. 본 기술의 DFR 유전자를 포함하는 시클라멘 페르시쿰의 총 RNA 회수는 공지된 분리방법에 의해 이루어 진다.
- 보유기관
- 경희대학교
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 면역학
본 기술은 과수 바이러스 검정용 프라이머 및 이를 이용한 바이러스 검출방법에 관한 것이다. 특히 본 기술은 ASGV, ACLSV, CTV 또는 CTLV에 의한 감염여부를 쉽고 간단하게 검정할 수 있는 서열번호 1의 ASGV-Pf 프라이며, 서열번호 2의 ASGV-Pr 프라이며, 서열번호 3의 ACLSV-CPf 프라이머, 서열번호 4의 ACLSV-CPr 프라이머, 서열번호 5의 CTLV-CPf 프라이머, 서열번호 6의 CTLV-CPf 프라이머, 서열번호 5의 CTLV-CPf 프라이머, 서열번호 6의 CTLV-CPf 프라이머, 서열번호 7의 CTV-CPf 프라이머 및 서열번호 8의 CTV-CPr 프라이머로 이루어진 군으로부터 선택된 과수 바이러스 검정용 프라이머에 관한 것이다. 본 기술의 과수 바이러스 검정용 프라이머는 과수 식물체 또는 일부 즉, 식물세포, 잎, 종자, 꽃잎, 줄기, 뿌리, 열매 또는 종자로부터 RNA를 추출하여 1종의 프라이머 세트 또는 1종 이상의 프라이머 세트로 RT-PCR 을 실시하여 과수 바이러스를 검출할 수 있다. 상기 과수 식물체는 ASGV, ACLSV, CTLV 또는 CTV가 감염될 수 있는 모든 종류의 식물일 수 있으며, 일례로 사과 및 감귤이 있다. 본 기술의 과수 바이러스 검정용 프라이머들은 ASGC, ACLSV, CTLV 또는 CTV에 의한 감염여부를 쉽고 간단하게 검정할 수 있을 뿐만 아니라 바이러스들의 복합 감염 역시 정확하게 파악할 수 있다. 따라서, 본 기술의 과수 바이러스 검정용 프라이머를 이용하여 과수 바이러수의 감염경로를 추적하거나 종실아니 대목에 대한 감염여부를 진단할 수 있으며, 과수 바이러스를 사전에 예방 방제할 수 있다.
- 보유기관
- 경희대학교
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 카나마이신 저항성 유전자를 포함하는 rescue cloning용 식물형질전환용 벡터 pRCV1에 관한 것으로서, 유용 돌연변이체를 만들어 유전자의 기능을 탐색하는 T-DNA tagging 연구 및 형질전환 작물에서 나타나는 도입된 유전자의 비정상적인 발현 양상을 연구하기 위하여 개발된 본 식물형질전환용 벡터는 선발 마커로 카나마이신 저항성 유전자와 reporter gene을 갖추고 있고, tagging을 위해 이용되는 방법인 rescue cloning과 inverse PCR이 보다 효율적으로 수행될 수 있도록 T-border 내부의 제한효소 사이트, T-border 바깥쪽과 안쪽 부분을 바로 시퀀싱할 수 있는 프라이머 사이트가 각각 고려되어 제작되었기 때문에 전이된 T-DNA 내부의 변이와 식물 genomic DNA를 분리 확보하여 분석할 수 있는 보다 효과적이고 간단한 연구방법을 제공할 수 있으며, 더 나아가 T-DNA가 multiple copy로 전이된 형질전환체의 분석도 가능한 뛰어난 효과가 있다. 본 기술은 식물형질전환용 벡터 중 카나마이신 저항성 유전자(nptII)를 운반하는 pCAMBIA2300에 암피실린 저항성 유전자와 박테리아 복제기점(bacterial replication origin)을 갖고 있는 pBluescriptII KS(+)을 삽입시켜 tagging 용벡터(pRCV1)를 제작하고 tagging할 개체의 genomic DNA를 절단하기 위하여 이용할 제한효소를 결정하는 단계; 클로닝된 벡터(pRCV1)를 맵핑하여 클로닝이 정확하게 됐는지 여부를 확인하고 선택 마커가 벡터 내에 존재하는지 여부를 PCR로 확인하는 단계; pRCV1의 전체 염기서열을 기초로 T-DNA 양쪽 border 바깥쪽과 안쪽을 시퀀싱 할 수 있는 프라이머를 제작하여 제작된 프라이머를 PCR로 증폭하고 염기서열 분석하여 제대로 바깥쪽과 안쪽을 시퀀싱 할 수 있는지 여부를 확인하는 단계; pRCV1을 A.tumefaciens LBA4404내로 삽입하고 삽입된 pRCV1에 선택 마커가 존재하는지 여부를 PCR을 통해 확인하는 단계로 구성된다.
