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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
대장균 세포에서 발현된 재조합 단백질 apo(a)VP를 분리 정제하여 apo(a)에 특이적인 다중클론 항체와 단일클론항체를 생산하는 항원으로 사용하여 apo(a)에 특이적인 다중클론항체와 단일콜론 항체를 생산하였음. 생산된 항체들을 근간으로 혈중 Lp(a) 농도의 측정을 위한 sandwich ELISA를 구성하였음. ①mAp(a)20 ②pAb(a) ③pAbB 100을 각각 capturing 항체들로 사용하고, 농도를 달리한 Lp(a)를 결합시킨 후 단일클론항체 mAp(a)23을 HRP와 결합시킨 것을 detecting 항체로 사용함. 그 결과 490nm에서의 흡광도와 Lp(a) 농도 사이에 직선상의 함수관계(r²=0.92 -0.9-가 성립함. 이들은 모두 혈중 apo(a) 농도측정을 위한 효소면역키트에 임상적으로 유용할 것으로 사료됨- 다형성을 지닌 apo(a)의 단일 copy 영역만을 인지하여 측정의 표준화가 용이함- 단일 클론 항체 위주의 진단 킷 개발- 심혈관 질환에 대한 위험률 진단- 국민 보건, 신체 검사시 활용 기대
- 등록일
- 2004-04-30
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
HBV의 수용체를 밝히면, HBV 감염의 기작을 이해에 도움이 되며 HBV 수용체에 대한 단일클론항체는 HBV 감염의 저해제로서 활용될 수 있음. 간세포 수용체를 밝히기 위하여, 사람 간세포주 HepG2 세포 표면을 biotin으로 표지한 후 막단백질을 분리하여 HBV preS1 리간드에 결합시켜 특이적으로 결합하는 단백질을 동정한 결과, 80kDa의 단백질이 preS1 리간드에 결합함을 확인함. 80kDa의 단백질이 세포표면에 존재하는 단백질임과 HBV preS1의 aa 12-20 과 aa 80-90의 영역에 결합함을 증명하였음. 재조합 preS1 뿐만 아니라 HBV 바이러스 particle 과도 결합함을 증명함. 따라서, 80 kDa의 단백질이 간세포의 표면에 존재하여 HBV 에 결합하는 단백질로 추정됨- HBV에 결합하는 간세포 표면 단백질의 동정하기 위한 assay system을 확립함- 간세포 표면에 존재하는 p80 단백질이 HBV에 결합함을 확인함- p80 단백질에 대한 단일클론항체를 개발하면 HBV 감염 저해제로 활용할 수 있을것으로 전망- HBV 감염 기작의 이해- HBV 감염 저해제의 개발에 활용
- 등록일
- 2004-04-30
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
- 재조합 아데노바이러스를 이용한 HCV 외피당단백질 E1E2의 인체 세포에서의 생산, 분리정제- 생산, 분리정제된 E1E2 단백질은 HCV 진단시약 및 E1E2 단일 클론항체 제작에 활용할 수 있음- native conformation을 갖는 인체세포에서의 HCV E1E2당단백질의 생산- E1E2단백질의 HCV 양성환자와의 특이적 반응- HCV 구조단백질 유전자가 도입된 복제가능 및 비복제 재조합아데노바이러스는 HCV에 대한 치료용 생백신으로 활용가능- 아데노바이러스 벡터를 이용하여 HCV 외피당단백질 E1E2를 인체세포에서 생산, 분리정제한 후 E1E2단백질을 고감도 진단시약 및 항체제작용 면역원으로활용가능- 인체세포에서 분리정제된 HCV외피당단백질 E1E2 HCV 세포수용체 탐색에 활용가능
- 등록일
- 2004-04-30
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
