일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 시클라멘 페르시쿰(Cyclamen persicum Mill)으로부터 분리된 화색관련 효소유전자인 다이하이드로플라보놀-4 리덕타아제(dihydroflavonol -4 reductase; DFR)의 유전자에 관한 것으로서, 식물 형질전환시 화색을 변화시킬 수 있는 뛰어난 효과를 제공한다. 시클라멘 페르시쿰의 화색관련 효소를 PCR 방법을 이용하여 분리하고 이들의 염기서열을 밝혀 그 염기서열을 제공하는 것을 목적으로 한다. 그리고 상기 유전자를 식물발현 벡터에 클로닝한 후, 형질전환시키는 것을 그 목적으로 한다. 시클라멘 페르시쿰(Cyclamen persicum Mill)에서 화색관련 효소유전자를 분리하기 위해 프라이머를 작성하고 이를 이용하여 PCR과정을 거쳐 시클라멘 페르시쿰의 DFR 유전자의 염기서열을 밝힌다. 본 기술에 사용된 시클라멘 페르시쿰은 화색이 빨간 품종을 사용하였으며 완전 전개된 화판을 -70℃에 보관하여 RNA 분리에 사용하였다. 본 기술의 DFR 유전자를 포함하는 시클라멘 페르시쿰의 총 RNA 회수는 공지된 분리방법에 의해 이루어 진다.
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- 경희대학교
- 등록일
- 2004-06-22
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 카나마이신 저항성 유전자를 포함하는 rescue cloning용 식물형질전환용 벡터 pRCV1에 관한 것으로서, 유용 돌연변이체를 만들어 유전자의 기능을 탐색하는 T-DNA tagging 연구 및 형질전환 작물에서 나타나는 도입된 유전자의 비정상적인 발현 양상을 연구하기 위하여 개발된 본 식물형질전환용 벡터는 선발 마커로 카나마이신 저항성 유전자와 reporter gene을 갖추고 있고, tagging을 위해 이용되는 방법인 rescue cloning과 inverse PCR이 보다 효율적으로 수행될 수 있도록 T-border 내부의 제한효소 사이트, T-border 바깥쪽과 안쪽 부분을 바로 시퀀싱할 수 있는 프라이머 사이트가 각각 고려되어 제작되었기 때문에 전이된 T-DNA 내부의 변이와 식물 genomic DNA를 분리 확보하여 분석할 수 있는 보다 효과적이고 간단한 연구방법을 제공할 수 있으며, 더 나아가 T-DNA가 multiple copy로 전이된 형질전환체의 분석도 가능한 뛰어난 효과가 있다. 본 기술은 식물형질전환용 벡터 중 카나마이신 저항성 유전자(nptII)를 운반하는 pCAMBIA2300에 암피실린 저항성 유전자와 박테리아 복제기점(bacterial replication origin)을 갖고 있는 pBluescriptII KS(+)을 삽입시켜 tagging 용벡터(pRCV1)를 제작하고 tagging할 개체의 genomic DNA를 절단하기 위하여 이용할 제한효소를 결정하는 단계; 클로닝된 벡터(pRCV1)를 맵핑하여 클로닝이 정확하게 됐는지 여부를 확인하고 선택 마커가 벡터 내에 존재하는지 여부를 PCR로 확인하는 단계; pRCV1의 전체 염기서열을 기초로 T-DNA 양쪽 border 바깥쪽과 안쪽을 시퀀싱 할 수 있는 프라이머를 제작하여 제작된 프라이머를 PCR로 증폭하고 염기서열 분석하여 제대로 바깥쪽과 안쪽을 시퀀싱 할 수 있는지 여부를 확인하는 단계; pRCV1을 A.tumefaciens LBA4404내로 삽입하고 삽입된 pRCV1에 선택 마커가 존재하는지 여부를 PCR을 통해 확인하는 단계로 구성된다.
- 보유기관
- 경희대학교
- 등록일
- 2004-06-22
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 유독 식물 플랑크톤에 의해 합성 분비되는 독성물질인 삭시톡신(saxitoxin)을 검출할 수 있는 바이오센서 및 이를 이용한 독성물질 검출 방법에 관한 것으로, 삭시톡신과 단백질과의 결합체로 면역반응시킨 마우스로부터 분리한 항-STX 항혈청(anti-STX antiserum)인 것을 특징으로 하는 삭시톡신(saxitoxin;STX) 검출용 바이오센서 및 독성물질과 단백질의 결합체를 제조하고; 상기 결합체르 마우스에 주사하여 면역반응시켜 항혈청(antiserum)을 제조하고; 그리고 상기 항혈청과 독성물질의 항원 항체 반응에 의한 발색도를 측정하는 단계를 포함한다. 본 기술은 아직까지 전세계에서 체계적으로 시도되거나 개발되지 않는 새로운 기술로서, 고가의 정밀분석기기의 이용과 함께 현장에서 독소의 조기 정밀 검정 기술이 확립된다면 이의 활용 가능성은 매우 높게 된다본 기술은 삭시톡신과 같은 독성물질을 쥐에 주사하여 혈청으로부터 항체를 생산하고, 생산된 항체와 독성물질의 반응에 의해 발색되는 정도를 측정함으로써 삭시톡신을 비롯한 독성물질을 검출하는 방법과 관련되며, 또한 적조현상은(redtide; Harmful Algal Blooms(HABs))은 전세계적으로 발생 빈도가 증가하고 있을 뿐 아니라, 유독화, 조밀화되고 있어 수산자원, 해양환경, 및 공중보건에도 심각한 위협이 되므로 이에 대한 대책이 요구되고 있다. 따라서 아직까지 전세계에서 체게적으로 시도되거나 개발되지 않은 새로운 기술로 고가의 정밀분석기기의 이용과 함께 현장에서 독소의 조기 정밀 검정기술이 확립된다면 이의 활용가능성은 매우 높다. 또한 항원 항체 반응을 이용한 독성물질 검출 방법은 다른 유해독소의 조기 정밀 진단에도 적용 가능하다.
