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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

동결절편 염색을 위한 염료조성물 및 이를 이용한동결절편 염색방법

동결절편 염색을 위한 염료조성물 및 이를 이용한 동결절편 염색방법에 관한 것이다. 본 발명은, 2 내지 6㎎의 요소; 100 내지 150㏄의 증류수; 150 내지 300㏄의 이소프로판올; 및 0.6 내지 1.0㎎의 톨루이딘블루;를 포함하여 조성된 것을 특징으로 하며, 100% 이소프로판올 용매 내에 0.3 내지 0.8% 농도를 가진 에오신 와이(Eosin Y)로 이루어지는 것을 특징으로 한다. 또한, 이를 이용한 고유의 염색방법을 통해 동결절편을 염색하는 것을 특징으로한다. 본 발명에 따르면, 염색처리된 동결절편 조직에 대한 광학적 관찰의 정확성과 이로 인한 타겟 영역의 보다 정밀한 선택 및 조직 절편 내부의 물질 보존성이 향상됨으로 인해 광학적 관찰 및 미세 절제 장치와 연계된 연구 작업에서 보다 효율적인 연구 결과물을 얻을 수 있는 장점을 제공한다.본 발명은 동결절편 염색을 위한 염료조성물 및 이를 이용한 동결절편 염색방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 동결절편 조직 내에 포함되어 있는 거대분자물질의 보존성을 향상시킬 수 있는 동결절편 염색을 위한 톨루이딘블루와 에오신 와이를 포함하는 염료 조성물 및 이를 이용한 동결절편 염색방법에 관한 것이다.광학 현미경 관찰 분야 또는 미세절제 유전체학 관련 분야(microdissection genomics)에서는 타겟 시편으로 채택된 생물체 조직의 형태학적 보존이 잘 되어 있어서 현미경적 관찰이 용이하여야 할뿐만 아니라, 생물체 조직 내부에포함되어 있는 각종 거대분자물질, 예컨대 DNA, RNA, 단백질 등의 보존이 잘 이루어져야 한다. 이러한 타겟 시편내부에서 형태 및 물질 자체의 보존이 제대로 이루어지지 못한다면, 광학 현미경 관찰시 정확한 진단을 내리기 어렵거나 미세병변의 감별에 어려움이 있을 것이며, 미세절제된 시편을 이용한 후속 연구를 진행하는 경우, 거대분자물질들이 파괴되어 있다면 그 연구 결과의 신뢰성이 충분하게 확보되지 못하는 문제점이 발생할 수 있다.

보유기관
가톨릭대학교
등록일
2006-06-12
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

조직 절편 보호 및 해상력 증진용 액상 커버 슬립, 그제조용 조성물, 그로부터 제조된 커버슬립을 구비한슬라이드 구조체 및 그 제조방법

슬라이드 조직 절편 보호 및 해상력 증진용 커버 슬립, 이를 제조하기 위한 조성물, 이를 이용하여 제조된 커버 슬립을 구비한 슬라이드 구조체 및 그 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 슬라이드 구조체는, 지지층, 상기 지지층의 상면 중앙부에 안착되는 조직 절편 및 상기 조직 절편의 외부 노출면을 완전히 감싸도록 형성되며, 분자량이 10,000 내지 360,000인 폴리비닐 피롤리돈 중합체를 주성분으로 제조된 액상 커버 슬립을 포함하여 구비된 것을 특징으로 한다. 본 발명에 따르면, 광학해상도가 개선되어 조직 절편에 대한 미세 관찰 및 미세 영역에 대한 정밀한 선택이 가능하며, 조직 절편이 무수(non-aquous) 상태를 유지함으로써 외부와 차단되어 조직 절편 내 거대분자물질의 파괴 또는 변성 문제를 원천적으로 해결하였다.슬라이드 조직 절편 보호 및 해상력 증진용 액상 커버 슬립, 이를 제조하기 위한 조성물, 이를 이용하여 제조된 커버슬립을 구비한 슬라이드 구조체 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 미세 절제 장치의 광학현미경으로 관찰되며 레이저빔에 의해 절제되는 슬라이드 기판 상부에 탑재된 조직 절편의 광학해상도를 증진시킴과 동시에 조직 절편 내의 DNA, RNA, 단백질 등의 거대분자물질(macromolecule)의 파괴를 방지하여 물질 보존성을 향상시키는 기능을 갖는 액상 커버 슬립, 이를 제조하기 위한 조성물, 이를 이용하여 제조된 커버슬립을 구비한 슬라이드 구조체 및 그 제조방법에 관한 것이다.일반적으로 광학현미경으로 생물 조직의 특정 조직 절편을 관찰하기 위해서는 사전에 여러 단계를 거쳐 관찰용 슬라이드가 제작되고 있다. 구체적으로 살펴보면, 인간을 포함한 동물, 식물 및 미생물 등의 생체원으로부터 필요한 조직의 일부를 채취한 후, 조직절편을 고정시키는 단계(fixing), 조직 절편 내에 남아 있는 수분을 제거하는 탈수단계(dehydration), 상기탈수과정에서 조직 절편 내부로 침투한 알코올을 자일렌(xylene)으로 대체시키는 투명화단계(clearing), 파라핀용액이 조직 내에 포함되도록 하여 파라핀 블록형태로 제조되는 포매단계(embedding)를 각각 거친다. 이후, 파라핀 블록을 소정 두께로 절편하는 박절단계(section)를 진행하고, 박편상태로 절편된 조직 절편을 슬라이드 상부에 탑재시킨 후, 광학현미경관찰을 위해 소정의 염료를 이용하여 세포내 구성요소에 대한 염색을 행하는 염색단계(staining)로 진행된다.