스타필로키나제를 발현하는 벡터와 그것으로 형질전환된 재조합 미생물로부터 스타필로키나제를 제조하는 공정에 관한 기술이다. 스타필로키나제는 혈액속의 흘라스미노겐을 활성화시켜 혈전을 분해하는 기능을 가지고 있어 혈관 내 혈액응고에 의하여 유발되는 뇌졸증 및 급성심근경색 등의 치료제로서 사용될 가능성이 있어 현재 연구가 활발히 진행되고 있는 단백질이다. 지금까지 스타필로키나제의 발현은 대장균의 세포질 내로 이루어지게 하여 복잡한 정제과정을 거쳐야만 하는 문제점이 있었으나 본 기술은 스타필로키나제를 대장균에서 대량으로 생산할 뿐 아니라 페리플라즘으로 분비 및 축적시킴으로써 보다 분리하기 쉽고 손쉬운 정제가 가능하도록 개발됨- 스타필로키나제 대량생산 가능한 벡터제작- 스타필로키나제를 대장균의 페리플라즘으로 대량생산- 손쉬운 정제과정으로 고순도, 고농축의 혈전용해제 획득 가능- 스타필로키나제의 대량생산 미생물의 산업적 이용- 혈전용해제인 스타필로키나제의 의학적 이용- 스타필로키나제 대량생산 미생물의 학문적 이용
- 등록일
- 2004-03-10
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
밀가루 반죽에 녹황색 채소 5-25 중량%를 첨가하고 고온 처리하여 튀김제품의 산화 안정성을 향상시키는 방법이다. 본 기술에 의한 튀김 제품은 가열시간에 따른 산화안정성 및 저장기간에 따른 산화 안정성을 보임으로써 가격이 저렴하고 쉽게 구입할 수 있는 녹황색 채소를 이용하여 유지 산화안정성을 향상시키고 경제적이고 제조방법이 간단하여 라면과 같은 튀김제품의 제조에 유용하게 사용할 수 있다. 유지는 저장 중에 수분, 열, 광선 등의 작용에 의해 가수분해 또는 산화반응으로 여러 산화물이 생성되고 색이나 맛도 변화해서 이취가 발생(유지의 산패)하며, 온도와 시간이 매우 큰 영향을 미치고 산화반응 과정을 통해 생성되는 과산화물들은 분해되어 다른 라디칼과 반응하거나 알데히드, 케톤, 알켄 및 알칸 등을 생성하고 이 산화생성물에 의해 튀김제품의 품질이 저하되며 튀김제품의 저장성이 떨어진다. 유지의 산패를 억제하기 위해 식품첨가물로 사용되는 항산화제는 보통의 실내 온도에서 우수한 항산화력을 나타내나 실제 튀김하는 고온에서 분해되거나 휘발되어 별로 효과가 없고 유기합성 항산화제의 안전성 문제가 계속 제기되어 왔다. 이를 해결하기 위해 인체에 해가 없는 천연 항산화제가 개발되고 있는데, 탈지 미강을 물과 에탄올의 혼합액으로 추출한 항산화제, 녹차잎에서 추출한 항산화제, 또는 울금, 산사자, 약쑥, 당귀, 두충, 구기자, 산조인 등에서의 에탄올 추출물이 알려져 있으나 사용 재료가 고가인 생약재이므로 대량생산에 문제점이 있다. 또 소나무 수피 또는 잎의 물 추출물을 HPLC로 재결정하는 것은 낮은 수율과 비용이 비싸 경제성이 떨어진다. 한편 녹황색 채소(시금치)는 기능성 성분을 풍부하게 함유하고 건강유지 및 증강, 질병 예방에 기여하는 식품으로 항산화 영양소, 비타민C, E 및 베타-카로틴을 함유하고 또 색소에 의한 시각적 효과도 이용할 수 있다. 이에 튀김 제품의 유지 산화 안정성을 향상시킬 수 있도록 하기 위해 튀김 제품의 조리시 밀가루 반죽에 녹황색 채소를 첨가하고 고온 처리하는 간단한 방법에 의해 저장기간에 따른 튀김 제품의 우수한 산화 안정성을 확인하였다.튀김 제품의 산화 안정성을 향상시키는 방법으로서 밀가루 반죽에 녹황색 채소를 첨가하고 고온 처리한다. 사용된 시금치는 분말형태로 밀가루 반죽에 대해 5-25 중량%를 첨가하며, 이 범위 이상은 색이 너무 짙고 반죽 형성이 곤란하다. 튀김 제품의 조리시 밀가루 반죽에 녹황색 채소 5-25%를 첨가하고 고온 처리함으로써 가열시간에 따른 튀김 기름의 안정성, 가열시간에 따른 튀김제품의 산화 안정성 및 저장기간에 따른 튀김 제품의 산화 안정성을 향상시킬 수 있다.가격이 저렴하고 쉽게 구입할 수 있는 녹황색 채소를 이용하여 유지의 산화 안정성을 향상시킬 수 있으며 이용방법이 간단하여 라면과 같은 튀김제품의 제조에 유용하게 사용할 수 있다.