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- 한국해양과학기술원
- 등록일
- 2004-11-12
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명자는 상기와 같이 종래 기술의 한계를 극복하기 위한 연구를 수행한 결과, 세포내 폴리아민의 과다발현을 억제하여 일정한 세포내 폴리아민 함량을 조절해 주는 것으로 여겨지는 uORF를 포함하는 SAMDC cDNA를 프로모터인 35S 프로모터에 결합시킨 컨스트럭트(construct)를 제조하고, 상기 컨스트럭트를 무균담배에 형질전환시킴으로써 SAMDC 유전자가 폴리아민의 생합성 함량을 증가시켜 식물생장의 결실 및 발아를 촉진하고 환경 스트르스에 대한 저항성이 높아짐으로써 농작물의 생산성을 제고할 수 있다는 사실을 알아내고 본 발명을 완성하였다.따라서, 본 발명의 목적은 농작물 특히 담배에서 폴리아민 생합성조절 유전자를 발현하는 새로운 방법을 제공함에 있다.본 발명의 또 다른 목적은 담배에서 폴리아민 생합성조절 유전자의 발현에 사용되는 재조합벡터 및 이들 재조합벡터로 형질전환된 담배식물체를 제공함에 있다.본 발명은 담배에서 폴리아민 생합성조절 유전자를 발현하는 방법과 이에 사용되는 재조합벡터 및 형질전환된 담배식물체에 관한 것으로, 좀더 상세하게는 폴리아민 생합성의 핵심 효소인 SAMD (Sadenosylmethionine decarboxylase)로 담배식물체를 형질전환함으로써 담배작물의 결실 및 환경스트레스 저항성을 높여 생산성을 제고하는 방법에 관한 것이다.본 발명에 의한 SAMDC 센스 construct가 도입된 형질전환 식물체는 폴리아민의 세포내에서의 함량을 증가시켜 주고, 식물생장과 결실 및 발아를 촉진시킬 수 있는 능력이 우수하다. 따라서 본 발명을 곡식 작물에 적용할 경우 곡식작물의 결실을 높여 향후 농업분야에서 농작물 생산성을 제고하는 데 있어 크게 기여할 수 있으리라 기대한다.
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- (재)전남테크노파크
- 등록일
- 2005-04-20
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 타입 5 아데닐릴 싸이클라아제(type 5 adenylyl cyclase, AC5)가 결실된 형질전환동물, 그의 제조방법 및 용도에 관한 것으로, 구체적으로 유전적 돌연변이 방법에 의해 D2 도파민 수용체 시스템(D2 dopamine receptor system)은 손상된 반면 D1 도파민 수용체 시스템은 기능적으로 완전하게 작동하는 돌연변이 AC5-/- 형질전환동물 및 그의 제조방법에 관한 것이다. <대표청구항>D2 도파민 수용체 시스템(D2 dopamine receptor system)은 손상된 반면 D1 도파민 수용체 시스템은 온전하게 작동하는 AC5 유전자(type 5 adenylyl cyclase)가 결실된 C5-/- 형질전환 마우스.본 발명은 D2 도파민 수용체 시스템은 손상된 반면 D1 도파민 수용체 시스템은 온전하게 작동하는 AC5-/- 형질전환 마우스를 제공한다. 본 발명자들은 상기 형질전환 마우스를 이용하여 D2 수용체 시스템은 AC5와 결함하여 작용하는 반면 D1 수용체 시스템은 AC5와 관계없이 작용한다는 사실과 AC5가 전형적인 항정신병 약제인 할로페리돌의 작용에 있어 매우 중요한 성분임을 입증하였다. 따라서, 장기간 사용시 유사 파킨슨병(Parkinsonism) 및 지연성 운동장애(Tardive dyskinesia) 등의 심각한 부작용을 초래하는 할로페리돌을 포함하는 항정신병 약제의 부작용을 고려할 때, 본 발명의 AC5-/- 형질전환 마우스는 항정신병 약제의 약학적 작용 기작을 밝히는데 사용될 수 있을 뿐만 아니라 기저 신경절 시스템의 약학적 및 생리학적 연구에 매우 유용한 도구로 사용될 수 있다
