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생명과학 > 기타 생명과학
* 구성 및 원리 본 기술은 식물바이러스병 방제 효과를 갖는 슈도모나스 플루오레센스 Gpf01에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 국내에서만 존재하는 오이 모자이크 바이러스(CMV), 담배 모자이크 바이러스(TMV) 등의 다양한 식물바이러스병을 효율적으로 방제하는 신규 슈도모나스 플루오레센스( Pseudomonas fluorescens) Gpf01[KCCM10642P] 균주, 이 균주의 배양액, 이배양액 추출물, 이 추출물의 제조방법 및 이 추출물을 유효성분으로 함유하는 식물바이러스병 방제제에 관한 것이다. 제조순서는 다음과 같다. 1) 슈도모나스 플루오레센스 Gpf01[KCCM10642P]를 밀러 힌톤(Muller Hinton) 배지에서 25 ~ 30 ℃에서 12 ~ 48 시간 배양하여 균체와 배양여액을 얻는다. 2) 배양여액을 95 ~ 100 ℃에서 10 ~ 30 분간 열처리하고, 증류수로 추출한다. 3) 추출물을 한외여과법으로 여과하여 분자량이 3,000 ~ 10,000 사이의 물질을 분리하고, 분리된 물질을 겔 여과 크로마토그래피로 분획하여 항바이러스 물질을 포함하는 배양액 추출물을 얻는다. * 기술적 배경 국외의 경우, 미생물을 식물체에 직접 처리하여 바이러스병을 방제하고자 하는 연구가 진행되고 있으나, 미생물 추출물을 이용하여 바이러스병을 방제하고자 하는 연구는 매우 미약한 수준이다. 국내의 경우, 미생물을 직접 식물체에 처리하여 바이러스병을 방제하고자 하는 연구가 최근 시도되고 있으나, 본 발명처럼 국내 토착 슈도모나스(Pseudomonas) 균의 배양액 추출물을 이용하여 바이러스병을 방제하고자하는 연구는 전무한 실정이다.* 독창성 및 우수성 본 기술을 활용하여 담배 모자이크 바이러스(TMV)에 감염된 식물에 정식후 10일부터 경엽 처리(분무)하여 방제 효과를 확인한 결과, 식물바이러스병 방제율이 90% 이상 나타난 점에 비추어 볼때 기술적 우수성이 매우 높은 것으로 판단된다.* 적용제품 및 관련시장 본 기술의 식물바이러스 방제를 위하여 본 국내 토착 슈도모나스 플루오레센스 Gpf01[KCCM10642P] 균주 또는 배양액 추출물은 미생물농약, 생화학농약, 친환경농자재 등의 다양한 형태로 산업화가 가능하게 되었다. 그러므로 각종 농약 및 농자재 제품으로 적용가능할 것이다. * 특징 및 장점 본 기술은 다음과 같은 특징 및 장점이 있다. 첫째, 오이 모자이크 바이러스(CMV), 담배 모자이크 바이러스(TMV)등의 다양한 식물바이러스병을 매우 효율적으로 방제할 수 있음이 증명되었다. 둘째, 본 균주 배양액의 추출물은 열에 매우 안정하며 항식물바이러스 활성 물질은 분자량 3,000 ~ 10,000의 저분자량 화합물로 식물에 전신유도저항성(SAR)을 유도하여 식물바이러스병을 방제한다. 셋째, 식물바이러스제는 인체와 환경에 독성이 없는 환경친화적 특징을 지니고 있다.
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- 강원대학교
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- 2006-05-18
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생명과학 > 기타 생물학
바실러스 속 균주 유래의 폴리 감마 글루탐산합성유전자를 이용한 펩타이드 항생물질 Ｐ5와Ａｎａｌ3의 표면 발현 방법 및 그의 용도 (Surface - expression method for peptides P5 and Anal3using pgs A) 본 발명은 미생물 표면에 외래 단백질을 효율적으로 발현시킬 수 있는 표면 발현 모체로서 바실러스 속 균주에서 유래한 폴리 감마 글루탐산 합성에 관여하는 세포외막 단백질의 유전자(pgsBCA)를 이용하여 항균, 항진균, 항암활성을 나타내는 양친화성구조의 펩타이드 항생물질 P5와 Anal3를 세포표면에 발현시킨 미생물, 그들의 제조방법 및 그의 용도를 제공함에 관한 것이다.폴리감마글루탐산 합성효소 복합체를 코딩하는 유전자 PGSB, PGSC 및 PGSA 중 어느 하나 또는 둘 이상과, 항균, 항진균 또는 항암활성을 갖는 양친화성의 펩타이드 항생물질인 펩타이드 P5 또는 펩타이드 ANAL3을 코딩하는 유전자를 포함하는 항생물질 표면발현용 벡터에 있어서, 상기 펩타이드 P5를 코딩하는 유전자는 서열번호 4와 서열번호 5의 프라이머를 이용하여 PCR로 증폭한 DNA 서열이고, 상기 펩타이드 ANAL3를 코딩하는 유전자는 서열번호 6과 서열번호 7의 프라이머를 이용하여 PCR로 증폭한 DNA 서열인 것을 특징으로 하는 항생물질 표면발현용 벡터.
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- 조선대학교
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- 2006-05-24
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생명과학 > 기타 생명과학
본 발명은 새로운 형태의 β-glucan 으로, 보다 특별하게는 β-glucan을 아민 유도체로 변형시켜 기존의 β-glucan 보다 생리활성이 우수한 β-glucan을 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에서 제조된 새로운 형태의 β-glucan은 Amination(-NH2)으로 변형되어 양(+)으로 하전된 다당체로 다양한 응용성을 부여 할 수 있는 성질을 가진 것으로 건중량에 대한 담즙산 결합능이 기존의 β-glucan 보다 5배 이상으로 상승된 값을 보였으며 또한 positive control인 cholestyramin을 100%로 하여 계산된 결합능(%)도 유도체화 전 시료에 비해 9배 이상 향상되었다. 항균실험을 한 결과 β-glucan에서는 항균력이 없었으나 그람 양성균(Gram positive)에 해당하는 B. subtilis에 대하여 β-glucan 아민 유도체에서는 살균력을 보였으며 그람 음성균(Gram negative)인 E.coli에 대해서는 그람 양성균에 비하여 낮은 항균 효과를 보였다. 또한 β-glucan은 ACE 저해활성이 나타나지 않았으나 β-glucan 아민 유도체는 저해 활성을 나타냈으며 NO 생성능의 시료농도별로 측정한 결과 대식세포 활성화 능력을 보였다.본 발명의 아미노화 β-글루칸은 생리활성을 확인한 결과 담즙산 결합능이 상승되었으며, 콜레스틸아민(cholestyramin)에 대한 결합능도 상승된 효과가 있다. 아미노화 되지 않은 β-글루칸에서는 항균력이 없었으나 본 발명의 아미노화 β-글루칸은 항균력이 생성되었으며, 특히 그람 음성균에 대한 항균활성이 우수하였다. 또한, 아미노화 되지 않은 β-글루칸은 ACE 저해활성이 나타나지 않았으나 본 발명의 아미노화 β-글루칸은 유의적인 효과를 보여, 고혈압에 대한 억제 효과를 기대할 수 있으며, 대식세포 활성화능의 지표로서 폐포세포에서 산화질소(NO) 생성능을 측정시 아미노화 β-글루칸에서 월등하게 NO 생성능이 증가됨을 확인하여 면역증강제로서의 가능성을 확인하였다.