- 보유기관
- 인하대학교
- 등록일
- 2004-03-23
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
신규 면역조절 분비 단백질을 탐색하기 위해 이용되는 cDNA 라이브러리 및 제작방법, cDNA 라이브러리를 이용한 유전자 탐색방법, 상기 탐색방법을 이용하여 동정한 L259 단백질 및 이를 이용하여 면역세포를 조절하는 방법이다.1) 신규 면역조절 분비 단백질을 탐색하기 위해 이용되는 cDNA 라이브러리 및 이의 제작방법2) 상기 cDNA 라이브러리를 이용한 유전자 탐색방법, 3) 상기 탐색방법을 이용하여 동정한 신규면역조절 분비 단백질인 L259 단백질 및 이를 이용하여 면역세포를 조절하는 방법 4) 상기 L259단백질을 암호화하는 면역세포 조절 유전자인 L259 유전자에 관한 것이다. 본 발명은 신호서열 트랩 방법을 응용하여 B세포유도인자를 분비하는 세포의 cDNA 라이브러리로부터 면역세포 성장을 촉진하는 신규 면역조절 분비 단백질인 L259 단백질을 탐색하는 방법, 상기 탐색에 이용되는 cDNA 라이브러리, 상기 cDNA 라이브러리의 제작방법, 상기 탐색방법을 이용하여 동정한 신규 면역조절 분비 단백질인 L259 단백질, 상기 L259 단백질을 이용하여 면역세포를 조절하는 방법 및 상기L259 단백질을 암호화하는 면역세포 조절 유전자인 L259 유전자에 관한 것이다.
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- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-05-03
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 기술은 B형 간염 바이러스의 유전자 중 주된 간암 유발 인자로 알려진 HBx 유전자가 발현되는 간세포의 완전한 세포사멸을 세포 배양상에서 유도시키는 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 활성산소(Reactive oxygen species, ROS) 유도제 및 NF-k B 억제제를 처리하여 HBx 단백질을 발현하는 간 세포의 완전한 세포사멸을 유도시키는 방법에 관한 것이다. 또한, 본기술은 세포사멸 유도방법을 이용하여 HBx 단백질을 발현하는 간세포의 세포사멸을 억제하는 물질 및 유전자를 탐색하는 시스템에 관한 것이다.기존의 간염바이러스 관련 세포사멸 유도방법은 TNF-α 처리 또는 serum starvation이 보고되어 있지만 완전한 세포사멸이 아닌 일부세포의 사멸만을 유도하였으며 이러한 결과도 다른 연구팀에 위해 반복 재현되지 않고 있다. 본 기술은 새로운 약제를 사용하여 간세포의 완전한 사멸을 유도하였다. 본 간세포의 완전한 세포사멸의 유도기술은 간염치료제 및 간암 발생 관련 유전자 탐색에 이용될 수 있다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 기술은 대추 추출물을 포함하는 콜레스테롤 에스테르 전이 단백질(cholesterol ester transfer protein, CETP)활성 저해제 조성물에 관한 것으로서, 본 기술의 조성물은 의약용 및 식품용 조성물을 포함한다. 