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- 이화여자대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 건선 환자의 건선 병변 또는 비병변 조직으로부터 유래된 침윤성 T 세포의 수용체 CDR3내에 특이적으로 존재하는 펩타이드, 상기 펩타이드를 암호화하는 핵산 또는 상기 핵산과 혼성화할 수 있는 핵산, 또는 상기 펩타이드에 대한 항체에 관한 것으로서, 건선의 병인 및 발병기작 연구에 유용한 도구를 제공할뿐 아니라, 나아가 건선의 진단, 및 예방 및 전신 치료에 유용하다. 본 발명은 서열번호 1에 기재된 아미노산 서열(DWTSGV)을 갖는 펩타이드를 제공한다. 본 발명에 따른 펩타이드는 C-말단측에 TCR Jβ2.7의 아미노산 서열, 특히 서열번호 2에 기재된 아미노산 서열(YEQYFGPGTRLTVT)을 추가로 갖고/거나, N-말단측에 TCR Vβ13의 아미노산 서열, 특히 서열번호 3, 4 또는 5에 기재된 아미노산 서열(CASR, CASRS 또는 CASY)을 추가로 가질 수 있다(Vβ13-DWTSGV- Jβ2.7 모티프). 본 발명은 상기 펩타이드를 암호화하는 핵산, 특히 서열번호 6(도 4 참조)에 기재된 염기 서열을 갖는 핵산, 또는 엄격한(high stringency) 조건 하에서 상기 핵산과 혼성화할 수 있는(hybridizable) 핵산, 특히 상기 핵산의 염기 서열에 상보적인 염기 서열을 갖는 핵산을 제공한다. 또한 본 발명은 상기 펩타이드에 대한 항체를 제공한다. 아울러, 본 발명은 유효성분으로서 상기 항체 또는 상기 핵산을 포함하는 건선의 진단, 또는 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공한다. 나아가, 본 발명은 상기 항체 또는 상기 핵산을 사용하여 건선의 진단, 또는 예방 또는 치료용 약제를 제조하는 방법을 제공한다.본 발명자들은 건선 병변에 침윤하는 T 세포의 수용체 CDR3 내에 공통적인 서열 모티프가 존재하는지 여부를 조사하기 위하여 지속적인 연구를 수행하였다. 그 결과, PCR에 기초한 스펙트라타이핑(PCR-based spectratyping), DNA 서열분석 및 RT-PCR-서던 혼성화의 복합 시스템을 사용하여 건선 환자로부터 유래된 피부 생검체에서 특이적 Vβ13-DWTSGV-Jβ2.7 모티프를 최초로 동정해내었다. 부수적으로, 본 발명자들은 Vβ15를 이용한 침윤성 T 세포에서도 아미노산 조성이 동일하거나 매우 유사한 반복성 TCR VDJ 재배열을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 목적은 건선 환자로부터 유래된 침윤성 T 세포의 수용체 CDR3내에 특이적으로 존재하는 펩타이드, 상기 펩타이드를 암호화하는 핵산, 상기 핵산과 혼성화할 수 있는 핵산 및 상기 펩타이드에 대한 항체, 및 건선의 진단, 예방 및 치료에 있어서의 그들의 용도를 제공하기 위한 것이다. 본 발명의 건선 환자로부터 유래된 침윤된 T 세포의 수용체 CDR3 Vβ13-DWTSGV-Jβ2.7 모티프는 건선의 병인 및 발병기작 연구에 유용한 도구를 제공할 뿐 아니라, 나아가 건선의 진단, 및 예방 및 전신 치료에 유용하다.
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- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 외래 유전자를 조류의 수정란의 핵 내로 전이시키는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 외래 유전자를 함유하는 DNA를 리포좀(liposome)과 혼합하여 조류의 수정란의 세포질에 미세주입(microinjection)하는 것을 포함하는 외래 유전자를 조류의 수정란의 핵 내로 전이시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 외래 유전자를 1세포기 수정란에 높은 효율로 전이시킬 수 있다. 따라서 생산된 후대의 모자이크 발생 확률이 낮다. 또한 바이러스를 이용하지 않기 때문에 감염의 위험성이 전혀 없어 안전하다. 따라서, 본 발명의 방법은 형질전환 조류를 제조하는데 매우 유용하게 사용될 수 있다.본 발명의 목적은 조류의 수정란의 핵 내로 전이시키는 방법을 제공하는 것이다. 본 발명에서는 리포좀을 이용하여 외래 유전자를 수정란의 핵 내에 전이시키는 방법을 개발하였다. 본 발명의 방법은 외래 유전자를 1세포기 수정란에 높은 효율로 전이시킬 수 있다. 따라서 모자이크 발생 확률이 낮다. 또한 바이러스를 이용하지 않기 때문에 감염의 위험성이 없어 안전하다. 따라서, 본 발명의 방법은 수정란 내 핵의 관찰이 매우 어려운 동물, 특히 조류를 형질전환하는데 매우 유용하게 사용될 수 있다.
