산업기술 통합검색
본 발명은 암 발생 및 전이에 관여하는 단백질을 이용하여 암을 진단하는 방법 및 상기 방법을 이용한 진단키트에 관한 것이다. 보다 상세하게는 암의 발생과 전이에 관여하여 N-연결형 당쇄의 변화를 나타내는 단백질의 당쇄변화를 측정하여 암을 진단하는 방법 및 상기 단백질의 당쇄변화를 측정하는 방법을 이용한 진단 킷트에 관한 것이다. 대장암 세포주 WiDr을 모델로 당전이효소 GnT-V의 산물인 베타1,6 N-acetylglucosamine을 검출하는 방법을 이용하여 암의 발생과 전이에서 당쇄 변화를 보여주는 당단백질 5가지를 glycomics기법을 이용하여 발굴했으며 단백질의 발현정도와 당쇄의 변화 즉 베타1,6 N-acetylglucosamine가지 정도(신규성)을 측정함으로써 두 가지 진보적 측면을 지닌 종양표식인자가 본 발명의 골자이다.
Receptor-type protein tyrosine kinase의 특징을 갖는 새로운 수용체 단백질을 encoding하는 사람 PTK7 cDNA / 단백질PTK7 cDNA의 cloning, 아미노산 서열 규명, 발현하는 조직의 규명
항암 및 항 혈관생성 억제제로 알려진 엔도스테틴이 세포간질 금속성단백질분해효소(MMP)의 활성을 저해함으로써 세포간질분해를 억제하는 방법에 관한 것이다.엔도스테틴의 발현, MMP의 발현 및 활성 분석, MMP 저해능 분석
프로테옴 분석법을 이용하여 다양한 단백질들을 포함하는 프로테옴(proteome)으로부터 특정 단백질 분해 효소에 대한 다수의 기질들을 발굴할 수 있는 방법프로테옴 분석을 통한 단백질 분해효소 기질 발굴
본 기술의 단백질 비효소적 당화 억제제는, Hippophae rhamnoides로부터 유래되고, 이는 단백질 비효소적 당화 억제 활성을 나타내는 물질을 유효 성분으로서 함유 하는 단백질 비효소적 당화 억제제이다. Hippophae rhamnoides는, 잘게 부수거나, 가루상태로 만드는 등에 의해 분말화 처리한 것을 이용하여도 되지만, 추출물 또는 그 처리물로서 이용하는 것이 바람직하다. 추출물은, 그대로 본 기술의 단백질 비효소적 당화 억제제의 유효 성분으로서 이용할 수 있고, 해당 추출물을 이온 교환 크로마토그래피, 겔 여과 크로마토그래피, 투석등의 각종 정제 수단에 의해 처리하여, 한층 더 활성을 높인 처리물로서 이용해도 괜찮다.본 기술의 추출 용매로는, 물/저급 알코올류/에테르류등이 사용가능하며, 추출 온도는, 특별한 제한은 없고, 용매의 융점내지 용매의 비점의 범위내이다. 또, 추출은 통상의 압력하에서 실시하지만, 가압하 또는 감압아래에서 실시해도 괜찮다. 추출 시간은, 추출 온도등에 의해 다르지만, 통상５분간에서１일간이다. 이 용액을 옷감/스텐레스 필터/여과지등으로 여과해 불순물등을 없애는 것으로, 목적의 추출액을 얻을 수 있다. 이 추출물인 단백질비효소적당화 억제제는, 단백질비효소적당화 억제 작용을 촉진하기 때문에, 당뇨병 또는 당뇨병 합병증을 예방·치료하는데 유효하다.