보유기관
가톨릭대학교
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

골세포 배양기

본 발명은 골세포 배양기에 관한 것으로서, 배양조(100)와; 상기 배양조(100) 내에 형성되고, 일측이 상기 배양조(10 0) 내부에 고정형성되며, 상면에 골세포가 놓여지도록 형성된 싱글컨틸레바(200)와; 상기 싱글컨틸레바(200) 타측에 스트레인을 인가하기 위한 제어수단(300);을 포함하여 구성되는 것을 특징으로 하는 골세포 배양기를 기술적 요지로 한다. 이에 따라 동일한 환경과 동일한 시료에 주파수 및 스트레인 세기만을 달리하여 최적의 골세포 배양조건을 찾 아 반복적이고도 지속적인 골세포 배양이 가능하며, 골세포를 효율적으로 배양할 수 있는 이점이 있다.본 발명은, 상기 배양조 외부에서 골세포에 스트레인을 인가하게 되므로 골세포 배양시 이물질을 발생시키는 요소를 최소화하였으며, 동일한 시료, 동일한 배양액, 동일한 시간, 동일한 스트레인 진동주파수 등의 환 경에서 스트레인의 강도에만 의존하는 골세포의 생리적변화와 배양 정도를 관찰하여 최적의 골세포를 배양 조건을 찾을 수 있으며, 이를 반복적으로 배양할 수 있는 효과가 있다. 또한 스트립에 형성된 스트레인게이지에 의해 스트레인이 스트립의 타측으로부터 선형적으로 증가하는 스트레인의 인가가 가능하므로 스트립상의 최적의 골세포 배양 위치를 알 수 있으며, 이에 의한 최적의 골세포 배양 조건을 용이 하게 찾을 수 있는 효과가 있다. 또한 진동자극의 강력한 골형성 작용을 이용하여 현재 약물 치료 위주로 시행하고 있는 골다공증의 치료에 새로운 전 기를 마련하는 효과가 있다.

보유기관
부산대학교
등록일
2006-05-10
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

동물세포 내에서 LPS에 의하여 유도되는 활성산소종의생성 및 NF-κB의 활성화를 억제하는 방법

본 발명의 발명자는 LPS에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성 및 NF-κB의 활성화를 특이적으로 억제할 수 있는 방법을 개발하고자 예의 노력한 결과, Nox4 유전자와 상보결합할 수 있는 siRNA를 직접 세포에 함입시키거나, 전기 siRNA를 발현하는 벡터를 동물세포에 형질전환시켜서, Nox4 유전자의 발현을 억제할 경우, LPS에 의해 유도되는 활성산소종의 생성및 NF-κB의 활성이 기저수준으로 억제됨을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다. 결국, 본 발명의 주된 목적은 세포 내에서 LPS에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성 및 NF-κB의 활성화를 특이적으로 억제하는 방법을 제공하는 것이다.따라서 본 발명은 Nox4 유전자와 상보결합할 수 있는 siRNA를 세포 내로 도입시켜,Nox4 유전자의 발현을 억제하는 단계를 포함하는 세포 내에서 LPS에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성 및 NF-κB의 활성화를 억제하는 방법을 제공한다. 본 발명의 세포 내에서 LPS에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성 및 NF-κB의 활성화를 억제하는 방법은, 그람 음성세균의 감염에 따른 LPS에 의해 유도되는 유해한 활성산소종의 과다생성과 염증유발인자로 알려진 NF-κB의 활성화를 억제할 수 있음으로써, 세균감염에 따른 염증치료에 널리 활용될 수 있을 것이다.본 발명은 동물세포 내에서 지질다당류(LIPOPOLYSACCHARIDE: LPS)에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성 및 NF-ΚB의 활성화를 억제하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 동물세포 내에서 LPS에 의하여 유도되는 활성산소종의 생성 및 NF-ΚB의 활성화를 억제하는 방법은 NOX4 유전자와 상보결합할 수 있는 SIRNA를 세포 내로 도입시켜, NOX4 유전자의 발현을 억제하는 단계를 포함한다. 본 발명에 의하면, 그람 음성세균의 감염에 따른 LPS에 의해 유도되는 유해한 활성산소종의 과다생성과 염증유발인자로 알려진 NF-ΚB의 활성화를 억제할 수 있음으로써, 세균감염에 따른 염증치료에 널리 활용될 수 있을 것이다.

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이화여자대학교
등록일
2006-05-18
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