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- 한양대학교
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- 2006-05-18
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생명과학 > 기타 생명과학
기존의 생체 계측기 센서는 대부분 이 금속재료로서 전도성은 좋은 반면 환자의 움직임에 따라 탈착이 쉬운 단점이 있었다. 계측 장비의 센서재료 고분자 하이드로겔은 유연성과 점착력이 좋아서 환자의 움직임에도 쉽게 떨어지지 않으며 추가적으로 하이드로겔에 약물을 함유시켜 지속적으로 방출시킴으로서 치료 방법 즉, 약물전달시스템으로도 쓰일 수 있다. 하지만 금속보다 전도성이 미약하기 때문에 전도성을 향상시키는 것이 필요하다. 본 발명은 PVA(poly vinyl alcohol)과 PNIPAAm(poly N-isopropylacrylamide) IPN (interpenetrating polymer network) hydrogel의 높은 팽윤성질과 전기 자극에 대한 굽힘(벤딩) 성질 및 전기자극에 대한 가역적인 반응을 나타내는 것을 이용하여 점착력이 좋고 이온전도도가 좋은 센서로의 응용 및 기타 다른 응용으로서 인공장기 요소 즉, 스위치, 약물전달시스템에 이용할 수 있는 IPN hydrogel을 제조함으로서 기존 생체 계측 센서의 단점을 보완하고 보다 안정적이고 편리한 센서재료를 제공할 수 있다.PVA와 PNIPAAm의 IPN 하이드로겔을 순차적으로 합성하였으며 이것은 많은 팽윤현상을 보이며 보다 낮은 전기적 자극에 더 빠른 부피변화를 보인다. 또한 이온의 전도도가 높아서 여러 분야로 응용될 수 있다. 새로운 제조방법을 통하여 합성한 IPN 하이드로겔은 높은 값의 팽윤도를 나타내며 전기장을 인가하면 빠른 굽힘(bending)을 보이고 이온의 전도도가 크기 때문에 본 발명의 PVA/ PNIPAAm IPN 하이드로겔은 인공장기요소 즉, 센서, 스위치, 약물전달계에 사용할 수 있으며 생명 공학 분야에서 매우 유용한 효과가 있다.
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- 한양대학교
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- 2006-05-18
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일반기술
생명과학 > 기타 생명과학
본 발명은 산업 부산물을 이용한 경제적인 투수 반응 벽체(PRB)의 매질을 개발하기 위해 제강 슬래그, 시멘트 페이스트, 및 Fe(Ⅱ)를 조합시킨 매질 시스템으로 이뤄지는 투수성 반응 벽체 및 그를 이용한 염소계 유기 오염물 제거 방법을 제공한다. 본 발명에 따른 매질 시스템은 염소계 유기 오염물, 그 중에서도 특히 TCE를 제거함에 있어 PRB의 매질로 주로 이용되는 영가철보다 월등히 우수하다. 매질 시스템은 고체/액체 비가 0.1이고 Fe(Ⅱ)가 100mM일 때에 70% 슬래그/30% 시멘트 페이스트로 이뤄지는 것이 반감기 6.1 시간으로 0.25mM의 TCE를 제거하는데 있어 최적의 조합이다. 제거 비율은 Fe(Ⅱ)의 주입량이 늘어날수록 선형적으로 증가된다. 칼럼 시험을 통해, 본 발명에 따른 매질 시스템에서는 제강 슬래그와 시멘트 페이스트로 이뤄진 반응 매질에 Fe(Ⅱ)가 함께 용해된 TCE를 주입하는 형식으로 Fe(Ⅱ)를 연속적으로 주입하는 것이 적합한 것으로 판명되었다. 본 발명에 따라 개발된 매질은 TCE 제거를 위한 투수 반응 벽체의 매질로 활용 가능할 뿐만 아니라, 영가철에 비해 시멘트 매트릭스 내로 중금속을 고정화시킬 수 있는 추가의 장점까지 갖는다.본 발명에 따른 제강 슬래그/시멘트 페이스트/Fe(Ⅱ) 반응 매질 시스템은 종래에 PRB의 반응 매질로 널리 사용되었던 Fe(0)에 비해 월등한 염소계 유기 오염물에 대한 분해능을 나타내고, TCE를 흡착이나 휘발에 의해서 제거하는 것이 아니라 환원성 제거의 반응 경로에 의해 분해시켜서 환원성 탈염소화시킨다. 특히, 환원성 제거의 반응 경로에 의해 생성되는 아세틸렌, 에틸렌, 에탄 등의 분해 부산물은 환경에 무해한 것으로, 본 발명에 따른 제강 슬래그/시멘트 페이스트/Fe(Ⅱ)의 반응 매질 시스템을 PRB의 반응 매질로서 적용함에 있어 매우 유리하다. 또한, 본 발명에 따른 제강 슬래그/시멘트 페이스트/Fe(Ⅱ) 반응 매질 시스템은 중성 pH에서도 우수한 반응성을 나타내는 바, 특히 그것은 실제로 현장에서 PRB에 적용할 경우에 토양과 비슷한 pH를 보이면서 주위 환경에 해를 미치지 않는 환경적으로 우수한 정화 방법을 구현할 수 있게 해준다. 뿐만 아니라, Fe(0)에 비해 저 농도의 Fe(Ⅱ)를 주입하더라도 우월한 반응 속도를 보여 경제적으로도 유리하다. Fe(Ⅱ)를 TCE와 함께 연속적으로 주입할 경우에는 환원력을 원상대로 유지시키도록 Fe(Ⅱ)를 지속적으로 주입함으로써 TCE 제거의 월등한 지속력과 반응성을 보이게 된다. 칼럼 시험 결과 슬래그/시멘트 페이스트/Fe(Ⅱ) 시스템은 평균 지하수 내의 TCE 농도의 약 30배에 가까운 TCE를 효과적으로 제거함으로써 실제로 지중 PRB에 설치될 경우에 시험 기간보다 훨씬 오랜 기간 동안 효과적으로 TCE를 분해할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 반응 매질로 이용되는 제강 슬래그, 시멘트 페이스트 및 Fe(Ⅱ)는 산업 부산물로 얻어지는 것이므로, 기존의 매질인 Fe(0)에 비해 자원 재활용 측면과 경제적인 측면에서도 큰 장점을 갖고 있어 슬래그/시멘트 페이스트/Fe(Ⅱ) 시스템을 경제적이면서도 효과적인 PRB 반응 매질로 적용할 수 있다. 덧붙여, 본 발명에 따른 반응 매질 시스템은 고형화/안정화의 바인더인 시멘트를 사용함으로써 중금속까지도 시멘트 매트릭스 내에 고정시켜 제거할 수 있다.
