일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
분자생물학적 즉 RFLP(restriction fragment length polymorphism) 패턴 분석을 이용하여 비피더스 균주를 동정하는 방법이다. 비피더스균은 그람 양성 혐기성균으로서 젖산, 아세트산을 생산함으로써 대장의 pH를 감소시키고 부패균의 성장을 억제하고 암모니아를 NH4+ 형태로 유지하게 함으로써 암모니아의 흡수를 감소시키는 적용을 한다. 최근에 건강에 대한 관심이 커지면서 비피더스균을 낙농제품의 첨가물로 많이 이용하고 있다. 비피더스균의 포도당대사(비피더스 경로)는 비피도박테리움(Bifidobacterium) 속 균주에 대한 마커로 사용되며, 이 경로의 가장 중요한 프럭토스-6-포스포케톨라제 효소는 모든 비피더스균 종에서 발견되고 특성이 잘 연구되어 있다. 따라서 비피더스균의 동정은 프럭토스-6-포스페이트 포스포케톨라제(F6PPK) 분석, 가스 크로마토그래피에 의한 세포 추출물에서의 아세트산과 젖산 분석 및 박막 크로마토그래피 분석에 의해 수행되어 왔다. 그러나 비피더스균을 포함하는 인간 및 동물의 대변 또는 발효된 우유로부터 분리 동정하는 초기 단계에서 시간이 많이 소모되고 민감도와 특이성이 결여된다는 단점이 있다. 최근 분자생물학적 방법이 계통 발생학적 연구와 미생물 동정에 사용되는 데 이 방법에는 G+C 수치의 양과 DNA-DNA 교잡법, RFLP, RAPD(random amplified polymeric DNA) 및 DNA PFGE(pulsed-field gel electrophoresis) 등이 포함된다. 이 중 RFLP 분석은 세균 종들과의 유전적 상관관계를 밝히는데 널리 사용되나 비피더스균주의 경우 이런 분자생물학적 방법을 이용하여 동정하는 방법이 아직 없다. 이에 16s rDNA 유전자의 RFLP 패턴에 따른 DNA 지문에 근거하여 비피더스 균주를 동정하고 분석하였으며, 분자생물학적 방법을 이용한 동정 방법이 종래에 사용되는 탄수화물의 발효 패턴을 이용한 비피더스 균주의 동정방법과 비교하였을 때 시간, 비용이 적게 들고 민감도와 특이성이 우수함을 확인하였다.기존의 탄수화물의 발효패턴을 이용한 동정 방법이 가지고 있던 문제점을 개선하여 시간 및 비용이 적게 들고, 민감도와 특이성이 보다 정확하게 각 균주를 동정할 수 있는 방법이다. 분리된 비피더스균주의 16S rRNA에 대해 상보적인 cDNA를 제조하는 단계, cDNA에 제한효소(EcoRI, HindIII 및 CfoI)를 처리하여 소화시키는 단계 및 소화된 DNA 절편의 패턴을 비교하는 단계로 동정한다. 16S rDNA 유전자의 RFLP 패턴에 따른 DNA지문에 근거한 분석에 바탕을 두고, 간편하고 정확하게 비피더스 균주를 동정할 수 있는 RFLP 방법을 사용하였다.기존의 동정 방법이 가지고 있던 민감도와 특이성의 문제점을 개선하여 보다 정확하게 각 균주를 동정할 수 있고, 한국인에게 가장 적합한 균주로서 야쿠르트 등의 다양한 발효식품에 첨가물로 유용하게 사용할 수 있다.유산균을 이용한 제품으로는 발효유 외에 버터류, 치즈류, 발효음료류, 유산균 함유 식품을 포함하여 2000년 총 9931억의 시장을 형성하고 있으며, 유산균을 이용한 제품으로 의약품 중 유아 및 성인용 정장제가 있고 그 시장규모는 1000억에 이르며, 그에 대한 수요가 기대되고 있다.
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
글래스 비드를 이용하여 미생물의 세포벽을 파괴하는 단계, 페놀 또는 클로로포름을 처리하여 단백질을 제거하는 단계 및 알코올 공침으로 통해 핵산을 침전시켜 수득하는 단계를 통해 미생물로부터 핵산을 분리하는 방법이다. 미생물로부터 핵산을 분리하는 것은 미생물 균주의 분리 및 동정에 필요하다. 기존 미생물을 분리․동정하기 위해 주로 미생물의 형태학적, 배양적, 생리학적 특성으로 유사종과 비교하였으나 특징을 판단하는데 기준이 명확하지 않고 이 방법을 수행하기 위해 많은 시간과 노동력이 필요하였으나, 최근 DNA의 염기조성이나 아미노산 조성을 조사함으로써 유사종과의 공통점과 차이를 정확하게 확인할 수 있어 많이 이용되고 있다. DNA의 염기조성이나 아미노산 조성을 조사하기 위해 미생물의 핵산 중에서 16S rDNA를 분석하는데 이 부분을 증폭할 수 있는 상보적인 염기서열을 가진 프라이머를 이용해 PCR를 수행하여 기존 미생물의 16S rDNA와 비교하여 미생물을 분류하고 동정한다. 이를 위해 제노믹 DNA의 분리가 필수적이며, 균주를 동정하기 위해 많은 균주로부터 제노믹 DNA를 분리하여야 하는데 종래 방법으로 시간이 많이 소요되어 시료가 많은 경우 적당치 않으며 보다 간단하고 단시간에 경제적으로 제노믹 DNA를 분리하는 방법이 시급히 개발되어야 한다. 