재조합 벡터, 재조합 효모 및 그것을 이용한 글루코스옥시데이즈의 대량 생산 방법

○ 기술발명의 목적: 글루코스 옥시데이즈를 최대로 생산하기 위한 재조합 벡터 방법○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 재조합 벡터와 재조합 균주를 이용한 글루코스 옥시데이즈의 대량 생산을 위한 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 pGAL1 프로모터, Aspergillus niger의 글루코스 옥시데이즈 유전자 및 GAL7 터미네이터를 포함하는 재조합벡터, 상기 재조합벡터로 형질전환된 효모 및 상기의 재조합 효모를 이용하여, 배지에 포도당, 콘 스팁 리쿼, 에탄올의 농도를 적절히 첨가하여 글루코스 옥시데이즈를 대량으로 생산하는 방법에 관한 발명이다.○ 색인어: 글루코스 옥시데이즈, 재조합 벡터, 재조합 효모, 대량 생산방법본 발명은 프로모터, 글루코스 옥시데이즈 및 터미네이터로 구성된 재조합벡터를 제공한다. 본 발명의 프로모터는 pGAL1, pGAL10, pGPD 중에서 선택된 프로모터가 바람직하다. 더욱 바람직하게는 본 발명의 프로모터는 pGAL1 프로모터가 적당하다. 본 발명의 글루코스 옥시데이즈는Aspergillus niger에서 유래된 것이 적당하다. 본 발명의 터미네이터는 GAL7 터미네이터 또는 글루코스 옥시데이즈 터미네이터가 적당하다.본 발명은 상기의 재조합벡터로 형질전환되고 UV로 돌연변이된 재조합 숙주세포를 제공한다. 본 발명의 재조합 숙주세포는 S. cerevisiaeAGG021가 적당하다.본 발명의 재조합 효모는 YEP(yeast extract peptone)을 기본으로 영양원이 풍부한 배지를 사용하여 외래 유전자 발현을 원활히 하도록 유도하여야 한다. 배양기간동안 재조합 효모는 round or oval-형으로 일정 시간이 경과함에 따라 모세포 혹은 모포자로부터, 출아 방식의 딸세포를 생성하여 개체수를 증가시킴으로 증식을 꾀한다. 야생형 효모는 mating type switch에 의해 단세포로부터 유성포자의 생성이 가능하나, 본 재조합 효모에 사용된 균주은 이의 생성이 억제된 돌연변이형이다.영양원으로는 폭넓은 범위의 탄소원과 질소원을 사용하였다. 또한 S. cerevisiae는 growth factor로 바이오틴을 필요로 하고 칼륨, 마그네슘, 구리, 철, 아연과 같은 미량원소를 필요로 한다. 본 재조합 효모는 특히 포도당과 효모 추출액이 첨가된 배지에서 성장 및 유전자 발현이 활발하다. 세포벽의 경우는 만난으로 구성된 비정형의 외층과 알카리 가용성 β-glucan으로된 중층 그리고 알카리 불용성 β-글루칸으로된 내경층을 포함한다.

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전북대학교
등록일
2006-05-18
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

신규 안트라사이클린 유도체 및 그 제조방법

○ 기술발명의 목적: 신규 안트라사이클린 유도체 및 그의 제조방법○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 신규한 안트라사이클린 유도체에 관한 것이로서, 상기 유도체는 다양한 종양에 대하여 강력한 항종양 활성을 나타낼 뿐만 아니라 심장독성도 크게 감소되어 있다. 또한, 본 발명은 상기 화합물의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 생체내 NAD/NADH 비율의 균형을 보완하여 산소 라디칼-생성 효소의 활성을 조절하게 된다. 본 발명의 화합물은 종래의 안트라사이클린 글리코시드의 14번 위치에 에스테르 결합으로 L-아스파르테이트 또는 피루베이트를 결합시켜 제조된다. 상기한 활성 및 약제학적 안정성 때문에, 본 발명의 화합물은 항종양제로서 약제학적 유효성분으로 이용될 수 있다.○ 색인어: 안트라사이클린, 아스파르테이트, 피루베이트, 항암제본 발명은 강력한 항암 활성을 갖으며 독성이 크게 감소된, 특히 다우노마이신, 아드리아마이신, 카르미노마이신 및 이다루비신과 같은 종래의 안트라사이클린 글리코시드 항암제보다 심장독성 이 크게 감소된 신규 안트라사이클린 글리코시드를 제공하는 데 있다. 또한, 화학식 1의 신규 안트라사이클린 글리코시드 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 제조하는 방법을 제공하는 데 있다.본 발명의 화학식 1의 화합물은 하기 화학식 2를 갖는 종래의 안트라사이클린 글리코시드 항암 화합물의 14번 위치에 L-아스파르테이트 또는 피루베이트를 에스테르 결합으로 연결시켜 제조된다: 상기 화학식으로 표시되는 공지의 안트라사이클린 글리코시드계 항암 화합물들은 본 발명의 신규 안트라사이클린계 화합물의 제조방법에 관한 첨부한 도면의 반응식에서 출발물질 1a-1f에 해당한다.

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전북대학교
등록일
2006-05-18
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

곰팡이 독소생성을 저해하는 조성물

○ 기술발명의 목적: 결명자 추출물을 포함하는 곰팡이 독소생성 저해용 조성물○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 알리자린, 크리소파닌산, 단손, 푸푸린 및 퀴니자린으로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택된 화합물을 포함하는 곰팡이 독소생성 저해용 조성물을 제공한다. 본 발명의 결명자 추출물 및 결명자에서 분리한 화합물은 항아플라톡신 활성 및 항오크라톡신 활성을 갖는 특징이 있다.○ 색인어: 결명자, 아플라톡신, 오크라톡신결명자는 탄소수 1내지 5의 알콜 또는 유기용매로 추출하여 추출물로 제조할 수 있다. 바람직하기로는 헥산, 메탄올, 에탄올, 아세톤, 에칠아세테이트, 염화메틸렌, 부탄올, 클로로포름 및 증류수로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택된 용매로 추출하는 것이 좋다. 상기 곰팡이 독소는 마이코톡신으로, 곰팡이의 2차 대사산물로서 동물의 생체에 장애를 유발하는 독성물질이다. 예로는 아플라톡신, 오크라톡신, 보미톡신, 맥각, 후모니신, 젤랄레논 등이 있다.본 발명의 결명자 추출물은 마이코톡신의 생성을 저해한다. 특히, 결명자 메탄올 조추출물, 결명자 헥산 추출물, 결명자 클로로포름 추출물은 아플라톡신 및 오크라톡신의 생성을 저해하는 효과가 우수하였다.본 발명의 곰팡이 독소생성 저해용 조성물은 상기 결명자 추출물을 1 ㎍/㎖에서 5 ㎎/㎖로 포함하고, 그 밖의 부형제를 더욱 포함할 수 있다.상기 조성물은 동물, 가축이 섭취하는 식물에 서식하는 곰팡이의 독소생성을 저해하기 위하여 사용하며, 식물의 파종, 재배, 수확, 저장, 가공 및 유통기간 중에 적용하여 곰팡이의 독소생성을 저해시킨다. 적용방법은 도포처리, 침지처리, 훈증처리 등의 방법이 바람직하고, 적용용량은 통상적인 살충제를 적용시키는 용량으로 사용할 수 있다. 상기 조성물의 제형은 액제, 유제, 훈연제, 훈증제, 도포제, 입제 등이 좋다.또한 더욱 포함되는 부형제는 조성물의 용도 및 적용방법에 따라 적절한 물질을 사용하는 것이 바람직하며, 동물에해가 없는 모든 종류의 물질이 바람직하다.또한 본 발명은 화학식 1의 알리자린(Alizarin, 1,2- Dihydroxyanthraquinine), 화학식 2의 단손(Danthron, 1,8-Dihydroxyanthraquinine), 화학식 3의 크리소파닌산(Chrysophanic acid, 1,8-Dihydroxy-3-methylanthraquinone), 화학식 4의 푸푸린(Purpurin, 1,2,4-Trihydroxyanthraquinone), 및 화학식 5의 퀴니자린(Quinizarin, 1,4-Dihydroxy-anthraquinone)를 제공한다.본 발명의 곰팡이 독소생성 저해용 조성물은 알리자린, 단손, 크리소파닌산, 푸푸린 및 퀴니자린으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 포함할 수 있다.