초임계/아임계 수를 이용한 콩으로부터 이소플라본의 추출, 분리 및 정제방법으로 초임계/아임계 수 장치의 최적 조건은 온도 523.15K(250℃). 압력 200 bar, 분취시간 2시간 30분임을 특징으로 한다. 본 기술에 의한 초임계/아임계 수를 이용한 추출, 분리, 정제방법은 공정이 간단하고 수율이 우수함으로써 생산성이 높다. 콩은 인류의 중요한 식량자원으로 이소플라본, 사포닌, 레시틴, 펩티드, 아미노산이 함유되어 있고 특히 이소플라본은 식물성 에스트로겐으로 암, 심장병, 고혈압, 골다공증, 갱년기 장애 등의 예방 및 치료효과가 있다. 콩에는 배당체(97%)와 비대당체(3%)가 함유되어 있고, 발효식품에 존재하는 비배당체의 이소플라본이 생체 이용성 측면에서 우수한 것으로 알려져 있다. 이소플라본의 제조에 있어 콩으로부터 유기산 및 유기용매를 이용하는 방법, 흡착수지를 이용하는 방법 및 베타-글루코시다제 효소를 이용하는 방법이 있다. 유기산 및 유기용매를 이용하는 방법은 빙초산, 젖산 등의 유기산과 아세톤, 에틸아세테이트의 유기용매로 추출물을 층 분리시키고 분리된 유기용매에 함유된 이소플라본 비배당체를 여과 정제하는 방법이다. 흡착수지를 이용한 방법은 대두 배아의 섬유질과 단백질을 제거한 후 수지에 통과시켜 이소플라본과 사포닌을 흡착시키고, 아세톤으로 추출하여 분리한 후 감압건조하여 이소플라본을 얻는다. 베타-글루코시다제를 이용한 방법은 Baciillus licheniformis CK-14로 발효시켜 생성되는 베타-글루코시다제를 이용하여 배당체 형태의 이소플라본을 생체내 흡수능이 좋은 비배당체 형태로 전환하는 방법이다. 전반적으로 추출공정이 복잡하여 생산성을 높인 제조방법이 계속 제기되어 왔다. 이에 콩에서 이소플라본을 추출하는 방법은 추출공정이 복잡하며 직접 추출함으로써 생산성이 떨어지는 문제가 있어 간단하면서 생산성을 높이기 위해 초임계/아임계 수를 이용한 최적의 조건에서 높은 수율의 이소플라본을 제조하는 방법을 완성하였다. 초임계/아임계 수를 이용한 콩으로부터 이소플라본을 추출하고 추출한 여과액을 분리하여 전처리하고, 칼럼크로마토그래피로 정제하는 방법으로서 간단하게 공정으로 구성된다. 초임계/아임계 수의 유속은 20g/min, 추출조건은 온도 523.15K(250℃). 압력 200 bar, 분취시간 2시간 30분 및 분취 여과액의 정제에 대한 용매조건 등 최적 조건을 확립함으로써 이소플라본 비배당체인 다이드제인, 제니스테인을 70-80% 함유한 이수플라본을 제조할 수 있다.초임계/아임계 수를 이용하여 콩으로부터 이소플라본을 추출, 분리 및 정제하는 방법은 공정이 간단하고 최적의 조건에서 높은 수율의 이소플라본을 제조하는 방법으로서 생산성을 향상시킬 수 있다. 인구의 평균수명이 점차 늘고 특히 여성들의 노령화 추세에 따른 뼈질환이 확대되면서 건강에 대한 인식 제고에 힘입은 의약품의 수요 증가로 여성 처방의약품이 2007년이 되면 2003년의 2배가 될 것으로 미국 Kalorama Information사가 ‘세계처방약시장’ 보고서에서 제시하였다. 국내의 골다공증 치료제는 500억원 규모로서 가속화되는 고령화와 건강의 중요성에 대한 인식이 높아지면서 계속 성장할 것으로 예측되고 있다이소플라본은 골다공증의 예방 및 치료보조제 차원의 건강기능식품으로 판매되고 있으며, 뼈의 성장과 형성이라는 기능성을 부각시켜 기존 건강기능식품 제품을 차별화한 제품 원료로 공급하여, 안정적인 성장을 이루고 있다. 따라서 기존 건강기능식품을 생산하는 기업에서 사업화하는 것이 가능하다.