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- 한양대학교
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- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 기타 세포·조직공학
○ 기술발명의 목적: 글루코스 옥시데이즈를 최대로 생산하기 위한 재조합 벡터 방법○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 재조합 벡터와 재조합 균주를 이용한 글루코스 옥시데이즈의 대량 생산을 위한 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 pGAL1 프로모터, Aspergillus niger의 글루코스 옥시데이즈 유전자 및 GAL7 터미네이터를 포함하는 재조합벡터, 상기 재조합벡터로 형질전환된 효모 및 상기의 재조합 효모를 이용하여, 배지에 포도당, 콘 스팁 리쿼, 에탄올의 농도를 적절히 첨가하여 글루코스 옥시데이즈를 대량으로 생산하는 방법에 관한 발명이다.○ 색인어: 글루코스 옥시데이즈, 재조합 벡터, 재조합 효모, 대량 생산방법본 발명은 프로모터, 글루코스 옥시데이즈 및 터미네이터로 구성된 재조합벡터를 제공한다. 본 발명의 프로모터는 pGAL1, pGAL10, pGPD 중에서 선택된 프로모터가 바람직하다. 더욱 바람직하게는 본 발명의 프로모터는 pGAL1 프로모터가 적당하다. 본 발명의 글루코스 옥시데이즈는Aspergillus niger에서 유래된 것이 적당하다. 본 발명의 터미네이터는 GAL7 터미네이터 또는 글루코스 옥시데이즈 터미네이터가 적당하다.본 발명은 상기의 재조합벡터로 형질전환되고 UV로 돌연변이된 재조합 숙주세포를 제공한다. 본 발명의 재조합 숙주세포는 S. cerevisiaeAGG021가 적당하다.본 발명의 재조합 효모는 YEP(yeast extract peptone)을 기본으로 영양원이 풍부한 배지를 사용하여 외래 유전자 발현을 원활히 하도록 유도하여야 한다. 배양기간동안 재조합 효모는 round or oval-형으로 일정 시간이 경과함에 따라 모세포 혹은 모포자로부터, 출아 방식의 딸세포를 생성하여 개체수를 증가시킴으로 증식을 꾀한다. 야생형 효모는 mating type switch에 의해 단세포로부터 유성포자의 생성이 가능하나, 본 재조합 효모에 사용된 균주은 이의 생성이 억제된 돌연변이형이다.영양원으로는 폭넓은 범위의 탄소원과 질소원을 사용하였다. 또한 S. cerevisiae는 growth factor로 바이오틴을 필요로 하고 칼륨, 마그네슘, 구리, 철, 아연과 같은 미량원소를 필요로 한다. 본 재조합 효모는 특히 포도당과 효모 추출액이 첨가된 배지에서 성장 및 유전자 발현이 활발하다. 세포벽의 경우는 만난으로 구성된 비정형의 외층과 알카리 가용성 β-glucan으로된 중층 그리고 알카리 불용성 β-글루칸으로된 내경층을 포함한다.
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- 전북대학교
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- 2006-05-18
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일반기술
생명과학 > 유전자 재조합 기술
○ 기술발명의 목적: 무라인 GM-CSF를 대량 생산하기 위한 재조합 벡터○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 재조합 싸이토카인을 포함하는 벡터와 그것을 발현하는 재조합 숙주에 관한 발명으로, 더욱 상세하게는 무라인 그래뉼로사이트-매크로파지 콜로니 자극 인자를 포함하는 재조합 벡터와 그것을 발현하는 형질 전환된 재조합 숙주인 Aspergillus niger에 대한 발명으로 본 발명에 의해 특이성이 높은 무라인 그래뉼로사이트-매크로파지 콜로니 자극 인자를 대량으로 얻어서 여러 임상에 적용할 수 있다.○ 색인어: 무라인 GM-CSF, 재조합 벡터, 재조합 아스포질러스 나이거본 발명은 글리셀알데히드 3-인산 탈수소효소(GPD)의 프로모터와 터미네이터를 갖는 무라인 GM-CSF를 갖는 재조합 벡터를 제공한다.본 발명의 재조합 벡터는 pANGM-CSF 프라즈미드가 적당하다. 또한 본 발명은 상기 재조합 벡터를 발현하는 재조합 숙주세포인 사상성 진균을 제공한다.본 발명의 사상성 진균은 Aspergillus niger가 적당하다.본 발명의 Aspergillus niger는 Aspergillus niger KCTC 0661BP가 적당하다.사상성 진균는 완전세대가 밝혀지지 않은 불완전균에 속하며, 따라서 무성포자만을 형성한다. GM-CSF를 생산하는 재조합 A. niger는 다양한 종류의 배지에서 생장이 가능하나, 균체 생장을 위하여서는 2% malt extract, 2% glucose, 0.1% peptone을 포함하는 CM 배지가 사용되었고, 재조합 단백질 GM-CSF의 생산을 위하여서는 A. niger고유의 단백질 분해효소 생산능력을 억제시키기 위하여, 1% yeast extract, 2% peptone, 2% glucose, 100mM NH4 Cl, 0.6% urea를 포함하는 배지가 사용되었다.생육조건으로는 다양한 pH와 온도에서 생육이 가능하나 pH 5.0-6.0 와, 30℃-37℃에서 생장이 재조합 단백질 발현의 최적조건이었다.본 발명에서 특별한 언급이 없으면, 본 발명에 사용된 모든 화학물질, 배지 및 효소는 각각 Sigma Chemical CO.(St.Louis, MO), Difco Laboratories(Detroit,MI) 또는 Boehringer Mannheim(Mannheim, Germany)에서 구입하여 사용한다.
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- 전북대학교
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- 2006-05-18
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일반기술
생명과학 > 기타 생명과학
○ 기술발명의 목적: 식물 세포 내로 인산을 흡수하는 능력을 보유하고 있는 단백질인 인산수송자를 암호화하는 담배 인산수송자 유전자의 염기서열 및 그로인한 아미노산 서열 제공○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 작물의 인산 흡수 및 이용 효율 개량을 가능하게 하는 담배 (Nicotiana tabacum L)의 인산수송자 유전자의 염기서열 및 아미노산 특성에 관한 것으로, 담배 인산수송자 유전자 (phosphate transporter)를 분리하여 효모용 유전자 발현 운반체인 p520에 삽입시켜 발현 재조합체인 pYNtPT1-1을 구축하고, 이 재조합 벡터 pYNtPT1-1을 인산수송자 유전자가 결여된 효모 돌연변이체인 NS219 세포에 도입하여 형질전환시킴으로써, 담배 인산수송자 유전자 및 그로부터 연역되는 아미노산 서열을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.○ 색인어: 담배의 인산수송자 유전자, NtPT1-1, pYNtPT1-1, NS219, p520본 발명의 상기 목적은 감자 인산수송자 유전자의 RT-PCR법을 수행하기 위한 프라이머를 제작하여 감자의 mRNA를 PCR증폭하여 감자 cDNA를 제조하고 이 cDNA를 방사능 표지하여 담배 인산수송자 유전자 NtPT1-1를 분리한 후, 이 유전자를 유전자 운반체 pGEM-Easy에 서브클로닝하여 상기 유전자 NtPT1-1의 염기서열과 아미노산 서열 특성 및 단백질 분자구조를 분석하고, NtPT1-1을 효모용 유전자 운반체 p520 에 삽입시켜 구축한 재조합 벡터 pYNtPT1-1을 인산수송자 유전자가 결핍된 NS219 형질돌연변이체에 도입하여 형질 전환된 형질전환효모균주를 diazocoupling법으로 염색하고 저인산 배지 상에서의 생장율을 측정함으로써 달성되었다.이하, 본 발명의 구성을 설명한다.본 발명은 담배 인산수송자 유전자를 분리해 내기 위한 탐침으로 이용할 감 자 인산수송자 유전자의 RT-PCR법을 수행하기 위해 프라이머를 제작한 후 감자의 mRNA를 PCR 증폭하여 감자 cDNA를 준비하는 단계 ; 상기 감자의 cDNA를 방사능 표지하여 담배품종 '버리21' 의 인산수송자 유전자 cDNA인 Ntpt1-1를 분리하는 단계 ; 상기 분리한 Ntpt1-1를 유전자 운반체 pGEMT-Easy 벡터에 서브클로닝하는 단계 ; 상기 분리한 담배의 인산수송자 유전자 Ntpt1-1의 염기서열과 그로부터 연역된 아미노산의 서열 특성을 분석하는 단계 ; 상기 담배 인산수송자 유전자 NtPT1-1를 효모용 유전자 발현 운반체인 p520에 삽입시켜 재조합 벡터 pYNtPT1-1을 구축하는 단계 ; 상기 재조합 벡터 pYNtPT1-1와 순수 p520을 인산수송자 유전자 결여 효모돌연변이계통인 NS219에 도입하여 형질전환시키는 단계 ; NS219 형질전환체가 생산하는 인산 수송 기능과 세포 생장율을 알아보기 위하여 재조합 벡터 pYNtPT1-1와 순수 p520을 인산수송자 유전자 결여 효모돌연변이계통인 NS219에 도입하여 형질전환시킨 두 균주를 Diazo-coupling 반응용액으로 염색하고, 흡광도를 측정하여 생장률을 측정하는 단계로 구성된다.