보유기관
전북대학교
등록일
2006-05-18
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

절약형 세포염색용 홀더

* 원리 및 구성본 기술은 현미경의 표본을 제작하는 과정에서 커버글래스 또는 커버글래스정도의 크기를 가지는 여과지에 점착된 세포 또는 조직을 염색하는데 사용되는 염색용 홀더에 관한 것으로서, '􃙜'자 형상을 가지며 얇은 판인 다수의 유니트와, 상기 커버글래스 또는 여과지가 수용되는 크기를 가지도록 상기 유니트들이 서로 일정간격을 두고 배열되어 유니트 사이에 형성되는 삽입칸을 가지는 유니트열과; 상기 유니트열의 우측면에서 설치되는 측면지지대와 상기 유니트열의 좌측면에서 설치되며 'ㅗ'자 형상인 손잡이와 상기 염색용 홀더가 기울어지지 않도록 상기 유니트열의 하부면에서 좌우대칭으로 배열된 다수의 하부지지대를 포함하여, 커버글래스 또는 여과지에 점착된 세포 또는 조직을 염색하는데 사용되는 절약형 세포염색용 홀더를 제공하며 염색시약의 소모량을 줄이는 작용효과가 있다.* 발명의 특징세포 및 조직의 염색 시 널리 사용되고 있는 염색용 홀더의 일종으로, 국내. 외 시판되고 있는 슬라이드 글라스용 홀더를 소형화하여 경제적 활용을 도모한다. 전자제품의 보드로 널리 쓰이는 베크라이트를 홀더의 소재를 선택하여 소재의 응용성과 소형화로의 기술개발로 홀더의 축소를 시도였다.* 적용응용분야 및 시장성의학 및 생물학 분야에서 세포 및 조직의 염색시 사용하며, 특히 적조 및 녹조 생물의 조사시 유용하게 활용 가능하다. 최신 현미경적 방법에 따라 시료를 여과지나 커버글라스 위에서 염색은 기존의 홀더로는 불가능하나 본 소형 염색홀더를 사용하면 효율적인 염색이 가능하다. 기존의 홀더에 비해 가격이 1/5-1/10 정도로 저렴하고 염색시약의 절약효과로 경제성과, 의학과 생명과학분야의 대학과 연구소에서 교육과 연구용의 실험기구로 활용할 수 있는 수용성을 갖추고 있다. 본 발명 홀더는 소형의 실험기구이므로 홀더중심의 단독기업화는 어려우나, 기존의 염색홀더를 제작 시판하고 있는 기업체에 기술을 이전 개발이 가능하다고 판단된다.

보유기관
한양대학교
등록일
2006-05-24
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생체활성 표면을 갖는 Ti-소재 경조직 대체재료의제조방법