본 발명은 Protein Data Bank (PDB)에 있는 protein-RNA 복합체의 3차원 원자 좌표 데이터로부터 RNA 분자의 이차 구조 요소와 삼차 구조 요소 정보를 추출하고, 추출된 구조 정보를 바탕으로 RNA 분자의 전체적인 구조와 RNA 분자를 구성하는 핵산간의 결합 관계를 시각화하는 것을 목적으로 한다. 본 발명을 위해 구현된 시스템은 두 부분의 알고리즘으로 구성되는데, 첫 번째 알고리즘은 RNA 분자의 이차 구조 요소와 삼차 구조 요소 정보를 추출해내는 알고리즘이고, 두 번째 부분은 추출된 구조 요소 정보를 바탕으로 RNA 분자의 전체 구조를 시각화하는 알고리즘이다. 첫 번째 알고리즘은 RNA의 구조 요소 정보를 추출하기 위해 RNA 분자를 구성하는 모든 원자들 사이에 수소 결합 데이터를 추출하고, 추출된 수소 결합 데이터를 염기쌍 규칙에 의거하여 염기쌍의 종류에 따라 분류해낸다. 그리고 추출된 수소 결합 데이터와 핵산 데이터를 통합하여 RNA 분자의 구조 요소 정보를 얻어낸다. 두 번째 알고리즘은, 첫 번째 알고리즘을 통해 얻어진 구조 요소 정보와 원자들의 좌표 데이터를 핵산 별로 분류하여 얻어진 핵산의 좌표 데이터를 통합하여, RNA 분자 구조의 시각화 데이터를 만들어 내고, 최종적으로 시각화 데이터를 바탕으로 RNA 분자의 전체적인 구조와 RNA 분자를 구성하는 각각의 핵산 사이에 결합 관계를 시각화한다. 본 발명은 protein-RNA 복합체나 RNA에 관한 원자들의 3차원 좌표 정보를 이용해서 RNA의 이차구조 요소 (28여가 염기쌍)와 삼차구조 요소 (pseudoknot, base triple 등)를 추출하여 3차원으로 시각화하는 국내외 첫 번째 기법이다. 기존에 수작업으로 이루어지던 RNA 분자의 구조 요소 정보 추출에 대한 자동화된 방법을 제시하고, 또한 Protein Data Bank에 있는 데이터를 입력 데이터로 사용함으로써, 정확한 RNA 분자의 구조 요소 정보와 시각화된 구조를 제공함으로써, RNA의 구조 예측 연구나 protein-RNA complex의 결합 예측 연구에 많은 도움을 줄 것이다.단백질-RNA 복합체로부터 RNA 이차구조 추출 및 시각화 시스템으로서 RNA 분자의 2차구조요소와 삼차구조 요소 정보를 추출하는 알고리즘으로 구현되는 RNA 분자의 구조요소 추출 수단과 추출된 구조요소 정보를 바탕으로 RNA 분자의 전체구조를 시각화하는 알고리즘을 통해 구현되는 RNA 분자의 시각화수단을 포함한다.protein-RNA 복합체나 RNA에 관한 원자들의 3차원 좌표 정보를 이용해서 RNA의 이차구조요소와 삼차구조요소를 추출하여 3차원으로 시각화하는 국내외 첫 번째 방법이다. 기존 수작업으로 이루어지던 RNA분자의 구조요소 정보 추출에 대한 자동화된 방법을 제시하고, 또 Protein data bank에 있는 데이터를 입력데이터로 사용함으로써 정확한 RNA분자의 구조요소정보와 시각화된 구조를 제공함으로써 RNA의 구조예측 연구나 protein-RNA 복합체의 결합예측 연구에 많은 도움을 줄 것이다.본 기술의 바이오인포메틱스 시장은 대학, 연구소, 기업체 등이며, 연구목적으로 사용되는 프로그램으로 특수용도에만 한정되기 때문에 시장은 크지 않고 시장의 다양성도 부족하다. 하지만 연구목적으로 지속적인 수요는 있을 것으로 전망되는 시장이다.