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- 전북대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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생명과학 > 기타 단백질·탄수화물·지(방)질공학
○ 기술발명의 목적: 철을 축적하는 패리틴 단백질을 발현하는 효모○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 올챙이의 패리틴 단백질을 이루는 중쇄부분의 유전자를 패릭 사이트레이트(ferric citrate)상의 효모에서 발현시킴으로써 철을 포함하는 재조합 패리틴 단백질을 대량으로 함유하는 재조합 효모를 제공한다. 본 발명의 재조합 효모는 식용으로 사용할 수 있어 철 결핍 예방 및 치료의 목적으로 사용할 수 있다.○ 색인어: 철, 패리틴, 효모, 사카로마이세스 세레비시아본 발명의 효모에 형질전환하는 패리틴 유전자는 올챙이의 패리틴 유전자가 바람직하고, 올챙이 패리틴 유전자의 중쇄유전자가 가장 바람직하다. 상기 중쇄유전자는 다른 서브그룹(Light chain)에 비해 철의 저장 및 유리속도가 빠르다.본 발명의 효모는 사카로마이세스 세레비시아가 바람직하다. 상기 사카로마이세스 세레비시아는 이종의 단백질을 발현하기에 가장 적합한 숙주로 통상적으로 이용되고 있다. 본 발명에서는 올챙이 패리틴 유전자의 중쇄유전자 TFH를 도 1에 도시한 바 와 같이 pMYI15 벡터에서 클로닝하여 pYEAG-TER 벡터에 삽입하여 pYETFAG-1 벡터를 제조하였다. 본 발명의 pYETFAG-1벡터는 총 7.26 Kb로 프로모터는 ADH2-GPD 혼성체이고 효모에 벡터를 형질전환하였을 때 형질전환체를 선별할 수 있는 마크인 유라실 유전자가 있다. 따라서 형질전환체는 유라실이 결핍된 배지에서 배양할 수 있으나 비형질전환체는 유라실이 결핍된 배지에서는 배양되지 않는다.본 발명의 재조합 패리틴은 24 kDa의 단백질로 자연 패리틴이 20.4 kDa인 것에 비해 분자량이 큰 것으로 확인되었다. 이는 효모내에서 패리틴 유전자가 단백질로 번역되는 과정에서 일어난 번역 후 변조과정에 의한 것으로 여겨진다. 하지만 본 발명의 재조합 패리틴은 프루센 블루 염색을 통하여 재조합 패리틴이 완전단백질로 집합체를 형성함을 확인하였고, 그로 인하여 상기 재조합 패리틴으로 이루어진 집합체가 철을 함유할 수 있음을 알 수 있었다.또한 본 발명은 상기의 pYETFAG-1 재조합 벡터로 형질전환된 생물인 사카로마이세스 세레비시아 KCTC 0853BP를 제공한다. 재조합 효모(KCTC 0853BP)는 건조무게 당 철을 500 ug 포함하는 것으로 나타나 자연의 효모가 건조무게 당 210 ug를 가지는 것에 비해 두 배 이상의 철을 포함함을 할 수 있었다.본 발명의 재조합 효모는 상기 재조합 효모에서 발현되는 재조합 패리틴에 의해 철을 다량 함유하게 되고 이는 자연효모의 액포에 포함되는 철원자 에 비해 월등히 높은 수치이다. 또한 액포내에 단순히 포함된 철은 생리적으로 이용할 수 없는데 반해 재조합 패리틴으로 이루어진 집합체 내의 철은 유용성을 가지며 독성을 지니지 않기 때문에 생리적으로 유용할 수 있 는 철 성분은 자연효모에 비해 월등히 높다.본 발명의 재조합 효모는 동물에게 사용하여 빈혈 예방 및 치료용으로 제공할 수 있다.
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- 전북대학교
- 등록일
- 2006-05-18
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생명과학 > 기타 세포·조직공학
○ 기술발명의 목적: 신규 안트라사이클린 유도체 및 그의 제조방법○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 신규한 안트라사이클린 유도체에 관한 것이로서, 상기 유도체는 다양한 종양에 대하여 강력한 항종양 활성을 나타낼 뿐만 아니라 심장독성도 크게 감소되어 있다. 또한, 본 발명은 상기 화합물의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 생체내 NAD/NADH 비율의 균형을 보완하여 산소 라디칼-생성 효소의 활성을 조절하게 된다. 본 발명의 화합물은 종래의 안트라사이클린 글리코시드의 14번 위치에 에스테르 결합으로 L-아스파르테이트 또는 피루베이트를 결합시켜 제조된다. 상기한 활성 및 약제학적 안정성 때문에, 본 발명의 화합물은 항종양제로서 약제학적 유효성분으로 이용될 수 있다.○ 색인어: 안트라사이클린, 아스파르테이트, 피루베이트, 항암제본 발명은 강력한 항암 활성을 갖으며 독성이 크게 감소된, 특히 다우노마이신, 아드리아마이신, 카르미노마이신 및 이다루비신과 같은 종래의 안트라사이클린 글리코시드 항암제보다 심장독성 이 크게 감소된 신규 안트라사이클린 글리코시드를 제공하는 데 있다. 또한, 화학식 1의 신규 안트라사이클린 글리코시드 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염을 제조하는 방법을 제공하는 데 있다.본 발명의 화학식 1의 화합물은 하기 화학식 2를 갖는 종래의 안트라사이클린 글리코시드 항암 화합물의 14번 위치에 L-아스파르테이트 또는 피루베이트를 에스테르 결합으로 연결시켜 제조된다: 상기 화학식으로 표시되는 공지의 안트라사이클린 글리코시드계 항암 화합물들은 본 발명의 신규 안트라사이클린계 화합물의 제조방법에 관한 첨부한 도면의 반응식에서 출발물질 1a-1f에 해당한다.