- 보유기관
- 가톨릭대학교
- 등록일
- 2006-05-12
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
LAD 단백질이 T 세포의 활성에 중요하며 활성화된 T 세포에서만 LAD 단백질이 발현됨을 이용하여 인간 LAD 프로모터의 활성을 조절할 수 있는 면역조절제의 고효율 스크리닝에 유용하게 사용될 수 있는 세포주-기초 스크리닝 시스템을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 인간 Lad 프로모터에 리포터 유전자가 융합되어 외부 자극에 대한 TCR의 반응에 따라 인간 Lad 프로모터에 의해 리포터 유전자의 발현이 조절되면서 발현된 단백질의 양을 쉽게 측정할 수 있는 재조합 유전자 컨스트럭트를 제작하고, 이를 형질전환시킨 세포주에 다양한 화합물을 처리한 후 Lad 프로모터에 의해 유도된 리포터 유전자의 발현 정도를 측정하여 LAD 단백질의 면역조절제로 사용될 수 있는 화합물을 선별할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.본 발명의 목적은 T 임파구의 비정상적인 활성화가 수반되는 면역질환의 치료를 위해 LAD 단백질의 발현을 조절할 수 있는 면역조절제를 용이하게 검색할 수 있는 고효율의 세포-기초 스크리닝 시스템을 제공하는 것이다.본 발명은 T 세포 수용체 (T CELL RECEPTOR, TCR) 자극에 의해 활성이 조절되는 인간 LAD (LCK-ASSOCIATED ADAPTER PROTEIN) 유전자의 프로모터에 리포터 유전자가 융합된 재조합 유전자 컨스트럭트, 이의 형질전환 세포주 및 이를 이용하여 LAD 단백질의 면역조절제 (IMMUNO MODULATING AGENT)를 검색하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 세포주 및 검색방법은 TCR 자극에 의한 인간 LAD 프로모터의 활성 변화를 리포터 유전자의 발현 정도로 용이하게 확인할 수 있으므로 인간 LAD 프로모터 활성 조절을 통하여 LAD 단백질의 발현을 조절할 수 있는 면역조절제를 검색하는데 유용하게 사용될 수 있다.
- 보유기관
- 이화여자대학교
- 등록일
- 2006-05-18
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 형질전환 세포주 및 이를 이용한 면역억제제 검색방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 ET 재조합 효소를 이용한 상동 재조합 방법에 의하여 제조된, LIME 프로모터에 의해 리포터 유전자의 발현이 조절되는 형질전환 세포주 및 이를 이용한 면역억제제 검색방법에 관한 것이다. 본 기술의 목적인 LIME 프로모터에 의해 리포터 유전자의 발현이 조절되는 형질전환 세포주 및 이를 이용한 면역억제제 검색방법 제공을 위하여 본 기술은 본 기술은 다음과 같은 작용들로 구성된다.(1) 인간 LIME 프로모터에 의해 리포터 유전자의 발현이 조절되는 재조합 유전자 컨스트럭트 및 상기 재조합 유전자 컨스트럭트를 포함하는 플라스미드를 제공한다.(2) 또한, 본 기술은 상기 재조합 유전자 컨스트럭트를 포함하는 형질전환 세포주를 제공한다.(3) 아울러 본 기술은 상기 형질전환 세포주를 이용하여 면역억제제를 검색하는 방법을 제공한다.본 기술의 LIME 프로모터의 조절을 받는 GFP 리포터 유전자를 포함한 BAC 플라스미드, 상기 재조합 플라스미드로 형질전환된 세포주 및 이를 이용한 면역억제제 검색방법은 LIME의 발현을 조절하여 T 세포 활성화를 억제하는 기작으로 작용하는 새로운 면역억제제를 동정하는데 유용하게 사용될 수 있다.본 기술의 형질전환 세포주 및 이를 이용한 면역억제제 검색방법은 형질전환된 세포주에 특정 화합물을 첨가함에 따라 리포터 유전자의 발현이 증가 또는 감소되는 것을 측정함으로써 세포 기반의 면역억제제를 검색하는데 유용하게 사용할 수 있다.