또한 미생물로부터 RNA를 분리하는 것은 미생물을 이용한 유전자조작을 위해 반드시 필요하나 고온 페놀 RNA 분리방법은 세포벽이 견고한 유산간균으로부터 RNA를 분리하기 쉽지 않고 시간도 많이 소요되므로 세포벽을 파괴하는 방법과 단시간에 RNA를 분리할 수 있는 방법이 개발되어야 한다. 이에 기존 핵산분리방법이 세포벽 파괴의 어려움으로 핵산을 분리하는데 시간이 많이 들고 분리가 제대로 되지 않는 것을 해결하기 위해 글래스 비드를 사용하여 세포벽을 파괴해 핵산을 분리함으로써 신속하면서, 또 경제적으로 핵산을 분리할 수 있게 되었다.세포벽 파괴의 어려움으로 인해 핵산을 분리하는 데 시간이 많이 들고 핵산의 분리가 제대로 되지 않는 점을 해결하기 위해 글래스 비드를 사용하여 세포벽을 파괴해 핵산을 분리함으로써 신속하고 경제적인 분리방법이다. 세포 배양액에 글래스 비드를 첨가하여 강하게 흔들어 줌으로써 미생물의 세포벽을 파괴하게 되고 글래스 비드의 양 및 흔들어 주는 것은 미생물의 종류와 배양액의 양에 따라 적절히 조절할 수 있다. 종래 기술에 비해 시간적, 경제적으로 유용하며, 본 방법에 의해 분리된 핵산은 제노믹 DNA 또는 전체 RNA가 바람직하고, 모든 미생물 특히 그람 양성균과 유산 간균으로부터 핵산을 분리하는 것이 더욱 바람직하다.글래스 비드를 사용하여 미생물의 세포벽을 단시간에 용이하게 파괴할 수 있고, 순도가 높은 핵산을 분리할 수 있기 때문에 핵산을 분리하는 데 드는 시간을 단축하고 핵산 분리에 사용되는 비용을 절감할 수 있어 미생물로부터 핵산을 분리하는 데 유용하게 사용할 수 있다.미생물 균주를 동정하기 위한 응용분야가 매우 다양하며, 특히 본 기술의 유산간균을 동정하는 진단 방법에 대한 수요가 기대되고 있다.
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
감초로부터 글라브리딘을 추출하는 방법으로서 분쇄된 감초와 에틸아세테이트, 에탄올, 메탄올 및 아세톤으로 이루어진 그룹 중 선택된 용매를 혼합하고 여과한 후 여과액을 감압 농축시켜 추출물을 얻고 이를 컬럼 크로마토그래피로 정제하는 방법이다. 감초(Glycyrrhiza uralensis)는 해독제, 진해거담제, 완화제, 소화성 궤양치료제, 근육이나 조직의 급격한 긴장에 의한 통증을 풀어주는 작용, 체중 증가, 백혈구 증가, 이뇨작용, 항염작용 등의 약용 및 식용으로 사용된다. 추출물 중 글리시리진은 물 또는 알칼리성 수용액으로 추출할 때 규산소다, 황산 알루미늄을 순차적으로 첨가하여 pH4.5-6.5로 조절하여 정치시킴으로써 여과․분리하는 방법, 메탄올 추출공정, 음이온교환수지 탈색공정, 에탄올 재결정 공정을 조합 또는 순차적으로 추출하는 방법에 의해 고순도의 추출물을 얻는 방법이 공지되어 있다. 또한 추출물로서 글라브리딘은 인체에 해로운 저밀도 인지질의 산화를 억제하고, 피부에 중요한 영향을 미치는 소수성물질의 하나로서 피부 미백에 탁월한 효과가 있어 이를 원료로 하여 미백효과가 있는 기능성 화장품을 제조하고 있다. 그러나 추출방법이 연구되어 순도가 높은 형태로 사용되는 글리시리진과 달리 글라브리딘은 추출방법이 없어 순도가 낮은 추출물의 상태로 사용되는 문제점이 있다. 이에 순도가 높은 글라브리딘 추출물을 얻기 위한 방법으로서 에틸아세테이트, 에탄올, 메탄올 및 아세톤으로 이루어진 그룹 중 선택된 용매를 혼합하고 여과한 후 여과액을 감압 농축하는 방법을 통해 글라브리딘을 추출하였다. 또한 분쇄된 감초와 물을 혼합 교반하여 열수 추출한 후 추출액에 클로로포름을 첨가하여 물층을 분리하고 물층에 에틸아세테이트를 첨가하여 에틸아세테이트 층을 분리하고 감압 농축시켜 글라브리딘 추출물을 얻고 이를 컬럼 크로마토그래피로 정제하는 방법이다.분쇄된 감초와 물을 혼합 교반하여 열수 추출하는 단계는 글라브리딘의 용출율을 증가시킨다. 추출액에 클로로포름을 첨가하고 물층을 분리하는 단계는 감초 분말의 친수성 및 소수성 불순물이 많이 함유되어 있어 추출액에 클로로포름을 첨가하여 층 분리하고 물층을 분리함으로써 감초 분말의 소수성 불순물이 클로로포름층으로 제거된다. 물층에 에틸아세테이트를 첨가하여 에틸아세테이트층을 분리하고 감압농축하여 추출물을 얻고 컬럼 크로마토그래피로 정제하는 단계는 통상의 방법이다.종래의 글라브리딘 함유 감초추출물에 비해 다른 불순물을 적게 함유하고 있고 글라브리딘의 함량이 높은 추출물을 제조하고 그 추출물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 글라브리딘의 함량과 순도가 높은 글라브리딘을 추출할 수 있어 한방, 식품, 담배 또는 기능성화장품인 미백제의 원료로 사용될 수 있다.대한화장품공업협회에 의하면 미백제는 2001년 515억원으로 전체 화장품시장의 1.51%, 2002년에는 792억원으로 2.11%로서 53.7% 성장하였다. 기능성 화장품이 15.4%의 성장률을 보인데 비해 높은 수준이다. 2003년 화장품 전체시장은 4조1천억원, 화장품 원료시장은 3천3백억원으로 추정된다.