본 기술의 조성물은 동물체내의 CETP활성을 저해하여 혈중 콜레스테롤을 감소시키므로 각종 심혈관계 질환의 예방 및 치료제로서 또는 건강 식품의 성분으로서 유용하게 사용될 수 있다. 대추 추출물을 활성 성분으로서 약학적으로 허용되는 담체와 함께 포함하는 혈중 콜레스테롤 강하용 약학조성물 및 대추 추출물을 호함하는 혈중 콜레스테롤 강하용 식품 조성물이 제공된다. 또한 대추 출출물중 CETP저해물질을 활성 성분으로 약학적으로 허용되는 담체와 함께 포함하는 CETP저해용 약학조성물 및 대추 추출물을 포함하는 CETP저해용 식품 조성물이 제공된다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-06-22
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 발명은 시알산 당전이효소에 대한 활성저해 능력을 가진 합성 펩타이드에 관한 것으로서, wwwwNG-NH2 구조를 가지며, 본 발명의 펩타이드는 인간을 비롯한 동물세포의 Ser/Thr-linked glycosylation과정의 Core-I 구조형성시 시알산 전달을 저해함으로써 시알산이 함유되지 않은 최종 Core-I구조를 형성하는데 기여할수 있다. 본 기술은 동물세포에서 발현되는 Core-I O-linked glycan: alpha2,3-sialyltransferase의 활성을 저해하는 펩타이드이다. 이는 국내, 국외적으로 최초로 보고되는 고등동물 시알산 당전이효소의 활성저해 펩타이드로서 유방암세포의 비정상적인 O-glycosylation을 복구할 수 있는 새로운 암치료제 후보물질로 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2004-07-15
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 발명은 다수의 라이신 잔기로 구성되어 유기화합물과 공유결합함으로써 유기화합물의 세포 침투를 가능하게 하는 올리고라이신 수송 도메인, 올리고라이신 벡터, 세포 내 침투 가능하고 세포 내에서 활성을 나타내는 올리고라이신 융합단백질, 그 융합단백질을 발현시키는 발현벡터 등에 관한 것이다. 본 발명에 따른 화물분자의 세포내 전달은 수개 내지 십수개의 라이신 잔기로 이루어진 올리고라이신 수송 도메인을 통하여 수행된다. 본 발명은 신규의 올리고라이신 수송도메인, 올리고라이신 수송 도메인-화물 분자 복합체, 올리고라이신 수송 도메인-화물 분자 복합체를 포함하는 치료, 예방 및 진단목적의 약학 조성물, 화장료 조성물 등에 관한 것이다.본 기술은 표적 세포 또는 세포 핵에 침투가 용이하지 않거나 또는 본래 유용한 속도로 표적 세포에 투입할 수 없는 생물학적으로 활성인 단백질, 핵산 및 기타 분자를 세포 내로 효율적으로 전달하기 위한 방법이다.