- 보유기관
- 이화여자대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 활성 표지(activation tagging) 및 유전자 포획(gene trapping)을 동시에 수행하는 T-DNA 표지 벡터로 단자엽 식물의 형질전환체를 제조하는 방법 및 이 방법으로 제조된 단자엽 식물의 형질전환체에 관한 것이다.본 기술의 T-DNA 표지 벡터는 유전자 주변에 삽입될 경우에는 그 유전자의 활성화에 의해 유전자 기능을 분석할 수 있으며, T-DNA가 유전자 내에 삽입될 경우에는 유전자 포획(gene trapping)을 통해 삽입된 유전자의 발현 양상을 조사할 수 있어 다양한 식물 유전자의 기능 분석 및 새로운 품종 개발에 유용하게 사용될 수 있다.본 기술은 1) 활성 표지를 위한 인핸서 및 유전자 포획을 위한 리포터 유전자를 포함하는 T-DNA 표지 벡터를 제조하는 단계; 2) 단계 1)에서 제조된 T-DNA 표지 벡터로 형질전환된 미생물과 단자엽 식물의 캘러스를 공배양하는 단계를 포함하는 단자엽 식물의 형질전환체를 제조하는 방법을 제공한다. 또한, 상기 목적에 따라 본 기술은 상기 방법으로 제조된 단자엽 식물의 형질전환체를 제공한다. 본 기술의 T-DNA 표지 벡터를 이용한 단자엽 식물의 형질전환 방법은 벼를 포함한 단자엽 식물에서 최초로 기능획득 돌연변이체를 만들 수 있고, 유전자 포획을 통한 유전자 발현 관찰과 기능손실 돌연변이체를 동시에 얻을 수 있기 때문에 벼를 포함한 다양한 작물의 유전자 기능 분석 및 새로운 품종 개발에 유용하게 사용될 수 있다.
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2006-05-18
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 미꾸라지 아포리포프로테인 AⅠ 유전자가 이식된 형질전환 미꾸라지에 관한 것으로, 서열 1에 기재된 미꾸라지 아포리포프로테인 AⅠ의 cDNA를 포함하는 발현벡터를 미꾸라지 수정란에 미세 주입하여 부화시키는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산된 본 발명의 형질전환 미꾸라지는, Apo AⅠ을 과발현하고 이에 따라 콜레스테롤 대사에 핵심적인 조절 기능을 담당하는 고밀도 리포프로테인을 대량 생산하므로, 고함량의 고밀도 리포프로테인-콜레스테롤(HDL-CHO)을 포함하는 건강식품으로 개발될 수 있을 것이다.본 발명에 따라 생산된 신기능성 형질전환 미꾸라지는 양식 소재로서의 개발을 통해 인체 유용 물질을 대량 함유하고 있는 기능성 식품 소재로 개발이 가능하다. 즉, 본 발명에 따른 미꾸라지 Apo AⅠ 유전자가 이식된 형질전환 미꾸라지는 자체 Apo AⅠ을 과발현하고 이에 따라 콜레스테롤 조절에 핵심적인 기능을 담당하는 인체 유용 성분인 고밀도 리포르로틴(HDL)을 대량 포함하고 있으므로, 일반 미꾸라지를 식품으로 이용할 때보다 훨씬 우수한 건강 보조 효과가 창출될 수 있음은 분명하다.더우기, 본 발명에서와 같이 인간의 유전자와 유사한 기능을 담당하는 어류 유전자의 이식을 통해 인체 질환 및 분자 치료 연구를 위한 유용 정보와 부가가치를 창출할 수 있다(Walter, R. B., 2001. Introduction: Aquaria fish models of human disease. Mar. Biotechnol., 3: S1-S2). 즉, 인체 질환 또는 대사 등과 밀접한 관계를 갖고 있는 어류 유사 유전자들을 발굴하고 형질전환을 통해 이들의 기능을 실험 어류에서 발휘시킬 경우, 해당 인간 유전자의 기능 유전체학과 질환치료제 개발에 유용한 정보를 얻을 수 있게 된다. 구체적으로, 본 발명에서는 인간과 유사한 기능을 담당하는 미꾸라지 Apo AⅠ 유전자의 과발현이라는 특정 표현형을 획득한 신기능성 어류를 개발할 수 있었는데, 이는 해당 인간 유전자(즉,인간 Apo AⅠ)의 기능 연구, 치료제 개발, 진단 시약 개발 등을 위한 유용한 실험 모델을 제공할 수 있을 것이다.