*배경단백질 분해효소를 산업적 용도에서 사용하는 경우 생체 내부의 환경에 비해 변화가 심하고, 보다 극심한 생체 외부 환경에서 단백질 분해효소가 활성을 유지해야 하기 때문에 매우 안정한 단백질 분해효소가 요구된다. *중요성 및 독창성본 기술은 이 문제점을 해결해줄 혁신 적인 기술이다. 이 기술은 단백질 분해효소를 생산하는 바실러스 속의 바실러스 클라우지 (Bacillus clausii ) 균주와 그 균주로부터 대량 생산되는 단백질 분해효소에 관한 것이다. 구체적으로는, 서해 연안 갯벌로부터 분리한 단백질 분해효소를 생산하는 바실러스 클라우지와 균주로부터 생산되는 단백질 분해효소의 분리방법과 대량생산 방법에 관한 기술이다.*특징 및 장점본 기술은 극심한 물리, 화학적 조건하에서도 다음과 같은 이점을 제공한다. ① 효소 활성을 유지하는 단백질 분해효소를 생산하는 바실러스 클라우지를 제공② 균주로부터 생산되는 단백질 분해효소를 제공③ 균주로부터 단백질 분해효소를 분리하는 방법을 제공④ 균주로부터 단백질 분해효소를 대량 생산하는 방법을 제공*적용제품 및 독창성본 기술로 인해, 바실러스 클라우지로부터 분리한 단백질 분해효소는 높은 농도의 계면 활성제와 산화제가 존재하여도 활성을 유지하기 때문에 의류용 또는 콘택트 렌즈용 세제의 성분으로 유용하다. 또한 식품, 사료, 천연 가죽 등의 가공 및 유기 폐기물의 처리에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.
*배경 배출된 닭털의 극히 일부만이 보온재, 쿠션의 충진 물질로 사용되며 대부분의 양이 폐기물로 배출되어 이를 처리하기 위해 소각이나 매립을 하고 있다. 그러나 소각 시 많은 매연이 발생하고, 매립 시에도 분해가 어려워서 많은 문제를 가지고 있기 때문에 환경오염의 주요 요인 중 하나로 대두되고 있다. 케라틴의 구조적 안정성과 단백질 분해효소에 대한 저항성 때문에 닭털을 사료화 하는 공정은 현재까지 가압가열 처리에 의존하여 왔다. 닭 사육 시 좋은 결과를 나타냈다는 보고도 있지만, 공정 중에 아미노산이 파괴되고 과도한 에너지가 소요되어, 가열처리 공정의 에너지 효율 및 경제성을 고려할 때 케라틴 분해효소를 이용한 효율적인 처리기술에 대한 연구가 필요한 실정이다. 닭털로부터 우모분을 제조하는 공정은 다양한 시설이 필요하고, 가압, 가열 처리하는 고에너지 요구 공정이며, 오염원 발생의 문제점을 지니고 있다.따라서 현재 우모의 생물학적 처리 방법이 많이 연구되어 왔다. 그리고 지금까지 케라틴 분해효소를 이용한 방법에 대한 연구는 자연계에서 케라틴 분해효소를 생산하는 균을 분리하는데 집중되어 왔다. 그 결과 분리된 균은 주로 구조단백질에 기생하는 균주로, 이에 대해 피부의학 연구진에 의한 발표가 주를 이루어 왔고 근래들어 케라티나아제 생산에 대한 보고가 이루어지고 있는 실정이다. *중요성 및 독창성본 기술은 한국의 서해 연안 갯벌에 서식하는 흰이빨 참갯지렁이로부터 여러 가지 균주를 탐색하고, 이들 균주 중에서 중금속에 의하여 활성이 억제되지 않고 광범위한 pH, 계면활성제, 산화제에 매우 뛰어난 안정성을 나타내며 강력한 케라틴 분해활성을 갖는 단백질 분해효소를 생산하는 균주를 분리ㆍ동정하고, 그 균주로부터 케라틴 분해활성 갖는 단백질 분해효소를 대량 생산하는 방법이다.