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- 2004-03-23
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
전자전달체와 멜라닌 색소를 탈색시키는 효소를 유효성분으로 포함하는 멜라닌 탈색용 조성물 및 이를 유효성분으로 포함하는 피부 미백제로서 기능성 화장품의 미백 원료로 사용되며 인체에 있어서 멜라닌 색소의 과다로 인한 기미, 주근깨 등의 병변을 개선하는 데 효과가 있다. 생활수준의 향상으로 미백에 대한 관심이 고조되고 있다. 기능성화장품으로 주름개선제, 자외선 차단제와 함께 중요한 미백제는 피부에서의 색소침착 방지 차원에서 멜라닌합성효소인 티로시나제 합성 저해, 멜라닌 생합성 장소인 색소형성세포의 기능을 저하시키는 독성물질을 투여, 도파의 산화방지를 위해 도파 환원물질의 개발과 같이 연구되고 있다. 피부의 멜라닌을 탈색시키는 방법으로 멜라닌 생성에 관여하는 티로시나제 효소의 작용을 억제하는 방법으로 포화 알킬이소시아나이드 유도체, 트리코데르마 종 MR-304 균주의 배양에 의한 MR-304-1 화합물 등이 공지되었다. 티로시나제 저해제는 티로시나제의 활성부위에 포함된 구리이온을 킬레이트시키는 코직산(kojic acid)와 티로시나제의 활성을 저해하는 알부틴(drbutin)이 있다. 그러나 이미 생성된 멜라닌에 의한 흑화는 치유하기 어렵고, 멜라닌이 생성되는 색소형성세포까지 침투시 장시간이 소요되고 그 기전이 불분명하여 더 연구를 진전할 수 없다. 이에 현재 개발 중인 멜라닌을 산화시켜 멜라닌을 탈색시키는 효소인 락케이즈(laccase)를 이용한 미백은 피부에 직접 표출된 즉 각질층에 있는 멜라닌을 탈색하므로 단시간에 효과를 얻을 수 있고 안정하므로 락케이즈를 이용하기 위한 방법으로서 산화제 매개체로 TBHQ(tert-bytylhydroquinone)를 사용하는 경우 락케이즈의 활성 증진에 의해 멜라닌의 탈색효과가 크게 증대됨을 확인하였다. TBHQ, 비타민C, 소듐 아스코빌포스페이트, 마그네슘 아스코빌포스페이트, 코직산, 감초추출물 및 알부틴으로 구성된 군에서 선택된 1종 이상의 전자전달체와, 락케이즈, 리그닌 퍼옥시다제, 망간 퍼옥시다제 등으로 구성된 군에서 선택된 1종 이상의 멜라닌 탈색효소를 유효성분으로 포함하는 멜라닌 탈색용 조성물이다.락케이즈 및 전자전달체를 함께 사용한 조성물은 멜라닌의 탈색 및 분해를 일으켜서 피부 미백효과를 증진시킨다. 본 조성물은 전자방출이 용이하고 반응성이 큰 산화제를 전자전달체로 사용하여 멜라닌 제거뿐만 아니라 노화방지 효과도 기대할 수 있다. 또 피부에서 과잉의 활성산소종 생성을 억제하고 생성된 활성산소를 효율적으로 제거할 수 있는 항산화방어 시스템으로 작용한다. 전달체는 TBHQ, 탈색효소는 아스퍼질러스(Aspergillus) 속에서 추출된 락케이즈가 바람직하다.멜라닌을 탈색시키는 효소 및 전자전달체를 유효성분으로 하는 멜라닌 탈색용 조성물은 피부 색소의 주요물질인 멜라닌을 효과적으로 탈색 및 분해시킬 수 있어 기능성 화장품인 미백제의 원료로 사용될 수 있고, 멜라닌 색소의 과다에 의한 기미, 주근깨 등의 병변을 개선하는 원료로 기대된다.대한화장품공업협회에 의하면 2001년 515억원으로 전체 화장품시장의 1.51%, 2002년에는 792억원으로 2.11%로서 53.7% 성장하였다. 기능성 화장품이 15.4%의 성장률을 보인데 비해 높은 수준이다. 2003년 화장품 전체시장은 4조1천억원, 화장품 원료시장은 3천3백억원으로 추정된다.
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- 인하대학교
- 등록일
- 2004-04-10
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
한국산 파인애플에 존재하는 단백질 가수분해 효소인 브로메라인(bromelain, E.C. 3,4,22,4)의 정제방법이다.한국산 파인애플의 과실에 존재하는 브로메라인의 정제방법에 있어서, 파인애플 과실을 박피하고 마쇄하여 과즙을 얻는 단계, 황산 암모늄을 이용하여 과즙을 분별침전시키는 단계, 분별침전된 시료를 투석하는 단계가 순차적으로 구성되는 것을 특징으로 하는 브로메라인의 정제방법으로 이루어 진다.식품의 육류 연화제로 이용될 수 있는 브로메라인을 황산 암모늄을 이용한 분별침전법으로 정제하는 방법, 소염제 등의 의료용으로 고순도를 요하는 경우 황산 암모늄으로 부분 정제한 후 이를 CM-cellulose 이온교환수지를 이용하여 흡착시키고 용출시키는 정제방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 기존의 방법과 비교하여 간단한 정제 단계를 거쳐 활성도와 순도가 현저히 높은 브로메라인을 제공한다.식품의 육류 연화제로 이용될 수 있고, 소염제등의 의료용으로도 정제가 가능하다.