- 보유기관
- 부경대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 수퍼옥사이드 디스뮤타제를 대량생산하는 형질전환된 식물체 및 그의 제조방법에 관한 것으로서,보다 상세하게는 오이 과실에서 우세적으로 발현하는 유전자 프로모터인 아스코베이트 옥시다제 프로모터,카사바 배양세포에서 분리한 SOD 유전자 및 제초제 바스타 내성 bar 유전자를 포함하는 식물 형질전환용 발현 플라스미드를 이용하여 아그로박테리아에 SOD 유전자를 도입하고,이를 식물 조직과 공동배양함으로써 얻은 높은 항산화 활성을 가지는 식물체 및 그의 제조방법에 관한 것이다○기술성 식용 가능한 과실부위에 SOD를 과량발현시켜 제품으로 이용함.거의 모든 종자식물의 하배축절단면으로부터 효율적으로 식물체를 재분화시킬 수 있음○사업성 SOD는 의약품(주사제)으로 개발이 추진되고 있으나,SOD의 안정성,체내에서 이동 등의 문제로 현재 drug deliverly system에 관한 연구와 환경스트레스 내성식물을 개발하기 위해 SOD 형질전환 식물체가 개발이 활발히 추진되고 있음
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 유즙 중에 인간 과립구 콜로니 자극인자를 대량생산하는 형질전환 흑염소에 관한 것으로, 상세하게는 흑염소 베타카제인 프로모터하에 인간 과립구 콜로니 자극인자 유전자를 포함하는 발현카세트 pGbc-hGCSF가 도입된 수정란(제KCTC 0718BP호), 상기 수정란으로부터 발생된 형질전환 흑염소, 상기 수정란을 대리모 흑염소의 난관에 이식하고 발생시키는 단계를 포함하는 상기 형질전환 흑염소의 제조 방법, 상기 도입에 사용되는 수정란의 채란 방법, 상기 형질전환 흑염소를 출산시킨 후 유즙 중에 포함된 형태로 인간 과립구 콜로니 자극인자를 회수하는 단계를 포함하는 인간 과립구 콜로니 자극인자의 생산방법에 관한 것이다.○기술성 본 발명에 따른 형질전환 흑염소는 생체내 활성을 갖는 인간 G-CSF를 유즙 중에 대량생산하며, 이로부터 생산된 인간 G-CSF는 생리활성을 그대로 유지하므로 골수 이식, 악성 임파종, 급성 백혈병, 폐암, 난소암, 고환종양, 골수이형성 증후군, 재생불량성 빈혈 및 선천성 특발성 호구증 감소증 등의 질환의 예방 및 치료제로 유용하게 사용될 수 있다.○사업성날로 확대되어 가는 의약시장 진출 시 경쟁력 우위 확보와 향후 무궁한 시장상황에서 고부가가치 창출을 도모 할 수 있다.
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 기술은 식물의 잎 수명을 조절하는 유전자를 이용하여 식물의 노화를 지연시키는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 애기장대로부터 분리된, ORE8 유전자를 이용하여 식물체를 형질전환시킴으로써 식물의 노화를 지연시키는 방법에 관한 것이다.본 기술에서는 식물체에서 수명 조절에 관여하는 유전자를 탐색하기 위하여 수명이 연장된 형질을 나타내는 돌연변이체를 액티베이션 태킹방법으로 찾고 이로부터 수명연장에 관계되는 유전자를 탐색하였다.본 기술에서는 ore8 변이체의 노화 지연 표현형이 ORE8 유전자의 활성화를 통해 나타났음을 확인하였고, 식물체 내에서 상기 ORE8 유전자를 활성화시킴으로써 식물의 노화 지연을 유도하고, 염- 및 산화적 스트레스에 대한 저항성을 증진시킨다.본 기술에 따른 방법에 따라 ORE8 유전자를 이용하여 식물체를 형질전환시킴으로써 산화적 스트레스나 고농도의 염에 대한 식물의 저항성이 증진되고, 식물의 노화가 지연되어 식물의 생산성 향상 및 저장 효율 증대 등이 도모될 수 있다.
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2006-06-12
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 세포사에 관여하는 유전자를 선발할 수 있는 효모 균주 DK990418과 DK990419 에 관한 것이다. NMV4 vector 에 Bax(program cell death 와 관련된 유전자) 를 억제하는 AtBl-1 유전자를 cloning하여 Saccharomyces cerevisiae 에 형질전환하여 SD-Glucose-Trp 와 SD-Galactose-Trp 선발배지에서 선발하여 세포사에 관련된 유전자를 선발할목적으로 DK990418과 DK990419를 만든 것이다. 지금까지 식물의 환경스트레스인 저온, 고온, 병해충의 침입, 상처 등의 원인으로 인하여 식물의 성장이나 결실이 나빠지거나, 식물 그 자체가 고사하는 경우가 있다. 따라서 효모 screening system을 이용한다면 환경스트레스를 극복할 수 있는 유전자를 개발하고 이를 이용하여 환경스트레스에 대한 열악한 조건을 극복할 수 있는 새로운 개체를 육성할 수 있을 뿐만 아니라 그 유전자의 단백질을 이용한다면 새로운 생물농약개발에 뛰어난 효과가 있다.본 발명은 DK990418과 DK990419 를 이용한다면, 환경스트레스에 의한 동식물 세포사에 관련된 유전자를 효율적으로 선발할 수 있다. DK990418과 DK990419 를 yeast strain을 개발하기 위하여 pYX112-AtBl과 pYX112-Bcl2의 정확한 sequence를 하여 ORF 영역을 규명하는 단계 : NMV4 vector 에 AtBl과 Bcl2를 construction함과 동시에 효모에 transformation하는 단계 : DK990418과 DK990419의 세포사 관련 screening을 하기 위한 검정 실험으로 pYX112-Bax와 pYX112를 각각 DK990418과 DK990419를 형질전환하여 선발배지에서 선발하는 단계로 구성된다. 세포사에 관여하는 유전자 AtBI을 포함하는 재조합벡터 NMV4-AtBI으로 형질전환된 효모 (Saccharomyces cerevisiae) 균주 DK990418, 세포사에 관여하는 유전자 Bcl을 포함하는 재조합벡터 NMV4-AtBI로 형질전환된 효모(Saccharomyces cerevisiae) 균주 DK990419
- 보유기관
- 경북기술이전센터
- 등록일
- 2007-01-03
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일반기술