*특징1) 본 기술의 바실러스 서브틸리스 균주 PL-1으로부터 생산된 단백질 분해효소는 높은 농도의 계면활성제 및 산화제에 안정하다. 2) 케라틴 분해 활성을 가지고 있어 의류용 세제, 식품, 사료, 천연 가죽 등의 가공, 유기 폐기물 처리 및 케라틴이 주성분인 깃털의 분해에 유용하게 사용될 수 있다.3) 중금속에 의하여 활성이 억제되지 않고 광범위한 pH, 계면활성제, 산화제에 매우 뛰어난 안정성을 나타내며 강력한 케라틴 분해활성을 갖는 단백질 분해효소를 생산하는 균주를 분리ㆍ동정하고, 그 균주로부터 케라틴 분해활성 갖는 단백질 분해효소를 대량 생산한다.4) 흰이빨 참갯지렁이로부터 여러 가지 균주를 탐색한다.
본 발명은 대변을 이용하여 위장관계 종양을 초기에 진단하기 위해 각종 종양표지 단백물질을 추출하는 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 환자 또는 검사 대상자의 대변을 채취하는 단계와; 상기 채취된 대변 10∼100㎎을 1∼10cc의 완충액(인산완충액, 글라이신, 식염수 등)에 넣고 혼합하는 단계와; 상기 완충액에 혼합된 변추출액을 영하 15도 내지 영하 196도에서 냉동하는 단계와; 상기 냉동된 추출액을 상온 내지 37도 수조에서 해동시켜 상피세포가 깨지도록 하는 해동단계와; 상기 냉동하는 단계와 해동하는 단계를 2∼3회 반복하는 단계와; 상기 추출액을 필터를 통과시켜 여과하는 단계와; 상기 여과된 액체를 원심분리하여 부유물질들을 가라 앉혀 제거하고 상층액을 분리하는 단계와; 상기 분리된 상층액을 검사하는 단계로 종양여부를 검진할 수 있도록 하는 방법으로서, 본 발명은 대변을 일정 기준량 채취하여 대변내의 세포내에 포함된 종양표지 단백양이 일정 기준량 이상 검출될 경우 정밀 진단하도록 하여 위장관계 종양 환자가 수술 불가능한 종양 및 전이가 발생되기 전에, 초기단계에서 치료를 함으로서 불치병이라 하더라도 완치의 가능성을 높일 수 있도록 한 대변내 종양 표지 단백물질 추출방법을 제공할 수 있도록 한 것이다.본 발명은 이와 같은 문제점을 감안하여 발명한 것으로서, 신체의 위장 관계를 거쳐 발생되는 대변을 채취하여 이에 포함된 상피세포 내의 종양표지 단백 양을 측정하여 일정 환자가 수술 불가능한 종양 및 전이가 발생되기 전에, 초기단계에서 위장관계 암을 검출 또는 진단할 수 있도록 함을 목적으로 한 것이다.따라서 본 발명은 종양검사시 대변채취 단계, 완충액에 혼합하는 단계, 냉동하는 단계, 상온 또는 37℃의 수조에서 해동하는 단계, 상기 냉동과 해동을 2∼3회 반복하는 단계, 필터로 여과하는 단계, 필터로 걸러진 액을 원심분리하는 단계, 상층 액을 검사체로 하여 검사는 단계, 검사 후 결과를 판독하는 순서로 이루지는 검사방법을 특징으로 한다.