- 보유기관
- 한림대학교
- 등록일
- 2004-07-15
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 발명은 유전자 유도 효소/프로드럭 치료법(gene directed enzyme/prodrug therapy; GDEPT)에서 중요한 역할을 수행하는 것으로 알려진 사이토신 디아미네이즈(CD)를 세포 내로 운반하고 세포 내에서 활성을 가지도록 하기 위하여 HIV-1 Tat 단백질과 융합시킨 융합단백질 Tat-CD, 이 융합단백질 Tat-CD를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드, 이 융합단백질을 제조하는 벡터 및 이 융합단백질을 세포 내로 도입시키는 방법 및 그 용도에 관한 것으로서, Tat-CD 융합단백질은 의약 조성물 등의 용도로 유용하다. 본 발명에서는 세포감염(transfection)에 의한 유전자 유도 효소/프로드럭 치료법(GDEPT)의 문제점을 극복하기 위해서 단백질 형질도입부위를 이용하여 세포 안으로 CD 효소를 직접 도입(transduction)시키는 방법(PTD-DEPT)을 개발하였으며, Tat-CD 융합효소를 도입하는 것에 의해 부작용 없이 항암효과를 나타내는 단백질 또는 치료법을 제공한다. PTD-DEPT를 증명하기 위한 방법으로서 CD 유전자들은 Tat의 9개 아미노산 (RKKRQRRR)과 융합되었고, 대장균 발현벡터에 클로닝 되었으며, 융합단백질을 순수하게 정제하여 융합 단백질을 HeLa 세포에 도입하였다.
- 보유기관
- 한림대학교
- 등록일
- 2004-07-15
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 발명은 세포침투성 카탈라제 융합단백질 및 그 용도에 관한 것으로서, 세포내 또는 세포핵 내로 침투하기 어려운 카탈라제에 단백질 형질도입 부위(protein transducing domain; PTD)를 공유결합시킨 카탈라제 융합단백질을 제조함으로써 세포 내로 원활히 침투하여 세포 내에서 해로운 활성산소종을 제거하는 활성을 나타내도록 하는 기술이다. 본 발명은 카탈라제를 세포 내로 도입하거나 발현시킴에 있어서 종래 기술의 문제점을 해결하고 고효율로 세포 내로 도입시키고 세포 내에서 활성을 가지도록 하려는 것이다. 본 발명은 카탈라제 cDNA 또는 그의 등가물(degenerate form)의 5' 말단에 HIV-1 Tat(49-57), Tat(51-57), Tat(50-56), Tat(50-57), Tat(50-55), 5~12개의 아르기닌 잔기로 구성되는 올리고 아르기닌, 5~12개의 라이신 잔기로 구성되는 올리고라이신, 5~12개의 아르기닌 또는 라이신 잔기로 구성되는 올리고펩타이드 중 1종의 단백질 형질도입 부위를 코딩하는 DNA 서열이 결합되어 상기 세포 침투성 카탈라제 융합단백질을 코딩하는 재조합 폴리뉴클레오타이드의 특징에 관한 것이다.
- 보유기관
- 한림대학교
- 등록일
- 2004-07-15
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 발명은 재조합이나 화학적 결합 방법으로 단백질 수송 도메인과 결합된 슈퍼옥사이드 디스뮤테이스(SOD) 융합 단백질에 Cu 이온을 회복시킴으로써 이 융합 단백질의 세포내 도입능력을 획기적으로 증가시키는 방법을 제공한다. 본 발명은 단백질 수송 도메인과 결합된 세포 침투성을 지닌 인간 Cu, Zn 슈퍼옥사이드 디스뮤테이스(Cu, Zn-Superoxide dismutase) 융합단백질의 세포내 도입능력을 구리이온 회복 방법을 이용하여 효율적으로 증가시키는 방법에 관한 것이다. 정제된 Tat-SOD 융합단백질에 구리이온을 첨가하여 충분한 양의 구리이온이 융합단백질에 결합하게 하고 결합하지 않은 자유 구리이온은 금속이온 킬레이터 수지(chelator resin)로 처리하여 제거함으로써 구리이온 회복 Tat-SOD(Copper ion recovered Tat-SOD)를 제조하였다. 구리이온 용액은 증류수를 이용하여 제조하거나 또는 SOD 융합단백질에 구리이온이 정상적으로 결합하는 것을 저해하지 않고, SOD 융합단백질 활성에 영향을 미치지 않는 완충용액을 이용하여 제조하는 것도 가능하다.