생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 식물의 세포사의 억제와 관련된 유전자를 cloning하기 위한 효모 system을 개발하기위함이다. Program med cell death(PCD)는 생리학적으로 매우 중요한 현상으로, 식물의발생분화기구 및 병원저항성 등에 대하여 특별히 중요한 역할을 하고 있다. 그러나 식물의 PCD mechanism은 명확하게 밝혀져 있지 않다. NMV4 vector에 세포사와 관련이 있는 cdf1 유전자를 cloning하여 Saccharomyces cerevisiae에 transformation하여 SD-Glucose-Trp 와 SD-Galactose-Trp 선발배지에서 선발하여 세포사에 억제하는 유전자를 선발할 목적으로 GY1015, GY1016, GY1017를 만든 것이다. 따라서, 식물에서 환경스트레스에 대한 유전자를 발견하여 이를 발현시켜, 식물이 환경스트레스로부터 면역기능 체계를 확립함과 동시에 식물의 cell death pathway를 억제하는 정확한 메카니즘을 밝힘으로서 환경스트레스에 대한 식물의 방어시스템을 개발하여, 새로운 품종을 육성하는데 있다.본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여 pYX112-cdf1 과 pYX112-cdf2의 ORF 영역을 NMV4 (TRP1, CEN) vector의 EcoR I 부분에 ligation하여 Saccharomyces cerevisiae (MAT a ade 1 his 2 leu 2-3)에 형질전환하여 세포사를 억제할 수 있는 새로운 yeast strain인 GY1015와 GY1016을 선발한 실험을 수행하였다. 또한 Bax 유전자를 NMV4 vector에 ligation하여 Saccharomyces cerevisiae (MAT a ade 1 his 2 leu 2-3)에 형질전환하여 GY1017을 얻었다. 본 발명은 GY1015, GY1016 및 GY1017을 이용한다면 동식물의 세포사를 억제할 수 있는 유전자를 screening할 수 있다.
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- 경북기술이전센터
- 등록일
- 2007-01-03
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생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 Arabidopsis cDNA library를 가지고 Saccharomyces cerevisiae strain (DK990418)을 이용하여 cell death 관련 유전자인 cerevisiae death factor 1 (cdf1) 와 cerevisiae death factor 2 (cdf2) 및 cerevisiae death factor 3 (cdf3) 을 선발한 것이다. cdf1 와 cdf2가 효모의 활성을 억제하고 단백질을 생산해 내는 유전자로 이들 유전자로부터 얻어진 단백질 산물은 생물농약의 원재로 사용될 수 있을 뿐만 아니라 인간에게 여러가지 virus나 fungus의 질병을 막을 수 있다. 또한 유용농작물에 형질전환을 시켜 그 형질전환체를 얻는다면 virus나 fungus에 의한 병해에 저항성인 식물체를 만들 수 있다.본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여 Arabidopsis cDNA library 를 이용하여 새로운 yeast strain (DK990418과 DK990419)을 이용하여 cell death 에 관련된 유전자를 screening 하는 단계, yeast strain으로 screening된 colony를 sequence와 homology 조사, 단백질을 생성 유무를 위한 검정 단계로 구성된다. cell death와 같은 기능을 하는 세 개의 유전자인 CDF1, CDF2, cdf3를 screening 하여 그 특성을 구명하였다. 식물에 형질전환이 된다면, 지금의 형질전환체로 GMO 문제점을 극복할 뿐만 아니라, 식물의 진균에 대한 방어기작 작용을 하여 새롭게 활용 가능하게 된 품종을 개발하는데 극대화시킬 뿐만 아니라, 그 단백질을 이용한다면 생물농약으로 사용될 수 있어 산업적으로 매우 유용한 발명인 것이다.
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- 경북기술이전센터
- 등록일
- 2007-01-03
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생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 니트로페닐술포닐에톡시카르보닐 [2-(4-nitrophenyl) -sulfonylethoxy carbonyl]-아미노산을 이용한 합성 테트라펩티드 라이브러리 (synthetic tetrapeptide library)의 제조방법에 관한 것으로서, 구체적으로 본 발명의 합성 테트라펩티드 라이브러리 제조방법은 1) 수지에 시스테인을 제외한 19개의 아미노산 혹은 아미노산 혼합물을 결합반응시키는 단계; 2) 상기 아미노산-수지에 19개의 아미노산 혹은 아미노산 혼합물을 세번 반복하여 결합반응시키는 단계 및 3) 수지와 곁사슬보호기를 제거하는 단계와 각각의 결합반응 후에 NSC기를 제거하는 단계를 포함하며, 이 때 상기 NSC-아미노산은 기존의 펩티드합성시 이용되는 아미노산에 비하여 상온에서 안정하여 취급이 편하고 합성시 부반응을 줄일수 있으며 비용적으로도 이점이 있어 본 발명의 방법에 의하면 경제적이고 간편하게 펩티드 라이브러리를 대량으로 합성할 수 있다. 1) 수지에 시스테인을 제외한 19개 각각의 아미노산을 결합반응시키는 단계; 2) 상기 아미노산-수지에 19개의 아미노산 혼합물을 세번 반복하여 결합반응시키는 단계 및 3) 수지와 곁사슬보호기를 제거하는 단계와 각각의 결합반응 후에 NSC기를 제거하는 단계를 포함하며, 이 때 상기 아미노산은 니트로페닐술포닐에톡시카르보닐(NSC)-아미노산을 이용하고 상기 아미노산 혼합물은 페닐알라닌 0.6-0.8 중량부; 알라닌 0.7-0.9 중량부; 아스파르트산, 아스파라긴, 세린, 글라이신 및 프롤린 0.9-1.1 중량부; 글루탐산, 글루타민 및 루신 1.0-1.2 중량부; 히스티딘, 아르기닌, 티로신, 메티오닌 및 라이신 1.1-1.3 중량부; 트레오닌 및 트립토판 1.2-1.4 중량부; 발린 및 이소루신 1.9-2.1 중량부를 함유하는 것을 특징으로 하는 합성 테트라펩티드 라이브러리의 제조방법.