본 기술은 라이브러리 차원에서 단백질간의 상호 결합을 조사할 수 있는 이중 라이브러리 단백질 결합 검색 방법 (Double Library Two-Hybrid System) 및 이에 이용되는 재조합 효모 균주에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 효모를 이용한 기존의 투-하이브리드 (two-hybrid) 시스템을 발전시킨 것으로 이중 라이브러리 단백질 결합 검색 방법 (double library two-hybrid system: DLTS)에 의한 검색 방법 및 이에 이용되는 재조합 효모 균주들에 관한 것이다.본 기술은 HF7c 효모의 URA3 유전자의 뉴클레오타이드의 일부가 제거된 재조합 효모 균주 및 476 효모의 URA3의 코딩 부위와 그 상위 부위 사이에 GAL1 프로모터를 끼어 들어가도록 하여 URA3의 발현이 Gal4p에 의존하도록 유전자를 재조합한 효모 균주를 제공하고 상기 효모 균주들을 이용한 이중 라이브러리 단백질 결합 검색 방법에 의한 검색 방법을 제공한다.본 기술은 a) 효모 균주 내의 URA3을 파괴하여 a 타입 균주를 제조한 후, URA3이 GAL1 프로모터에 의해 발현되는 플라스미드를 도입하는 단계, b) 유전자 재조합 방법을 이용하여 효모 균주 내의 URA3이 GAL1 프로모터에 의해 발현되도록 직접 수정하여 α타입 균주를 제조하는 단계, c) 상기 제조된 a 타입 균주 및 α타입 균주에 베이트(bait) 라이브러리 및 프레이(prey) 라이브러리를 각각 형질 전환하는 단계, d) 상기 형질 전환된 a 타입 균주 및 α타입 균주를 각각 5-FOA(5- fluoroorotic acid)를 포함하는 배지에서 배양하면서 가짜 양성 반응을 선택적으로 제거하는 단계, e) 및, 상기 선택 과정에서 살아 남은 두 타입의 형질전환 효모를 메이팅(mating) 시켜 단백질-단백질 결합 쌍들을 검출하는 단계를 포함하는, 이중 라이브러리 단백질 결합 검색 방법을 제공한다. 상기 a) 및 b)와 같이 재조합 효모를 사용하는 이유는 URA3이 Gal4p에 의존적으로 발현되게 하기 위함이다.본 기술에 따르면 단일 단백질이 아닌, 라이브러리 수준의 단백질들의 결합 쌍들을 동시에 효율적으로 검색하기 위한 시스템을 제공할 수 있다.
본 발명은 T-타입 칼슘 이온 통로의 알파1G 단백질의 기능을 억제하여 간질을 일으키지 않게 하는 방법, 알파1G 단백질의 기능 억제제를 간질 예방제 또는 치료제로 사용하는 용도, 유전자 적중법에 의해 T-타입 칼슘 이온 통로의 알파1G 단백질의 기능을 상실시켜 간질을 일으키지 않는 유전자 변이 생쥐 및 그의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 T-타입 칼슘 이온 통로의 알파1G 단백질의 기능을 억제하면 간질을 일으키지 않고, 또한 알파1G 단백질의 기능이 상실된 유전자 변이 생쥐는 간질과 관련된 기작을 연구하는 동물모델로서 유용하게 사용될 수 있다.T-타입 칼슘 이온 통로의 알파1G 단백질이 발현되지 않는 알파1G -/- 유전자형을 갖는 동형접합체(homozygote) 유전자 변이 생쥐(transgenic mouse).