- 보유기관
- 한림대학교
- 등록일
- 2004-07-15
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 발명은 기능을 가진 단백질 또는 펩타이드를 더 높은 효율로 세포 내로 도입시키는 융합단백질과 그 용도에 관한 것으로, 6~12개의 아미노산 잔기로 구성되며 아르기닌 또는 라이신 잔기를 3/4 이상 포함하는 수송도메인이 목표단백질의 아미노기와 카르복실기에 공유결합된, 세포침투성 수송도메인-목표단백질-수송도메인 융합단백질과 그 용도에 관한 것이다. 본 발명은 단백질의 세포 내 도입능과 효율 및 세포 내 활성을 용이하게 분석하기 위한 녹색형광 단백질(Green fluorescence protein)과 생체 방어메카니즘에서 중요한 역할을 수행하는 것으로 알려진 Cu, Zn-슈퍼옥사이드 디스뮤테이스(SOD)를 목표 단백질로 사용하였다. 본 발명은 슈퍼옥사이드 디스뮤테이스를 세포 내로 도입하거나 발현시킴에 있어서 종래 기술의 문제점을 해결하고 고효율로 세포 내로 도입시키고 세포 내에서 활성을 가지도록 하려는 것이다. 또한, 수송도메인과 융합된 슈퍼옥사이드 디스뮤테이스를 이용하여 피부 표피, 진피층, 피하지방층까지 침투하여 활성산소종의 제거능이 탁월한 화장료를 제공하려는 것이다. 상기 목적을 달성하기 위하여 수송도메인과 인간 Cu, Zn-슈퍼옥사이드 디스뮤테이스를 융합시켜 이 융합단백질이 효과적으로 세포 내로 투과되는지를 HeLa 세포를 이용한 실험에서 확인하였다.
- 보유기관
- 한림대학교
- 등록일
- 2004-07-15
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 기술은 전자수용체 처리를 통한 퇴적토의 생물학적 정화방법에 관한 것으로 혐기상태의 퇴적토를 현장내에서 효율적으로 정화시킬 수 있다. 퇴적토에 전자수용체를 처리하여 유기오염원의 분해율을 높여줌으로써 오염믈질을 효율적으로 제거할 수 있는 정화방법이다. 퇴적토의 생물학적 정화방법은 퇴적통에 오염된 유기화합물을 분해시키는 것으로, 바람직하기로는 다핵 방향족 탄화수소화합물(PAH)을 효율적으로 제거하며, 다핵 방향족 탄화수소화합물은 2내지 5개의 일구조를 가지는 탄화수소화합물로, 대표적인 화합물은 나프탈렌, 페난트렌, 아세나프텐, 플루오렌, 플루오란텐, 피렌, 안트라센 및 벤조(아)피렌 및 크리센가 있다. 자연계에서 유기오염화합물의 분해는 제한된 산소공급으로 인해 그 분해율이 매우 낮아 오랜 기간 잔류하게 된다. 이를 해결하기 위한 방안으로 자연현장 조건 하에서 대체 전자수용체를 공급해줌으로써 유기화합물 분해율을 제고시켜 생물정화를 효율적으로 적용할 수 있다. 또한 퇴적토의 생물학적 정화방법은 오염원을 분해하는 미생물의 성장 및 활성을 증가시키는 방법으로, 오염된 퇴적토를 이동시키지 않고 현장내에서 퇴적토를 정화시킬 수 있으며, 협기상태의 미적토에 생물학적 처리하기 위하여 산소를 주입하는 과정을 거치지 않고 협기성 미생물을 이용함으로써 공정이 간단하면서도 용이하게 오염원을 분해시킬 수 있을 뿐만 아니라 정화과정중 이차적인 오염을 유발하지 않는다. 보다 구체적인 퇴적토의 생물학적 정화방법은 전자수용체를 퇴적토에 살포하거니, 퇴적통 내부에 주입하는 방식일 수 있으며, 통상적으로 오염된 토양에 정화제를 처리하는 방식으로 실시할 수 있다.