- 보유기관
- 경남대학교
- 등록일
- 2004-04-28
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
세포배양의 encapsulation은 고밀도와 안전한 배양을 위한 방법으로 현재까지 이용되고 왔다. 캡슐 내에서 세포들은 유해한 환경으로부터 보호되고, 확산에 의해 기질들은 자유롭게 유입되는 반면에 대사물질과 product는 캡슐 내에 남아 있게 된다. 또한 캡슐들은 그들의 특성을 잃거나 변하지 않고 기계적인 스트레스에 저항하는데 있어 매우 안정적이다. 캡슐에 포함된 세포는 전통적인 stirred tank system에서도 세포의 손상 없이 배양될 수 있다. 이는 프로세스 과정을 안정화 할 수 있은 즉, pH, pO2와 같은 중요한 프로세스 파라메타들이 조절할 수 있다.본 기술의 새로운 시스템은 세포가 다당류의 메트릭스 내에서 새로운 형태로 encapsule되는 방법이다. 본 기술은 기존에 알려진 alginate encapsulation의 기술과 유사하나 원료로 사용되는 polysaccaride 가 생물학적인 원료로써 양이온과 중합하여 세포주변에서 고형막을 형성하는 칼슘클로라이드 용액에 떨어뜨려 캡슐을 형성한다. 세포가 외부 환경에 의존하지 않고 마이크로 환경 속에서 성장 할 수 있기 때문에 스케일링 프로세스 또한 간편하여 이에 관한 기술 개선을 위한 연구가 진행되고 있는 중이다.
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- 한국과학기술연구원
- 등록일
- 2004-07-07
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
1. 히아루론산은 최근 의료용 원료로 각광을 받고 있음.2. 히아루론산의 정제 기술로서 미생물 유래의 히아루론산 보다 적용시 효과가 월등히 우수함.3. 때문에 히아루론산을 기존의 공정보다 경제적이고 효율적으로 생산 할 수 있는 공정을 개발하여 적용한 것임1. 정제된 히아루론산은 미생물 유래의 그것 보다 적용시 효과가 월등히 우수함.2. 공정단독으로 인한 부수적인 설비비, 유지비, 인건비, 검사비, 원료비를 절감3. 공정 등의 유독성 화학물질사용을 배제하여 친환경적이며 완료제품의 안정성 향상4. 경제성이 탁월함5. 응용분야 : 의료용 의약품, 의료용구, 진단시약, 화장품, 식품 등
- 보유기관
- (재)충남테크노파크
- 등록일
- 2004-07-22
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
1. 산란계의 면역항체(IgY)를 이용한 기술임.2. 면역항체(IgY)를 가지고 있는 산란계가 생산하는 계란의 난황은 면역항체(IgY)가 유전3. 이를 이용하여 면역항체(IgY) 분리와 면역항체(IgY) 응용에 관한 기술임.4. 위염 원인 균인 헬리코박터 파이로리를 억제할 수 있는 기술임. 5. 면역항체(IgY) 항원을 비롯한 면역항체(IgY)항원의 대량생산 기술6. 면역항체(IgY) 원료화 및 면역항체(IgY)제품의 효능 검증을 포함한 전체 기술7. 각종 기능성 식품의 원료 및 기능성 화장품의 원료로 사용가능면역항체(IgY)를 가지고 있는 산란계가 생산하는 계란의 난황은 면역항체(IgY)가 유전되어 있으며 이렇게 유전되어 생산된 난항을 이용하여 면역항체(IgY)백신과 면역항체(IgY)백신의 대량생산 기술을 기반으로 면역항체(IgY) 원료화 및 면역항체(IgY) 제품 개발과 면역항체(IgY)를 이용한 응용제품의 생산을 위한 기술임또한 면역항체(IgY) 효능 검증과 면역항체(IgY)에 관한 동물임상실험법에 대한 기술로헬리코박터 파이로리에 대한 면역항체(IgY) 생산기술 전반
- 보유기관
- (재)충남테크노파크
- 등록일
- 2004-07-30
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
1. 비농세정액은 천연물 소재를 가지고 바이오피드백 시스템 기술을 사용하여 개발 생산한 기술이다.2. 천연물 혼합 재료를 특수 배합, 세척, 가공, 여과, 농도측정 등의 여러과정을 거쳐서 만들어진 기술로서 3. 알러지성비염, 축농증, 습관성콧물감기 등으로 고생하는 환자를 대상으로 생리식염수 대체용 세정액로 효과가 큰 기술이다.4. 그러나 비농세정액을 생산하기 위해 혼합 천연물에서 물질을 추출할 수 있는 디지털 바이오피드백 시스템이 반드시 필요한 기술이다.비농세정액은 혼합천연물의 재료로 바이오피드백 시스템 기술을 사용하여 개발하였다. 혼합 천연물에서 물질을 추출하는 방식이 많이 있지만, 디지털 바이오피드백 시스템에서만 본 추출 및 정제되어 생산이 가능하다. 때문에 비농세정액을 생산하기 위해서는 바이오피드백 시스템 장치도 꼭 필요하다.비농세정액은 알러지성비염, 축농증, 습관성콧물감기 등으로 고생하는 환자의 생리식염수 대체용 세정액로 효과가 큰 물질이다.
- 보유기관
- (재)충남테크노파크
- 등록일
- 2004-07-30
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
우르솔릭산(Ursolic Acid, C30H48O3, 분자량 456.68)은 Urson, Prunol, Micromrol, Malol 등으로 알려져 있으며, Pentacyclic triterpenoid 복합체로서 사과, 배, 로즈마리, 월귤나무 등 여러 종류의 과일 및 식물과 약초에 함유된 성분으로, 항암, 항염, 항궤양 효과 및 간기능 보호 등의 의약적 기능과 피부 노화 방지 및 피부 주름 방지 등의 기능성 화장품 기능, 그리고 뇌기능 향상 및 성인병 예방 등의 건강 식품 기능 등 다양한 용도로의 적용이 기대되는 천연 원료임.- 추출 원재료는 시베리아지역에서 구하기 쉬운 식물성 재료를 주원료로 하여 우르솔릭산의 추출 및 제조 기술을 개발하였으며, 사용되고 있는 원재료는 cranberry, cowberry (red bilberry), black chokeberry와 seabuckthorn berry들로 식료품 생산회사에서 쥬스, 음료 및 잼 등을 제조하고 남은 부산물을 원재료로 사용하였음.- 우르솔릭산의 효능이라고 알려져 있는 다양한 생체학적인 효능들은 우르솔릭산외의 다른 Triterpenic Acid 들에서도 볼 수 있으므로, 순수한 우르솔릭산 뿐만 아니라 다른 천연 Triterpenic Acid가 혼합된 혼합체들도 화장품과 같은 생체학적인 분야에 다양하게 사용될 수 있어, 우르솔릭산을 적용한 응용 상품의 제조 원가를 낮출 수도 있음. - NIOCH의 천연 식물에서의 우르솔릭산 추출 기술은 2003년에 RAS (Russian Academy of Science)로부터 유기화학분야의 최고 개발상을 수여 받았음. - 식품회사 (과일 통조림, 잼 류 등)의 과일 등의 찌꺼기를 원료로 사용할 수 있어, 제품의 생산 원가를 대폭 낮출 수 있어, 그 동안 고가라는 인식의 우르솔릭산을 화장품에의 적용도 가능할 수 있도록 하였음.- NIOCH에서 제조되는 우르솔릭산은 순도 90% 이상의 정제품과 함량의 조절이 가능한 우르솔릭산 힘량 20% 이상의 혼합품으로 구성되고 있음.