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- 전북대학교
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- 2006-05-18
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생명과학 > 기타 세포·조직공학
○ 기술발명의 목적: 결명자 추출물을 포함하는 곰팡이 독소생성 저해용 조성물○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 알리자린, 크리소파닌산, 단손, 푸푸린 및 퀴니자린으로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택된 화합물을 포함하는 곰팡이 독소생성 저해용 조성물을 제공한다. 본 발명의 결명자 추출물 및 결명자에서 분리한 화합물은 항아플라톡신 활성 및 항오크라톡신 활성을 갖는 특징이 있다.○ 색인어: 결명자, 아플라톡신, 오크라톡신결명자는 탄소수 1내지 5의 알콜 또는 유기용매로 추출하여 추출물로 제조할 수 있다. 바람직하기로는 헥산, 메탄올, 에탄올, 아세톤, 에칠아세테이트, 염화메틸렌, 부탄올, 클로로포름 및 증류수로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택된 용매로 추출하는 것이 좋다. 상기 곰팡이 독소는 마이코톡신으로, 곰팡이의 2차 대사산물로서 동물의 생체에 장애를 유발하는 독성물질이다. 예로는 아플라톡신, 오크라톡신, 보미톡신, 맥각, 후모니신, 젤랄레논 등이 있다.본 발명의 결명자 추출물은 마이코톡신의 생성을 저해한다. 특히, 결명자 메탄올 조추출물, 결명자 헥산 추출물, 결명자 클로로포름 추출물은 아플라톡신 및 오크라톡신의 생성을 저해하는 효과가 우수하였다.본 발명의 곰팡이 독소생성 저해용 조성물은 상기 결명자 추출물을 1 ㎍/㎖에서 5 ㎎/㎖로 포함하고, 그 밖의 부형제를 더욱 포함할 수 있다.상기 조성물은 동물, 가축이 섭취하는 식물에 서식하는 곰팡이의 독소생성을 저해하기 위하여 사용하며, 식물의 파종, 재배, 수확, 저장, 가공 및 유통기간 중에 적용하여 곰팡이의 독소생성을 저해시킨다. 적용방법은 도포처리, 침지처리, 훈증처리 등의 방법이 바람직하고, 적용용량은 통상적인 살충제를 적용시키는 용량으로 사용할 수 있다. 상기 조성물의 제형은 액제, 유제, 훈연제, 훈증제, 도포제, 입제 등이 좋다.또한 더욱 포함되는 부형제는 조성물의 용도 및 적용방법에 따라 적절한 물질을 사용하는 것이 바람직하며, 동물에해가 없는 모든 종류의 물질이 바람직하다.또한 본 발명은 화학식 1의 알리자린(Alizarin, 1,2- Dihydroxyanthraquinine), 화학식 2의 단손(Danthron, 1,8-Dihydroxyanthraquinine), 화학식 3의 크리소파닌산(Chrysophanic acid, 1,8-Dihydroxy-3-methylanthraquinone), 화학식 4의 푸푸린(Purpurin, 1,2,4-Trihydroxyanthraquinone), 및 화학식 5의 퀴니자린(Quinizarin, 1,4-Dihydroxy-anthraquinone)를 제공한다.본 발명의 곰팡이 독소생성 저해용 조성물은 알리자린, 단손, 크리소파닌산, 푸푸린 및 퀴니자린으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 포함할 수 있다.
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- 전북대학교
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- 2006-05-18
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생명과학 > 생화학
○ 기술발명의 목적: 살비성 화합물 및 해충 표시자○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 1,4-벤조퀴논(1,4-Benzoquinone), 4-디하이드록시나프탈렌(1,4-Dihydroxynaphthalene), 8-하이드록시퀴날딘(8-Hydroxyquinaldine), 알파-나프토퀴놀린(α-Naphthoquinoline), 알파-나프토퀴논(α-Naphthoquinone), 퀴날딘(Quinaldine), 퀴나졸린(Quinazoline), 퀴놀린(Quinolin), 퀴놀린-4-카복시알데하이드(Quinoline-4-carboxaldehyde), 8-퀴놀리놀(8-Quinolinol) 및 퀴녹살린(Quinoxaline)로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 살비성 화합물을 제공한다. 본 발명의 살비성 화합물은 진드기에 대하여 강한 살비능을 나타내며, 특히 1,4-벤조퀴논과 1,4-디하이드록시나프탈렌은 해충을 검은색(또는 검은 갈색)으로 변색시켜 눈으로 식별할 수 있는 표시자로서 사용할 수 있다.○ 색인어: 진드기, 살비효과, 1,4-벤조퀴논, 1,4-디하이드록시나프탈렌, 8-하이드록시퀴날딘, 알파-나프토퀴놀린, 알파-나프토퀴논, 퀴날딘, 퀴나졸린, 퀴놀린, 퀴놀린-4-카복시알데하이드, 8-퀴놀리놀, 퀴녹살린, 표시자본 발명은 1,4-벤조퀴논(1,4-Benzoquinone), 4-디하이드록시나프탈렌(1,4-Dihydroxynaphthalene), 8-하이드록시퀴날딘(8-Hydroxyquinaldine), 알파-나프토퀴놀린(α-Naphthoquinoline), 알파-나프토퀴논(α-Naphthoquinone), 퀴날딘(Quinaldine), 퀴나졸린(Quinazoline), 퀴놀린(Quinolin), 퀴놀린-4-카복시알데하이드(Quinoline-4-carboxaldehyde), 8-퀴놀리놀(8-Quinolinol) 및 퀴녹살린(Quinoxaline)로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 살비성 화합물을 제공한다.또한 본 발명은 1,4-벤조퀴논, 4-디하이드록시나프탈렌, 8-하이드록시퀴날딘, 알파-나프토퀴놀린, 알파-나프토퀴논, 퀴날딘, 퀴나졸린, 퀴놀린, 퀴놀린-4- 카복시알데하이드, 8-퀴놀리놀 및 퀴녹살린으로 이루어진 군으로부터 1종이상 선택된 화합물을 포함하는 살비제를 제공한다.또한 본 발명은 1,4-벤조퀴논 또는 1,4-디하이드록시나프탈렌을 포함하는 해충 표시용 화합물을 제공한다.또한 본 발명은 상기의 해충 표시용 화합물을 진드기에 적용하여 진드기의 색변화를 유도하는 것을 포함하는 해충 표지법을 제공한다.또한 본 발명은 상기의 해충 표시용 화합물을 포함하는 살비제를 제공한다.본 발명자들은 기존의 화합물 중 진드기에 대하여 살비성을 나타내는 화합물을 스크리닝하였고, 살비성을 가지는 화합물을 확인하였다.본 발명의 살비성 화합물은 화학식 1의 1,4-벤조퀴논(1,4-Benzoquinone), 화학식 2의 4-디하이드록시나프탈렌(1,4-Dihydroxynaphthalene), 화학식 3의 8-하이드록시퀴날딘(8-Hydroxyquinaldine), 화학식 4의 알파-나프토퀴놀린(α-Naphthoquinoline), 화학식 5의 알파-나프토퀴논(α-Naphthoquinone), 화학식 6의 퀴날딘(Quinaldine), 화학식 7의 퀴나졸린(Quinazoline), 화학식 8의 퀴놀린(Quinolin), 화학식 9의 퀴놀린-4-카복시알데하이드(Quinoline-4-carboxaldehyde), 화학식 10의 8-퀴놀리놀(8-Quinolinol) 및 화학식 11의 퀴녹살린(Quinoxaline)이다.