○ 기술발명의 목적: 생체활성 표면을 갖는 Ti-소재 경조직 대체재료의 제조 방법○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 열확산방법으로 생체활성 표면을 갖는 Ti-소재 경조직 대체재료의 제조방법에 관한 것으로서, 상기 방법은 진공소결로 내에서 티타늄 또는 티타늄합금을 기재로 하여 하이드록시애퍼타이트 분말로 매몰시킨 다음, 불활성가스 또는 질소 분위기 하에서 열처리하여 Ca, P를 기재층으로 침투시키는 단계를 포함한다. 본 발명의 방법은 고가의 설비에 의한 코팅방법에 비해 진공열처리 설비만으로도 제조할 수 있고, 또한 기재 내부로 Ca 또는 P가 침투하기 때문에 마모에 의해 Ti-Ca 또는 Ti-P층이 떨어져 나가지 않아 안정된 생체활성 피막을 제조할 수 있다.○ 색인어: 생체활성, Ti, Ti6Al4V, 경조직 대체재료, 하이드록시애퍼타이트본 발명의 생체활성 표면을 갖는 Ti-소재 경조직 대체재료의 제조방법은 진공소결로 내에서 티타늄 또는 티타늄 합금을 기재층으로 침투시키는 것을 특징으로 한다.본 발명에서 사용된 방법과 같이, 매식체 표면에 뼈 등의 생체 경조직 중의 무기성분의 주요 구성화합물인 애퍼타이터와 같은 생체 친화성이 우수한 물질을 피복시키면, 매식 체와 뼈와의 초기고정이 촉진된다. 또한 열처리에 의해 표면층 뿐 아니라, 티타늄 또는 티타늄합금 조직이 느슨해지는 틈 사이로 Ca, P와 같은 뼈 유사성분이 침투하기 때문에 마모에 의해 Ti-Ca 또는 Ti-P층이 떨어져 나가지 않아 안정된 생체활성 피막으로의 사용이 가능하다.이하, 하기 실시예를 통해 본 발명을 구체적으로 설명하지만, 본 발명이 이들에 한정되는 것은 아니다.<제조예 1> 하이드록시애퍼타이트(HA)의 제조시약급 질산칼슘 4수화물(Ca(NO 3 ) 2 •4H 2 O, 덕산), 인산수소암모늄((NH 4 ) 2 HPO 4 , 오사까, 일본)을 Ca/P몰비가 1.67인 조건에서 암모니아수를 이용하여 pH를 7로 만든 후, 30℃를 유지하면서 10시간 동안 교반시켰다. 얻어진 분말을 감압여과하면서 3회 이상 세척한 후, 100℃ 건조기에서 24시간 건조시켜 하이드록시애퍼타이트를 제조하였다.제조된 하이드록시애퍼타이트를 FT-IR(니콜렛, 프랑스), XRD(리가꾸, D/MAX-ⅢA, 일본)를 이용하여 상용화된 하이드록시애퍼타이트(와꼬, 일본)와 비교한 결과, 하이드록시애퍼타이트(HA) 고유의 피크들을 확인할 수 있었다.<제조예 2> 진공소결로 제작하이드록시애퍼타이트(HA) 내에 매몰된 티타늄 소재의 상변태온도 이상으로 열처리(1200℃ 이상)가 가능하고, 진공, 아르곤 및 질소 가스 투입이 가능하며, 설 정된 온도까지 상승시간과 그 온도 유지시간을 변경할 수 있는 온도제어장치를 구비한 진공소결로를 제작하였다. 가열로는 원통형의 알루미나를, 시편용기는 카본을 사용하여 열처리시 노내분위기에서 발생할 수 있는 화학적 변화를 최소화하였다.<실시예 1> 순수티타늄-기재 매식체의 제조순수티타늄을 기재로 하여 하이드록시애퍼타이트(HA) 분말에 매몰시키고, 진공소결로에서 10 -3 토르까지 진공형성 후, 아르곤 가스 분위기하에서, 800℃, 850℃, 900℃에서 각각 1시간 동안 열처리하여 순수티타늄-기재 매식체를 제조하였다.

보유기관
전북대학교
등록일
2006-05-22
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

암 발생 및 전이에 관여하는 단백질의 당쇄 변화를 측정하여 암을 진단하는 방법 및 이를 이용한 진단 킷트

본 발명은 암 발생 및 전이에 관여하는 단백질의 당쇄 변화를 측정하여 암을 진단하는 방법 및 이를 이용한 진단 킷트에 관한 것으로,보다 상세하게는 암의 발생과 전이에 관여하여 N-연결형 당쇄의 변화를 나타내는 단백질의 당쇄변화를 측정하여 암을 진단하는 방법 및 상기단백질의 당쇄변화를 측정하는 방법을 이용한 진단킷트에 관한 것이다○기술성 대장암 세포주 WiDr을 모델로 당전이효소 GnT-V의 산물인 β1,6 N-acetylglucosamine을 검출하는 방법을 이용하여 암의 발생과 전이에서 당쇄 변화를 보여주는 당단백질 5가지를 glycomics기법을 이용하여 발굴했으며 단백질의 발현정도와 당쇄의 변화,즉 β1,6 N-acetylglucosamine 신규성을 측정함으로써 단백질의 발현정도와 부가된 당쇄의 변화를 지닌 종양표식인자가 본 발명의 골자이다○사업성 암 발생 및 전이에 관여하는 단백질의 당쇄 변화를 측정하여 암을 진단하는 방법 및 이를 이용한 진단 킷트는 대장암을 포함한 암을 효과적으로 진단할 수 있다

보유기관
한국생명공학연구원
등록일
2006-05-24
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일반기술 생명과학 > 기타 세포·조직공학

복합스트레스 내성 식물체를 위한 pSSA_K벡터와 pSSA-H벡터 및 이를 이용한 내성식물체의 제조방법

본 발명은 산화스트레스 유도성 프로모터에 복합스트레스 내성 유전자가 결합된 발현벡터에 관한 것으로,구체적으로는 고구마 유래의 산화스트레스 유도성 퍼옥시다제 프로모터에 복합스트레스 내성유전자 및 APX가 결합된 상기 유전자를 엽록체에 발현시키는 발현벡터,상기 발현벡터를 함유한 복합스트레스 내성의 형질전환 식물체 및 상기 식물체의 제조방법에 관한 것이다○기술성 스트레스 유도성 퍼옥시다제 프로모터에 복합재해 내성을 나타내는 CuZnSOD와 APX유전자를 엽록체에 동시에 발현시키는 신규 발현벡터를 이용한 형질전환식물은 복합 환경재해내성을 나타내는 특성이 있어 산업적 가치가 매우 높음○사업성 본 발명의 발현벡터를 이용하면 제초제,냉해,염해 또는 활성산소를 유발시키는 각종 환경오염에 의한 스트레스에 대한 내성이 강한 형질전환 식물체의 제조가 가능하다

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한국생명공학연구원
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2006-05-24
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복합스트레스 내성 식물체 제조용 재조합 발현벡터 및 이를 이용한 복합스트레스 내성 식물체의 제조방법