- 보유기관
- 경희대학교
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 유전자 치료 기술
본 기술은 식물 추출물을 포함하는 항고콜레스테롤증 조성물에 관한 것이다. 특히 본 기술은 혈관내 콜레스테롤 증가 및 침착에 의한 질환, 특히 고콜레스테롤혈증, 고지혈증, 동맥경화증, 협심증, 심근경색증 및 뇌경색증을 예방 및 치료하기 위한 용도로 제공될 수 있는 오리나무 추출물, 오가피 추출물 및 차가버섯 추출물에 관한 것이다.본 기술은 콜레스테롤 대사관련 유전자의 발현을 조절할 수 있는 천연물을 발견하기 위하여 약용식물의 에탄올 추출물을 유전자의 프로모터-리포터 접합 플라스미드가 도입된 세포주에 투여하는 방법을 사용한 것이다. 이 기술의 가장 큰 장점은 다양한 추출물의 활성을 유전자가 도입된 세포를 사용하여 대규모로 검색할 수 있는 점에서 찾을 수 있다.
- 보유기관
- 한림대학교
- 등록일
- 2004-06-22
상세보기
일반기술
생명과학 > 생화학
냉동 보관된 균주를 녹인 후 marine peptone extract에서 나흘 동안 round stirrer를 이용하여 배양한 후 원심분리로 분리한 cell mass (38.97 g)를 색소 추출에 사용한다. 일반적인 추출법과는 다르게 뜨거운 메탄올을 cell mass에 충전시킨 후 슬러리가 가라앉을 때까지 두 시간 정도 둔 후 상청액을 버리고 cell mass가 coloress grey로 될 때까지 이러한 과정을 반복한다. united methanolic 추출물을 rotating evaporator를 이용하여 용매를 제거하고 진공 오일 펌프를 이용하여 건조 시키면 deep black raw extract를 얻을 수 있다. 이 색소 혼합물 (73.5 g)을 dichlormethan/methanol (6+1)에 섞고 하룻밤동안 둔 후 다음날 상청액 (13.5 mg)을 실리카겔과 dichlormethan/methanol (6+1)에서 크로마토그래피법으로 분리하면 두개의 blue-violet 색소인 deoxyviolacein (0.4 mg)과 violacein (2.9 mg)을 얻을 수 있다. 또한 이렇게 분리된 색소를 분석의 목적으로 preparative HPLC나 methanol/n-hexan을 이용한 isothermal crystallization을 함으로 추가적으로 정제할 수 있다.최근 염료를 만들어 내는 해양 침전 박테리아인 Pseudoalteromonas 계통의“ Black Beauty"( DSM 13623; patent deposition at the DSMZ, Braunschweig )로부터 천연 blue-violet 염료를 생합성 하는 방법이 개발되었다. 해양 박테리아인 “ Black Beauty"는 특별히 천연 염료 violacein과 deoxyviolacein을 생산할 수 있는 매우 많은 양의 색소를 함유하고 있다. 또한 이 박테리아는 수득률을에 있어서도 특별히 배양시, 조건들을 최적화 시킴으로 향상시킬 수 있으므로 대량 생산의 측면에서 볼 때 적절하게 공정단계를 조절함으로 비교적 짧은 시간으로 많은 경제적인 이익을 얻을 수 있다. Violacein의 항균, 항바이러스 그리고 항암적인 측면에서 볼 때 생물 공학적으로 만들어진 색소는 앞으로 전염병을 치료하는 약물로도 쓰일 수 있다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기
일반기술
생명과학 > 생물반응기
ArraryBoosterTM의 핵심은 AdvaCardTM이다. 이것은 서로 다른 spotting 범위에 적용할 수 있는 세 가지 다른 크기의 micro-agitation chip(미세 교반 칩)이다. 