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- 전북대학교
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- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 기타 유전자 공학
본 발명은 신경특이적 발현을 조절하는 제브라피쉬(zebrafish)의 HuC 프로모터 유전자, 이를 이용하여 형광단백질 유전자를 신경특이적으로 발현하는 형질전환동물 및 그의 제조방법, 그리고 상기 형질전환동물을 이용한 신경 돌연변이체의 선별방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 신경세포에서 특이적으로 발현하는 HuC 유전자의 프로모터 부위를 분리·동정하여 이의 염기서열 및 조절인자들을 분석함으로써 상기 HuC 프로모터가 신경세포의 분화를 조절하는 기작을 확인하고, 이를 이용하여 형광 단백질인 GFP(green fluorescence protein) 유전자가 신경특이적 발현되어 살아있는 상태에서 신경계 전체를 가시적으로 확인할 수 있는 형질전환 제브라피쉬를 제조하고 상기 형질전환 제브라피쉬를 이용하여 신경계에 유전자변이가 유발된 신경 돌연변이체를 단시간내에 가시적으로 선별하는 방법에 관한 것이다.본 발명은 신경세포에서 특이적으로 발현하는 HuC 프로모터가 신경세포의 분화를 조절하는 기작을 확인하고, 이를 이용하여 GFP 의 발현이 신경계에 특이적으로 일어나는 형질전환 제브라피쉬를 제공한다. HuC프로코터는 신경계의 분화를 조절하는 기작을 연구하는데 이용된다 Huc 프로모터는 신경계의 분화를 조절하는 기작을 연구하는데 유용하게 이용될 수 있으며, 상기 HuC 프로모터 및 이를 이용한 신경특이적 GFP 발현 형질전환 제브라피쉬는 상세한 신경세포의 구성과 형성과정 및 신경세포와 신경조직의 분포확인을 가능케 할 뿐 아니라 신경 돌연변이체를 다양한 제브라피쉬 돌연변이체 집합들로부터 살아있는 상태에서 손쉽게 선별, 분석하는데 이용될 수 있다.
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- 경북대학교
- 등록일
- 2006-05-18
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일반기술
생명과학 > 단백질개량 기술
○ 기술발명의 목적: 효모 발현 시스템을 이용한 인터루킨-18 단백질의 생산방법○ 기술 요약 및 특징: (a) GPD 프로모터(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase; GenBank accession number M13807) 또는 AG 프로모터(GenBank accession number J01314), (b) 세포외 분비신호서열, (c) 사이토카인 유전자 및 (d) 전사종결신호 서열을 포함하는 벡터, 이를 포함하는 형질전환주 및 재조합 인터루킨-18 단백질을 제공한다. 본 발명의 재조합 인터루킨-18 단백질은 바이러스 및 세균감염에 대한 면역증가용 조성물, 항암조성물로 사용할 수 있을 뿐만 아니라 인터루킨-18 항체제조를 위한 항원으로 사용할 수 있다.○ 색인어: 효모, 사이토카인, 인터루킨-18본 발명은 (a) GPD 프로모터(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase; GenBank accession number M13807) 또는 AG 프로모터(GenBank accession number J01314), (b) 세포외 분비신호서열, (c) 사이토카인 유전자 및 (d) 전사종결신호 서열을 포함하는 벡터를 제공한다.또한 본 발명은 상기의 벡터를 포함하는 형질전환주를 제공한다.또한 본 발명은 상기의 형질전환주에서 발현된 재조합 단백질을 제공한다.또한 본 발명은 (a) 이종유전자를 GPD 프로모터(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase; GenBank accession number M13807) 또는 AG 프로모터(GenBank accession number J01314), 세포외 분비신호서열 및 전사종결 신호를 포함하는 벡터에 도입하여 재조합 벡터를 제조하고, (b) 상기 재조합 벡터를 효모에 형질전환하고 및 (c) 형질 전환된 효모를 배지에서 배양하여 이종단백질을 생산하는 것을 포함하는 효모발현시스템을 제공한다.사이토카인을 최적으로 발현시킬 수 있는 시스템을 연구하여, 효모시스템을 확립하였다. 본 발명의 효모시스템은 외부 단백질을 쉽게 세포외로 다량 발현시킬 뿐만 아니라 신체 안전성이 공인되어 있어 발현된 재조합 단백질을 안전한 시료로 사용할 수 있다. 또한 생산된 재조합 단백질은 기존의 미생물에서 발현된 재조합 단백질에 비하여 월등한 생물학적 활성을 가진다.효모시스템에서 외부 단백질을 효과적으로 발현시킬 수 있는 벡터는 프로모터, 세포외분비신호 서열, 사이토카인 유전자 및 전사종결신호서열을 포함한다. 상기 프로모터, 세포외 분비신호서열, 전사종결신호서열은 효모에서 기능을 가지는 통상의 서열을 사용할 수 있다. 바람직한 프로모터는 GPD 프로모터(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase promoter, GenBank accession number M13807) 및 AG 프로모터(하이브리드 프로모터: upstream activating sequence (UAS) of ADH2 (alcohol dehydrogenase 2 + GPD, GenBank accession number J01314)이고, 세포외분비신호는 아밀레이즈 1A 서열(amylase 1A ; 이하 Ramy1A 라 함, GenBank accession number X16509)이다. 바람직한 전사종결신호서열은 GAL7 (galactose-1-P uridyl transferase, GenBank accession number M12348)이다.