- 보유기관
- 티알씨코리아
- 등록일
- 2005-07-25
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
조류의 가슴에서 추출된 본 히알루론산은 항바이러스, 항박테리아, 마취성 및 상처 치유 효과 등의 특성을 지니고 있고, 피하에서 피부의 노화를 방지하는 등 다양한 기능을 보유한 원료로 모든 동물들이 보유하고 있다. 타 선진국에서는 주로 닭의 벼슬로부터 추출하고 있으며, 일부 국가에서 인공 합성을 연구하고 있으나 실용에 대한 성공 여부는 아직 불투명한 상태이다. 현재 본 히알루론산은 류마티스 치료, 안과 수술 등 여러 의학 분야에서는 물론 기능성 화장품 분야에서도 사용되고 있는 고가의 원료로 저렴한 비용으로 추출 정제가 가능하다면 매우 큰 경제적인 성과를 거둘 수 있을 것으로 기대된다. 본 기술은 육류로부터 히알루론산을 정제 분리할 수 있도록 개발되었다. 본 개발은 물리화학 측면, 생명공학 측면의 특성을 모두 살려 수행되었다. 이러한 기초 원료의 추출에서 더 나아가 히알루론산의 특성을 이용한 제약 분야로의 개발 영역을 확대하여 관련 설비의 개발에도 노력을 기울였다. 본 히알루론산의 여러 효능을 타 기초 원료의 효능과 연계할 경우, 그 시너지 효과로 인하여 매우 폭 넓은 제약품의 창출 가능성이 기대된다.히알루론산은 의료 및 화장품 산업을 포함하여 다양한 분야에서 사용이 가능하며, 현재 세계 시장에서의 가격대는1kg 당 52000달러 1백2십만달러까지 그 품질에 따라 다양하게 구성되어 있다. 본 제안 기술은 매우 폭 넓은 적용이 가능하고 우수한 품질의 히알루론산을 추출 정제할 수 있는 기술이다. 본 기술에서 사용하는 원재료는 지역 조류 육류 공장에서 나오는 폐육류를 사용하므로 매우 경제적이다. 본 기술을 이용하여 1kg의 히알루론산을 생산할 경우, 수입하는 것에 비하여 매우 저렴할 것은 자명하다. 본 개발 기술은 히알루론산의 추출은 물론 히알루론산을 이용한 타 제약 분야품의 생산에 대한 응용도 가능하다. 히알루론산의 응용 영역은 매우 넓으며, 아직 전체가 다 밝혀지지 않은 상태이다
- 보유기관
- 티알씨코리아
- 등록일
- 2005-07-25
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
로도코커스(Rhodococcus) 균주 T104 유래의 다중방향족고리 하이드록실레이션 옥시게나아제 및 이의 식물 테르펜을 이용한 발현유도방법으로서 환경오염원이 되는 방향족 기질들을 효과적으로 분해하는 로도코거스 균주 T104 유래의 3종 및 식물 테르펜을 사용하여 효과적으로 발현 유도하는 방법이다. 방향족 화합물은 산업화 과정에서 사용된 후 방출되거나 부산물로 방출되는 유해한 물질로서 폴리염화비페닐(PCBs) 등은 자연환경에 영향을 미쳐 생태계를 파괴하므로 치명적이다. 따라서 물리적 화학적 방법을 이용하여 분해 또는 제거하기 위한 기술이 개발되고, 이중 미생물을 이용한 생분해방법은 부수적 오염물질이 발생되지 않아 많이 연구되고 있다. 이에 본 개발자들은 PCBs의 분해미생물 중 PCBs의 분해과정 유도인자로서 리모넨(limonenes), 사이민(cymenes), 칼본(carnones), 피넨(pinenes) 등의 모노테르펜 존재하에 분해를 효과적으로 수행할 수 있고, 로도코커스 속 균주 T104가 리모넨, 비페닐, 페놀에 대해 각각 산화과정을 가지고 있음이 밝혔다. 또 하이드록실레이션 옥시게나아제의 발현이 사용된 성장기질에 따라 달리 영향을 받고 기질 특이성을 이용하면 다중방향족고리 하이드록실레이션 옥시게나아제가 PCBs나 다른 생분해 목적물질을 분해하여 제거하는 과정에 유용하게 사용될 수 있으며, 천연물인 식물 테르펜을 이용하여 하이드록실레이션 옥시게나아제 유전자의 발현을 효과적으로 유도함으로써 방향족 기질들을 효과적으로 분해할 수 있을 뿐만 아니라 기존의 로도코커스 균주 T104의 배양에 사용되었던 성장기질 이용시 따르는 고비용과 환경오염문제를 해결할 수 있는 방법이 가능하다. 이에 로도코커스 균주 T104 유래의 다중 방향족고리 하이드록실레이션 옥시게나아제가 3종 있고, 이들이 리모넨, 비페닐, 페놀을 포함한 방향족 기질의 분해에 연관되어 있음을 PCR과 변성농도구배 겔 전기영동으로 확인하고, 리모넨, 사이민 및 식물 추출물A에 의해 옥시게나아제의 발현이 효과적으로 유도됨을 확인하였다. 로도코커스 균주 T104 유래의 다중방향족고리 하이드록실레이션 옥시게나아제(T1, T2 및 T5의 3종)를 방향족고리기질인 환경오염물질의 생분해에 사용한다. 식물 테르펜을 이용한 로도코커스 균주 T104의 하이드록실레이션 옥시게나아제의 발현 유도방법으로, 이 때 식물 테르펜은 리모넨, 사이민, 식물추출물A인 것을 특징으로 한다.다중 방향족고리 하이드록실레이션 옥시게나제와 식물 테르펜을 이용한 발현유도방법은 리모넨, 비페닐, 페닐 및 폴리염화비닐 등의 방향족 고리구조를 가진 환경오염물질을 분해할 뿐만 아니라 경제성과 안전성이 좋아 산업적으로 유용하게 사용할 수 있다.환경오염을 일으키는 방향족 화학물질에 의한 부담을 최소화하고 오염된 환경을 회복할 수 있는 미생물을 공급하여 생분해시킴으로써 이차적인 오염을 방지하고 기존 물리적 화학적 방법을 대체할 수 있을 것으로 환경 친화적인 제품으로서 그 수요가 기대되고 있다. 환경오염물질의 처리에 대한 미생물을 이용한 생분해성 제제로서 미생물 제제를 생산하는 기업에서 이용이 가능하다. 환경보호를 위한 환경단체나 정부·지자체 차원에서 정책적으로 시행하고 홍보함에 따라 사업화여건이 변할 수 있으므로 이에 대한 전략이 필요하다고 사료된다.