최적의 교반 효율을 위해서 적어도 두 개 또는 세 개의 AdvaCardTM이 필요한데 라디오파 전압이 이 칩에 공급되면 이 칩과 microarray 사이에 끼어있는 혼성화 샘플 용액이 quasi-chaotic(외견상으로 무질서하게 보이는) 흐름 패턴으로 유도되게 된다. ArraryBoosterTM를 이용하여 올리고 마이크로 어레이에 Cy3로 표지된 쥐의 간 cDNA를 혼성 시키는 실험을 했을 때 하룻밤동안의 배양으로도 비(非)교반 실험과 비교하여 신호 강도를 10배까지 향상 시킬 수 있었다. ArraryBoosterTM를 단백질 microarray에 이용하면 신호 강도를 거의 10배까지 증가 시킬 수 있고 또한 신호 강도의 손실 없이 샘플의 농도를 줄일 수도 있다. ArraryBoosterTM는 built-in 병렬 포트 interface를 통하여 PC나 laptop에 연결할 수 있기 때문에 ArraryBoosterTM를 4개 연결하면 하나의 컴퓨터로 결과적으로 16개의 배양 챔버를 관리할 수 있게 된다. 또한 각각의 기계를 더 확장하기 위해 master나 slave module을 이용할 수도 있다. 외형적으로 매우 간단하고 직접적인 이 ArraryBoosterTM를 관리하는 소프트웨어는 모든 연결된 장치를 자동으로 detect할 수 있으며 사용자들에게 각각의 챔버를 독립적으로 조절할 수 있는 interface를 제공한다. 이 소프트웨어는 사용자에게 혼성화 샘플 용액이 가장 효과적으로 교반되는 다양한 흐름 패턴을 프로그래밍 할 수 있도록 해주고 혼성화시 모든 상대적인 인자들(온도, 공정 내구성, 교반 프로토콜)들 windows 파일 시스템에 다른 실험 데이터들과 같이 모든 배양단계에서의 실험 조건들을 세세하게 기록하여 보관하기 쉽게 텍스트 파일로 저장 할 수 있다.DNA microarray를 혼성화 시킬때 샘플의 확산에 있어서 한계를 가진다. 즉 신호의 강도는(특히나 적게 발현 되는 유전자일 경우) probe(탐침)에 reaching하는 target 물질의 수에 의해 결정되는데 확산은 큰 물질일 경우에 굉장히 느리게 진행되어 하루가 지나도 혼성화 시스템은 평형에 도달하지 않는다. 이러한 DNA 혼성화의 확산 한계는 샘플 용액을 교반 시켜줌으로 해결할 수 있다. ArrayBoosterTM은 DNA나 protein microarray를 incubation(배양)하는 동안
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기
일반기술
생명과학 > 생물반응기
multispot PCR에서는 먼저 서로 다른 프라이머들을 polymerase와 함께 PCR 칩표면에 스팟하면 칩위에 unspecific하게 붙게 된다. 두 번째 단계로 샘플 용액을 칩에 첨가 하게 되는데 이때에 단일 샘플 방울은 단지 하나의 스팟이나 스팟숫자로 정해진 하나의 well에 덮는다. 이 작은 방울들은 샘플을 pipetting하거나 표면 음파를 이용하여 형성된다. 세 번째 단계는 프라이머가 표면음파나 대류에 의해 용해되고 마침내 모든 방울들이 미네랄 오일로 덮이고 그 결과로서 PCR 프로토콜은 모든 스팟들이 독립적으로 그러나 병렬적으로 수행된다. 이러한 접근은 많은 양의 inhomogeneous assay(DNA 혼성화, ELISAs)에서 homogeneous assay 에 이르기까지 많은 수의 transformation을 가능하게 한다. PCR칩은 히터와 온도 센서가 붙어있어서 실시간 PCR에 이용할 수 있고 DNA microarray와 비교할 때 보존 기간을 가지고 있다.기존의 일반적인 PCR과는 다르게 multiplex PCR은 서로 다른 여러개의 프라이머를 이용함으로 많은 수의 개별적으로 진행되는 PCR을 한꺼번에 수행할 수 있으며, 상당한 시간과 가격면에서 경제적인 이득을 주고 샘플 수 또한 줄일 수 있기 때문에 샘플이 한정적일때 multiplex PCR은 아주 유용한 방법이다. 그러나 이러한 multiplex PCR은 최적화가 매우 어렵기 때문에 확실한 assay를 개발하기 위해 프라이머를 온도 프로토콜의 변화와 연관하여 디자인 하는데 많은 시간과 노력이 필요 했었다. multispot PCR은 multiplex PCR의 다른 접근 방식으로 일반적인 PCR의 장점과 multiplex PCR 간단한 조작법을 결합한 것이다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기
일반기술
생명과학 > 생물반응기