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- 전북대학교
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 유전자 발현·조절 기술
* 기술 개요본 기술은 특정유전자의 발현을 억제하는 RNAi를 임의적으로 조절함으로써 특정 유전자의 기능을 효과적으로 분석할 수 있는 레트로바이러스 벡터에 관한 것으로, 생쥐 돌연변이체 TBP와 TATA 박스 돌연변이체 U6 프로모터를 이용한 테트라사이클린 유도 시스템에 기반을 두고 있다. * 원리 및 구성특정유전자에 대한 RNAi를 삽입하여 사용할 수 있는 본 기술의 벡터는 단백질의 발현을 원하는 시기에 원하는 기간 동안 억제 할 수 있어 세포내에서 발생이나 분화, 생존 또는 세포주기 조절등에 관여하는 유전자들에 대해서도 효과적으로 그 기능을 살펴 볼 수 있다. 또한 이러한 유전자의 선택적 발현 억제는 사람의 유전자 치료에도 응용될 수 있는 기초 원리를 제공한다.* 특징본 기술은 특정유전자의 발현을 억제하는 siRNA를 임의적으로 조절함으로써 특정 유전자의 기능을 효과적으로 분석할 수 있는 개선된 siRNA 발현 레트로바이러스 벡터에 관한 것으로, 테트라시이클린 존재 하에서 돌연변이체 TBP 단백질이 만들어지고, 이 단백질은 TATA 박스 돌연변이체 U6 프로모터에 결합함으로써 표적 유전자의 RNAi를 만든다.* 적용특징 - 일시적 뿐만 아니라 지속적인 siRNA 유도 발현 벡터 시스템으로서 발생이나 분화, 생존 또는 세포주기 조절 등에 관여하는 표적 유전자들의 발현을 원하는 시기에 효율적으로 억제할 수 있다.* 적용 분야 - 기초 생명과학 연구 - 유전자 치료
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- 한양대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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일반기술
생명과학 > 기타 생물학
본 발명은 NADPH (Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced form)를 생산하는 세포질 내 이소시트릭산 탈수소화 효소(isocitrate dehydrogenase) 및 그의 유전자, 그리고 이 효소의 활성 및 그 유전자의 발현을 저해하는 비만, 고지혈증, 지방간 등 대사성 질환의 치료제를 선별하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 세포질 내에 존재하는 이소시트릭산 탈수소화 효소인 IDPc 유전자를 포함하는 융합유전자 콘스트럭트로 형질전환 세포주 및 형질전환 동물을 제조하였다.지방산, 톨레스테롤 생합성 및 지방 축적에 이용되는 NADPH를 생산하는 이소시트릭산 탈수소화 효소 및 그의 유전자를 제공한다. 상기 유전자를 포함하는 융합 유전자 컨스트럭트, 이의 형질전환 세포주 및 형질 전환 동물을 제공한다. 또한 지금까지 알려진 바 없는 마우스의 IDPc 유전자 발현 및 효소의 증가, 그리고 이로 인한 효소반응 생성물인 NADPH들의 감소는 세포 내 지방의 축적을 억제함도 발견하였다. 그리고 상기 형질전환 세포주 및 형질전환 동물을 이용하여 IDPc 효소의 활성 및 유전자 발현 정도가 지방산, 콜레스테롤 생합성 및 지방 축적에 절대적으로 필요한 NADPH를 생성하는 핵심 인자임을 밝힘으로써 이 효소의 활성 및 그 유전자의 발현을 저해하는 비만, 고지혈증, 지방간 등 대사성 질환의 치료제를 선별하는 방법을 제공하는 것이다.
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- 경북대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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일반기술
생명과학 > 기타 세포·조직공학
* 원리 및 구성본 기술은 현미경의 표본을 제작하는 과정에서 커버글래스 또는 커버글래스정도의 크기를 가지는 여과지에 점착된 세포 또는 조직을 염색하는데 사용되는 염색용 홀더에 관한 것으로서, ''자 형상을 가지며 얇은 판인 다수의 유니트와, 상기 커버글래스 또는 여과지가 수용되는 크기를 가지도록 상기 유니트들이 서로 일정간격을 두고 배열되어 유니트 사이에 형성되는 삽입칸을 가지는 유니트열과; 상기 유니트열의 우측면에서 설치되는 측면지지대와 상기 유니트열의 좌측면에서 설치되며 'ㅗ'자 형상인 손잡이와 상기 염색용 홀더가 기울어지지 않도록 상기 유니트열의 하부면에서 좌우대칭으로 배열된 다수의 하부지지대를 포함하여, 커버글래스 또는 여과지에 점착된 세포 또는 조직을 염색하는데 사용되는 절약형 세포염색용 홀더를 제공하며 염색시약의 소모량을 줄이는 작용효과가 있다.* 발명의 특징세포 및 조직의 염색 시 널리 사용되고 있는 염색용 홀더의 일종으로, 국내. 외 시판되고 있는 슬라이드 글라스용 홀더를 소형화하여 경제적 활용을 도모한다. 전자제품의 보드로 널리 쓰이는 베크라이트를 홀더의 소재를 선택하여 소재의 응용성과 소형화로의 기술개발로 홀더의 축소를 시도였다.* 적용응용분야 및 시장성의학 및 생물학 분야에서 세포 및 조직의 염색시 사용하며, 특히 적조 및 녹조 생물의 조사시 유용하게 활용 가능하다. 최신 현미경적 방법에 따라 시료를 여과지나 커버글라스 위에서 염색은 기존의 홀더로는 불가능하나 본 소형 염색홀더를 사용하면 효율적인 염색이 가능하다. 기존의 홀더에 비해 가격이 1/5-1/10 정도로 저렴하고 염색시약의 절약효과로 경제성과, 의학과 생명과학분야의 대학과 연구소에서 교육과 연구용의 실험기구로 활용할 수 있는 수용성을 갖추고 있다. 본 발명 홀더는 소형의 실험기구이므로 홀더중심의 단독기업화는 어려우나, 기존의 염색홀더를 제작 시판하고 있는 기업체에 기술을 이전 개발이 가능하다고 판단된다.
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- 한양대학교
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 면역학
돼지 유행성 설사병 바이러스 중화 에피토프 및 이의 이용한 바이러스의 감염을 예방법을 목적으로 연구되었으며 다음의 목적과 특징으로 기술되어진다.○ 기술발명의 목적: 돼지 유행성 설사병 바이러스 중화 에피토프○ 기술 요약 및 특징: 특히 본 발명은 돼지 유행성 설사병 바이러스에 대하여 목적항원으로 사용하여 효과적으로 상기 바이러스의 감염을 예방할 수 있는 서열번호 1의 폴리펩타이드를 포함하는 PEDV(porcine epidemic diarrhea virus) 에피토프를 제공한다.○ 색인어: 돼지 유행성 설사병, 바이러스, 에피토프, 항원, 항체, 백신돼지에서 설사병을 일으키는 TGEV(Transmissible gastroenteritis virus)는 고양이 질병을 일으키는 FIPV(felineinfectious peritonitis virus)와 교차중화력(cross-neutralization)을 보이는데, TGEV의 중화 에피토프를 포함하는 503-715(Genebank AAA47109)는 FIPV의 해당부위와 92%의 상동성을 가진다. 그러나, TGEV와 교차중화력을 나타내지 않는 PEDV에서의 해당부위는 TGEV와 28%의 상동성을 보이며, 특히 코어 부위인 TGEV의 522-607 부위는 PEDV의 해당부위인 503-568(Genebank CAA80971)과 9%의 상동성만을 보인다. 따라서, 코어부분에서 보이는 낮은 상동성이 TGEV와 PEDV간에 교차중화력이 나타나지 않는 이유로 추정되었다. 이에 본 발명자들은 PEDV 스파이크 단백질 중 코어 부위가 PEDV를 중화시킬 수 있는 에피토프를 포함하고 있을 것으로 추정하여 실험하였으며, 그 결과 PEDV를 중화시킬 수 있는 에피토프를 클로닝하였다.본 발명의 PEDV 중화 에피토프는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드이다. 서열번호 1의 아미노산에 기재된 "X"는 바이러스의 서브타입별로 다양한 아미노산을 나타내는 것으로, 알라닌, 알기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민산, 글루타민, 글리신, 히스티딘, 이소루신, 루신, 라이신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤닌, 세린, 트레오닌, 트립토판, 타이로신 및 발린으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이 사용될 수 있다. 상기 PEDV 에피토프는 PEDV 스파이크 단백질의 코어부분에 해당한다.