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2007-08-10
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생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 높은 활성을 가진 사람과 생쥐 인터루킨-12 (Interleukin 12, IL-12)를 생산할 수 있는 IL-12p40 소단위체 돌연변이 유전자, 상기 돌연변이 유전자를 포함하는 발현 벡터 및 이를 DNA 백신 면역증강제로 이용하는 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 활성형의 IL-12의 경쟁적 저해제로 작용하는 사람 또는 생쥐 IL-12p40의 Asn-222 (사람) 또는 Asn-220 (생쥐) 아미노산에 돌연변이를 유발시킴으로써 IL-12p40의 분비는 저해하면서 IL-12의 면역 활성을 가지는 IL-12p70은 정상적으로 분비되도록 한 IL-12p40 돌연변이 유전자에 관한 것이다. 본 발명의 IL-12p40 소단위체 돌연변이 유전자와 IL-12의 또 다른 소단위체인 IL-12p35 유전자를 함께 C형 간염 바이러스 (HCV)의 외피 당단백질 2 (E2)에 대한 DNA 백신을 이용한 면역화에 함께 사용할 경우, HCV-E2 DNA 단독으로 면역화된 경우나 IL-12p40 정상 유전자가 사용된 경우보다 오랜 기간 동안 최적의 세포성 면역 반응을 유도 및 유지할 수 있음을 발견하였다. 따라서, 이러한 결과를 통하여 IL-12p40 소단위체를 제외한 IL-12p70이 생체 내에서 장기간의 강력한 세포성 면역 반응을 도출할 수 있음을 확인하였으며, 본 발명의 IL-12p40 돌연변이 유전자는 세포성 면역 반응이 필수 불가결한 것으로 알려져 있는 후천성 면역 결핍증 (AIDS), C형 및 B형 간염, 암, 독감, 결핵, 말라리아 등을 예방 및 치료하기 위한 유전자 치료 등에 유용하게 사용될 것이다. 사람 IL-12의 p40 소단위체를 암호화하는 서열번호 1 의 염기서열을 갖는 유전자에 있어서, Asn-222를 암호화하는 코돈이 당쇄화가 되지 않도록 비하전된 극성 측쇄형 아미노산(Amino acids with uncharged polar side chains) 또는 비극성 측쇄형 아미노산(Amino acids with nonpolar side chains)을 암호화하는 코돈으로 치환된 p40 소단위체 유전자.
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2007-08-10
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생명과학 > 형질 전환 기술
본 발명은 레티노산 (retinoic acid)에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자 컨스트럭트, 그의 형질전환 세포주 및 이를 이용한 레티노산 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법에 관한 것으로, 본 발명의 검색방법은 레티노산에 민감하게 반응하는 형질전환 세포주를 이용하므로 레티노산 유사물질에 의한 리포터 유전자 발현량의 증가와 저해물질에 의한 리포터 유전자 발현량의 감소를 통해 레티노산 유사물질 및 저해물질을 적은 비용으로 신속하고 간단하게 검색하는데 유용하게 이용될 수 있다. 1) 서열번호 1로 기재되는 염기서열을 갖는 TREpal (palindromic TRE)과 리포터 유전자가 융합된 유전자 컨스트럭트를 레티노산 수용체를 발현하는 세포주에 도입하여 형질전환 세포주를 제조하는 단계; 2) 상기 형질전환 세포주에 레티노산과 검색 대상 화합물을 처리하여 배양하는 단계; 3) 상기 배양액으로부터 단백질을 분리하는 단계; 4) 분리된 단백질에 리포터 유전자의 기질을 첨가하여 효소-기질 반응을 유도하는 단계; 및 5) 상기 효소-기질 반응에 의해 생성된 발광정도를 측정하는 단계를 포함하는, 레티노산 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법.
- 보유기관
- 포항공과대학교
- 등록일
- 2007-08-10
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