본 발명은 산화스트레스 유도성 프로모터에 복합스트레스 내성 유전자가 결합된 복합스트레스 내성 식물체 제조용 재조합 발현벡터,상기 발현벡터로 형질전환된 복합스트레스 내성 식물체 및 상기 식물체의 제조방법에 관한 것으로,구체적으로는 고구마 유래의 산화스트레스 유도성 퍼옥시다제 프로모터에 복합스트레스 내성유전자가 결합된 상기 유전자를 엽록체에 발현시키는 복합스트레스 내성 식물체 제조용 재조합 발현벡터,상기 발현벡터로 형질전환된 복합스트레스 내성 식물체 및 상기 식물체의 제조방법에 관한 것이다○기술성 고구마 유래의 산화스트레스 유도성 프로모터에 복합스트레스 내성 유전자가 결합되어 상기 유전자를 엽록체에 발현시키는 복합스트레스 내성 식물체 제조용 재조합 발현벡터를 제공하고,형질전환된 복합스트레스 내성 식물체 및 상기 식물체의 제조방법을 제공한다○사업성 본 발명의 복합스트레스 내성 식물체 제조용 재조합 발현벡터를 이용하여 생물체를 형질전환시키는 경우,제초제,냉해,염해 또는 활성 산소의 발생을 유발하는다양한 환경오염에 의한 스트레스에 대해 강한 내성을 나타내는 형질전환 식물체를 제조할 수 있으므로,농작물의 생산성 증대 또는 유용성분의 대량 생산 등에 크게 기여할 수 있다

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2006-05-24
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인간 배아줄기세포에 특이적인 단일클론항체

○본 발명은 인간 배아줄기세포에 특이적으로 결합하는 단일클론항체 및 이를 생산하는 하이브리도마에 관한 것으로서,인간 배아줄기세포에는 결합하고 생쥐 배아줄기세포에는 결합하지 않는 HSPA8에 대한 단일클론항체,상기 단일클론항체를 생산하는 하이브리도마,상기 단일클론항체를 포함하는 검정키트 및 인간 배아줄기세포 제거용 조성물에 관한 것이다.○기술성본 발명은 인간 배아줄기세포에는 결합하고 생쥐 배아줄기세포에는 결합하지 않는 HSPA8에 대한 단일클론항체를 제공하고,단일클론항체를 생산하는 하이브리도마를 제공한다.○사업성본 발명의 단일클론항체는 인간 배아줄기세포의 세포표면 단백질을 특이저으로 인식하므로,생쥐와 고등동물인 인간의 초기배 발달의 차이를 연구할수 있는 도구를 제공하여 인간 배아줄기세포의 분석 연구에 이용할 수 있으며,세포 치료시 미분화된 인간 배아줄기세포를 제거하는데 유용하게 이용될 수 있다.

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한국생명공학연구원
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2006-05-24
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곰팡이 유래의 멜라닌 생합성 저해물질과 활성산소 소거물질 및 그의 신규한 용도

○본 발명은 곰팡이 유래의 활성산소 소거물질 및 그의 신규한 용도에 관한 것으로서 국내 토양에 서식하는 곰팡이 페니실리움 F80695를 신규로 분리하고 그 곰팡이의 배양액을 에틸아세테이트 등의 유기용매 또는 물을 사용하여 분액추출하고 컬럼 크로마토그래피,세파덱스 LH-20 크로마토그래피,TLC 및 HPLC등을 수행함으로써 활성산소 소거활성이 있는 페놀성 화합물을 획득하고 그 화학 구조 및 물리화학적 특성을 조사한 후 항산화 활성을 측정한 결과,활성 산소 소거활성과 그로 인한 노화방지 효과,그 외에도 멜라닌 생합성 저해 활성 효과가 뛰어난 신규한 용도의 화학물질로 뛰어난 효과가 있다.○기술성본 발명은 활성산소 소거기능이 있는 곰팡이 페니실리움 F80695 및 그 곰팡이 추출물로부터 획득한 멜라닌 생합성 저해활성이 우수하고 독성이나 부작용이 적은 신규한 용도의 페놀성 화합물을 제공한다. 또 강력한 멜라닌 생합성 저해 활성과 강력한 활성 산소 소거 활성을 유효한 성분으로 함유하는 조성물을 제공한다.○사업성본 발명은 국내 토양에 서식하는 곰팡이 페니실리움 F80695를 신규로 분리하고 그로부터 생체 내에 축적되어 세포를 파괴하고 생체 방어계에 치명적인 산소 독성을 일으키는 활성 산소를 제거하는 기능으로 강력한 활성 산소 소거활성을 나타내는 페놀성 화합물 멜라노신 A,B,C 및 D는 활성산소를 소거하는 뛰어난 효과가 있다. 아울러 활성 산소에 의한 노화 발생 방지에 우수한 효과가 나타나는 등의 뛰어난 효과로 의약품,화장품 등에 응용할수 있다.

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2006-05-24
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PPARv에 대한 단일클론 항체, 특이항체분비 융합 세포 주 및 항체를 이용한 염증, 암, 대사성질환과 같은 질병 관련 조절인자 검색하는 방법

본 발명은 암 , 염증, 대사성질환(비만, 당뇨)과 같은 난치성 질환의 진행정도에 관련된 PRARv의 기능 연구에 필수적인 PRARv에 대한 특이 단일클론 항체를 생산하는 융합 세포주에 관한 것과 PRARv 특이 단일클론 항체를 이용한 PRARv의 조절물질(리간드)를 탐색할 수 있는 방법에 관한 것이다.○기술성 본 발명은 항염증, 항암 등에 영향을 끼치는 것으로 알려진 핵 내 전사 수용체(nuclear receptor)인 PRARv와 전사보조인자인 SRC-1과의 결합력을 바탕으로 한 간단하고, 많은 샘플을 동시에 적용할 수 있으며, 방사선 동위원소를 사용하지 않는 암, 염증, 비만, 그리고 당뇨 조절물질의 일차적 탐색 방법이기 때문에, 향후, 암, 염증 및 대사성 질환의 개선제 및 치료제 개발에 보다 경쟁력을 가질 수 있는 효과가 있다.○사업성 비만 및 당뇨 조절 물질을 탐색할 수 있는 방법을 통해, 쳔연자생식물 및 한약제 추출물에서 비만 및 당뇨 조질 물질들을 탐색한 후 이들 후보물질들을 분리 정제한 다음, 연구 및 상품화함으로써 향후, 의약시장 진입 시 고부가가치 창출을 도모할 수 있다.