- 보유기관
- 한국해양과학기술원
- 등록일
- 2004-11-12
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
수서생물의 호흡시 산소소비량을 측정하는 호흡측정장치에 관한 것이며, 일반적으로, 호흡측정장치는 일정량의 산소가 용존된 물에서 생물의 호흡에 의해 감소하는 산소량을 측정함으로써 수중에서 서식하는 수서생물의 호흡상태를 간접적으로 측정할 수 있는 실험장치이다. 종래의 호흡측정장치는 용존산소를 측정할 수 있는 센서만 부착되어 자료를 단순히 수치화하거나 아날로그 방식으로 나타내고, 온도와 염분도 및 수시로 변화하는 대기압을 수작업으로 보정하여야 하므로, 장시간 측정하지 못하는 문제점이 있었음. 또한 종래의 호흡측정장치는 생물의 호흡에 의해 용존된 산소량이 일정치 이하로 감소하게 되면 생물의 생존을 위해 새로운 물로 교체해야 하는데, 이러한 교체작업이 수작업으로 이루어져 불편할 뿐만 아니라, 실험오차를 크게 하는 문제점이 있었음. 기존 호흡측정장치의 제반 문제점을 해소하기 위한 것으로, 순환수의 용존산소와 대기압을 자도으로 보정하여 생물의 호흡상태를 장시간 측정할 수 있는 자동 호흡측정장치를 제공함에 그 목적이 있다. 물이 순환하는 페루프로 된 메인순환루프와, 상기 메인순환루프에 연통되게 설치되도 피실험생물을 생물저장조와, 메인순환루프에 병렬로 연결되어 메인순환루프로 산소가 포화용존된 보충수를 공급하는 보조순환루프 및 메인순환루프 내의 용존산소량을 측정하여 보조순환루프를 메인순환루프와 연통시키는 연산제어부를 포함한다.따라서, 상기 메인순환루프 내의 산소용존량을 측정하여 그 데이터값에 따라 보조순환루프와 메인순환루프를 자동으로 연통시키으로써 메인순환루프 내의 용존산소량를 자동으로 보정할 수 있어 장시간 실험을 할 수 있게 되는 것이다.즉, 실험에 사용중인 물의 산소포화도가 일정치 이하일때 산소가 포화용존된 물을 자동으로 공급할 수 잇고 대기압을 자도으로 보정하여 생물의 호흡상태를 장시간 측정할 수 있을 뿐만 아니라 실험오차도 줄일 수 있다.
- 보유기관
- 한국해양과학기술원
- 등록일
- 2004-11-12
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일반기술
생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 기술은 형질전환된 미생물을 이용하여 단백질 분해효소의 기질특이성을 측정하는 방법에 관한 것이다. 본 기술의 단백질 분해효소의 기질특이성을 측정하는 방법은 단백질 분해효소를 코딩하는 유전자를 포함하는 벡터를 작제하는 단계와 효모의 골기체에 존재하는 막단백질의 골기체 표적 신호 부위와 막횡단 부위를 코딩하는 유전자, 특정 아미노산 서열을 가지는 기질 부위를 코딩하는 유전자 및 효모의 인버타아제(invertase)를 코딩하는 유전자를 포함하는 벡터를 작제하는 단계, 전기 두 가지 벡터를 이용하여 suc2 돌연변이종 효모를 동시에 형질전환시켜서 형질전환체를 제조하는 단계 및 전기 형질전환체를 자당을 유일한 탄소원으로 포함한 배지에서 배양하여 생존율을 측정하는 단계를 포함한다."본 기술에 의하면, 단백질 분해효소의 순수분리 및 정제과정이 필요하지 않고, 많은 비용이 소요되는 기질펩티드의 합성이 요구되지 않으므로, 간단하고, 경제적으로 단백질 분해효소의 유전자 동정 또는 특정 단백질 분해효소에 의해 절단되는 단백질의 유전자 동정에 널리 활용될 수 있을 것이다.결국, 본 기술의 주된 목적은 단백질 분해효소 발현벡터와 기질 발현 벡터로 동시에 형질전환된 suc2 돌연변이종 효모를 이용하여, 단백질 분해효소의 기질특이성을 측정하는 방법을 제공하는 것이다."