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- 인하대학교
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- 2006-03-16
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
본 발명은 피브린 분해 활성을 갖는 신규한 프로테아제와 그 분리 및 정제 방법에 관한 것으로, 구체적으로 본 발명의 프로테아제는 갯지렁이 (Periserrula leucophryna)로부터 순수분리되며, 약 28 kDa에서 약 30 kDa의 분자량을 갖고, 계면활성제, 중금속, 저온, 극심한 pH 조건, 극심한 산화성 환경 또는 환원성 환경에서도 활성을 유지하는 프로테아제이다. 따라서, 본 발명의 프로테아제는 혈전 용해제, 의류용 또는 콘택트 렌즈용 세제의 성분으로 유용하며, 식품, 사료, 직물, 천연 가죽 등의 가공 및 유기 폐기물의 처리에 유용하게 사용될 수 있다.본 발명은, 불안정하거나 극심한 물리적, 화학적 조건 하에서도 단백질 분해 활성을 유지하며 갯지렁이 (Periserrula leucophryna)로부터 분리되는 프로테아제를 제공한다.또한, 본 발명은 상기 프로테아제를 갯지렁이로부터 분리, 정제하는 방법을 제공한다.또한, 본 발명은 상기 프로테아제를 포함하는 혈전 용해제, 의류용 또는 콘택트 렌즈용 세제를 제공하며, 상기 프로테아제를 이용하여 식품, 사료, 직물, 천연 가죽을 가공하는 방법 및 유기 폐기물을 분해하는 방법을 제공한다. 본 발명은 갯지렁이 (Periserrula leucophryna)로부터 분리된 프로테아제를 제공한다. 상기 프로테아제는 약 28 kDa에서 30 kDa의 분자량을 가지며 피브린 분해 활성이 있는 프로테아제로서, 계면활성제 또는 중금속이 존재하는 환경, 극심한 pH 조건, 극심한 산화성 또는 환원성 환경에서도 활성을 유지하며 저온에서도 효소 활성이 유지된다.또한, 본 발명은 상기 프로테아제를 갯지렁이로부터 분리, 정제하는 방법을 제공한다. 구체적으로, 갯지렁이로부터 조효소액을 얻고, 이를 황산암모늄 침전법으로 정제한 후, 황산암모늄 활성분획을 다양한 칼럼 크로마토그래피를 조합 사용하여 정제함으로써 본 발명의 프로테아제를 분리할 수 있다. 이때, 상기 조효소액을 약 50℃에서 가열 처리하면, 프로테아제 활성을 보다 많이 분리할 수 있어 바람직하다. 또한, 상기 황산암모늄 분획 중 30～80% 황산암모늄 분획에서 본 발명의 프로테아제 활성이 나타나므로 이 분획을 칼럼 크로마토그래피에 사용하는 것이 바람직하고, 상기 칼럼 크로마토그래피는 겔 여과 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 벤자미딘 (benzamidine) 친화 크로마토그래피의 순서로 수행하는 것이 바람직하다.
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- 인하대학교
- 등록일
- 2006-03-16
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
*원리 및 개요1) 콩에는 97 %의 배당체와 3 %의 비배당체가 함유되어 있으며, 이소플라본 배당체는 다이드진, 제니스틴, 글리시틴, 말로닐-다이드진, 말로닐-글리시틴, 말로닐-제니스틴, 아세틸-다이드진, 아세틸-글리시틴, 아세틸-제니스틴 등이 있고, 이소플라본 비배당체는 다이드제인, 제니스테인, 글리시테인 등이 있다.2) 본 기술은 초음파를 이용한 콩에서 이소플라본(여성호르몬인 에스트로겐과 비슷한 기능을 담당하는 콩단백질의 하나)의 추출 방법 및 그 추출용 초음파 반응기에 관한 것이다.*배경콩에서 이소플라본을 추출하는 방법은 전반적으로 추출 공정이 복잡하며, 콩에서 직접 이소플라본을 추출함으로써 생산성이 떨어지는 문제점이 있다.*중요성 및 독창성1) 본 기술은 부산물 및 콩으로부터 유용성분을 추출하기 위한 최적 조건을 찾고 이러한 결과로부터 상품화를 위한 추출공정 시스템을 개발하기 위해 예의 연구하였다.2) 초음파를 이용하여 콩으로부터 이소플라본을 물 또는 알코올 용매 하에서 추출한 다음 고성능 액체 크로마토그래피를 이용하여 정제하면 국내외 시장성에 적합한 고순도(60 % 이상), 중순도 (40-60 %) 및 저순도(10-40 %)의 이소플라본을 간단하게 추출 및 정제할 수 있음을 발견하였다.3) 단계 초음파를 이용하여 콩으로부터 이소플라본을 물 또는 알코올 녹여서 뽑아낸 후, -그 추출된 여과액을 나누어가져 불순물을 제거하는 전처리 단계 -이 액체를 고성능 액체 크로마토그래피(색소물질을 흡착제에 의해서 분리하는 방법)로 정제하는 단계로 나누어 진다.