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2006-05-24
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자궁경부암 항암제 및 세포사멸조절인자 검색방법

본 발명은 자궁경부암 항암제 및 세포사멸조절인자 검색방법에 대한 것으로, 대장균 BL21/pET28a-E7(E.coli, BL21/pET28a-E7) KCTC 18016P에서 GST 및 His-융합형으로 발현되는 사람 파필로마바이러스(Human Papillomavirus ; HPV)16형 E7 재조합 단백질을 글루타치온 비드 및 니켈비드로 신속하게 정제하여, 대장균에서 생산된 사람 암 억제인자 Rb의 가용성 분획과 반응시켜 그 결합능을 웨스턴 블럿법과 엘라이자(ELISA)법으로 확인함으로써 E7-뀨 in vitro 결합능 검색 방법을 제공하고, 상기 검색 방법을 통하여 항암제 및 세포사멸조절인자의 검색과 개발 및 스트리닝에 이용할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.○기술성 본 발명은 자궁경부암을 유발하는 HPV 16평 E7 단백질과 암억제유전인자 Rb단백질을 형질전환된 대장균에 의해 분리 정제하여, 웨스턴 블럿법과 엘라이자법을 통해 그 결합능을 분석하는 시스템을 개발함으로써 이를 이용하여 항암제 및 세포사멸조절인자의 검색방법을 제공하는 효과가 있으므로 생물의약 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.○사업성기존 기술은 많은 시간과 단계를 거쳐야 소수의 샘플의 항암활성능을 측정할 수 있었으나, 본 시스템은 E7 ,Rb 단백질을 쉽게 분리 정제하여 이들 결합을 이용, 간편하게 다량의 샘플을 한번에 저렴한 비용으로 스크리닝하는데 적합한 기술로써, 향후 의약시장 진입 시 고부가가치 창출을 도모할 수 있다.

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2006-05-24
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포유동물 세포를 슬라이드글래스의 미세배양조건하에 배양 할 수 있는 킷트 및 이의 제조방법

미세 환경 조건하에서 동물세포 배양을 가능하게 한 기술로서, 질병 예후인자로 활용될 수 있는 각종 특정 유전자를 갖고 있는 많은 동물세포들을 마이크로슬라이드 상의 미세 환경 조건에서 배양할 수 있는 기술을 개발하여 다채널 진단기술인 high throughput-screening 방법에 응용할 수 있게 하였다. 이 기술은 향후 cell-chip을 제조하는데 필수적인 기술이 될 것이다.○기술성 Cell-chip은 단백질, DNA-과 더불어 미래의 초정밀 진단기구로 개발되고 있다. Cell-chip의 제조공정은 미세면적에서 세포의 배양기술이 이루어져야 하는데 아직 실험실적 수준에서는 이루어지고 있으나 슬라이드 상에서 많은 세포를 동시에 배양할 수 있는 기술이 존재하지 않아 아직 실용화가 되지 못하고 있다. 본 기술은 이러한 미세면적에서 동물세포의 배양이 가능하게 함으로써 cell-chip의 제작이 가능하게 되었다.○사업성Cell-chip의 제조공정은 아직 실험실적 수준에서 이루어질 뿐 실용화단계에는 접어들지 못하고 있는 실정에서 본 기술은 슬라이드 상에서 많은 동물세포의 배양이 가능케 함으로써 시장진입 시 고부가가치를 창출을 도모 할 수 있다.

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한국생명공학연구원
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2006-05-24
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통계적 최적화 방법과 화학물질의 유도에 따른크산토필로마이세스 덴드로로스 JH1 돌연변이체를 이용한아스타잔틴 대량생산방법

본 발명은 통계적 최적화 방법과 화학물질의 유도에 따른 크산토필로마이세스 덴드로로스 JH1 돌연변이체를 이용한 아스타잔틴 대량생산방법에 관한 것으로, 통계적 실험 설계(statistical experimental designs)를 통해 크산토필로마이세스 덴드로로스 JH1 돌연변이체로부터 세포 성장과 아스타잔틴의 최적생산조건을 확립하여 아스타잔틴을 대량생산하는 방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다. 특히, 본 발명은 통계적 실험 설계를 통해 얻은 아스타잔틴 최적생산조건 하에서 에탄올, 아세트산, 과산화수소 등의 유효한 화학물질을 첨가하여 세포 성장과 아스타잔틴의 대량생산을 유도하는 방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.본 발명은 통계적 최적화 방법과 화학물질의 유도에 따른 크산토필로마이세스 덴드로로스 JH1 돌연변이체를 이용한 아스타잔틴 대량생산방법에 관한 것으로, 통계적 실험 설계(statistical experimental designs)를 통해 크산토필로마이세스 덴드로로스 JH1 돌연변이체로부터 세포 성장과 아스타잔틴의 최적생산조건을 확립하여 아스타잔틴을 대량생산하는 방법을 제공하는데 뛰어난 효과가 있다. 특히, 본 발명은 통계적 실험 설계를 통해 얻은 아스타잔틴 최적생산조건 하에서 에탄올, 아세트산, 과산화수소 등의 유효한 화학물질을 첨가하여 세포 성장과 아스타잔틴의 대량생산을 유도하는 방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다. 따라서, 본 발명의 방법에 따라 대량생산되는 아스타잔틴은 사료나 식품에 사용될 수 있어 기능성식품산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

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고려대학교
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2007-03-15
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PAH 노출 여부 진단용 바이오 마커 단백질