현재 시판되고 있는 shaken bioreactor 는 손쉬운 관리와 저렴한 가격으로 인해 현재까지도 많이 이용되고 있으나, 이들은 온라인 상에서 배양 상태 및 생리학적 시스템을 확인하지 못하는 결점을 가지고 있다. 또한 통상적으로 shaken bioreactor의 장점을 최대화하여 배양 최적화 및 strain 스크린 등으로 stirred bioreactor에서 고부가가치 물질의 배양을 위해sacle-up을 위한 인자들을 이용하여 고부가가치 product들을 생산하고 있는 실정이다.그러나 이들 배양 시스템의 최적화는 수동으로 발효조 내의 배양상태를 체크하고 있는 매우 원시적인 단계이므로 scale-up 시 많은 risk와 시행착오를 거쳐야 하는 문제점을 안고 있다.본 배양 시스템의 호흡활성 모니터링 시스템의 장점은 최적의 상태를 스크린 할 수 있 수 있으며, 또한 짧은 시간에 배양시스템의 set-up이 가능하여 지속적으로 균일한 배양환경을 유지할 수 있다는데 있다. 이러한 ideal shape으로 인한 모든 deviation은 배양조 내에서의 배양상태에 대해 사용자에게 정보를 제공하며, limitation, inhibition 그리고 일시적인 변화에 따른 성장에 대한 정보를 RAMOS에 의해 쉽게 감지 할 수 있도록 제작되었다. 본 장치는 measuring cycle을 연속적으로 반복할 수 있도록 제작되어 공기 유입을 통해 measuring flasks를 rinsing시킴으로써 시간에 따른 미생물의 호흡활성을 통한 생리학적 data(성장상태 등)를 측정하도록 하였다. 이는 각각의 measuring flasks의 headspace에 있는 산소(ORT)와 이산화탄소(CTR)의 부분압 측정기를 통해 이들의 차로 컴퓨터에서 모니터링 된다. 컴퓨터상의 모니터링을 통해 scale-up 시 보다 손쉽게 변화할 수 있는 인자들 (valuable factors)을 관리할 수 있으므로 배양시 나타나는 risk를 감소 할 수 있다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기
일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
세포배양의 encapsulation은 고밀도와 안전한 배양을 위한 방법으로 현재까지 이용되고 왔다. 캡슐 내에서 세포들은 유해한 환경으로부터 보호되고, 확산에 의해 기질들은 자유롭게 유입되는 반면에 대사물질과 product는 캡슐 내에 남아 있게 된다. 또한 캡슐들은 그들의 특성을 잃거나 변하지 않고 기계적인 스트레스에 저항하는데 있어 매우 안정적이다. 캡슐에 포함된 세포는 전통적인 stirred tank system에서도 세포의 손상 없이 배양될 수 있다. 이는 프로세스 과정을 안정화 할 수 있은 즉, pH, pO2와 같은 중요한 프로세스 파라메타들이 조절할 수 있다.본 기술의 새로운 시스템은 세포가 다당류의 메트릭스 내에서 새로운 형태로 encapsule되는 방법이다. 본 기술은 기존에 알려진 alginate encapsulation의 기술과 유사하나 원료로 사용되는 polysaccaride 가 생물학적인 원료로써 양이온과 중합하여 세포주변에서 고형막을 형성하는 칼슘클로라이드 용액에 떨어뜨려 캡슐을 형성한다. 세포가 외부 환경에 의존하지 않고 마이크로 환경 속에서 성장 할 수 있기 때문에 스케일링 프로세스 또한 간편하여 이에 관한 기술 개선을 위한 연구가 진행되고 있는 중이다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기
일반기술
생명과학 > 유전자원 활용화 기술
aptamer란 목적 물질에 높은 친화력을 가지는 DNA 혹은RNA를 말하며 통상적으로 SELEX(s ystematic evolution of ligands by ex ponential enrichment) 기법을 통해 원하는 목적 물질 즉, 단백질, 당, 염색물질, DNA 금속이온, 세포 등에 대한 aptamer를 분리한다. 이는 원하는 목적 물질이 용액에 자유롭게 남아 있도록 하여 high affinity aptamer를 클로닝과 시컨싱을 통해 분리하는 것으로 현재 사용되고 있는 본 SELEX기법은 많은 량의 목적 물질을 필요로 하고, 중요한 핵산의 시컨싱의 변형과 삭제가 일어나므로 폴리머라이즈의 리스크가 많게 되므로 많은 효소적 증폭 단계를 필요로 하는 단점을 안고 있다. 