기술개요-바실러스 균주가 분비하는 단백질-혈전 분해 활성을 가지는 서브틸리신, DJ-4단백질-피브린 분해 효소 특이성을 가짐된장에서 분리한 분비 단백질로서 혈전을 형성하는 주 물질인 피브린을 분해하는 활성을 갖는 단백질전통적 우리 교유의 식품인 된장에서 분리한 균주의 분비 단백질로서 식용으로 인체에 무해다다고 판단되는 단백질로서 혈전 용해 활성을 보유하는 단백질임-Subtilisin DJ-4 protein with fibrinolytic activity현재 뇌졸증이나 혈전 관련 질환의 치료제로 사용하고 있는 tPA와 같은 치료제는 부작용이 있으나 대체할 물질이 없어 대체물질이 시급한 상황이고,심장 순환계 질환치료제 시장이 점점 고속성장을 이루고 있는 상황으로 새로운 약물에 대한 기대가 증대되고 있느 실정임-Characteristics Protein sacreted by Bacillus sp.DJ-4 that was isolated from Doen-Jang , a korea traditional ferment food Protein which have a excellent fibrinolytic and non toxicity in health
본 발명은 독성 단백체 생체 지표 연구에 관한 것으로서, 구체적으로 환경오염물질중에 발암성 물질로 알려진 포름알데히드(Formaldehyde) 노출여부를 진단하고 독성학적으로 모니터링할 수 있는 바이오 마커 단백질, 그에 대한 항체, 및 이를 이용하여 포르알데히드 노출여부 및 정도를 진단할 수 있는 키트에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 프로테오믹스(proteomics) 기법을 사용하여 동물(rat)에서 포름알데히드에 특이적으로 반응하는 혈장(plasma) 단백질 6종을 발굴하여 포름알데히드 독성 단백체 생체지표로 제시하였다. 본 발명에서 확인된 단백질들과 독성물질인 포름알데히드와의 연관성은 동물에서 포름알데히드의 노출정도를 파악할 수 있는 새로운 독성 단백체 지표로서 뿐만 아니라 포름알데히드의 생체독성 기전 연구 및 인간에게 적용할 수 있는 독성연구에 중요한 기초자료로서의 역할을 할 것이다.
발명의 목적 표면 플라즈몬 공명(SPR)현상을 이용하여 생체고분자의 생화학적 반응 및 그 결과를 실시간으로 정량분석할 수 있는 단백질 칩 분석장치를 제공고자 함.발명의 주요 내용 본 기술은 백색광 SPR을 이용한 단백질 칩 분석장치에 관한 것으로 아래와 같은 구성으로 이루어짐. * 백색광 광원 : 텅스텐램프, 텅스텐할로겐램프, 제논램프 * 광유도부 : 복수개의 렌즈, 거울 또는 광학적 소자 * 편광기 : 필터 기능 * 입사부 : 프리즘 등 * 단백질 칩 홀더 * 단백질 칩 : 0.1~10㎜의 소형 단위 칩의 소형 다중행렬 배열칩 * 광파이퍼 : 집광 기능 * 그레이팅 분광기 : 분광기를 통해 분광되어 나오는 각 단위칩의 빛이 광검출기에서 분석됨 * 컴퓨터 : 각 광데이터를 분석 소프트웨어로 분석함발명의 효과 생체고분자의 생화학적 반응에 따라 공명의 파장이 이동하게 되는 현상을 분광 관측함으로써 단백질, 게놈 등 생체고분자의 생화학적 반응의 결합정도를 분석할 수 있음