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- 전북대학교
- 등록일
- 2006-05-24
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일반기술
생명과학 > 면역학
○ 기술발명의 목적: 돼지 유행성 설사병 바이러스의 에피토프 단백질을 발현하는 형질전환체 및 그를 포함하는 경구투여용 백신조성물○ 기술 요약 및 특징: 본 발명의 경구투여용 백신 조성물에 포함된 돼지 유행성 설사병 바이러스의 에피토프 단백질을 생산하는 식물 형질전환체는 쉽게 보관, 유지 및 이동시킬 수 있을 뿐만 아니라 쉽게 동물에 투여하여 돼지 유행성 설사병 감염을 예방할 수 있다.○ 색인어: 돼지 유행성 설사병 바이러스, 에피토프, 백신본 발명은 서열번호 1의 PEDV 에피토프 단백질을 암호하는 PEDV 에피토프 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제공한다. 상기 서열번호 1에서, X22는 Asp 또는 Gly이고, X23은 Ser 또는 Leu이고, X24는 Ser 또는 Gly이고, X25는 Ser 또는 Gly이고, X51은 Thr 또는 Arg이고, X58은 Asn 또는 Ser이고, X114는 Leu 또는 Phe이고, 및 X137은 Ile 또는 Val이다.또한 본 발명의 상기의 재조합 벡터로 형질전환된 형질전환체를 제공한다.또한 본 발명은 상기의 형질전환체로부터 발현된 재조합 PEDV 에피토프 단백질을 제공한다.또한 본 발명은 상기의 형질전환체, 상기 형질전환체의 단백질 추출물 또는 상기 형질전환체로부터 분리된 재조합 PEDV 에피토프 단백질을 포함하는 경구투여용 백신조성물을 제공한다.본 발명자들은 PEDV 항원으로 작용하는 서열번호 1의 PEDV 에피토프 단백질을 발현하는 재조합 벡터 및 형질전환체를 제조하였으며, 이를 이용한 경구 백신 조성물을 개발하였다.본 발명의 재조합 벡터는 서열번호 1의 PEDV 에피토프 단백질을 암호하는 유전자서열을 포함하는 것으로, 원핵생물 또는 진핵생물에서 발현가능하도록 제작된 것이다.상기 PEDV 에피토프는 PEDV 스파이크 단백질의 코어부분에 해당한다.서열번호 1에 기재된 "X"는 PEDV의 서브타입별로 다양성을 나타내는 아미노산으로, 알라닌, 알기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민산, 글루타민, 글리신, 히스티딘, 이소루신, 루신, 라이신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤닌, 세린, 트레오닌, 트립토판, 타이로신 및 발린으로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산이 사용될 수 있다.본 발명에서는 서열번호 1의 아미노산에서 22번에 기재된 X를 편의상 X22로, 23번의 X는 X23, 24번의 X는 X24, 25번의 X는 X25, 51번의 X는 X51, 58번의 X는 X58, 114번의 X는 X114 및 137번의 X는 X137로 나타낸다.또한 본 발명의 재조합 벡터는 PEDV 에피토프 단백질이 포함된 스파이크 단백질(GeneBank No. Z25483)을 암호하는 서열을 포함할 수 있다.
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- 전북대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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일반기술
생명과학 > 동물자원
○ 기술발명의 목적: 부화부산물로 폐기되는 신생 병아리의 단백질 자원을 이용하는 방법○ 기술 요약 및 특징: 본 발명은 신생부화 병아리를 분쇄 및 균질화하여 병아리육유동액을 제조하는 단계(S10); 상기 병아리육유동액에 옥수수전분을 가하여 압출성형하는 단계(S20); 및 상기 성형물을 건조시킨 후 수분을 가하여 단백질을 조직화하거나, 상기 성형물을 건조시킨 후 마찰열로 변성조직화하여 병아리육을 가공하는 단계(S30);로 이루어지는 것을 특징으로 한다. 상기와 같은 방법으로 제조된 병아리육유동액은 가용성의 유동액체나 유화제를 형성하고, 이 균질체들은 아직 변성되지 않은 생단백질로 다양한 식품에 첨가 가공될 수 있으므로 다양한 맛, 기호성, 물성, 관능성, 보건기능성을 나타낼 수 있어 종래의 식품이나 신제품의 부가가치를 현저히 증가시킬 수 있는 특징이 있다.○ 색인어: 신생부화, 가금류, 균질화, 가용액, 사롱, 압출성형S10 단계는 신생부화 병아리를 분쇄 및 균질화하여 병아리육유동액을 제조하는 단계이다. 균질화 과정이란 병아리의 형체를 없애 시각적인 혐오감을 방지하면서도 식육화를 가능케 하기 위한 것으로 신생부화 병아리를 분쇄, 세절 및 균질화하여 가용성의 유동액체나 유화제를 형성하게 되는데, 이때 기계적인 균질화 작업을 위해 스크류 방식과 밀링 기어방식이 혼재된 장치를 채택할 경우 연속 반복적인 분쇄과정을 통해 미크로 단위까지 이들을 미분화할 수 있다.기계적 균질을 높이기 위하여 일반적인 분쇄기와는 달리 밀링 기어를 사용하는 분쇄기에서 분쇄하게 되므로 닭뼈와 같이 단단한 제품이라도 미세한 분쇄가 가능하다. 분쇄 대상물이 투입되면 먼저 스크류에 의해 1차 분쇄가 이루어지면서 내부의 밀링 기어에 의해 작게 분쇄되기를 3회에서 6회에 이르기까지 반복되므로 제품이 마이크로(micro)단위까지 분쇄가 이루어진다.S10 단계를 대체하는 방법으로서는 신생부화 병아리의 피부, 털, 부리 및 발톱을 분리하여 가열, 파쇄한 후 병아리 몸체와 혼합하여 가압증자하는 방법도 가능하다. 본 방법에서는 0.5N HCl 또는 NaOH로 85℃에서 상기 분리물을 30분간 가열하여 파쇄시킨다.S10 단계를 대체하는 또 다른 방법으로서는 상기 분리물 혹은 병아리 몸체를 가수분해하고 중화하여 가압증자시키는 단계이다. 본 방법에서는 2N HCl 또는 NaOH로 가수분해하며 다시 HCl이나 NaOH로 중화시킨다.S20 단계는 상기 S10 단계에서 만들어진 병아리육유동액에 옥수수전분을 가하여 압출성형하는 단계이다. 본 단계에서는 병아리 분쇄물에 옥수수 전분을 가하여 잘 혼합하고, 압출성형장치의 배럴 온도를 120∼200℃ 범위로 하여 3mm의 원형 다이노즐을 통해 180∼220rpm의 속도로 압출물을 생산할 수도 있다.S30 단계는 상기 성형물을 건조시킨 후 단백질을 조직화하는 단계이다. 본 단계에서는 열풍건조기 등에서 일정하게 건조하여 수분함량이 13%로 되게 한다. 그리고 상기 압출물을 원료 공급기를 통해 배럴에 투입하면서 물을 가하여 수분함량이 30∼40%가 되게 유지하면서 이를 130℃의 배럴부에 통과시켜 단백질의 조직화 반응을 유도한다.
- 보유기관
- 전북대학교
- 등록일
- 2006-05-22
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