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- 인하대학교
- 등록일
- 2006-05-18
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
*원리 및 구성본 기술은 프로테아제의 분리와 정제 방법에 관한 것이다. 프로테아제는 생체내에서 소화, 흡수, 방어 등의 다양한 기능을 하고 있고, 혈전의 용해 등과 같은 사람의 질병 치료용 이외에도 의류용 세제의 성분, 콘텍트 렌즈 세정제의 성분으로 이용될 수 있다. 현재, 프로테아제는 의료용 혈액 응고와 혈전의 용해에 가장 많이 사용되고 있다. 따라서, 이 기술은 의료분야 및 산업 분야에서 유용하게 사용할 수 있으며, 프포테아제를 간단하고 빠르며, 높은 수율로 분리해주고 정제할 수 있게 역할을 해준다. 또한, 이 기술로 인해 대량 생산이 가능해지기 때문에 빠르게 발전해 나갈 것이다.*4가지의 기술적 단계1) 갯지렁이(Periserrula leucophryn)로부터 조추출액(crude extraction)을 조제하는 단계2) 조추출액을 흡작제를 사용하여 흡착시키는 단계3) 흡착된 것을 용출제를 사용하여 용출시켜 용출액을 얻는 단계4) 그로부터 얻어지는 활성 분획을 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하는 단계*효과본 기술은 프로테아제를 갯지렁이로부터 흡착제를 이용하여 간단하고, 빠르면 높은 수율로 분리하는 방법을 제공해주고, 갯지렁이로부터 분리된 프로테아제를 정제하는 방법도 제공해준다.
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- 인하대학교
- 등록일
- 2006-05-18
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
본 고안은 혼성화 반응 및 효소 면역 분석법을 이용한 병원성 미생물의 무증폭 다중 정량 검출킷트 라고 하고 이를 이용하여 병원성 미생물을 정량적으로 검출하는 방법에 관한 것으로, 낚시탐침이 고정된 혼성화 모듈, 태그가 표시된 보고탐침, 표준시료, 혼성화 완충용액, 세척용액, 변성용액, 중화용액, 항체 희석 용액, 효소연결 항-태그 항체 및 상기 효소의 기질용액을 포함하는 본 발명의 검출킷트는 유전물질을 정제하거나 증폭하지 않고 혼성화 반응 및 ELISA의 조합에 의해 바이러스, 세균, 원생생물 등 여러 종류의 병원성 미생물을 한번에 정량적으로 검출할 수 있게 하며, 간단한 방법에 의해 재생하여 반복 사용할 수 있으므로 시간과 비용 면에서 매우 경제적이다.본 고안은 기존의 병원성 미생물을 진단하는 방법에 있어서 문제점을 해결하기 위해 혼성화 반응 및 ELISA를 이용하여 간단하고 경제적인 방법으로 병원성 미생물을 정확하고 정량적으로 검출할 수 있는 킷트 및 이를 이용하여 병원성 미생물을 정량적으로 검출하는 방법을 제공하는 것에 목적을 같는 다. 미생물을 검출하기 위해서는 낚시탐침이 고정된 혼성화 모듈, 태그가 표지된 보고 탐침, 표준시료, 혼성화 완충 용액, 세척용액, 변성용액, 중화용액, 항체 희석용액, 효소 연결 항-태그 항체 및 상기 효소의 기질용액을 포함하고, 유전물질을 정제하거나 증폭하지 않고도 혼성화 반응 및 ELISA의 조합에 의해 병원성 미생물을 정량적으로 검출하고 정확하게 진단할 수 있는 킷트를 제공한다.
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- (재)광주테크노파크
- 등록일
- 2007-01-03
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생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
본 발명은 페니실리움 시트리눔(Penicillium citrinum) KCCM 11663 균주로부터 프락토실 트랜스퍼라제의 분리, 정제방법에 관한 것으로서, 상세하게는 수크로스(sucrose)가 포함된 배지조성에서 배양한 페니실리움 시트리눔 KCCM 11663이 생산하는 여러 효소 중 설탕을 네오프락토 올리고당으로 만드는 새로운 프락토실 트랜스퍼라제의 분리정제방법에 관한 것이다. 일반적으로는 프락토 올리고당과 네오프락토 올리고당이 함께 생산되었지만 본 발명의 정제된 프락토실 트랜스퍼라제를 이용하여 수크로스에 반응시킨 결과 프락토 올리고당은 생산되지 않고 네오프락토 올리고당만을 선택적으로 생산할 수 있어 여러 식품, 의약 산업의 첨가제로 사용이 용이하게 된다.본 발명은 수크로스(sucrose)가 포함된 배지조성에서 배양한 페니실리움 시트리눔 KCCM 11663이 생산하는 여러 효소 중 설탕을 네오프락토 올리고당으로 만드는 새로운 프락토실 트랜스퍼라제의 분리정제방법에 관한 것이다. 네오프락토 올리고당의 경우 우수한 보습작용, 우수한 단맛, 저 칼로리성, 항우식 작용, 장내 세균의 증식, 장관 국소면역 증강작용 등의 기능을 갖고 있기 때문에 감미료, 기능성 식품, 사료, 의약, 식물의 방역 촉진제 등의 다방면의 적용이 가능한 것인데, 일반적으로는 프락토 올리고당과 네오프락토 올리고당이 함께 생산되어 그 생산량이 낮고 필요시에 프락토올리고당으로 부터 다시 정제해야 하는 기술상의 어려움이 있어 네오프락토 올리고당 만의 이용에 제한이 따랐다. 그러나 본 발명의 정제된 프락토실 트랜스퍼라제를 이용하여 수크로스에 반응시킨 결과 프락토 올리고당은 생산되지 않고 네오프락토 올리고당만을 선택적으로 생산할 수 있어 여러 식품, 의약 산업의 첨가제로서의 사용시에 상당한 공정비의 절감과 고수율 생산이 가능하게 되므로 네오프락토 올리고당을 이용하는 산업에 유용한 발명이다.