- 보유기관
- 호남제주공공기술이전컨소시엄
- 등록일
- 2004-11-12
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
본 기술은 아스퍼질러 플레버스(Aspergillus flavus) KCTC 6961로 분리한 아미노펩티다제(aminopeptidase) 및 그를 이용한 재조합 단백질의 아미노말단에 부착된 메티오닌 잔기의 제거방법에 관한 것이다.아스퍼질러스 플레버스(Aspergillus flavus) KCTC 6961 균주의 포자를 멸균배지에 접종하여 배양하고, 배양액을 이온 교환 크로마토그래피와 2회에 걸쳐 겔 여과 크로마토그래피 처리를 하여 아미노펩티다제를 제조한다. 본 기술의 아미노펩티다제를 이용하며, 비천연형의 유전자 재조합 단백질의 아미노 말단에 위치하는 메티오닌 잔기를 제거하여 천연형의 단백질로 전환할 수 있다.
- 보유기관
- 고려대학교
- 등록일
- 2004-11-29
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
간염B바이러스의 S 항원에 대한 항체를 생산하는 재조합 CHO 세포에 세포예정사를 억제하는 Bcl-2 단백질의 과발현을 유도할 수 있도록 Bcl-2 발현 벡터를 도입한다. Subcloning 방법을 통하여 Bcl-2를 과발현하는 세포를 확보하고 이 세포를 회분배양하는 과정에서 항체를 생산하는 단계에서 배지내에 외래단백질의 발현을 증가시키는 sodium butyrate를 첨가하고 sodium butyrate의 세포독성으로부터 유도되는 세포예정사를 Bcl-2 단백질의 과발현을 통하여 억제함으로써 최종항체생산성을 대조군과 비교하여 2배 이상 증가시킬수 있다. 본 기술은 외부단백질의 발현효율을 높일 수 있는 sodium butyrate의 세포독성에 대한 저항성을 세포에 부여하기 위하여 생존단백질로 알려져있는 Bcl-2 단백질을 항체생산 CHO 세포에서 과발현을 유도하여 재조합 단백질의 단위생산성 증가 및 배양 기간의 연장을 동시에 실현함으로써 최종 단백질생산성 증가를 가능하게 하는데 기술적 특징이 있다.
- 보유기관
- 한국과학기술원
- 등록일
- 2004-12-10
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
목적단백질 생산을 위하여 산업적으로 널리 사용되는 DHFR이 결핍된 CHO DUKX 세포주를 무혈청 배지에서 부유배양이 가능하도록 적응하였다. 예정사를 억제하기 위하여 bcl-2, 아데노 바이러스 E1B-19K 유전자를 각각 도입한 후 subcloning과 western blotting을 통하여 과발현하는 CHO 숙주세포주를 확보하여, 회분배양을 통해 세포의 농도와 생존율을 측정하였다. Bcl-2, 아데노 바이러스 E1B-19K 단백질을 과발현하는 세포주는 세포 생존율이 대조군에 비하여 완만하게 감소하였으며, 상대적으로 예정사가 감소하였다.본 기술은 무혈청 배지에서 부유배양이 가능하고, 예정사에 저항성을 갖는 DHFR이 결핍된 CHO 숙주세포주를 제공하므로써, 이 CHO 숙주세포주를 이용하면 예정사에 저항을 갖는 다양한 목적단백질을 생산하는 재조합 CHO 세포주를 효율적으로 제작할 수 있게 하는데 기술적 특징이 있다.
- 보유기관
- 한국과학기술원
- 등록일
- 2004-12-10
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