발명의 목적 신뢰성이 높고, 측정 속도가 빠르며, 기존 스팟 스캔 방식보다 효율적인 라인 스캐닝에 의한 단백질 칩 분석방법을 제공하고자 함.발명의 주요 내용 본 기술에서는 단백질ㆍ게놈 등 생체 고분자의 상호작용 및 생체 반응을 실시간으로 분석하는 방법을 제공함. 라인 스캐닝에 의한 단백질 칩 분석방법은 아래와 같은 단계로 이루어짐.① 다수 개의 단백질 스팟이 일정하게 종횡으로 배열된 단백질 칩을 x-y 스테이지에 얹어 설치하고, x-y 스테이지 위에 프리즘을 결합시킴② 광원으로부터 나온 빛을 p-편광 시킴③ p-편광된 빛을 프리즘에 입사시킴④ 프리즘에 입사된 빛을 단백질 칩에 조사함⑤ ④에서 조사된 빛이 단백질 스팟들 각각의 중심을 잇는 직선을 따라 단백질 칩에 순차적으로 조사되도록 x-y 스테이지를 이동시킴⑥ 단백질 칩으로부터 반사되어 나오는 광 신호를 하나 이상의 광섬유를 통하여 분광기로 집광한 후, 표면 공명 플라즈몬 신호를 얻음⑦ 얻어진 표면 공명 플라즈몬 신호를 정량적으로 분석함발명의 효과 * 하나의 스팟 내에서 여러 번을 측정하므로 기존 방식에 비해 분석 결과의 신뢰성이 높음 * 스팟들의 중심을 잇는 직선만 따라가면서 측정하므로 측정 속도가 빠름 * 필요로 하는 메모리 용량을 절감하고, 측정 결과의 신뢰성이 보다 높아짐
발명의 목적 표면 플라즈마 공명(Surface Plasma Resonance, 이하 SPR) 스펙트럼과 SPR 이미지를 동시에 얻어 분석할 수 있는 이중 기능 SPR 바이오센서를 구성함으로써, 보다 경제적이고 편리하며 효용성이 큰 단백질 칩 분석용 장치를 제공하고자 함.발명의 주요 내용 본 기술에서는 SPR 스펙트럼 파장을 측정ㆍ분석하거나 백색광 광원에서 나오는 빛을 단백질 칩에 입사시켜, 유전체와 금속박막 사이의 경계면에서 반사되는 빛을 촬상소자(charge coupled device, 이하 'CCD') 카메라를 사용하여 SPR 이미지를 측정ㆍ분석하는 장치 및 방법을 제공함. 본 단백질 칩 분석용 장치에 대한 구성 및 특징은 아래와 같음. * 광원 : 광을 조사함 * 편광기 : 광원으로부터 나온 빛을 p-편광시킴 * 광학 렌즈계 : 편광기에 의해 p-편광된 빛을 조사함 * 단백질 칩 : 광학 렌즈계에 의해 조사된 빛이 입사되도록 프리즘의 밑면에 접하여 위치함 * CCD 카메라 : 단백질 칩으로부터 반사되어 나오는 빛을 순차적으로 촬상(외부에서 들어오는 빛을 전기 신호로 전환)하여 이미지를 획득함 * 광섬유 : 단백질 칩으로부터 반사되어 나오는 빛을 받아서 전달함 * 분광기 : 광섬유와 연결됨 * 고정수단 : CCD 카메라 및 광섬유의 수광부를 고정함 * 이동 스테이지 : 단백질 칩으로부터 반사되어 나오는 빛을 CCD 카메라 또는 광섬유의 수광부에 선택적으로 입사될 수 있도록 구동수단에 의하여 이동함발명의 효과 * 하나의 바이오센서로 단백질 칩의 SPR 스펙트럼 및 SPR 이미지를 얻을 수 있음 * 특정 조건에 맞는 방식을 사용하기 위해 별개의 장치를 설치할 필요가 없으므로, 경제적이며 편리하고 효용성이 큼
해당 기술은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) CH2 균주로부터 분리한 키토산아제의 신호서열 및 코딩서열을 포함하는 유전자, 상기 유전자를 포함하는 발현벡터, 상기 발현벡터가 도입된 형질전환체, 이로부터 생산된 키토산아제 및 그 정제방법에 관한 것이다. 해당 기술에 의한 상기 신호서열을 가진 발현벡터는 대장균에서 발현시킬 경우, 발현된 키토산아제 단백질을 세포내막과 외막 사이로 이동시켜 세포동결 및 삼투압과 같은 정제과정을 통해 보다 쉽고 순도 높은 단백질을 분리 및 정제하는데 유용하게 사용될 수 있다.