본 발명은 환경 유해 물질인 PAH(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons)에 노출되었을 때 바이오마커로 사용 될 수 있는단백질 개발에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 정상인의 혈액에는 없으나 PAH벤젠에 노출된 사람의 혈액에는 존재하거나정상인의 혈액에서 보다 PAH에 노출된 사람의 혈액에서 더 많이 발현되는 바이오 마커 단백질과 이를 이용한 PAH 노출여부 진단키트에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 얻기 간편한 소량의 혈액으로부터 작업자의 PAH 노출 정도를 측정할 수 있을 뿐만 아니라, 이렇게 측정된 오염 정도로 PAH 노출자의 생리적인 상태를 파악 할 수 있다. 또한, 본 발명의 바이오마커 단백질을 기초로 제조된 단일클론항체는 immunoassay 키트 (ELISA, antibody coated tube test, lateral-flow test, potable biosensor)에 이용될수 있을 뿐만 아니라, 보다 높은 특이도와 민감도를 나타내는 항체의 개발을 통한 다양한 난분해성 오염물질 검출 스펙트럼을 갖는 단백질칩 개발에 이용될 수도 있다.상기와 같이 이차원 전기영동실험을 수행한 결과, 다음과 같이 PAH에 노출된 사람에서 새롭게 발현되거나 발현양이 증가하는 단백질들이 동정되었다.1. 새롭게 발현되는 단백질정상인 33명과 PAH에 노출된 작업자 48명을 대상으로 이차원 전기영동을 수행한 결과 PAH에 의해 새로이 발현되는 1개단백질을 찾아내었다(도 2). 상기 새로이 발현된 1개의 점(4981)을 MALDI-TOF/MS 분석하고 그 질량스펙트럼을NCBInr에 대해 ProFound 서치를 수행한 결과 trypsin-digested peptide 서열이 2개 (서열번호 1 및 2) 일치하여'putative capacitative calcium entry channel' (NCBI Accession No. CAC06090)로 동정되었으며 (도 5), 그 결과를 표1에 요약하였다.

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고려대학교
등록일
2007-03-15
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조직 재생 촉진 효과를 갖는 생분해성 유착방지막 및 이의 제조 방법

* 주요 내용콜라겐 및 파이브로넥틴을 포함하는 조직 접착층(adhesion layer) 및 이의 한 측면(one side)이 PEG-PLGA(Polyethylene glycol-Polylactide-co-glycolide) 공중합체의 층을 갖는 생분해성 유착방지막.* 고안배경최근 연구보고에 따르면 불임여성의 불임원인 중 자궁부속기 협착증이 차지하는 비율이 최소 20% 이상이 된다고 한다. 이러한 현상이 일어나는 주요 원인은 손상된 조직에서 나오는 삼출물이 흡수, 용해되지 않아 섬유조직을 형성하고 이 후에 섬유아세포와 함께 자라나 결국 교원질 침착이 일어나기 때문이다. 그동안 다양한 유착방지 물질이 연구되어 왔다. 이 중에서 생분해성 고분자를 재료로 이용한 InterceedTM (Johnson & Johnson Medical, Inc. Arlinton, TX)와 SeprafilmTM (Genzyme Cop. Camridge, MA) 등은 상품화되어 사용되고 있으나, Interceed™는 동물실험을 통해 대조군과 비교하여 유의적인 효과가 없다는 결과들이 보고되고 있으며, Seprafilm™은 실험 모델에 따라 결과가 다르게 나타나 확실한 효과를 입증하지 못하고 있다. 그리고 Poloxamer 407은 건조하고, 출혈이 없는 표면에서만 제한된 사용을 가진다는 단점을 가지고 PRECLUDE™ Peritoneal Membrane은 생분해되지 않아 별도의 재수술이 필요하다는 단점이 있다.* 특징 본 발명에서, “유착(adhesion)”이란 인접한 체조직간, 조직과 내부 기관 사이에 발생하는 바람직하지 않은 조직의 성장을 의미하는데, 흔히 심장외과, 정형괴과, 뇌신경외과, 복부외과, 산부인과 등의 다양한 외과적 수술, 기계적 외상, 화학제제, 국소 감염에 의해 발생한다. 상기 유착은 통증이나 기능 장해를 야기시키고, 흉막염, 복막염, 장폐색 등의 주요 원인이 될 뿐 아니라 심한 경우에는 유착을 박리하기 위한 수술을 별도를 필요하므로, 유착의 사전 방지는 매우 중요하다. 본 발명에서, “유착방지막”이란 상처 재생 과정에서 조직들을 서로 분리시키기 위한 물리적 장벽으로 작용하는 막을 의미하는데, 유착의 우려가 있는 적용 부위(환부 또는 손상 부위)를 유착 방지막으로 덮어주거나 감싸주어 상처 치유 기간 동안 상처를 주변조직과 격리시켜 유착 발생을 방지하게 된다. 이런 유착방지막은 상용화되어 있고 가장 많이 사용되는 유착막지막에는 예를 들어, 히알론산 및 카르복실메틸셀룰로오스 혼합막이 있다. 본 발명의 유착방지막은 콜라겐 및 파이브로넥틴을 포함하는 조직 접착층 및 이의 한 측면이 PEG-PLGA 공중합체 층을 가지는, 막의 양 측면의 성질이 다른 막인 것을 특징으로 한다.* 효과 본 발명에 의해 제조되는 생분해성 유착방지막은 복부 절개 수술환자의 복강 내 장이나 복벽의 상처 부위에 다른 주변 조직이 유착되는 것을 억제하여 장폐색증, 장기적 후유증, 골반 통증의 원인을 제거할 수 있다. 동시에, 다른 유착방지막들과는 달리 막의 내측면은 세포의 점착에 관여하여 세포 증식, 이주 등을 조절하는 파이브로넥틴과 조직의 재생을 촉진할 수 있는 콜라겐 및 히알루론산 등 세포외기질 성분이 결합되어 있으므로 손상부위의 치유 속도를 증가시킬 수 있다.

보유기관
연세대학교
등록일
2007-03-15
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