그리고 적어도 12회 이상의 cycle을 반복하여야 high affinity aptamer를 얻을 수 있으므로 많은 시간이 소요되고 있는 실정이다.본 사에서 개발된 MonolexTM 기술은 매우 빠르게 high affinity aptamer를 얻도록 개발되었다. 본 기술은 다량의 목적 물질을 직접 사용하는 기존의 기술과는 달리 임의적인 시컨스 부위의 핵산을 합성하여 목적 물질의 핵산을 흡착시킨 후affinity resin에 핵산을 구별하여 affinity의 정도가 다른 핵산을 이용하여 이들을 분리시키는 방법을 사용한다. 또한 분리된 핵산을 증폭시켜 각각의 핵산을 클로닝과 시컨스함에 따라 monoclonal aptamer를 규명하는 방법으로써 본 기술을 통해 화학적 합성이 가능하고 적은 량의 목적 물질을 이용하여 원하는 만큼의 aptamer를 규명할 수 있다. 또한 반복되는 polymerase selection cycles에서 구조적인 혼돈을 막을 수 있어 분자유전학적 연구를 위한 기초 기술을 뒷받침하고 있다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기
일반기술
생명과학 > 유전학
유전적으로 변형된 쥐는 약학과 의학의 기초연구에 매우 유용한 필수 연구 자료이다. 질병에 대한 조건적 유전자 변형과 같은 마우스 모델들은 하나의 동물 실험 내에서 다수의 유전자 변형 유도를 요구하므로 현재까지는 많은 수의 쥐들과 시간들이 소요되며 연구 진행되어 왔다. 이러한 문제들이 ArteMice™ SPEED technology을 통해 embryonic stem cells(ArteES™ cells)에 다수의 유전적 변형을 동시에 이용할 수 있게 되었다. 따라서 본 사에서는 이를 이용하여 빠르고 기술적인 생산품을 위해 새롭고 편리하게 제작된 ArteMice™ platform으로 질병치료연구에 사용할 수 있도록 이를 개발하였다.본 기술은 CONDITIONAL ™knock-out이나 over-expression 동물에 이를 유발시킴에 따라 in vivo상에서 현재 기술로 24개월 소요된 것과는 대조적으로 6-8개월 내에 빠르게drug target validation을 촉진시키도록 개발되었다. 본 기술은 마우스의 선택된 조직에 주어진 유전자를 knock-out 하거나 over-expression 하여, 배아 또는 초기 신생아 치사와 같은 구조적 knock outs의 한계를 극복하도록 하였으며, 또한 발달하는 동안 성장한 동물에서 보일 수 있는 결함을 보상하는 효과를 가질 수 있도록 개발되었다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기
일반기술
생명과학 > 줄기세포 분화 기술
일반적 형광 이미지 분석은 광합성 식물의 형광 유전자 분석을 통해 특정 환경에 대한 식물의 반응을 분석하기 위한 사용법이다. 그러나 현재 본 추적 기술은 과학자들에게 외과적인 처리 없이 신체에 영향을 끼치는 잠재적인 약의 효과에 대해 관찰할 수 있도록 개발되었다. 예를 들어, 항암 유전자에, 유전자 조작이 성공적으로 이루어졌는가를 알기 위해 발광유전자를 삽입시킬 수 있다. 따라서 본 기술을 이용하여 미래에 수술 시에 암조직을 제거하는 외과의사들을 도울 수 있는 미래 지향적 기술 인 것으로 사료되고 있다. 그러나 현재까지 이들 기술의 이용은 많은 경제적 부담과 시간적 소모로 인해 매우 미흡하다.본 기술은 쥐의 embryonic stem (ES) 세포에서 본 형광 단백질을 적용함으로써 각 조직의 특이 프로모터 조절 하에서GFP(녹색 형광 단백질) report 유전자를 발현시켜 다른 조직에 ES 세포를 분화시킴을 통해 녹색형광을 유도하여 이를 확인하는 기술개발이다. 형광 정도가 정확하게 조직 발달에 대한 marker로 나타나고, 이를 쉽게 측정할 수 있도록 제작 된 것이다. 본 기술은 기존의 고 비용으로 많은 처리량을 사용할 수밖에 없었던 것을 저가의 비용으로 이용할 수 있도록 개발하였고, 이를 수정(clinic)하는 시간 또한 단축시킴으로써 embryo cell의 유전적 분석에 실리적으로 이용될 전망이다.
- 보유기관
- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
상세보기