- 보유기관
- 고려대학교
- 등록일
- 2007-03-15
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
본 발명은 아토피성 피부염에 대한 치료효과를 보이는 약독화된 살모넬라 균주의 새로운 용도에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 약독화된(attenuated) 살모넬라(Salmonella typhimurium) 균주를 유효성분으로 함유하는 아토피성 피부염 치료용 조성물에 관한 것이다.본 발명이 제공하는 살모넬라 균주는 병원성이 없는 약독화된 살모넬라 균주로써 동물에 주사할 때 체내 사이토카인의 변화를 유도하여 아토피피부염의 억제인자중 하나인 인터페론 감마(Interferon-gamma)의 발현을 높이고 활성인자인 IL-4 의 발현을 낮추어 주었으며 동시에 IgE의 발현을 억제하는 효과를 보여주었다. 이 결과로 피부염완화를 유도하고 아토피성 피부염의 증상인 가려움증 및 피부염증의 증상완화효과를 보여주었다. 따라서, 본 발명의 살모넬라 제제는 난치성 질환으로 적절한 치료제가 부제한 아토피성질환의 치료 및 보조 예방제제로서 의약산업에 매우 유용하게 사용될 수 있다.본 발명이 제공하는 살모넬라 균주는 병원성이 없는 약독화된 살모넬라 균주로써 동물에 주사할 때 체내 사이토카인의 변화를 유도하여 아토피피부염의 억제인자중 하나인 인터페론 감마(Interferon-gamma)의 발현을 높이고 활성인자인 IL-4의 발현을 낮추어 주었으며 동시에 IgE의 발현을 억제하는 효과를 보여주었다. 이 결과로 피부염 완화를 유도하고 아토피성 피부염의 증상인 가려움증 및 피부염증의 증상완화효과를 보여주었다. 따라서, 본 발명의 살모넬라 제제는 난치성 질환으로 적절한 치료제가 부제한 아토피성질환의 치료 및 보조 예방제제로서 의약산업에 매우 유용하게 사용될 수 있다.
- 보유기관
- 고려대학교
- 등록일
- 2007-03-15
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
본 발명은 제비콩추출물 및 그 제조방법에 관한 것으로 제비콩추출물로부터 다이드진(daidzin), 제니스틴(genistin),다이드제인(daidzein), 제니스테인 (genistein), 6'-o-아세틸-제니스틴(6'-o-acetyl-genistin), 6'-o-아세틸-다이드진 (6'-o-acetyl-daidzin)과 같은 이소플라보노이드 성분을 분리, 확인하였으며 본 발명 제비콩추출물은 임상에서 글루타메이트 피루베이트 트랜스아미나아제(GPT), 글루타메이트 옥살로아세테이트 트랜스아미나아제(GOT),락테이트 디하이드로게나아제(LDH)의 활성을 낮추고 코린에스터라아제의 활성을 증가시켜 생리활성을 증가시키는 뛰어난 효과가 있다.상기 실시예를 통하여 설명한 바와 같이 본 발명은 제비콩 종실과 잎으로부터 다이드진(daidzin), 제니스틴(genistin), 다이드제인(daidzein), 제니스테인(genistein), 6'-o-아세틸-제니스틴(6'-o-acetyl-genistin), 6'-o-아세틸-다이드진(6'-o-acetyl-daidzin)과 같은 이소플라보노이드 성분을 분리, 확인하였으며 본 발명 제비콩추출물은 임상에서 글루타메이트 피루베이트 트랜스아미나아제 (GPT), 글루타메이트 옥살로아세테이트 트랜스아미나아제(GOT), 락테이트 디하이드로게나아제(LDH)의 활성을 낮추고 코린에스터라아제의 활성을 증가시켜 생리활성을 증가시키는 뛰어난 효과가 있으므로 생물의약 및 식품산업상 매우 유용한 발명인 것이다.
- 보유기관
- 효성특허법률사무소
- 등록일
- 2007-03-15
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일반기술
생명과학 > 생물 분리정제 (H74)
본 기술은 아르기닌 영양요구성인 브레비박테리움(Brevibacterium)속의 미생물을 이용한 유가식 발효에 의해 오르니틴을 제조하는 방법에 있어서, 아르기닌을 요구량 이상 첨가한 성장 배지에서 상기 미생물을 배양하여 오르니틴의 생산을 유도한 후, 아르기닌과 인산염 농도를 상기 균주의 아르기닌 영양요구성의 상실을 억제시키는 범위내로 조절되도록 생산용 배지를 공급하며 더욱 배양하는 단계를 포함하는, 생산성이 향상된 오르니틴의 제조 방법에 관한 것으로, 본 발명의 방법에 따르면 65시간의 발효에서 70g/l 이상의 오르니틴을 얻을 수 있다
- 보유기관
- 한국생명공학연구원
- 등록일
- 2008-02-25
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